期末考試生物試題PAGEPAGE1北京西城區(qū)2019-2020學(xué)年高二下學(xué)期期末考試試題第一部分選擇題1.在家庭自制葡萄酒的過(guò)程中，需要進(jìn)行的操作是（）A.對(duì)葡萄進(jìn)行滅菌處理 B.將葡萄汁裝滿發(fā)酵瓶C.及時(shí)擰松瓶蓋放氣 D.通入無(wú)菌空氣『答案』C『解析』『詳解』A、對(duì)葡萄進(jìn)行滅菌處理會(huì)令葡萄皮上的酵母菌死亡，導(dǎo)致發(fā)酵無(wú)法成功，A錯(cuò)誤；

B、葡萄汁裝滿發(fā)酵瓶會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵過(guò)程中發(fā)酵液溢出，造成污染，B錯(cuò)誤；

C、及時(shí)擰松瓶蓋，將產(chǎn)生的二氧化碳放出，C正確；

D、酵母菌的發(fā)酵環(huán)境可以抑制大部分微生物生長(zhǎng)，家庭自制沒(méi)必要通入無(wú)菌空氣，D錯(cuò)誤。

故選C。2.關(guān)于微生物培養(yǎng)中的無(wú)菌技術(shù)，敘述錯(cuò)誤的是（）A.實(shí)驗(yàn)前需用75%的酒精棉球擦拭雙手B.配制好的培養(yǎng)基可通過(guò)高壓蒸汽進(jìn)行滅菌C.接種環(huán)可以通過(guò)酒精燈火焰灼燒進(jìn)行滅菌D.使用后的培養(yǎng)基不需要滅菌可直接丟棄『答案』D『解析』『詳解』A、實(shí)驗(yàn)前需用75%的酒精棉球擦拭雙手，進(jìn)行消毒，A正確；

B、配制好的培養(yǎng)基可通過(guò)高壓蒸汽進(jìn)行滅菌，B正確；

C、接種環(huán)可以通過(guò)酒精燈火焰灼燒進(jìn)行滅菌，C正確；

D、為防止污染環(huán)境，使用后的培養(yǎng)基需要滅菌，才能丟棄到指定的地方，D錯(cuò)誤。

故選D。3.下圖為篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.選擇培養(yǎng)基中應(yīng)以尿素為唯一碳源B.挑取單菌落后可用劃線法進(jìn)行接種C.鑒別培養(yǎng)基中可加入酚紅作指示劑D.培養(yǎng)皿在接種微生物后需倒置培養(yǎng)『答案』A『解析』『詳解』A、篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌需要制備以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；

B、挑取單菌落后需在酒精燈火焰旁，用平板劃線法進(jìn)行接種，B正確；

C、可在鑒別培養(yǎng)基中加入酚紅作指示劑，觀察是否變紅來(lái)鑒定菌種是否為尿素分解菌，C正確；

D、培養(yǎng)皿在接種微生物后需倒置培養(yǎng)，以防止冷凝水倒流污染培養(yǎng)基，D正確。

故選A。4.從紅豆杉中分離出一株內(nèi)生真菌，能利用纖維素發(fā)酵生產(chǎn)紫杉醇（如下圖）。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.纖維素可為該菌的生長(zhǎng)提供能源B.該菌能分泌纖維素酶來(lái)分解纖維素C.第6天纖維素酶活性最高，最適合收獲紫杉醇D.第6天后纖維素酶活性逐漸下降，可能與纖維素濃度下降有關(guān)『答案』C『解析』『詳解』A、纖維素作為多糖，可為該菌的生長(zhǎng)提供能源，A正確；

B、據(jù)圖分析可知，該菌可分泌纖維素酶來(lái)分解纖維素，B正確；

C、第6天纖維素酶活性最高，但紫杉醇的產(chǎn)量較低，不適合收獲紫杉醇，C錯(cuò)誤；

D、第6天后纖維素酶活性逐漸下降，可能與纖維素被消耗濃度下降有關(guān)，D正確。

故選C。5.篩選到兩株能產(chǎn)生抑菌物質(zhì)的乳酸菌，將其產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)用酶處理，一段時(shí)間后，加入到試驗(yàn)平板上的小孔中，測(cè)定抑菌圈大小，結(jié)果如下表。以下分析錯(cuò)誤的是（）菌株抑菌圈直徑/mm未經(jīng)酶處理過(guò)氧化氫酶處理胰蛋白酶處理胃蛋白酶處理乳酸片球菌C2816．716．3012．7格式乳桿菌J5716．316．300A.試驗(yàn)平板接種時(shí)應(yīng)使細(xì)菌均勻分布在培養(yǎng)皿中B.過(guò)氧化氫酶對(duì)兩菌株產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)基本沒(méi)有影響C.兩菌株產(chǎn)生的主要抑菌物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)D.C28產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)對(duì)胃蛋白酶比對(duì)胰蛋白酶更敏感『答案』D『解析』『詳解』A、試驗(yàn)平板接種時(shí)應(yīng)使細(xì)菌均勻分布在培養(yǎng)皿中，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，A正確；

