江蘇省淮安市重點(diǎn)中學(xué)2025屆高三最后一卷生物試卷注意事項(xiàng)1．考生要認(rèn)真填寫(xiě)考場(chǎng)號(hào)和座位序號(hào)。2．試題所有答案必須填涂或書(shū)寫(xiě)在答題卡上，在試卷上作答無(wú)效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功能的敘述，正確的是（）A．可以利用樣方法調(diào)查陸地某群落中植物的物種豐富度B．所有生態(tài)系統(tǒng)中各營(yíng)養(yǎng)級(jí)的生物數(shù)量與能量均為正金字塔形C．生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)是指生態(tài)系統(tǒng)的食物鏈和食物網(wǎng)D．抵抗力穩(wěn)定性低的生態(tài)系統(tǒng)，其恢復(fù)力穩(wěn)定性一定高2．下列哪一項(xiàng)不是生物多樣性的內(nèi)容（）A．多種多樣的基因 B．豐富的物種數(shù)目C．豐富的個(gè)體數(shù)量 D．多種多樣的生態(tài)系統(tǒng)3．某研究小組進(jìn)行“制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型”的活動(dòng)。下列敘述正確的是（）A．制作的DNA雙鏈模型中，四種堿基的顏色各不相同B．制作脫氧核苷酸模型時(shí)，每個(gè)磷酸上連接一個(gè)脫氧核糖和一個(gè)堿基C．制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型過(guò)程中，嘧啶數(shù)與嘌呤數(shù)相等體現(xiàn)了堿基互補(bǔ)配對(duì)原則D．選取材料時(shí)，用4種不同形狀的材料分別表示脫氧核糖、磷酸和堿基4．無(wú)子西瓜的培育過(guò)程如圖所示，下列敘述正確的是（）A．①過(guò)程只能用秋水仙素處理，它的作用主要是抑制細(xì)胞有絲分裂前期紡錘體的形成B．由三倍體種子發(fā)育成無(wú)子西瓜，與中心體有密切的關(guān)系C．四倍體西瓜與二倍體西瓜不存在生殖隔離，它們屬于同一物種D．上圖四倍體植株所結(jié)的西瓜，胚細(xì)胞內(nèi)含有3個(gè)染色體組5．下列有關(guān)組成生物體化合物的敘述，正確的是()A．ATP中含有組成RNA基本單位的成分B．RNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，催化的反應(yīng)物是RNAC．細(xì)胞中的糖類(lèi)都可以為生命活動(dòng)提供能量D．氨基酸的種類(lèi)、數(shù)目、排列順序和肽鍵的空間結(jié)構(gòu)的差異決定了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的多樣性6．下列關(guān)于基因突變的敘述，正確的是（）A．基因突變是DNA分子上堿基對(duì)缺失、增加或替換引起的核苷酸序列的變化B．血友病、色盲、多指、白化病等致病基因的出現(xiàn)說(shuō)明基因突變具有不定向性C．分裂間期較分裂期更易發(fā)生基因突變，主要是因?yàn)殚g期持續(xù)的時(shí)間更長(zhǎng)D．基因突變必然形成新基因，而其控制合成的蛋白質(zhì)的氨基酸序列不一定改變7．研究人員利用玉米胚芽鞘和圖l所示裝置進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，測(cè)得甲、乙、丙、丁四個(gè)瓊脂塊中MBOA（一種內(nèi)源激素）含量變化如圖2所示。該實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蜃C明的是（）A．單側(cè)光能促進(jìn)玉米胚芽鞘產(chǎn)生MBOAB．MBOA由胚芽鞘向光側(cè)向背光側(cè)運(yùn)輸C．MBOA在胚芽鞘尖端能發(fā)生極性運(yùn)輸D．MBOA在運(yùn)輸時(shí)需要消耗能量8．（10分）下列有關(guān)物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)臄⑹?，正確的是（）A．生長(zhǎng)素極性運(yùn)輸時(shí)不需要消耗能量B．固醇類(lèi)激素進(jìn)入靶細(xì)胞的過(guò)程屬于主動(dòng)運(yùn)輸C．神經(jīng)細(xì)胞受到刺激時(shí)產(chǎn)生的內(nèi)流屬于被動(dòng)運(yùn)輸D．護(hù)膚品中的甘油進(jìn)入皮膚細(xì)胞的過(guò)程屬于協(xié)助擴(kuò)散二、非選擇題9．（10分）下圖是制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過(guò)程(1)過(guò)程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割的優(yōu)點(diǎn)是_________，此外還要用到________酶。(2)過(guò)程②中首先需要用Ca2＋處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，VP40基因進(jìn)入大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達(dá)的過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)_____。(3)與植物原生質(zhì)體融合相比，過(guò)程④特有的方法是用________處理。通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素，目的是________________________。選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體________(填“是”或“不是”)單克隆抗體。(4)圖示過(guò)程應(yīng)用的生物技術(shù)有______________________________________10．（14分）回答下列（一）、（二）小題。（一）鎮(zhèn)江香醋素以“酸而不澀、香而微甜、色濃味鮮”而蜚聲中外。下圖是鎮(zhèn)江香醋的生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)化流程：（1）蒸煮的目的：使原料在高溫下滅菌，同時(shí)_________，淀粉被釋放出來(lái)，淀粉由顆粒狀變?yōu)槿苣z狀態(tài)。