PCR崗位技能考核試題（2024）[復(fù)制]您的姓名：[填空題]*_________________________________您的部門(mén)：[單選題]*○檢驗(yàn)科○實(shí)習(xí)生1、PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,需要的條件是（

）*A.目的基因(正確答案)B.引物(正確答案)C.四種脫氧核苷酸(正確答案)D.DNA聚合酶等(正確答案)E.mRNAF.核糖體2、鎂離子在DNA或RNA體外擴(kuò)增反應(yīng)的濃度一般為（

）[單選題]*A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L(正確答案)3、多重PCR需要的引物對(duì)為（

）[單選題]*A、一對(duì)引物B、半對(duì)引物C、兩對(duì)引物D、多對(duì)引物(正確答案)4、PCR是在引物、模板和4種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)，其特異性決定因素為（

）[單選題]*A、模板B、引物(正確答案)C、dNTPD、鎂離子5、在PCR反應(yīng)中，下列哪項(xiàng)可以引起非靶序列的擴(kuò)增（

）[單選題]*A、TaqDNA聚合酶加量過(guò)多B、引物加量過(guò)多C、A、B都可(正確答案)D、緩沖液中鎂離子含量過(guò)高6.PCR技術(shù)的發(fā)明人是（）[單選題]*Mullis(正確答案)史蒂文.沙夫蘭德?tīng)?才木7.PCR產(chǎn)物短期存放可在（

）保存。[單選題]*4℃(正確答案)常溫-80℃高溫8.PCR產(chǎn)物長(zhǎng)期儲(chǔ)存最好置于（

）。[單選題]*A、4℃常溫-20℃(正確答案)9.PCR的基本反應(yīng)過(guò)程包括（

）[單選題]*變性、退火、延伸(正確答案)變性、延伸變性、退火10.在實(shí)際工作中，基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室污染類型包括（

）

[單選題]*A.試劑污染和標(biāo)本間交叉污染B.擴(kuò)增產(chǎn)物的污染C.天然基因組DNA的污染D.A、B、C都可能(正確答案)11、PCR技術(shù)于哪一年發(fā)明（

）[單選題]*1983年(正確答案)1971年1987年1993年12.TaqDNA聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為（

）[單選題]*A、37℃B、50-55℃C、70-75℃(正確答案)D、80-85℃13.以下哪種物質(zhì)在PCR反應(yīng)中不需要（

）[單選題]*TaqDNA聚合酶dNTPs鎂離子RNA酶(正確答案)14.PCR檢測(cè)中，經(jīng)過(guò)n個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增，拷貝數(shù)將增加（

）[單選題]*n2n2^n(正確答案)n^215.PCR基因擴(kuò)增儀最關(guān)鍵的部分是（

）[單選題]*溫度控制系統(tǒng)(正確答案)熒光檢測(cè)系統(tǒng)軟件系統(tǒng)熱蓋16.以下哪項(xiàng)不是臨床PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的一般原則（

）[單選題]*各區(qū)合并(正確答案)注意風(fēng)向因地制宜方便工作17.PCR實(shí)驗(yàn)室一般包括（

）[單選題]*A.試劑準(zhǔn)備區(qū)B.標(biāo)本制備區(qū)C.擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)D.A、B、C都含(正確答案)18.PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來(lái)了便利，而且改進(jìn)了檢測(cè)細(xì)菌和病毒的方法。若要檢測(cè)一個(gè)人是否感染了艾滋病病毒，你認(rèn)為可以用PCR擴(kuò)增血液中的（

）。[單選題]*白細(xì)胞DNA病毒蛋白質(zhì)血漿抗體病毒核酸(正確答案)19.如果反應(yīng)體系中加入模板DNA分子100個(gè)，則經(jīng)過(guò)30個(gè)循環(huán)后，DNA分子的數(shù)量將達(dá)到（

）個(gè)。[單選題]*A、100×30B、100×30×2C、100×30^2D、100×2^30(正確答案)20.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析方法主要有（

）[單選題]*A、凝膠電泳分析法B、點(diǎn)雜交法C、熒光探針定量PCR法D、A、B、C都是(正確答案)21、陽(yáng)性室內(nèi)質(zhì)控品出現(xiàn)假陰性失控的常見(jiàn)原因分析（

）*A、核酸提取中的隨機(jī)誤差，如核酸提取中的丟失，有機(jī)溶劑的去除不徹底，標(biāo)本中擴(kuò)增抑制物的殘留，所用耗材如離心管有PCR抑制物等。(正確答案)B、儀器的問(wèn)題，如擴(kuò)增儀孔間溫度的不一致性，孔內(nèi)溫度與所示溫度的不一致性等。(正確答案)C、試劑的問(wèn)題，如Taq酶和/或反轉(zhuǎn)錄酶的失活，探針的純度及標(biāo)記效率和核酸提取試劑的效率等。(正確答案)22.陰性室內(nèi)質(zhì)控品出現(xiàn)假陽(yáng)性失控的常見(jiàn)原因分析（