B、表中顯示過(guò)氧化氫酶對(duì)兩菌株產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)處理后，透明圈直徑變化不大，說(shuō)明過(guò)氧化氫酶對(duì)其基本沒(méi)有影響，B正確；

C、根據(jù)酶的專一性可知，在胰蛋白酶的處理下，透明圈消失，說(shuō)明胰蛋白酶水解了2種抑菌物質(zhì)，主要抑菌物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，C正確；

D、表中顯示，C28產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)對(duì)胰蛋白酶比對(duì)胃蛋白酶更敏感，D錯(cuò)誤。

故選D。6.下圖為煙草植物組織培養(yǎng)過(guò)程的流程圖，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.對(duì)過(guò)程①獲取的根組織塊應(yīng)進(jìn)行消毒處理B.過(guò)程②使用的培養(yǎng)基中應(yīng)含有機(jī)碳源和氮源C.用人工薄膜包裹胚狀體可制作人工種子D.雜合植株經(jīng)上述過(guò)程獲得的幼苗會(huì)出現(xiàn)性狀分離『答案』D『解析』『詳解』A、離體組織需要進(jìn)行消毒處理，A正確；

B、脫分化形成的愈傷組織還無(wú)法進(jìn)行光合作用，故培養(yǎng)基中應(yīng)含有機(jī)碳源和氮源，B正確；

C、人工薄膜包裹胚狀體可以制作人工種子，C正確；

D、雜合植株經(jīng)上述過(guò)程獲得的幼苗與原植株基因型一致，不會(huì)出現(xiàn)性狀分離，D錯(cuò)誤。

故選D。7.以南方紅豆杉的幼莖為外植體，探究激素對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)及愈傷組織褐變（褐變會(huì)使愈傷組織失去分裂和分化能力，甚至導(dǎo)致死亡）的影響，結(jié)果如下表。根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，無(wú)法獲得的推論是（）2，4-D（mg/L）+6-BA（mg/L）誘導(dǎo)率（%）褐變率（%）1.0+0.5002.0+0.510062.53.0+0.51001001.0+1.0002.0+1.010087.53.0+1.0100100A.紅豆杉幼莖愈傷組織褐變率與兩種激素的濃度比值、濃度高低均有關(guān)B.紅豆杉幼莖愈傷組織誘導(dǎo)率與兩種激素的濃度比值有關(guān)，與濃度高低無(wú)關(guān)C.高濃度的2，4-D容易導(dǎo)致紅豆杉幼莖愈傷組織發(fā)生褐變D.在6種組合中誘導(dǎo)脫分化的最佳激素組合為2，4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L『答案』B『解析』『詳解』A、由表格數(shù)據(jù)可知，兩種激素的不同濃度組合，紅豆杉幼莖愈傷組織褐變率存在差異，說(shuō)明紅豆杉幼莖愈傷組織褐變率與兩種激素的濃度比值、濃度高低均有關(guān)，A正確；B、由表格中第2、3、5、6組（較高濃度）誘導(dǎo)率均為100%，只有第1組和第4組（較低濃度）誘導(dǎo)率為0，說(shuō)明紅豆杉幼莖愈傷組織誘導(dǎo)率與兩種激素的濃度比值無(wú)關(guān)，與濃度高低有關(guān)，B錯(cuò)誤；C、比較第1～3組，或第4～6組，在6-BA濃度一定的情況下，褐變率隨2，4-D濃度的增大而增大，說(shuō)明高濃度的2，4-D容易導(dǎo)致紅豆杉幼莖愈傷組織發(fā)生褐變，C正確；D、在6種組合中，第2組（2.0+0.5）愈傷組織誘導(dǎo)率為100%，且褐變率較低，為誘導(dǎo)脫分化的最佳激素組合，D正確。故選B。8.在利用小鼠制備抗人乳頭瘤病毒單克隆抗體的過(guò)程中，以下操作錯(cuò)誤的是（）A.用滅活的人乳頭瘤病毒免疫小鼠B.取小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合C.對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)、抗體檢測(cè)和篩選D.從脾細(xì)胞中分離出單個(gè)B細(xì)胞體外培養(yǎng)獲取單克隆抗體『答案』D『解析』『詳解』A、用滅活的人乳頭瘤病毒免疫小鼠，會(huì)刺激小鼠產(chǎn)生能分泌相應(yīng)抗體的漿細(xì)胞，A正確；B、在小鼠的脾臟細(xì)胞中存在能分泌抗人乳頭瘤病毒抗體的B淋巴細(xì)胞，設(shè)法將骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞融合，獲得雜交瘤細(xì)胞，B正確；C、對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)、抗體檢測(cè)和篩選，可獲得單克隆抗體，C正確；D、從脾臟細(xì)胞中分離的單個(gè)B細(xì)胞已高度分化，無(wú)法體外培養(yǎng)增殖、獲得單克隆抗體，D錯(cuò)誤。故選D。9.關(guān)于“克隆羊”與“試管羊”的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.克隆羊是無(wú)性生殖的產(chǎn)物，試管羊是有性生殖的產(chǎn)物B.培育克隆羊需要進(jìn)行核移植，培育試管羊需要進(jìn)行體外受精C.培育克隆羊是細(xì)胞水平的技術(shù)，培育試管羊是DNA分子水平的技術(shù)D.克隆羊的染色體來(lái)自提供細(xì)胞核的親本，試管羊的染色體來(lái)自雙親『答案』C『解析』『詳解』A、克隆羊沒(méi)有精子核卵細(xì)胞結(jié)合過(guò)程，直接通過(guò)核移植技術(shù)得到，是無(wú)性生殖的產(chǎn)物，試管羊通過(guò)體外精子和卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵發(fā)育而來(lái)，是有性生殖的產(chǎn)物，A正確；B、培育克隆羊需要進(jìn)行核移植，移入去核的卵母細(xì)胞發(fā)育而來(lái)，培育試管羊需要進(jìn)行體外受精，進(jìn)行胚胎移植發(fā)育而來(lái)，B正確；C、培育克隆羊和培育試管羊都是在細(xì)胞水平上操作，都屬于細(xì)胞水平的技術(shù)，C錯(cuò)誤；D、克隆羊經(jīng)過(guò)完整的細(xì)胞核移植，染色體來(lái)自提供細(xì)胞核的親本，試管羊經(jīng)過(guò)體外受精，染色體來(lái)自雙親，D正確。故選C。10.胚胎干細(xì)胞的發(fā)育和自我更新受多個(gè)基因調(diào)控（如下圖）。下列有關(guān)胚胎干細(xì)胞的敘述錯(cuò)誤的是（）A.可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞B.將干細(xì)胞用于疾病的臨床治療沒(méi)有任何風(fēng)險(xiǎn)C.Nanog基因突變可能使胚胎干細(xì)胞自我更新受阻D.抑制Oct3/4表達(dá)會(huì)促進(jìn)胚胎干細(xì)胞向滋養(yǎng)層分化『答案』B『解析』『詳解』A、胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育全能性，能發(fā)育為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種類型的細(xì)胞，A正確；

