水稻抗二化螟抗性鑒定技術規(guī)程范圍本標準規(guī)定了水稻抗二化螟抗性鑒定和評價方法的術語和定義、鑒定方法、抗性評價分級標準。本標準適用于水稻對二化螟的抗蟲性鑒定。術語和定義下列術語和定義適用于本標準。人工接蟲鑒定人為將二化螟幼蟲接到水稻參鑒材料上，通過參鑒材料的受害情況鑒定對二化螟的抗性水平。田間鑒定水稻參鑒材料種植于大田中，通過田間自然發(fā)蟲鑒定水稻參鑒材料對二化螟的抗性水平。二化螟蟻螟二化螟的初孵幼蟲淡褐色，頭部黑色，被深灰色毛，稱為蟻螟。對照品種為了保證抗性鑒定結果的準確性、可靠性，減少年度間和環(huán)境條件造成的差異，在品種鑒定時設置相對已知的抗蟲和感蟲品種?？菪闹笖?shù)參鑒材料的枯心率與感蟲品種的枯心率的比值，單位為百分率（%）。按下列公式進行計算：枯心指數(shù)=參鑒材料枯心率/感蟲品種枯心率×100白穗指數(shù)參鑒材料的白穗率與感蟲品種的白穗率的比值，單位為百分率（%）。按下列公式進行計算：白穗指數(shù)=參鑒材料白穗率/感蟲品種白穗率×100人工接蟲鑒定感蟲對照為明恢63，華恢1號（高抗）和T2A-1（中抗）轉基因水稻為抗性對照。室內人工接蟲鑒定參鑒材料準備取分蘗盛期的參鑒稻苗，洗凈后去除老葉和大部分須根。截取基部10～15cm稻苗；在稻苗離根部3cm處沿半徑方向向上劃一條3cm左右長的縱向切口，以便二化螟幼蟲鉆蛀；把處理好的稻苗擦干，放入底部有2cm深營養(yǎng)液的玻璃管(長25cm，內徑2.5cm)內，每管放稻苗2～3根，備用。每管為一個重復，重復6次。蟲源準備將接近孵化的二化螟卵塊放在培養(yǎng)皿中，待蟻螟孵化備用。接蟲用細毛筆輕輕將10頭二化螟蟻螟接在每根玻璃管內，接蟲后，玻璃管上端用黑布封口并用橡皮筋扎緊。接蟲后的管理稻苗接蟲后，每個處理為一組，用橡皮筋扎緊，放于養(yǎng)蟲室中。第4天開始向管內添加新鮮供試稻苗1～2根，稻苗處理同前述。其間，每隔2天換1次管中的水，如果玻璃管中的水分太多，及時取出稻苗(二化螟幼蟲已鉆入莖稈)，擦干玻璃管，再將試苗放入。調查接蟲后第7天剝查稻株，記錄幼蟲存活數(shù)，計算幼蟲死亡率。結果記載于附錄A表中。校正死亡率計算公式為：校正死亡率%=(取食參鑒材料幼蟲死亡率%-取食感蟲對照材料幼蟲死亡率%)/(1-取食感蟲對照幼蟲死亡率%)×100網(wǎng)室人工接蟲鑒定參鑒材料準備鑒定圃設置在網(wǎng)室的水泥池內，水稻材料單本栽插，株行距15cm×15cm，每個處理設置5次重復，每個重復10株。蟲源準備將接近孵化的二化螟卵塊放在培養(yǎng)皿中，待蟻螟孵化備用。接蟲于水稻分孽盛期每株稻苗接二化螟蟻螟5頭，接在莖稈與第二葉或第三葉葉鞘之間的葉舌處。接幼蟲前清除其它蟲卵、天敵，確保試驗的準確性。接蟲后的管理接蟲后用80目網(wǎng)罩加蓋。調查接蟲后30天(枯心苗不再增加時)分別調查各枯心情況，計算幼蟲死亡率、枯心率和枯心指數(shù)。田間自然發(fā)生鑒定感蟲對照為明恢63。實驗田的選擇設在二化螟常發(fā)區(qū)。選擇排灌方便、肥力均勻的田塊。秧苗移栽水稻材料采用單本移栽，采用完全隨機區(qū)組設計，每個處理3個重復，每個小區(qū)邊最小不低于9米，小區(qū)面積最小81平方米。試驗田的管理水肥按照當?shù)爻Ｒ?guī)管理，在整個生長季節(jié)，所有試驗小區(qū)均不施用任何農藥。調查于水稻移栽后，調查各代二化螟發(fā)生的情況。采用平行線跳躍法調查，每個小區(qū)剝查6點，每點5叢（每小區(qū)剝查30叢）水稻。記錄每叢水稻的分蘗數(shù)，枯鞘數(shù)，枯心數(shù)，穗數(shù)，白穗數(shù)，二化螟幼蟲數(shù)及蛹數(shù)。計算枯心指數(shù)和白穗指數(shù)。評價標準人工接蟲鑒定評價標準室內人工接蟲鑒定評價標準按照幼蟲校正死亡率評價參鑒材料室內人工接蟲抗性鑒定的抗性，分級標準：抗性級別抗性及幼蟲校正死亡率（%）0高抗=100180≤抗＜100360≤中抗＜80540≤耐蟲＜60720≤感蟲＜409高感＜20網(wǎng)室人工接蟲鑒定評價標準按照枯心指數(shù)評價參鑒材料網(wǎng)室人工接蟲鑒定的抗性，分級標準：抗性級別抗性及枯心指數(shù)（%）0高抗=010＜抗≤20320＜中抗≤40540＜耐蟲≤60760＜感蟲≤809高感＞80田間自然發(fā)生鑒定評價標準按照田間二化螟在水稻分蘗期的枯心指數(shù)或穗期的白穗指數(shù)評價參鑒材料田間鑒定的抗性，分級標準：抗性級別抗性及枯心（白穗）指數(shù)（%）0高抗=010＜抗≤20320＜中抗≤40540＜耐蟲≤60760＜感蟲≤809高感＞80

（規(guī)范性附錄）

水稻抗二化螟抗性鑒定調查表表1室內人工接蟲鑒定調查記載表材料名稱重復接蟲數(shù)（頭）活蟲數(shù)（頭）表2網(wǎng)室人工接蟲鑒定調查記載表材料名稱重復植株編號分蘗數(shù)（個）枯心數(shù)（個）接蟲數(shù)（頭）活蟲數(shù)（頭）表3田間自然發(fā)生鑒定調查記載表材料名稱剝查點植株編號分蘗數(shù)（個）枯心數(shù)（個）穗數(shù)（個）枯穗數(shù)（個）幼蟲數(shù)（頭）蛹數(shù)（頭）

（資料性附錄）

水稻二化螟的識別特征二化螟屬鱗翅目，螟蛾科。一生要經歷卵、幼蟲、蛹和成蟲四個蟲態(tài)。成蟲是一種中小型蛾子，體長12～15毫米，前翅灰黃色，其外緣有7個小黑點，系識別的主要特征，后翅灰白色。觸角雌蛾絲狀，雄蛾先端數(shù)節(jié)呈鋸齒狀。卵扁橢圓形，數(shù)十至百多粒卵粘連在一起，作魚鱗狀排列，其上覆蓋透明膠質。水稻苗期卵多產于葉片近端部，圓桿拔節(jié)期則產卵于離水面2～3寸的水稻葉鞘上。初產時呈乳白色，近