（2）由于酵母菌缺少淀粉水解酶系，糯米需經(jīng)蒸煮后在a-淀粉酶的作用下液化，后加入糖化酶糖化，目的是_________。30min后，裝入發(fā)酵罐再接入酵母進(jìn)行_________。在操作過(guò)程中，發(fā)酵罐先通氣，后密閉。通氣能提高_(dá)________的數(shù)量，有利于密閉時(shí)獲得更多的酒精產(chǎn)物。（3）醋酸發(fā)酵時(shí)酒精應(yīng)先_________，否則會(huì)因濃度過(guò)高抑制醋桿菌的增殖。發(fā)酵過(guò)程需敞口操作，麩皮和糠等拌勻制作成松散的發(fā)酵料，其目的是_________。發(fā)酵過(guò)程中可通過(guò)高效液相色譜技術(shù)對(duì)多種有機(jī)酸組成及動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行研究。將_________在相同的色譜條件下進(jìn)行檢測(cè)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。再根據(jù)其對(duì)發(fā)酵過(guò)程中的有機(jī)酸含量進(jìn)行測(cè)算跟蹤發(fā)酵進(jìn)程。（4）黑曲霉可產(chǎn)生a-淀粉酶用于液化，還可以產(chǎn)生果膠酶將果膠徹底分解為_(kāi)________。（二）請(qǐng)回答下列與基因工程和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題。（1）質(zhì)粒的抗性基因是常用的_________標(biāo)記，如果質(zhì)粒的抗性基因內(nèi)有若干單一的限制性酶切位點(diǎn)就更好。當(dāng)外源基因插入這樣的酶切位點(diǎn)時(shí)，會(huì)使該抗性基因失活，這時(shí)宿主菌變?yōu)閷?duì)該抗生素_________的菌株，容易檢測(cè)出來(lái)。（2）雙酶切會(huì)使載體和目的基因的DNA都產(chǎn)生兩種不同的粘性末端，但DNA連接酶在適宜pH條件下會(huì)選擇把_________連接起來(lái)，從而保證目的基因只以一個(gè)方向連接入載體。影響DNA連接反應(yīng)的因素有_________（寫(xiě)出兩點(diǎn)）。（3）花藥培養(yǎng)是單倍體克隆的主要方法?；ㄋ幵偕仓甑漠a(chǎn)生有兩條途徑：一是煙草等植物通過(guò)形成花粉胚的_________途徑，二是水稻等植物通過(guò)產(chǎn)生芽和根的_________途徑，最后發(fā)育成單倍體植物。水稻花藥培養(yǎng)除了得到單倍體植物，還可以得到來(lái)源于花藥體細(xì)胞的_________植株，因此需要對(duì)后代進(jìn)行進(jìn)一步的篩選。11．（14分）酵母菌是單細(xì)胞真菌，在自然界中分布廣泛，在人類(lèi)的生活和生產(chǎn)中應(yīng)用也很多?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題：（1）傳統(tǒng)做米酒的操作中沒(méi)有進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理，但米酒井沒(méi)有被雜菌污染而腐敗，原因是在____________環(huán)境條件下酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物因無(wú)法適應(yīng)而受抑制；米酒開(kāi)封后一段時(shí)間會(huì)變酸，可能的原因是____________________________________。（2）為實(shí)現(xiàn)啤酒發(fā)酵連續(xù)生產(chǎn)，酵母細(xì)胞固定化技術(shù)已在啤酒工業(yè)中廣泛應(yīng)用，例如，將啤酒酵母和_____________混合均勻，經(jīng)處理形成凝膠顆粒，而酵母細(xì)胞則被固定在其內(nèi)部。這種固定化方法稱(chēng)為_(kāi)____________。（3）土壤是酵母菌的大本營(yíng)，人們想從土壤中分離得到純凈的酵母菌，操作過(guò)程中要特別注意防止________________。如果還需要統(tǒng)計(jì)土壤中酵母菌的含量，應(yīng)該采用的接種方法是_____________。（4）科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)酵母菌R能合成胡蘿卜素。若要從酵母菌R中萃取出胡蘿卜素，可以用石油醚作萃取劑，理由是__________________________________（需答兩點(diǎn)理由）。萃取胡蘿卜素時(shí)的溫度不能太高，否則會(huì)導(dǎo)致_____________。12．回答利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因植物的相關(guān)問(wèn)題：（1）培育轉(zhuǎn)基因植物過(guò)程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中_____，并且可以通過(guò)復(fù)制遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因表達(dá)和發(fā)揮作用．（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可利用DNA連接酶連接被限制酶切開(kāi)的_____鍵．（3）組成基因表達(dá)載體的單體是_____．基因表達(dá)載體中的啟動(dòng)子是_____識(shí)別和結(jié)合的部位，這種結(jié)合完成后才能驅(qū)動(dòng)目的基因通過(guò)_____（填過(guò)程）合成mRNA．（4）用兩種限制酶XbaI和SacI（兩種酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，獲得含目的基因的片段．若利用該片段構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)選用下圖中的何種Ti質(zhì)粒？_____（5）將受體細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要應(yīng)用_____技術(shù)，該技術(shù)的理論依據(jù)是_____．