B、干細(xì)胞用于疾病的臨床治療可能會(huì)引起免疫排斥，干細(xì)胞腫瘤化等風(fēng)險(xiǎn)，B錯(cuò)誤。

C、Nanog基因促進(jìn)胚胎干細(xì)胞自我更新，突變可能使細(xì)胞自我更新受阻，C正確；

D、Oct3/4基因抑制胚胎干細(xì)胞發(fā)育為滋養(yǎng)層，抑制該基因表達(dá)會(huì)促進(jìn)胚胎干細(xì)胞向滋養(yǎng)層分化，D正確。

故選B。11.基因工程應(yīng)用廣泛，成果豐碩。下列成果屬于基因工程應(yīng)用的是（）A.腺病毒載體重組新型冠狀病毒疫苗的制備B.白菜與甘藍(lán)體細(xì)胞雜交育成白菜-甘藍(lán)C.人工誘變獲得高產(chǎn)青霉素的青霉菌株D.用單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)出可供移植的皮膚『答案』A『解析』『詳解』A、腺病毒載體重組新型冠狀病毒疫苗的制備利用了基因工程，以腺病毒為載體，目的基因?yàn)樾滦凸跔畈《镜腟蛋白抗原基因，構(gòu)建重組腺病毒作為疫苗，A正確；B、白菜與甘藍(lán)體細(xì)胞雜交育成白菜-甘藍(lán)利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，B錯(cuò)誤；C、人工誘變獲得高產(chǎn)青霉素的青霉菌株利用了誘變育種，其原理是基因突變，C錯(cuò)誤；D、用單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)出可供移植的皮膚利用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，D錯(cuò)誤。故選A。12.擬利用番茄表達(dá)人類凝血因子Ⅸ，操作步驟排序正確的是（）①制備工程農(nóng)桿菌②構(gòu)建植物表達(dá)載體③獲取人類凝血因子Ⅸ基因④番茄植株中凝血因子Ⅸ基因的檢測(cè)⑤用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化番茄植株并篩選⑥提取凝血因子Ⅸ并檢測(cè)活性A.③①②⑤⑥④ B.⑥③①②⑤④C.④③②①⑤⑥ D.③②①⑤④⑥『答案』D『解析』『詳解』基因工程的基本步驟：獲取目的基因，構(gòu)架表達(dá)載體，受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，目的基因的表達(dá)及檢測(cè)。