）*A、擴(kuò)增產(chǎn)物的污染(正確答案)B、臨床標(biāo)本的核酸提取過(guò)程中發(fā)生的樣本間的交叉污染。(正確答案)C、移液槍頭等關(guān)鍵耗材污染(正確答案)D、試劑污染(正確答案)E、儀器故障23.出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室污染怎么辦?（

）*A、開(kāi)窗通風(fēng)(正確答案)B、用次氯酸鈉溶液清洗地面，實(shí)驗(yàn)臺(tái)、墻面(正確答案)C、增加紫外燈照射時(shí)間(正確答案)D、用核酸清除劑空中噴霧等方法去除(正確答案)E、每天進(jìn)行上述過(guò)程，直到污染消除。(正確答案)24.生物安全柜、超凈工作臺(tái)、通風(fēng)柜的區(qū)別（

）[多選題]*A.生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí),用來(lái)保護(hù)工作人員、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)品,使其避免暴露于上述操作過(guò)程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)的。(正確答案)B.超凈工作臺(tái)是為了保護(hù)試驗(yàn)品或產(chǎn)品而設(shè)計(jì)的通過(guò)吹過(guò)工作區(qū)域的垂直或水平層流空氣防止試驗(yàn)品或產(chǎn)品受到工作區(qū)域外粉塵或細(xì)菌的污染。一旦微生物樣品放置于工作區(qū)域,層流空氣將把帶有微生物介質(zhì)的空氣吹向前臺(tái)工作人員而產(chǎn)生危險(xiǎn)。(正確答案)C.通風(fēng)柜是為在化學(xué)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中清除腐蝕性化學(xué)氣體和有毒煙霧而設(shè)計(jì)的。分為外接管道通風(fēng)柜和凈氣型通風(fēng)柜，凈氣型通風(fēng)柜主要用于保護(hù)實(shí)驗(yàn)室人員免受有毒化學(xué)氣體和煙霧吸入危害,也可用于防止粉末吸入危害(正確答案)D.通風(fēng)柜和超凈工作臺(tái)不屬于生物安全柜,不可使用在涉及微生物材料的實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)過(guò)程中(正確答案)二、判斷題（共60題，每題1分）1、PCR引物設(shè)計(jì)的目的是在擴(kuò)增特異性和擴(kuò)增效率間取得平衡。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)2、在PCR反應(yīng)中，dATP在DNA擴(kuò)增中可以提供能量，同時(shí)作為DNA合成的原料。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)3、DNA擴(kuò)增過(guò)程未加解旋酶，可以通過(guò)先適當(dāng)加溫的方法破壞氫鍵，使模板DNA解旋。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)4、PCR反應(yīng)中，復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)5、PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)6、PCR技術(shù)可用于基因診斷，判斷親緣關(guān)系等。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)7、PCR技術(shù)需在體內(nèi)進(jìn)行。[判斷題]*對(duì)錯(cuò)(正確答案)8、PCR反應(yīng)體系中的緩沖液相當(dāng)于細(xì)胞中的體液。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)9、核酸的復(fù)制是由5＇——→3＇方向進(jìn)行的。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)10、配對(duì)的堿基總是A與T和G與C[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)11、HBsAg轉(zhuǎn)陰性后一段時(shí)間才出現(xiàn)可檢測(cè)的HBsAb，此段間隔期稱之為“窗口期”。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)12、市面上多數(shù)試劑用淬滅基團(tuán)Q基團(tuán)和報(bào)告基團(tuán)R基團(tuán)來(lái)標(biāo)記熒光定量PCR的探針。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)13、PCR反應(yīng)體系中Mg2+的作用是促進(jìn)TaqDNA聚合酶活性。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)14、若標(biāo)本中含有蛋白變性劑（如甲醛），PH、離子強(qiáng)度、Mg2+等有較大改變都會(huì)影響Taq酶活性。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)15.每個(gè)子代DNA分子中均保留一條親代DNA鏈和一條新合成的DNA鏈，這種復(fù)制方式稱之為半保留復(fù)制。(

)[單選題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)16.發(fā)生溶血的標(biāo)本對(duì)PCR結(jié)果沒(méi)影響（

）[判斷題]*對(duì)錯(cuò)(正確答案)17.“平臺(tái)效應(yīng)”是描述PCR后期循環(huán)產(chǎn)物對(duì)數(shù)累積趨于飽和。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)18.逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reversetranscription-PCR，RT-PCR）就是在應(yīng)用PCR方法檢測(cè)RNA病毒時(shí)，以RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成cDNA鏈，然后以cDNA為模板進(jìn)行正常的PCR循環(huán)增。[單選題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)19.在定量PCR中，72℃這一步對(duì)熒光探針的結(jié)合有影響，故去除，實(shí)際上55℃仍可充分延伸，完成擴(kuò)增復(fù)制。（

）[單選題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)20.PCR可應(yīng)用于遺傳病、腫瘤及病原體檢測(cè)三大方面（