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】

生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括生態(tài)系統(tǒng)的成分和食物鏈、食物網(wǎng)兩部分，生態(tài)系統(tǒng)的成分包括非生物的物質(zhì)和能量，生產(chǎn)者，消費(fèi)者和分解者。食物鏈和食物網(wǎng)是生態(tài)系統(tǒng)的營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)，能量流動(dòng)、物質(zhì)循環(huán)和信息交流是生態(tài)系統(tǒng)的功能。【詳解】A、一般可用樣方法調(diào)查群落中植物的物種豐富度，只是用樣方法調(diào)查植物的豐富度時(shí)，應(yīng)該調(diào)查植物的種類(lèi)總數(shù)，不能取平均值，A正確；B、所有生態(tài)系統(tǒng)中各營(yíng)養(yǎng)級(jí)的能量均為正金字塔形，各營(yíng)養(yǎng)級(jí)的生物數(shù)量一般為正金字塔形，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)倒置情況，B錯(cuò)誤；C、生態(tài)系統(tǒng)的營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)是指生態(tài)系統(tǒng)的食物鏈和食物網(wǎng)，C錯(cuò)誤；D、抵抗力穩(wěn)定性低的生態(tài)系統(tǒng)，恢復(fù)力穩(wěn)定性不一定高，例如荒漠生態(tài)系統(tǒng)，D錯(cuò)誤。故選A。2、C【解析】

物多樣性的內(nèi)涵通常包括三個(gè)方面，即基因的多樣性、物種多樣性和生態(tài)系統(tǒng)的多樣性。【詳解】ABD、生物多樣性通常有三個(gè)主要的內(nèi)涵，即基因的多樣性、物種多樣性和生態(tài)系統(tǒng)的多樣性，ABD正確。C、豐富的個(gè)體數(shù)量不是生物多樣性的內(nèi)容，C錯(cuò)誤。故選C?！军c(diǎn)睛】解答此類(lèi)題目的關(guān)鍵是理解生物多樣性的內(nèi)涵。3、A【解析】