對(duì)植物細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

綜合可知正確的排序應(yīng)為：③②①⑤④⑥，故選D。13.人類基因組中有大量短串聯(lián)重復(fù)序列（STR），重復(fù)次數(shù)在不同個(gè)體間存在差異，具有高度多樣性。提取某犯罪現(xiàn)場(chǎng)證據(jù)DNA及嫌疑人DNA，PCR擴(kuò)增某基因座STR后電泳，結(jié)果如圖，據(jù)此可排除嫌疑的是（）A.甲B.乙C.丙D.丁『答案』C『解析』『詳解』據(jù)圖分析，和證據(jù)DNA對(duì)照，甲、乙、丁的結(jié)果與證據(jù)DNA都有一致的條帶，不能排除嫌疑，只有丙的結(jié)果與證據(jù)DNA有不一樣的條帶，可以排除嫌疑，ABD錯(cuò)誤，C正確。故選C。14.水稻R基因的等位基因R1與R2存在一個(gè)堿基對(duì)的差異，為檢測(cè)水稻的基因型，使用存在1個(gè)堿基錯(cuò)配的引物對(duì)3株水稻的R基因局部進(jìn)行PCR擴(kuò)增后，用限制酶HinfⅠ切割并電泳（如下圖）。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.在R1基因和R2基因的差異序列中，不含限制酶HinfⅠ的酶切位點(diǎn)B.引物中存在1個(gè)堿基錯(cuò)配，導(dǎo)致R基因經(jīng)PCR擴(kuò)增后1個(gè)堿基對(duì)改變C.擴(kuò)增后的R2片段有1個(gè)HinfⅠ的酶切位點(diǎn)，而擴(kuò)增后的R1片段沒(méi)有D.電泳結(jié)果顯示，植株1為純合子，植株2和植株3為雜合子『答案』D『解析』『詳解』A、由圖可知，在R1基因和R2基因的差異序列中，不含限制酶HinfⅠ的酶切位點(diǎn)，A正確；

B、因?yàn)橐镏写嬖?個(gè)堿基錯(cuò)配，導(dǎo)致R基因經(jīng)PCR擴(kuò)增后1個(gè)堿基對(duì)改變，B正確；

C、根據(jù)酶切結(jié)果可知，擴(kuò)增后的R2片段有1個(gè)HinfⅠ的酶切位點(diǎn)，而擴(kuò)增后的R1片段沒(méi)有HinfⅠ的酶切位點(diǎn)，C正確；

