我國(guó)小麥育種研究進(jìn)展

20世紀(jì)50年代以來(lái)，中國(guó)的小麥栽培經(jīng)歷了三個(gè)階段：抗病穩(wěn)定、低產(chǎn)量、高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)，第一階段最長(zhǎng)，同時(shí)發(fā)揮了最大的作用。我國(guó)最重要的小麥產(chǎn)區(qū)黃淮麥區(qū),1950年開(kāi)始大面積推廣抗條銹品種碧螞1號(hào)和碧螞4號(hào)等,1956年引進(jìn)的阿夫和阿勃也得到大面積種植,1970和1971年育成了半矮稈品種泰山4號(hào)和矮豐3號(hào),1980—2000年前主要推廣1B/1R衍生品種如陜農(nóng)7859和豫麥21等,近10年優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)兼顧品種如濟(jì)南17和豫麥34等大面積種植。在遠(yuǎn)緣雜交和骨干親本創(chuàng)制方面也取得顯著進(jìn)展,如用長(zhǎng)穗偃麥草后代育成的高產(chǎn)多抗優(yōu)質(zhì)廣適型品種小偃6號(hào),在陜西關(guān)中等地大面積推廣20多年,并已成為我國(guó)優(yōu)質(zhì)小麥的骨干親本之一;育成的骨干親本“繁六”和“矮孟牛”等在育種中發(fā)揮了重要作用,發(fā)現(xiàn)的太谷核不育基因在育種中也發(fā)揮了較好作用。1960—2000年,黃淮冬麥區(qū)的河北、山東和河南小麥品種產(chǎn)量潛力的年遺傳進(jìn)度為0.48%~1.05%或32.1~72.1kghm-2。矮稈基因和1B/1R易位系的利用使株高降低、收獲指數(shù)提高、穗粒重增加,這是品種產(chǎn)量潛力提高的主要原因。這說(shuō)明我國(guó)小麥育種在產(chǎn)量改良方面取得了舉世矚目的成績(jī)。但同時(shí)還應(yīng)看到,國(guó)內(nèi)外廣泛采用的常規(guī)育種技術(shù)改進(jìn)不大,效率較低,亟待提升完善。分子標(biāo)記輔助選擇等新技術(shù)代表了未來(lái)小麥育種的發(fā)展方向,在發(fā)達(dá)國(guó)家應(yīng)用日益廣泛,而且還為未來(lái)育種技術(shù)革新提供了許多重要信息和知識(shí),推動(dòng)了品質(zhì)和抗病性等研究的不斷深入。本文旨在初步總結(jié)近10年國(guó)內(nèi)小麥育種的主要進(jìn)展,評(píng)述分子標(biāo)記輔助育種的進(jìn)展與存在問(wèn)題,概括小麥品質(zhì)研究中與育種密切相關(guān)的實(shí)用技術(shù)和方法的新進(jìn)展,并在分析當(dāng)前國(guó)內(nèi)小麥育種的一些熱點(diǎn)問(wèn)題的基礎(chǔ)上提出今后應(yīng)著重加強(qiáng)的領(lǐng)域。暫不涉及可能具有重要潛在價(jià)值,但目前還不能用于育種實(shí)踐的基礎(chǔ)性研究問(wèn)題。1小麥品種選育工作從1998—2008年,我國(guó)小麥面積從3000萬(wàn)公頃下降到2350萬(wàn)公頃,單產(chǎn)從3685kghm-2提高到4762kghm-2,總產(chǎn)從1.10億噸增長(zhǎng)到1.12億噸。10年小麥單產(chǎn)增長(zhǎng)29.2%,而同期水稻和玉米分別增長(zhǎng)5.5%和3.1%,其中新品種選育和栽培技術(shù)進(jìn)步在增產(chǎn)中發(fā)揮了重要作用。1981—2008年河南省小麥品種產(chǎn)量潛力年遺傳進(jìn)度為0.60%或51.3kghm-2,1971—2006年山東省小麥品種產(chǎn)量潛力年遺傳進(jìn)度為0.92%或66.6kghm-2(本實(shí)驗(yàn)室未發(fā)表資料)。這說(shuō)明由于育種家的不斷努力,主產(chǎn)區(qū)的小麥品種產(chǎn)量潛力還在繼續(xù)提高,常規(guī)育種仍然發(fā)揮著重要作用。2000年以來(lái),我國(guó)小麥育種取得的新進(jìn)展主要表現(xiàn)在3個(gè)方面。一是主產(chǎn)麥區(qū)育成一批高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、多抗、廣適的新品種,實(shí)現(xiàn)了兩次品種更新?lián)Q代,單產(chǎn)顯著增加,一批強(qiáng)筋小麥品種的大面積推廣使商品糧的整體加工品質(zhì)明顯改善,還實(shí)現(xiàn)優(yōu)質(zhì)小麥的小批量出口。