本題考查制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的活動(dòng)，需要制備若干四種顏色的堿基、一種顏色的脫氧核糖、一種顏色的磷酸，在制作的過(guò)程中注意堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，即A與T配對(duì)、G與C配對(duì)。【詳解】A、制作的DNA雙鏈模型中，四種堿基的顏色應(yīng)該各不相同，A正確；B、制作脫氧核苷酸模型時(shí)，每個(gè)磷酸上連接一個(gè)脫氧核糖，但是不連接堿基，B錯(cuò)誤；C、制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型過(guò)程中，嘧啶數(shù)與嘌呤數(shù)相等體現(xiàn)了嘧啶與嘌呤配對(duì)，但是不能體現(xiàn)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則的全部?jī)?nèi)容，C錯(cuò)誤；D、選取材料時(shí)，用6種不同形狀的材料分別表示脫氧核糖、磷酸和四種堿基，D錯(cuò)誤。故選A。4、D【解析】

分析題圖：圖示表示無(wú)子西瓜的培育過(guò)程，首先①用秋水仙素（抑制紡錘體的形成）處理二倍體西瓜的幼苗，獲得四倍體植株；②用該四倍體西瓜和二倍體進(jìn)行雜交得到種子發(fā)育成的即是三倍體西瓜；③三倍體西瓜結(jié)的種子再種植即可獲得三倍體無(wú)籽西瓜?！驹斀狻緼、①過(guò)程用秋水仙素處理或者低溫處理，它的作用是抑制有絲分裂過(guò)程中紡錘體的形成，A錯(cuò)誤；B、由三倍體種子發(fā)育成無(wú)子西瓜，涉及到細(xì)胞的有絲分裂和分化，而高等植物細(xì)胞不存在中心體，B錯(cuò)誤；C、由于二倍體西瓜與四倍體西瓜之間雜交產(chǎn)生的三倍體西瓜是高度不育的，因此二倍體西瓜與四倍體西瓜之間存在生殖隔離，C錯(cuò)誤；D、四倍體植株所結(jié)的西瓜中所含的胚是由四倍體的母本產(chǎn)生的卵細(xì)胞和二倍體的父本產(chǎn)生的精子結(jié)合形成的受精卵發(fā)育而來(lái)的，因此胚細(xì)胞內(nèi)含有3個(gè)染色體組，D正確。故選D。5、A【解析】

A、ATP中的A代表腺苷，腺苷是由腺嘌呤和核糖組成的。如果ATP失去兩個(gè)磷酸基團(tuán)變?yōu)锳-P，則A-P為腺嘌呤核糖核苷酸，它是RNA的基本單位之一，A項(xiàng)正確；B、RNA聚合酶催化的反應(yīng)物是4種核糖核苷酸，反應(yīng)產(chǎn)物是RNA，B項(xiàng)錯(cuò)誤；C、不是細(xì)胞中的糖類(lèi)都可以為生命活動(dòng)提供能量，例如纖維素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁主要成分，核糖和脫氧核糖分別是RNA和DNA的組成成分，這些糖類(lèi)都不能為生命活動(dòng)提供能量，細(xì)胞膜上糖蛋白和糖脂里面的糖也不提供能量，C項(xiàng)錯(cuò)誤；D、氨基酸的種類(lèi)、數(shù)目、排列順序和肽鏈的空間結(jié)構(gòu)的差異決定了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的多樣性，但肽鍵的結(jié)構(gòu)都是相同的，D項(xiàng)錯(cuò)誤。故選A?！军c(diǎn)睛】本題考查組成生物體的化合物的有關(guān)知識(shí)，解題時(shí)要與核酸、ATP的組成，細(xì)胞膜的成分和結(jié)構(gòu)等聯(lián)系起來(lái)分析，形成科學(xué)的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)便于深刻理解與應(yīng)用，C選項(xiàng)是難點(diǎn)，可以通過(guò)特例排除的方法進(jìn)行解答。6、D【解析】