D、電泳結(jié)果顯示，植株1和植株2為純合子，植株3為雜合子，D錯(cuò)誤。

故選D。15.生物技術(shù)給人類帶來(lái)福祉的同時(shí)，也引起人們對(duì)其安全性和倫理問(wèn)題的關(guān)注。我國(guó)政府反對(duì)（）A.生產(chǎn)任何轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品B.生產(chǎn)、儲(chǔ)存生物武器C.人類胚胎干細(xì)胞研究D.生殖性克隆動(dòng)物『答案』B『解析』『詳解』我國(guó)政府反對(duì)生產(chǎn)、儲(chǔ)存生物武器并禁止生殖性克隆人，支持在安全范疇進(jìn)行轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品、人類胚胎干細(xì)胞研究和生殖性克隆動(dòng)物研究，故選B。第二部分非選擇題16.中國(guó)是食醋釀造大國(guó)，有幾千年的釀醋歷史。但目前中國(guó)常用的醋酸桿菌菌株AS1.41產(chǎn)酸能力、酒精耐受性均有待提高。擬從醋醅中篩選高產(chǎn)酸、高耐酒精的醋酸菌，過(guò)程如圖1所示。（1）試驗(yàn)中所用培養(yǎng)基均含有水、葡萄糖、酵母浸膏和酒精，其中葡萄糖可為醋酸菌的生長(zhǎng)提供_________。配制分離培養(yǎng)基時(shí)，除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加2%的碳酸鈣和_____，以便觀察醋酸與碳酸鈣反應(yīng)后菌落周圍形成的透明圈。（2）分離醋酸菌時(shí)，需將富集的醋酸菌培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋，采用_____法接種到分離平板上。30℃培養(yǎng)72h后，挑取透明圈_____的單菌落進(jìn)行劃線分離。分離出的單菌落接種到斜面培養(yǎng)基（含3%酒精）上并于4（3）取保藏的三個(gè)菌株分別接種于發(fā)酵培養(yǎng)液（含5%酒精）中，30℃培養(yǎng)5d后測(cè)產(chǎn)酸量，篩選出高產(chǎn)酸的醋酸桿菌J2菌株。將J2與AS1.41分別接種到含不同濃度酒精的培養(yǎng)液中，30℃培養(yǎng)24h后測(cè)定活菌數(shù)量，結(jié)果如圖2。由圖2可知，酒精可_____醋酸菌的生長(zhǎng)。與AS1.41相比，J2菌株對(duì)酒精的耐受性（4）獲得J2菌株后，還可以采取_____的育種措施，進(jìn)一步提高其酒精耐受性。（5）篩選出J2菌株后，其高產(chǎn)酸特性的遺傳是否穩(wěn)定還需檢測(cè)，請(qǐng)寫(xiě)出基本過(guò)程。_____『答案』(1).碳源和能量(2).酸堿指示劑(3).稀釋涂布平板(4).大(5).抑制(6).更高(7).誘變(8).將J2菌株連續(xù)培養(yǎng)多代，將每一代菌株都接種到培養(yǎng)基上，觀察并比較產(chǎn)生的透明圈大小，如果透明圈大小基本一致，說(shuō)明其高產(chǎn)酸特性能穩(wěn)定遺傳，如果透明圈大小不一致，說(shuō)明其高產(chǎn)酸特性不能穩(wěn)定遺傳『解析』『詳解』（1）葡萄糖含有碳元素，可以為醋酸菌提供碳源，同時(shí)葡萄糖是其呼吸作用的底物，可以提供能量，配制分離培養(yǎng)基時(shí)，除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加2%的碳酸鈣和酸堿指示劑，以便觀察醋酸與碳酸鈣反應(yīng)后菌落周圍形成的透明圈；（2）富集培養(yǎng)后濃度較高，需要梯度稀釋，采用稀釋涂布平板法接種到分離平板上，30℃培養(yǎng)72h（3）由圖2可知，加入酒精后，活菌數(shù)量相對(duì)值都沒(méi)有不加酒精時(shí)高，說(shuō)明酒精可抑制醋酸菌的生長(zhǎng)，J2菌株相對(duì)值到酒精濃度為10%時(shí)才下降到0，說(shuō)明J2菌株對(duì)酒精的耐受性更高；（4）J2菌株是細(xì)菌，可以通過(guò)誘變的方式，使其發(fā)生基因突變，進(jìn)一步提高其酒精耐受性；（5）檢測(cè)J2菌株高產(chǎn)酸特性能否穩(wěn)定遺傳，需要檢測(cè)其后代的產(chǎn)酸能力，所以將J2菌株連續(xù)培養(yǎng)多代，將每一代菌株都接種到培養(yǎng)基上，觀察并比較產(chǎn)生的透明圈大小，如果透明圈大小基本一致，說(shuō)明其高產(chǎn)酸特性能穩(wěn)定遺傳，如果透明圈大小不一致，說(shuō)明其高產(chǎn)酸特性不能穩(wěn)定遺傳。17.花椰菜和黑芥均為十字花科植物，花椰菜易患黑腐病（致病菌為黃單胞桿菌屬細(xì)菌）。擬通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)（如圖1），將黑芥的抗黑腐病基因引入到花椰菜中。（1）在用酶解法制備原生質(zhì)體時(shí)，需先用較高滲透壓的溶液處理植物細(xì)胞，使細(xì)胞處于微弱的_____狀態(tài)，然后用_____消化去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體。（2）用不同劑量紫外線處理黑芥原生質(zhì)體，統(tǒng)計(jì)愈傷組織數(shù)和再生植株率，結(jié)果如圖2。由圖2可知，處理黑芥原生質(zhì)體的適宜紫外線劑量為_(kāi)____J·cm-2，此處理下融合細(xì)胞的_____能力較強(qiáng)，既能得到大量愈傷組織，再生植株率也最高。（3）雜種細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)發(fā)育成植株，該過(guò)程所用培養(yǎng)基中包括水、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，此外還需加入一定濃度和比例的_____，以調(diào)節(jié)細(xì)胞的發(fā)育方向。（4）雜種細(xì)胞分裂過(guò)程中會(huì)丟失來(lái)自黑芥的部分染色體，有時(shí)會(huì)發(fā)生染色體易位，這使雜種植株染色體組成呈現(xiàn)多樣性。如何對(duì)雜種植株進(jìn)行選擇和培育，才能得到既抗黑腐病、又最大程度減少非目標(biāo)性狀的花椰菜植株？請(qǐng)寫(xiě)出基本思路。_____『答案』(1).失水(2).纖維素酶和果膠酶(3).0.1(4).再生(5).植物激素(6).對(duì)雜種植株接種黑腐病菌，能正常生長(zhǎng)的即為具有高抗性的雜種植株『解析』『詳解』（1）使用高滲透壓的溶液處理植物細(xì)胞，使細(xì)胞處于微弱的失水狀態(tài)。植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，故采用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。

