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T/CVMA158—2024牛分枝桿菌抗體熒光偏振檢測(cè)方法FluorescencepolarizationassayfordetectionofantibodiesagainstMycobacteriumbovis2024-5-8發(fā)布2024-5-8實(shí)施中國(guó)獸醫(yī)協(xié)會(huì)發(fā)布I本文件起草單位:上海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、山東生科尚儀生物技術(shù)有12規(guī)范性引用文件GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范振光,用熒光偏振儀檢測(cè)待檢血清的偏振光增加值即可判斷血清中是否存在牛分枝桿5試劑和材料5.1試劑5.1.4樣品稀釋緩沖液配制方法見(jiàn)附錄5.1.5結(jié)合物:用硫氰熒光素(FITC)標(biāo)記牛分5.2材料25.2.196孔黑色平板微孔板。5.2.2移液器吸頭。6儀器和設(shè)備8.4取180μL樣品稀釋緩沖液加入到98.7將96孔黑色平板微孔板置室溫孵育2min~3min,置熒光偏振儀上讀取最終偏振值。9結(jié)果判定FP=A-B(1)FP——對(duì)照或樣品的偏振值,mP;當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照的偏振值在120mP~250mP之間,陰性對(duì)照的偏振值在70mP~90mP之間時(shí),方可進(jìn)3△=FP-C..(2)△——樣品的偏振值與陰性對(duì)照平均值的差值,mP;FP——對(duì)照或樣品的偏振值,mP;C——陰性對(duì)照平均偏振值,mP。當(dāng)被檢樣品△<10mP,樣品判為陰性;10mP≤△≤20mP,樣品判為可疑;△>20mP,樣品可疑樣品應(yīng)重新檢測(cè)兩次。如果兩次復(fù)檢的結(jié)果△均小于10mP,則樣品判為陰性;若兩次重檢
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