）[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)21.PCR方法檢測(cè)GBS-DNA檢測(cè)的敏感度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為95.05%、98.74%、92.31%和99.21%。（

）[單選題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)22.使用無(wú)菌拭子取生殖道、直腸樣本進(jìn)行GBS核酸檢測(cè)。（

）[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)23.GBS核酸樣本在2℃-8℃保存條件下必需7天內(nèi)檢測(cè)完成。（

)[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)24.使用無(wú)菌拭子取生殖道、直腸樣本進(jìn)行GBS核酸檢測(cè)。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)25.內(nèi)標(biāo)對(duì)照CT值＞38或未檢出，說(shuō)明樣本中含有PCR反應(yīng)的抑制物，建議重新進(jìn)行

樣本提取。（）[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)26.20、噻氯匹定、氯吡格雷、普拉格雷通過(guò)抑制ADP受體，而發(fā)揮抗血小板的作用。（

）[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)27.氯吡格雷治療可明顯改善經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療術(shù)(PCI)術(shù)后患者的主要心血管預(yù)后，但仍有5%~15%的患者在1年內(nèi)會(huì)出現(xiàn)包括死亡、心肌梗死和腦卒中在內(nèi)的臨床終點(diǎn)事件。與CYP2C19基因多態(tài)性有關(guān)。（

）[單選題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)28.氯吡格雷屬于前體藥物，15%通過(guò)肝臟代謝后生成活性硫醇代謝物。（

）[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)29.CYP2C19基因分型檢測(cè)可以使用肝素抗凝管采血。（

）[判斷題]*對(duì)錯(cuò)(正確答案)30.CYP2C19*2：是指5號(hào)外顯子的第681位發(fā)生G-A突變；CYP2C19*3：是指4號(hào)外顯子的第636位發(fā)生G-A突變（）[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)31.CYP2C19基因型為*1/*3(*2GG;*3GA)，為中代謝，臨床可以考慮增加用藥劑量或更

換其它抗血小板藥物。（

）[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)32.抗血小板藥物相關(guān)基因檢測(cè)結(jié)合血栓彈力圖實(shí)施個(gè)體化藥物治療，如果發(fā)現(xiàn)基因型與表型存在矛盾，制定個(gè)體化給藥方案時(shí)，應(yīng)以基因型為主。（）[判斷題]*對(duì)錯(cuò)(正確答案)33.亞甲基四氫葉酸還原酶MTHFR是體內(nèi)葉酸代謝當(dāng)中的關(guān)鍵酶。（

）[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)34.血清中同型半胱氨酸的升高與MTHFR、MTR、MTRR酶的活性降低有關(guān)。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)35.中國(guó)人群中，約29%的人MTHFR基因?yàn)?77TT型。（

）[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)36.MTHFRC677T發(fā)生純合突變（TT型）后酶的活性僅有正常的30%。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)37.用于MTHFR基因檢測(cè)的標(biāo)本常溫條件下可以保存3天。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)38.核酸包括兩種類型:脫氧核糖核酸(ATCG)和核糖核酸(AUCG)[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)39.根據(jù)遺傳中心法則，遺傳信息的流動(dòng)方向?yàn)椋篋NA?RNA?蛋白質(zhì)（

）[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)40.核酸樣品含量可根據(jù)260nm處波長(zhǎng)的吸光度算出。（

）[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)41.核酸樣品純度可根據(jù)(260/280nm)處波長(zhǎng)的吸光度比值算出。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)42.Taq酶是決定PCR特異性的關(guān)鍵因素。[判斷題]*對(duì)錯(cuò)(正確答案)43.PCR中，全血樣本采集一般使用EDTA或枸櫞酸鹽抗凝，不使用肝素抗凝。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)44.Taqman探針兩端標(biāo)記有:熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)45.dNTPs呈顆粒狀，保存不當(dāng)容易變性失活。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)46.PCR基本反應(yīng)過(guò)程包括:變性、退火、延伸。(

)[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)47.核酸基本結(jié)構(gòu)單位是:核苷酸，其組成包括堿基、核糖或脫氧核糖和磷酸。(

)[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)48.DNA雙鏈中:堿基A-T之間以兩個(gè)氫鍵相連，G-C以三個(gè)氫鍵相連。(

)[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)49.核酸的解鏈溫度(Tm)與G+C含量有關(guān)，G+C含量愈大，Tm越低。(

)[判斷題]*對(duì)錯(cuò)(正確答案)50.核酸的復(fù)制是由5’-3’方向進(jìn)行。(

)[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)51.DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間氫鍵的斷裂。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)52.熒光閥值一般設(shè)置為前3-15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)差的10倍。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)53.CT值指擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的閥值時(shí)所經(jīng)過(guò)的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)54.初始模板濃度的對(duì)數(shù)與CT值呈線性關(guān)系，可以據(jù)此進(jìn)行定量分析。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)55.肝素是TaqDNA聚合酶活性的強(qiáng)抑制劑。[判斷題]*對(duì)(正確答案)錯(cuò)