（2）由圖可知，處理黑芥原生質(zhì)體的適宜紫外線劑量為0.1J·cm-2，此濃度下融合細(xì)胞的再生能力較強(qiáng)。

（3）植物組織培養(yǎng)過(guò)程中需調(diào)節(jié)植物激素的種類和比例，以保證愈傷組織再分化并得到完整的植株。

（4）對(duì)雜種植株接種黑腐病菌，能正常生長(zhǎng)的即為具有高抗性的雜種植株。18.目前流感疫苗主要的生產(chǎn)介質(zhì)是雞胚。研究者用犬腎細(xì)胞（MDCK細(xì)胞）培養(yǎng)流感病毒，制備疫苗并測(cè)定了其免疫效果。（1）利用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)基中需加入水、葡萄糖、_____、維生素、無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。為防止污染，需對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行_________處理，以及在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作。（2）將貼壁生長(zhǎng)型MDCK細(xì)胞進(jìn)行馴化，可使之適應(yīng)懸浮培養(yǎng)。與貼壁培養(yǎng)相比，懸浮培養(yǎng)利于提高細(xì)胞密度，傳代培養(yǎng)時(shí)不需要用_____消化，操作更簡(jiǎn)單。（3）通過(guò)克隆化培養(yǎng)，獲得若干單克隆細(xì)胞株。需要從這些單克隆細(xì)胞株中篩選出高產(chǎn)流感病毒的細(xì)胞株，請(qǐng)寫(xiě)出篩選的思路_____。（4）用MDCK細(xì)胞培養(yǎng)甲型H1N1流感病毒，制成疫苗后對(duì)小鼠進(jìn)行免疫接種（第一次免疫兩周后進(jìn)行第二次免疫）。第二次免疫后兩周接種甲型H1N1流感病毒，測(cè)定免疫效果，結(jié)果如圖1、圖2。①由圖1可知，用兩種疫苗免疫小鼠，均可產(chǎn)生較高水平的抗體，說(shuō)明兩種疫苗均可激發(fā)小鼠對(duì)流感病毒的_____免疫應(yīng)答。②由圖2可知，兩種疫苗都對(duì)小鼠有較好的_____作用。『答案』(1).氨基酸(2).滅菌(3).胰蛋白酶(4).在特定的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該選擇培養(yǎng)基中，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有目的細(xì)胞可以存活(5).特異性（或體液）(6).免疫預(yù)防『解析』『詳解』（1）利用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)基中需要加入水、葡萄糖、氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。為防止污染，需對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理，以及在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作。

（2）將貼壁生長(zhǎng)型MDCK細(xì)胞進(jìn)行馴化，可使之適應(yīng)懸浮培養(yǎng)。與貼壁培養(yǎng)相比，懸浮培養(yǎng)利于提高細(xì)胞密度，傳代培養(yǎng)時(shí)不需要用胰蛋白酶消化，操作更簡(jiǎn)單。

（3）從這些單克隆細(xì)胞株中篩選出高產(chǎn)流感病毒的細(xì)胞株，篩選思路為：在特定的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該選擇培養(yǎng)基中，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有目的細(xì)胞可以存活。

（4）①由圖1可知，用兩種疫苗免疫小鼠，均可產(chǎn)生較高水平的抗體，說(shuō)明兩種疫苗均可激發(fā)小鼠對(duì)流感病毒的特異性免疫應(yīng)答。

