胡學(xué)軍嘉善中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢查梅毒的定義定義：梅毒是一種慢性傳染性疾病。是由梅毒螺旋體（蒼白螺旋體）引起，患病后病程漫長，早期侵犯生殖器和皮膚，晚期侵犯全身各器官，并生多種多樣的癥狀和體征，病變幾乎能累及全身各個(gè)臟器。病原體為梅毒螺旋體，屬于密螺旋體屬，蒼白密螺旋體蒼白亞種(Treponemapallidumsubspeciespallidum)

蒼白亞種梅毒蒼白螺旋體地方亞種地方性梅毒極細(xì)亞種雅司病密螺旋體屬

品他螺旋體品他病4

微生物形態(tài)

螺旋細(xì)密（5-15um長，0.1-0.2um寬）、規(guī)則一端/兩端鉤狀，菌體成8、S或C形在暗視野顯微鏡下運(yùn)動(dòng)活潑

G-,Fontana鍍銀染色,染成棕褐色5形態(tài)與染色暗視野顯微鏡下觀察6梅毒螺旋體梅毒螺旋體，F(xiàn)ontana鍍銀染色傳播途徑梅毒患者的皮膚、粘膜中含梅毒螺旋體，未患病者在與梅毒患者的性接觸中，皮膚或粘膜若有細(xì)微破損則可得病。獲得性梅毒（后天）早期梅毒病人是傳染源，95%是通過不潔性交傳染，少數(shù)通過接吻，握手、輸血、接觸污染的內(nèi)衣濕毛巾、茶杯、煙斗、哺乳、尿布等傳染。胎兒梅毒（先天）：孕婦體內(nèi)螺旋體，一般在妊娠3—4月通過胎盤感染嬰兒。

免疫性特異性抗體感染2周后產(chǎn)生特異性IgM抗體,不能通過胎盤感染4周后出現(xiàn)特異性IgG抗體,可通過胎盤非特異性抗體刺激機(jī)體產(chǎn)生抗心磷脂抗體/反應(yīng)素RPR

和

TRUST等方法可檢出：5～7周或硬下疳后2～3周完全治愈的早期梅毒可再感染梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢測方法顯微鏡檢測法：

（1）暗視野顯微鏡檢查（2）鍍銀染色檢查血清學(xué)檢測法：

非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)

（1）VDRL(性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn))：需滅活（2）USR（不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)）（3）RPR(加速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn))

（4）TRUST(甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn))

梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)（1）FTA-ABS

（2）TPPA/TPHA

（3）TP-ELISA

（4）發(fā)光法（5）膠體金法

暗視野顯微鏡檢查標(biāo)本類型：梅毒硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損的滲出液、淋巴結(jié)穿刺液方法：暗視野顯微鏡下查找梅毒螺旋體。結(jié)果：典型的梅毒螺旋體呈白色發(fā)光,其螺旋較密而均勻。運(yùn)動(dòng)方式：①伸縮其螺旋間距離而移動(dòng)（主要方式）②蛇行式③旋轉(zhuǎn)式評(píng)價(jià)：①.簡單、可靠。②.早期：硬下疳（梅毒血清學(xué)試驗(yàn)仍陰性）。③.陰性不能排出患梅毒的可能性

暗視野顯微鏡下的梅毒螺旋體螺旋體檢查是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最好方法，WHO指定其為性病實(shí)驗(yàn)室必備項(xiàng)目之一鍍銀染色檢查基本原理：梅毒螺旋體具有親銀性，可被銀溶液染色，從而可以在鏡下觀察到梅毒螺旋體結(jié)果：棕褐色的梅毒螺旋體

梅毒血清試驗(yàn)梅毒螺旋體侵入人體后產(chǎn)生：抗心磷脂抗體：即非特異性抗體、反應(yīng)素

RPR、TRUST抗梅毒螺旋體抗體：IgG、IgM

ELISA、TPPA兩種抗體1．抗心磷脂抗體血清學(xué)試驗(yàn)（RPR，TRUST等）目的：檢測血清中抗心磷脂抗體

抗原：心磷脂甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST):原理：抗原以膽固醇晶粒為載體，包被上心磷脂和卵磷脂，構(gòu)成VDRL（抗類脂）抗原顆粒。再把抗原顆粒結(jié)合到甲基胺紅上，當(dāng)抗原與血清中反應(yīng)素以一定的比例相互作用時(shí)，出現(xiàn)凝集，凝集顆粒呈紅色。甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST):特點(diǎn)：敏感度高、特異性低，易出現(xiàn)假陽性用途作為篩選定量檢測：觀察療效、復(fù)發(fā)和再感染2、梅毒螺旋體抗體血清學(xué)試驗(yàn)：方法：1、梅毒螺旋體抗體測定(ELISA法)2、TPPA（明膠凝集實(shí)驗(yàn)）等梅毒螺旋體抗體測定(ELISA法)

特點(diǎn)：檢測總抗體（1）用作篩查和確認(rèn)試驗(yàn)：敏感性、特異性高

（2）不用于觀察療效、復(fù)發(fā)和再感染：感染梅毒螺旋

體后，體內(nèi)產(chǎn)生的抗螺旋體抗體持續(xù)存在，甚至

終生，即使經(jīng)過足夠的抗梅治療，其血清反應(yīng)仍

持續(xù)陽性TPPA（明膠凝集實(shí)驗(yàn)）

確證實(shí)驗(yàn)/確診實(shí)驗(yàn)采用梅毒螺旋體天然抗原作為診斷抗原特異性和靈敏度高，檢測的是IgM抗體，可以檢測到潛伏梅毒，但操作繁瑣，費(fèi)用高梅毒血清試驗(yàn)假陽性因素：技術(shù)性：標(biāo)本的污染溶血操作失誤生物學(xué)假陽性：某些疾?。航Y(jié)核、瘧疾、肝病、紅斑狼瘡、流感、肺炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性心臟病、風(fēng)疹、系統(tǒng)性硬化癥等，疾病發(fā)展過程中釋放心磷脂，到血液中假陽性（多見于TRUST）生理機(jī)能發(fā)生變化：少數(shù)孕婦也可發(fā)生生物學(xué)假陽性梅毒螺旋體抗體測定(ELISA法)結(jié)果的解讀

陰性對照OD≤0.1，陽性對照OD＞0.8時(shí)實(shí)驗(yàn)正常，否則實(shí)驗(yàn)無效。計(jì)算方法：cut-off(co)值=0.12+陰性對照平均OD值s/co值=病人OD值/cut-off(co)值，s/co值大于或等于1判為陽性，s/co值小于1判為陰性注s/co值在0.5~2.0之間的灰區(qū)樣本需復(fù)檢確認(rèn)后報(bào)告梅毒檢測流程圖A1(ELISA)A1+A1-A2(PRP或TRUST）A1+A2+感染：既往或現(xiàn)在A1+A2-A3（TP