根據(jù)種植面積,代表性品種有石4185、邯6172、衡觀35、石麥15、石家莊8號(hào)(河北)、濟(jì)南17、濟(jì)麥19、濟(jì)麥20、濟(jì)麥22、煙農(nóng)19(山東)、鄭麥9023、豫麥34、新麥18、周麥18、矮抗58(河南)、皖麥52(安徽)、小偃22、西農(nóng)979(陜西)、晉麥47(山西)、揚(yáng)麥11、揚(yáng)麥12、揚(yáng)麥13(江蘇)、川麥107(四川)、新冬20(新疆)和龍麥26(黑龍江)?？傮w來(lái)說(shuō),大面積推廣品種的產(chǎn)量潛力和加工品質(zhì)顯著提高,而最突出的特點(diǎn)是對(duì)多種病害表現(xiàn)較好的抗性,抗逆性強(qiáng),適應(yīng)性廣。二是矮稈高產(chǎn)抗病親本周8425B及高產(chǎn)廣適品種魯麥14在全國(guó)小麥育種中發(fā)揮了重要作用,成為新的骨干親本;具遠(yuǎn)緣血統(tǒng)的抗病親本普通小麥-簇毛麥6VS/6AL易位系(如92R137等)和人工合成小麥在抗病育種中廣泛應(yīng)用。周8425B矮稈高產(chǎn)配合力好,含有新的抗條銹病基因YrZH84和抗葉銹病基因LrZH84抗白粉病,用做親本育成22個(gè)品種如河南省的主栽品種矮抗58和周麥16。魯麥14既是好品種,又是好親本,用做親本育成11個(gè)品種如山東省的主栽品種濟(jì)麥22和良星99等。6VS/6AL易位系抗白粉病和條銹病,農(nóng)藝性狀較好,用做親本育成15個(gè)品種如石麥14和揚(yáng)麥18等;用人工合成小麥育成的川麥42和川麥47等高產(chǎn)抗病,已在西南地區(qū)大面積推廣。三是育種技術(shù)研究取得重要進(jìn)展。分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)開(kāi)始用于抗病性品種培育,用小麥與玉米雜交誘導(dǎo)單倍體育成了高產(chǎn)節(jié)水品種中麥533;小麥品質(zhì)評(píng)價(jià)體系建立和分子技術(shù)研究取得較大進(jìn)展;在太谷核不育的基礎(chǔ)上,把不育和矮稈兩個(gè)基因緊密連鎖在一起的“矮敗小麥”正在育種中應(yīng)用;冬小麥一年多代加代技術(shù)和兩系雜交小麥也取得較好進(jìn)展;另外,將中間偃麥草的抗黃矮病基因和冰草的多?；?qū)胄←湶⒁言谛缕贩N選育中發(fā)揮作用,磷高效等研究為培育營(yíng)養(yǎng)高效和廣適性品種提供了有效方法。但是育種中還存在一些較為突出的問(wèn)題。總體來(lái)說(shuō),組織形式落后,育種單位多,規(guī)模小,缺乏有效協(xié)作,材料和信息交流不暢,影響工作質(zhì)量和效率。具體來(lái)講,一是主產(chǎn)區(qū)所用親本趨于單一。山東省以改造濟(jì)麥19和濟(jì)麥22為主,河北省以改造冀5418和邯6172為主,河南省多為周麥16的后代親本單一導(dǎo)致新品種的遺傳相似性增加,今后育成突破性品種的難度加大。二是抗病育種還需進(jìn)一步加強(qiáng)。根據(jù)我們2010年在四川省的觀察,人工合成小麥后代如川麥42所帶新的抗條銹病基因YrCH42已喪失對(duì)條銹病的抗性;6VS/6AL易位系和貴農(nóng)號(hào)品系所攜帶的Yr24/Yr26在四川等地比例很高,這是一個(gè)全生育期抗性的主基因,已開(kāi)始感病,應(yīng)引起高度重視(康振生,個(gè)人交流)。過(guò)去我們?cè)J(rèn)為YrCH42與Yr24/Yr26可能是同一基因,2010年四川省的觀察結(jié)果并不支持這一推斷。2009年河南等地不少品種出現(xiàn)白粉病抗性喪失現(xiàn)象,原因尚不清楚。另外吸漿蟲(chóng)危害在河北南部和北部冬麥區(qū)有蔓延趨勢(shì);生產(chǎn)上缺乏高抗紋枯病的品種,全蝕病日益嚴(yán)重但普通小麥缺乏抗源,有關(guān)研究(包括育種家急需的可靠的抗病性鑒定技術(shù)等)亟待加強(qiáng)。三是新技術(shù)應(yīng)用慢,可用的標(biāo)記數(shù)量少,有關(guān)產(chǎn)量和抗病性的功能標(biāo)記更少,分子標(biāo)記發(fā)掘與主流育種項(xiàng)目結(jié)合不夠緊密,缺乏為育種服務(wù)的分子技術(shù)平臺(tái),育種家對(duì)分子標(biāo)記研究的進(jìn)展也不夠了解,標(biāo)記選擇尚未真正起到輔助新品種培育的作用(見(jiàn)本文第二部分)。四是品種審定還需進(jìn)一步規(guī)范化。