②由圖2可知，兩種疫苗作用下小鼠的存活率都高于對(duì)照組，說(shuō)明兩種疫苗都對(duì)小鼠有較好的免疫預(yù)防作用。19.禾谷鐮刀菌可侵染小麥等作物，使其產(chǎn)量和品質(zhì)下降。研究者通過(guò)構(gòu)建融合基因Ve-FG并轉(zhuǎn)化擬南芥，以期實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植物抗禾谷鐮刀菌的目的。（1）利用PCR技術(shù)，將野生番茄的抗黃萎病基因Ve與禾谷鐮刀菌的識(shí)別基因FG進(jìn)行重組，構(gòu)建融合基因Ve-FG（如圖1）。①設(shè)計(jì)3對(duì)引物。其中引物2的一部分序列與C片段一部分序列互補(bǔ)，另一部分序列與_____片段一部分序列互補(bǔ)。②通過(guò)PCR分別克隆A、C、P片段?？寺片段應(yīng)選用的引物是_____。③以A、C、P片段為_(kāi)____進(jìn)行延伸，將A、P、C片段拼接，再以引物1、4進(jìn)行PCR，擴(kuò)增融合基因Ve-FG。（2）用_____將Ve-FG與質(zhì)粒連接，構(gòu)建重組質(zhì)粒（如圖2，圖中潮霉素抗性基因只在植物細(xì)胞中表達(dá)）。將農(nóng)桿菌與重組質(zhì)?；旌?，一段時(shí)間后涂布到含有_____的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選。用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化擬南芥，幾周后收獲種子，種在含有潮霉素的培養(yǎng)基上，獲得轉(zhuǎn)基因擬南芥株系1和株系2。（3）分別提取株系1和2、非轉(zhuǎn)基因擬南芥植株葉片中的DNA作為模板，PCR擴(kuò)增Ve-FG基因后進(jìn)行電泳，結(jié)果如圖3。①電泳時(shí)應(yīng)以_____為陽(yáng)性對(duì)照。②成功導(dǎo)入Ve-FG基因的是_____。③株系1可抗潮霉素，但電泳結(jié)果無(wú)陽(yáng)性條帶，原因可能是_____。（4）為檢驗(yàn)融合基因Ve-FG的功能，以導(dǎo)入Ve-FG基因的植株為實(shí)驗(yàn)組，導(dǎo)入空白質(zhì)粒的植株為對(duì)照組，分別接種_____。一段時(shí)間后觀察發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照植株相比，實(shí)驗(yàn)組整體長(zhǎng)勢(shì)更旺盛，葉片萎蔫程度、葉片變黃程度也較輕，這表明_____?！捍鸢浮?1).P(2).1、3(3).模板(4).DNA連接酶(5).卡那霉素(6).融合基因Ve-FG(7).株系2(8).株系1中導(dǎo)入的是空白質(zhì)粒，應(yīng)空白質(zhì)粒中也含有上述的兩種抗性基因(9).禾谷鐮刀菌(10).轉(zhuǎn)基因擬南芥中的Ve-FG基因在擬南芥細(xì)胞中成功表達(dá)?！航馕觥弧涸斀狻唬?）①設(shè)計(jì)3對(duì)引物。其中引物2的一部分序列與C片段一部分序列互補(bǔ)，另一部分序列與P片段一部分序列互補(bǔ)，才能實(shí)現(xiàn)圖示的連接。②通過(guò)PCR分別克隆A、C、P片段。選用的引物1、3可完成A片段的克隆。③以A、C、P片段為模板進(jìn)行延伸，將A、P、C片段拼接，再以引物1、4進(jìn)行PCR，擴(kuò)增融合基因Ve-FG。（2）用DNA連接酶將Ve-FG與質(zhì)粒連接，構(gòu)建重組質(zhì)粒（如圖2）。將農(nóng)桿菌與重組質(zhì)粒混合，由于重組質(zhì)粒中含有抗卡那霉素的基因和潮霉素抗性基因，但是潮霉素抗性基因只在植物細(xì)胞中表達(dá)，因此，一段時(shí)間后將農(nóng)桿菌涂布到含有卡那霉素的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，從而將經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌篩選出來(lái)。用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化擬南芥，幾周后收獲種子，種在含有潮霉素的培養(yǎng)基上，從而將含有重組質(zhì)粒的擬南芥株系1和株系2篩選出來(lái)。（3）分別提取株系1和2、非轉(zhuǎn)基因擬南芥植株葉片中的DNA作為模板，PCR擴(kuò)增Ve-FG基因后進(jìn)行電泳，結(jié)果如圖3。①電泳時(shí)應(yīng)以融合基因Ve-FG為陽(yáng)性對(duì)照。②成功導(dǎo)入Ve-FG基因的是株系2。③株系1可抗潮霉素，但電泳結(jié)果無(wú)陽(yáng)性條帶，原因可能是株系1導(dǎo)入的是空白質(zhì)粒，從而不能急檢測(cè)到目的基因。（4）為檢驗(yàn)融合基因Ve-FG的功能，以導(dǎo)入Ve-FG基因的植株為實(shí)驗(yàn)組，導(dǎo)入空白質(zhì)粒的植株為對(duì)照組，分別接種禾谷鐮刀菌。一段時(shí)間后觀察發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照植株相比，實(shí)驗(yàn)組整體長(zhǎng)勢(shì)更旺盛，葉片萎蔫程度、葉片變黃程度也較輕，這表明導(dǎo)入的Ve-FG基因在擬南芥細(xì)胞中成功表達(dá)。20.新型冠狀病毒是一種單鏈RNA病毒，新型冠狀病毒感染的常規(guī)檢測(cè)方法是通過(guò)實(shí)時(shí)熒光PCR鑒定。（1）首先，從樣本中提取病毒RNA，經(jīng)_____酶作用生成cDNA。然后以cDNA為模板進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增，測(cè)定樣品中病毒核酸量。（2）通過(guò)實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增目的基因，需額外添加熒光標(biāo)記探針（一小段單鏈DNA，可與目的基因中部序列特異性結(jié)合）。當(dāng)探針完整時(shí)，不產(chǎn)生熒光。