有關(guān)基因突變，考生需要注意以下幾方面：1、基因突變是指基因中堿基對(duì)的增添、缺失或替換。2、基因突變的類(lèi)型：自發(fā)突變和人工誘變。3、基因突變的特點(diǎn)：基因突變具有普遍性、低頻性（個(gè)體的基因突變率低，但種群中個(gè)體數(shù)，其突變率較高）、隨機(jī)性、不定向性、多害少利性。4、體細(xì)胞突變一般不遺傳給子代，生殖細(xì)胞突變一般可以遺傳給子代。5、基因突變的意義：基因突變是新基因產(chǎn)生的途徑；基因突變能為生物進(jìn)化提供原材料；基因突變是生物變異的根本來(lái)源。6、基因突變不改變生物性狀：①體細(xì)胞中某基因發(fā)生改變，生殖細(xì)胞中不一定出現(xiàn)該基因；②若該親代DNA上某個(gè)堿基對(duì)發(fā)生改變產(chǎn)生的是一個(gè)隱性基因，并將該隱性基因傳給子代，而子代為雜合子，則隱性性狀不會(huì)表現(xiàn)出來(lái)；③根據(jù)密碼子的簡(jiǎn)并性，有可能翻譯出相同的氨基酸；④性狀表現(xiàn)是遺傳基因和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果，在某些環(huán)境條件下，改變了的基因可能并不會(huì)在性狀上表現(xiàn)出來(lái)等?！驹斀狻緼、基因突變指的是基因中核酸分子中堿基對(duì)的缺失、增加或替換，是基因結(jié)構(gòu)的改變，A錯(cuò)誤；B、血友病、色盲、多指、白化病等致病基因的出現(xiàn)說(shuō)明基因突變具有普遍性，B錯(cuò)誤；C、分裂間期由于進(jìn)行DNA復(fù)制易發(fā)生基因突變，與其持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng)無(wú)關(guān)，C錯(cuò)誤；D、基因突變產(chǎn)生新基因，由于密碼子具有簡(jiǎn)并性，基因中堿基序列發(fā)生改變，其控制合成的蛋白質(zhì)中的氨基酸序列不一定發(fā)生改變，D正確。故選D。7、A【解析】

題圖分析：玉米胚芽鞘在單側(cè)光的照射下，甲、乙瓊脂塊中MBOA的含量先逐漸增加，而有所減少，且甲瓊脂塊中MBOA的含量多于乙瓊脂塊；由于胚芽鞘沒(méi)有光照，丙、丁瓊脂塊中MBOA的含量幾乎沒(méi)有增加，說(shuō)明MBOA的合成與光照有關(guān)。【詳解】A、對(duì)甲、乙瓊脂塊與丙、丁瓊脂塊進(jìn)行比較，由分析可知：?jiǎn)蝹?cè)光能促進(jìn)玉米胚芽鞘產(chǎn)生MBOA，A正確；B、甲瓊脂塊中MBOA的含量多于乙瓊脂塊，說(shuō)明MBOA沒(méi)有由胚芽鞘向光側(cè)向背光側(cè)運(yùn)輸，B錯(cuò)誤；C、該實(shí)驗(yàn)說(shuō)明MBOA從胚芽鞘尖端經(jīng)過(guò)擴(kuò)散向下運(yùn)輸至瓊脂塊，但不能說(shuō)明發(fā)生了極性運(yùn)輸（其本質(zhì)是主動(dòng)運(yùn)輸），C錯(cuò)誤；D、該實(shí)驗(yàn)無(wú)法證明MBOA在運(yùn)輸時(shí)需要消耗能量，D錯(cuò)誤。故選A?！军c(diǎn)睛】本題考查與內(nèi)源激素相關(guān)的探究實(shí)驗(yàn)，要求學(xué)能對(duì)一些簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)方案做出恰當(dāng)?shù)脑u(píng)價(jià)和修訂，還要求學(xué)生熟記生長(zhǎng)素的產(chǎn)生、運(yùn)輸和作用部位，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象作出合理的解釋。8、C【解析】

小分子物質(zhì)物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式分：主動(dòng)運(yùn)輸和被動(dòng)運(yùn)輸。被動(dòng)運(yùn)輸分自由擴(kuò)散和協(xié)助擴(kuò)散。被動(dòng)運(yùn)輸?shù)挠绊懸蛩赜斜贿\(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)濃度差。協(xié)助擴(kuò)散的影響因素有細(xì)胞膜上的載體蛋白。主動(dòng)運(yùn)輸?shù)挠绊懸蛩丶?xì)胞膜上的載體蛋白和能量?！驹斀狻緼、生長(zhǎng)素極性運(yùn)輸時(shí)以主動(dòng)運(yùn)輸?shù)姆绞竭M(jìn)行，因此需要消耗能量，A錯(cuò)誤；B、固醇類(lèi)激素進(jìn)入靶細(xì)胞的過(guò)程屬于自由擴(kuò)散（如性激素），B錯(cuò)誤；C、神經(jīng)細(xì)胞受到刺激時(shí)產(chǎn)生的Na+內(nèi)流，需要載體，不消耗能量，屬于被動(dòng)運(yùn)輸，C正確；D、護(hù)膚品中的甘油進(jìn)入皮膚細(xì)胞的過(guò)程屬于自由擴(kuò)散，D錯(cuò)誤。故選C。二、非選擇題9、防止自身環(huán)化DNA連接轉(zhuǎn)化滅活的病毒防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染不是基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合【解析】

