醫(yī)學(xué)微生物學(xué)病毒的增殖演講人：日期:目錄CONTENTS01病毒復(fù)制周期02病毒與宿主相互作用03病毒增殖檢測(cè)方法04抗病毒治療策略05特殊病毒增殖模式06病毒研究技術(shù)進(jìn)展01病毒復(fù)制周期吸附與侵入宿主細(xì)胞01病毒吸附病毒通過(guò)表面蛋白與宿主細(xì)胞受體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)定位與吸附。02侵入方式病毒通過(guò)胞吞、膜融合等方式將核酸注入宿主細(xì)胞，完成侵入過(guò)程。生物合成階段利用宿主細(xì)胞酶和原料，病毒核酸進(jìn)行復(fù)制。病毒核酸復(fù)制病毒核酸編碼的蛋白通過(guò)宿主細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)合成。病毒蛋白合成0102病毒組裝與釋放病毒核酸與蛋白在宿主細(xì)胞內(nèi)特定區(qū)域組裝成完整病毒顆粒。病毒組裝病毒通過(guò)破壞宿主細(xì)胞或利用細(xì)胞途徑釋放到細(xì)胞外，繼續(xù)感染其他細(xì)胞。病毒釋放02病毒與宿主相互作用宿主細(xì)胞受體識(shí)別病毒通過(guò)特異性受體與宿主細(xì)胞表面的受體結(jié)合，如SARS-CoV-2通過(guò)ACE2受體進(jìn)入人體細(xì)胞。特異性受體受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用受體結(jié)構(gòu)變化一些病毒通過(guò)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入宿主細(xì)胞，如流感病毒通過(guò)HA受體進(jìn)入呼吸道上皮細(xì)胞。病毒與受體結(jié)合后，會(huì)引起受體結(jié)構(gòu)變化，從而觸發(fā)病毒進(jìn)入細(xì)胞的機(jī)制。病毒基因表達(dá)調(diào)控病毒基因組的激活病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后，需要激活自身的基因組進(jìn)行復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。宿主細(xì)胞機(jī)制的利用病毒蛋白的調(diào)控病毒會(huì)利用宿主細(xì)胞的機(jī)制來(lái)調(diào)控自身基因的表達(dá)，如利用宿主細(xì)胞的RNA聚合酶進(jìn)行病毒RNA的合成。病毒基因表達(dá)過(guò)程中，會(huì)產(chǎn)生一些病毒蛋白來(lái)調(diào)控病毒復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的進(jìn)程，如逆轉(zhuǎn)錄酶、蛋白酶等。123宿主免疫逃逸機(jī)制免疫逃逸的后果病毒逃逸宿主免疫系統(tǒng)的攻擊后，會(huì)導(dǎo)致病毒在體內(nèi)持續(xù)感染、擴(kuò)散，甚至引發(fā)免疫病理反應(yīng)。03病毒會(huì)通過(guò)各種策略來(lái)逃逸宿主免疫系統(tǒng)的攻擊，如變異病毒表面抗原、抑制宿主免疫應(yīng)答等。02病毒逃逸策略宿主免疫系統(tǒng)的識(shí)別病毒在感染宿主細(xì)胞后，會(huì)被宿主免疫系統(tǒng)識(shí)別為外來(lái)入侵物質(zhì)。0103病毒增殖檢測(cè)方法細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是檢測(cè)病毒增殖的常用方法之一，通過(guò)在細(xì)胞培養(yǎng)物中加入病毒，觀察病毒在細(xì)胞內(nèi)的增殖情況，從而判斷病毒的感染能力和增殖能力。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)概述細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)包括原代細(xì)胞培養(yǎng)、傳代細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞系和克隆株的培養(yǎng)等，可根據(jù)病毒的特性和實(shí)驗(yàn)需求選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)方法。細(xì)胞培養(yǎng)方法在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，可通過(guò)觀察細(xì)胞病變情況來(lái)判斷病毒的增殖情況，如細(xì)胞形態(tài)變化、細(xì)胞壞死、細(xì)胞融合等現(xiàn)象。細(xì)胞病變觀察分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)是通過(guò)檢測(cè)病毒的核酸或蛋白質(zhì)來(lái)判定病毒增殖的方法，具有高度的特異性和敏感性。分子生物學(xué)檢測(cè)分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)概述PCR技術(shù)是分子生物學(xué)檢測(cè)中常用的技術(shù)之一，通過(guò)特定的引物擴(kuò)增病毒核酸，從而檢測(cè)病毒的增殖情況。