在PCR過(guò)程中，與目的基因結(jié)合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，R發(fā)出的熒光可被檢測(cè)到（如圖1）。①當(dāng)樣本中有目的基因時(shí)，引物和探針與目的基因退火，通過(guò)形成_____而特異性結(jié)合。②在PCR循環(huán)的_____階段，TaqDNA聚合酶催化子鏈的合成并水解探針。檢測(cè)到的熒光強(qiáng)（3）在通過(guò)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)新型冠狀病毒感染時(shí)，檢測(cè)到的熒光強(qiáng)度變化如圖2所示。①與指數(shù)增長(zhǎng)期相比，線性增長(zhǎng)期目的基因數(shù)量的增長(zhǎng)率下降，原因有_____。②Ct值的含義：在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時(shí)所經(jīng)歷的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)。因此，當(dāng)樣本中初始模板越多時(shí)，Ct值就_____。③某新型冠狀病毒核酸檢測(cè)說(shuō)明書(shū)標(biāo)明，Ct≤37判定為陽(yáng)性，Ct>40或無(wú)Ct值判定為陰性。圖2所示新型冠狀病毒核酸檢測(cè)結(jié)果應(yīng)判定為_(kāi)____。（4）陰性結(jié)果也不能排除新型冠狀病毒感染?？赡墚a(chǎn)生假陰性的因素有_____。a．取樣太早，樣本中病毒量少，達(dá)不到實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)閾值b．樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解c．病毒發(fā)生變異『答案』(1).逆轉(zhuǎn)錄(2).氫鍵(3).延伸(4).底物濃度下降、酶活性下降(5).越小(6).陽(yáng)性(7).abc『解析』『詳解』（1）由病毒RNA生成cDNA的過(guò)程屬于逆轉(zhuǎn)錄，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。（2）①當(dāng)樣本中有目的基因時(shí)，引物和探針與目的基因退火，通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)形成氫鍵而特異性結(jié)合。②在PCR循環(huán)的延伸階段，TaqDNA聚合酶催化子鏈的合成并水解探針。（3）①線性增長(zhǎng)期目的基因數(shù)量的增長(zhǎng)率下降，有可能是底物濃度降低導(dǎo)致的，也有可能是酶的活性緩慢下降導(dǎo)致的。②樣本中初始模板越多時(shí)，達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時(shí)所經(jīng)歷的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)就越小，Ct值就越低。③據(jù)圖2可知熒光閾值大概是36，新型冠狀病毒核酸檢測(cè)結(jié)果應(yīng)判定為陽(yáng)性。（4）陰性結(jié)果也不能排除新型冠狀病毒感染?？赡墚a(chǎn)生假陰性的因素有，取樣太早，樣本中病毒量少，達(dá)不到實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)閾值，樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解，病毒發(fā)生變異。21.閱讀下面的材料，回答問(wèn)題胰島素的應(yīng)用是糖尿病治療歷史上的一個(gè)里程碑。胰島素自1922年用于臨床以來(lái)，就成為治療糖尿病的特效藥物。目前全世界糖尿病患者已超過(guò)四億，為臨床提供充足、質(zhì)量可靠的胰島素制劑是現(xiàn)代生物制藥領(lǐng)域的一項(xiàng)重要工程。人胰島素由胰島β細(xì)胞合成，核糖體上最初形成的是前胰島素原單鏈多肽，進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔后，信號(hào)肽被切除，形成胰島素原。高爾基體內(nèi)的特異性肽酶將胰島素原的C肽區(qū)域切除，A鏈和B鏈通過(guò)二硫鍵形成共價(jià)交聯(lián)的活性胰島素（如圖）。最初用于臨床的胰島素幾乎都是從豬、牛胰臟中提取的。豬、牛胰島素與人胰島素生理功能相似，但氨基酸序列有微小差異。接受動(dòng)物胰島素治療的患者有5％～10％出現(xiàn)不同程度的過(guò)敏反應(yīng)，抗動(dòng)物胰島素抗體還可能對(duì)患者的胰島β細(xì)胞功能產(chǎn)生負(fù)面影響。隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，重組人胰島素逐漸取代動(dòng)物胰島素。早期的重組人胰島素生產(chǎn)，采用A、B鏈分別表達(dá)法。后來(lái)該方法被胰島素原表達(dá)法取代，即由大腸桿菌合成胰島素原，然后經(jīng)細(xì)胞外酶切獲得胰島素。1987年用酵母菌生產(chǎn)重組人胰島素的方法出現(xiàn)。重組人胰島素的結(jié)構(gòu)與人體自身分泌的胰島素結(jié)構(gòu)完全相同，但無(wú)法完全模擬生理胰島素曲線，容易導(dǎo)致血糖波動(dòng)，甚至導(dǎo)致低血糖發(fā)生。上世紀(jì)90年代，科學(xué)家通過(guò)改變胰島素的氨基酸序列和結(jié)構(gòu)，研制出能更好模擬生理胰島素分泌特點(diǎn)的胰島素類似物，包括速效胰島素和長(zhǎng)效胰島素類似物。例如，將人胰島素B鏈第28位的脯氨酸替換為天門(mén)冬氨酸，可有效抑制胰島素單體的聚合，皮下注射這種速效胰島素類似物后，起效快（10-20分鐘起效）、血藥濃度峰值高、藥效消失快，已經(jīng)在臨床上廣泛應(yīng)用。（1）用豬胰島素進(jìn)行治療，易誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗豬胰島素