制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過(guò)程，①是目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，②是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，給老鼠注射特定的抗原蛋白：VP40蛋白引起小鼠的特異性免疫，產(chǎn)生特定B淋巴細(xì)胞，④過(guò)程是動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程，據(jù)此答題即可?！驹斀狻浚?）過(guò)程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割可以使目的基因的兩端獲得不同的粘性末端，所以這樣處理的優(yōu)點(diǎn)是防止目的基因自身環(huán)化，此外目的基因與運(yùn)載體結(jié)合還需DNA連接酶。

（2）過(guò)程②是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，此過(guò)程首先需要用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，VP40基因進(jìn)入大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達(dá)的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化。

（3）與植物原生質(zhì)體融合相比原理基本相同，植物原生質(zhì)體融合常用物理方法和化學(xué)方法，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法是用滅活的病毒處理，通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素，目的是防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染．選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)過(guò)多次篩選才可以獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，所以選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體不是單克隆抗體。

（4）圖示過(guò)程應(yīng)用的生物技術(shù)有：基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程和細(xì)胞工程，解題的關(guān)鍵是要能夠熟記基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)。10、使植物細(xì)胞破裂將淀粉分解成糖酒精發(fā)酵酵母菌（用水）稀釋增加通氣性各種有機(jī)酸的標(biāo)準(zhǔn)溶液半乳糖醛酸篩選敏感相同的粘性末端溫度、酶的用量、反應(yīng)時(shí)間胚胎發(fā)生器官發(fā)生二倍體【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定?！驹斀狻浚ㄒ唬?）蒸煮的目的：使原料在高溫下滅菌，同時(shí)高溫可以破壞細(xì)胞膜，使細(xì)胞中的淀粉被釋放出來(lái)。（2）淀粉在a-淀粉酶的作用下變成糊精，糊精在β-淀粉酶的作用下變成麥芽糖，麥芽糖在糖化淀粉酶的作用下變成葡萄糖。加入糖化酶糖化，目的是糖化。30min后，裝入發(fā)酵罐再接入酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵，酵母菌利用葡萄糖進(jìn)行厭氧呼吸可產(chǎn)生酒精。酵母菌繁殖需要能量，而需氧呼吸能提供更多的能量，通氣能提高酵母菌的數(shù)量，有利于密閉時(shí)獲得更多的酒精產(chǎn)物。（3）酒精含量過(guò)高，醋桿菌容易死亡，因此醋酸發(fā)酵時(shí)酒精應(yīng)先（用水）稀釋。發(fā)酵過(guò)程需敞口操作，麩皮和糠等拌勻制作成松散的發(fā)酵料，都是為了增加通氣性。將各種有機(jī)酸的標(biāo)準(zhǔn)溶液在相同的色譜條件下進(jìn)行檢測(cè)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。再根據(jù)其對(duì)發(fā)酵過(guò)程中的有機(jī)酸含量進(jìn)行測(cè)算跟蹤發(fā)酵進(jìn)程。（4）果膠是半乳糖醛酸的高聚物，果膠酶可將果膠徹底分解為半乳糖醛酸。（二）（1）質(zhì)粒常含有抗性基因用于重組質(zhì)粒的篩選。當(dāng)外源基因插入這樣的酶切位點(diǎn)時(shí)，會(huì)使該抗性基因失活，抗性基因無(wú)法表達(dá)，這時(shí)宿主菌變?yōu)閷?duì)該抗生素敏感的菌株，容易檢測(cè)出來(lái)。（2）雙酶切會(huì)使載體和目的基因的DNA都產(chǎn)生兩種不同的粘性末端，但DNA連接酶在適宜pH條件下會(huì)選擇把相同的粘性末端連接起來(lái)，避免單酶切使目的基因或質(zhì)粒自連或反向連接，保證目的基因只以一個(gè)方向連接入載體。溫度、酶的用量、反應(yīng)時(shí)間都會(huì)影響DNA連接反應(yīng)。（3）花藥再生植株的產(chǎn)生有兩條途徑：一是煙草等植物通過(guò)形成花粉胚的胚胎發(fā)生途徑（胚是植物的幼體），二是水稻等植物通過(guò)產(chǎn)生芽和根的器官發(fā)生途徑（芽、根是植物的器官），最后發(fā)育成單倍體植物。水稻花藥培養(yǎng)除了得到單倍體植物，還可以得到來(lái)源于花藥體細(xì)胞的二倍體植株（秋水仙素加倍），因此需要對(duì)后代進(jìn)行進(jìn)一步的篩選（表現(xiàn)型進(jìn)行篩選）?！军c(diǎn)睛】基因工程是現(xiàn)代生物技術(shù)研究的重要內(nèi)容，基因工程涉及到很多技術(shù)，是重點(diǎn)也是難點(diǎn)，在學(xué)習(xí)時(shí)應(yīng)在理解相應(yīng)技術(shù)原理的基礎(chǔ)上，熟悉各種技術(shù)的特點(diǎn)及應(yīng)用范圍。11、缺氧和酸性醋酸菌在有氧條件下，將酒和糖轉(zhuǎn)化為醋酸所致海藻酸鈉包埋法外來(lái)雜菌的入侵稀釋涂布平板法沸點(diǎn)高，與水不混溶，能夠充分溶解胡蘿卜素等胡蘿卜素分解【解析】