PCR技術(shù)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)病毒核酸的擴(kuò)增情況，對(duì)病毒增殖進(jìn)行定量分析。實(shí)時(shí)熒光定量PCR血清學(xué)診斷指標(biāo)血清學(xué)診斷指標(biāo)是通過(guò)檢測(cè)血清中的病毒特異性抗體來(lái)判斷病毒增殖的方法，具有操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)速度快等優(yōu)點(diǎn)。血清學(xué)診斷指標(biāo)概述IgM抗體檢測(cè)IgG抗體檢測(cè)IgM抗體是機(jī)體感染病毒后最早產(chǎn)生的抗體，可用于早期診斷和病毒感染的篩查。IgG抗體是機(jī)體在病毒感染后期產(chǎn)生的抗體，可持續(xù)存在數(shù)年，常用于病毒既往感染的檢測(cè)和血清流行病學(xué)調(diào)查。04抗病毒治療策略阻斷病毒吸附藥物干擾病毒吸附過(guò)程通過(guò)干擾病毒吸附過(guò)程中的某些環(huán)節(jié)，使病毒無(wú)法完成吸附。03通過(guò)阻斷病毒表面蛋白的功能，使病毒無(wú)法與宿主細(xì)胞受體結(jié)合。02阻斷病毒表面蛋白功能阻斷病毒與宿主受體結(jié)合通過(guò)阻斷病毒與宿主細(xì)胞受體結(jié)合，阻止病毒進(jìn)入細(xì)胞。01核酸復(fù)制抑制劑通過(guò)抑制病毒DNA的合成，阻止病毒復(fù)制。抑制病毒DNA合成通過(guò)抑制病毒RNA的合成，阻止病毒復(fù)制。抑制病毒RNA合成通過(guò)抑制病毒逆轉(zhuǎn)錄酶的活性，阻止病毒復(fù)制。抑制病毒逆轉(zhuǎn)錄酶活性病毒蛋白酶靶向治療抑制病毒蛋白酶活性通過(guò)抑制病毒蛋白酶的活性，阻止病毒復(fù)制。阻斷病毒蛋白酶合成藥物與病毒蛋白酶結(jié)合通過(guò)阻斷病毒蛋白酶的合成，阻止病毒復(fù)制。通過(guò)藥物與病毒蛋白酶結(jié)合，使其失去活性，從而阻止病毒復(fù)制。12305特殊病毒增殖模式潛伏感染機(jī)制潛伏感染的定義指病毒在顯性或隱性感染后，病毒基因存在于細(xì)胞內(nèi)，但不產(chǎn)生病毒顆粒，不引起宿主細(xì)胞的病變。01潛伏感染的部位潛伏感染主要發(fā)生在一些特定的組織或細(xì)胞中，如神經(jīng)節(jié)、三叉神經(jīng)節(jié)、背根神經(jīng)節(jié)等。02潛伏感染的激活當(dāng)宿主的免疫功能降低時(shí)，潛伏的病毒可被激活，引起顯性感染或復(fù)發(fā)。03指病毒基因組整合到宿主細(xì)胞基因組中，隨宿主細(xì)胞基因復(fù)制而復(fù)制，這種復(fù)制方式稱為整合型病毒復(fù)制。整合型病毒復(fù)制整合型病毒復(fù)制的定義整合型病毒復(fù)制具有穩(wěn)定性，病毒基因組可隨宿主細(xì)胞基因組一起復(fù)制和傳遞，不易被清除。整合型病毒復(fù)制的特點(diǎn)常見的整合型病毒有逆轉(zhuǎn)錄病毒，如HIV等。整合型病毒復(fù)制的實(shí)例缺陷病毒增殖特點(diǎn)缺陷病毒的定義指病毒基因組或基因產(chǎn)物存在缺陷，不能獨(dú)立完成病毒復(fù)制周期的病毒。缺陷病毒的增殖方式缺陷病毒必須依賴其他完整病毒的輔助才能完成病毒復(fù)制，這種增殖方式稱為依賴缺陷性增殖。缺陷病毒的類型缺陷病毒包括基因組缺陷病毒和基因產(chǎn)物缺陷病毒兩種類型。基因組缺陷病毒是指病毒基因組不完整或發(fā)生突變，不能完成病毒復(fù)制；基因產(chǎn)物缺陷病毒是指病毒基因組能完整復(fù)制，但病毒基因表達(dá)產(chǎn)物存在缺陷，不能完成病毒包裝。缺陷病毒的應(yīng)用缺陷病毒在基因治療和疫苗制備等方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。06病毒研究技術(shù)進(jìn)展冷凍電鏡結(jié)構(gòu)解析通過(guò)快速冷凍樣品，減少冰晶形成，保持病毒顆粒的天然狀態(tài)，利用電子顯微鏡觀察病毒結(jié)構(gòu)。冷凍電鏡技術(shù)原理揭示了病毒表面蛋白的精細(xì)結(jié)構(gòu)和病毒與宿主細(xì)胞的相互作用機(jī)制。冷凍電鏡在病毒學(xué)中的應(yīng)用如SARS-CoV-2（新冠病毒）的S蛋白與ACE2受體的結(jié)合機(jī)制。代表性成果通過(guò)獲取病毒的基因組序列，利用遺傳工程技術(shù)構(gòu)建病毒的感染性克隆，從而研究病毒的基因功能和致病機(jī)制。反向遺傳學(xué)系統(tǒng)反向遺傳學(xué)原理用于研究病毒的基因功能、制備疫苗和抗病毒藥物、以及病毒毒力的評(píng)估。反向遺傳學(xué)在病毒學(xué)中的應(yīng)用如流感病毒的反向遺傳學(xué)系統(tǒng)，為疫苗研發(fā)和抗病毒藥物篩選提供了有力工具。代表性成果單細(xì)胞感染追蹤技術(shù)單細(xì)胞感染追蹤原理通過(guò)標(biāo)記病毒或宿主細(xì)胞，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)病毒在單個(gè)細(xì)