1.酵母菌在有氧和無(wú)氧的條件下都能生活:在有氧時(shí)，酵母菌大量繁殖，但是不起到發(fā)酵效果，在無(wú)氧時(shí)，繁殖速度減慢，但是此時(shí)可以進(jìn)行發(fā)酵。在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無(wú)菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵。20℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵的好溫度是在18℃~25℃，pH最好是弱酸性。2.測(cè)定培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目，可采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)(或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù))法對(duì)培養(yǎng)液中的微生物直接計(jì)數(shù)，也可用稀釋涂布平板法將微生物接種于滅菌后的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，通過(guò)計(jì)數(shù)菌落數(shù)目計(jì)算培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目。由于采用第一種方法計(jì)數(shù)時(shí)不能剔除死菌，采用第二種方法計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以第一種方法統(tǒng)計(jì)的數(shù)目比實(shí)際活菌數(shù)目高，第二種方法統(tǒng)計(jì)的數(shù)目比實(shí)際活菌數(shù)目低?！驹斀狻浚?）在缺氧和酸性環(huán)境條件下酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物因無(wú)法適應(yīng)而受抑制，因此傳統(tǒng)做米酒的操作中不需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理，而且米酒也不會(huì)被雜菌污染而腐敗，米酒開(kāi)封后一段時(shí)間會(huì)變酸，是因?yàn)樵谟醒鯒l件下，醋酸菌將酒和糖轉(zhuǎn)化為醋酸引起的。（2）酵母細(xì)胞固定化技術(shù)通常的做法是，將啤酒酵母和海藻酸鈉混合均勻，然后用注射器將混合溶液以恒定的速度滴加到適宜濃度的溶液中，經(jīng)過(guò)處理形成凝膠顆粒，而酵母細(xì)胞則被包埋其中，這種方法叫做包埋法。（3）要想從土壤中分離得到純凈的酵母菌，嚴(yán)格的無(wú)菌技術(shù)是成功的保證，即在操作過(guò)程中要特別注意防止外來(lái)雜菌的入侵。為了統(tǒng)計(jì)土壤中酵母菌的含量，需要采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，然后統(tǒng)計(jì)平板中的菌落數(shù)。（4）石油醚沸點(diǎn)高，與水不混溶，能夠充分溶解胡蘿卜素，因此，選用石油醚作萃取劑從酵母菌R中萃取胡蘿卜素。萃取胡蘿卜素時(shí)的溫度不能太高，否則會(huì)導(dǎo)致胡蘿卜素分解?！军c(diǎn)睛】熟知果酒、果醋發(fā)酵過(guò)程的操作要點(diǎn)時(shí)解答本題的關(guān)鍵，酵母細(xì)胞的固定和計(jì)數(shù)操作是本題的重要考查點(diǎn)，掌握植物有效成分提取方法中萃取劑的選擇原理和操作要點(diǎn)是解答本題的另一關(guān)鍵！12、穩(wěn)定存在磷酸二酯脫氧核苷酸RNA聚合酶