近幾年審定的品種數(shù)量較“十五”期間有所減少,但仍然偏多,可以更嚴(yán)格些,因?yàn)閷彾ㄆ贩N過(guò)多對(duì)良種推廣不利,品種壽命也明顯縮短;同時(shí)在審定品種中對(duì)品質(zhì)和抗病性的把握不切合實(shí)際,影響一些確有潛力的品種通過(guò)審定。今后我國(guó)小麥育種面臨更嚴(yán)峻的挑戰(zhàn),既要繼續(xù)提高單產(chǎn)又要改善品質(zhì),還要提高水肥利用率。建議進(jìn)一步加強(qiáng)品種高產(chǎn)潛力研究;日益明顯的氣候變化對(duì)小麥適應(yīng)性提出新的要求,應(yīng)重視抗旱、抗熱等性狀和冬麥北移的研究;以及進(jìn)一步推動(dòng)分子標(biāo)記輔助選擇、轉(zhuǎn)基因、雙單倍體和遠(yuǎn)源雜交等技術(shù)的實(shí)用化研究,實(shí)現(xiàn)育種技術(shù)革新。2功能標(biāo)記的應(yīng)用分子標(biāo)記輔助選擇用于作物育種的研究已有20多年歷史,目前雖已在發(fā)達(dá)國(guó)家的育種中發(fā)揮了較重要的作用,但總體來(lái)說(shuō)與育種家的期望尚有較大差距,Xu和Crouch曾對(duì)其原因和對(duì)策做了深入分析。分子標(biāo)記的成功應(yīng)用與標(biāo)記的種類和質(zhì)量、使用成本、相關(guān)信息的處理和分析、標(biāo)記與雙單倍體等技術(shù)的結(jié)合、育種目標(biāo)的復(fù)雜性等息息相關(guān),也和育種家對(duì)標(biāo)記的認(rèn)識(shí)程度有關(guān)。近幾年國(guó)外有關(guān)小麥分子育種的綜述也較多,Gupta等對(duì)小麥分子標(biāo)記的應(yīng)用現(xiàn)狀和前景做了較詳細(xì)的評(píng)述。小麥育種中常用的分子標(biāo)記包括連鎖標(biāo)記(SSR等)和依據(jù)基因序列開(kāi)發(fā)的功能標(biāo)記(STS等)兩大類,SNP和DArT目前還僅限于有關(guān)研究,全基因組選擇也處在研究階段,分子設(shè)計(jì)育種則是對(duì)未來(lái)育種工作的愿景設(shè)想,要付之實(shí)踐尚需相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間。數(shù)量性狀位點(diǎn)(QTL)定位可提供位點(diǎn)數(shù)目、在染色體上的位置及效應(yīng)大小等重要信息,若將被定位親本用于雜交,可用標(biāo)記對(duì)后代進(jìn)行跟蹤選擇。由于小麥基因組很大,對(duì)數(shù)量性狀來(lái)說(shuō),要獲得緊密連鎖的標(biāo)記并不容易。從理論上講,如目標(biāo)基因兩側(cè)都有標(biāo)記,連鎖距離2~5cM即可應(yīng)用;如僅基因一側(cè)有標(biāo)記則連鎖距離應(yīng)小于2cM。對(duì)主效基因來(lái)說(shuō)獲得緊密連鎖(小于2cM)的標(biāo)記并不太難。定位的準(zhǔn)確性與群體大小、表型數(shù)據(jù)的質(zhì)量或可靠性及連鎖圖的質(zhì)量(標(biāo)記的數(shù)量與分布)等密切相關(guān)。連鎖標(biāo)記不能用于檢測(cè)其他親本(盡管國(guó)內(nèi)外也有一些不恰當(dāng)?shù)膽?yīng)用報(bào)道),因此育種應(yīng)用價(jià)值受到限制。有時(shí)由于定位所用親本的農(nóng)藝性狀太差,導(dǎo)致育種家不愿利用定位親本進(jìn)行品種選育,只能用于種質(zhì)創(chuàng)新。正是基于上述原因,有關(guān)QTL定位或連鎖標(biāo)記的論文很多,但育種實(shí)際應(yīng)用的例子屈指可數(shù)據(jù)作者所知,在小麥中真正用于育種的只有3B染色體上抗赤霉病的連鎖標(biāo)記。與小麥類似,連鎖標(biāo)記在其它作物育種中的應(yīng)用實(shí)例也很少。盡管如此,由于QTL定位能提供目標(biāo)性狀的位點(diǎn)數(shù)目、在染色體上的位置及其效應(yīng)大小等重要信息,它又是基因克隆的前提,因此重要性狀的定位仍是各國(guó)的研究重點(diǎn)。近幾年國(guó)內(nèi)定位的重要性狀基因/QTL有抗赤霉病、抗或慢白粉病[26,27,28,29,30,31,32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42]、抗或慢條銹病,還有品質(zhì)性狀和農(nóng)藝性狀[49,50,51,52,53,54]等,其中多酚氧化酶活性和黃色素含量的定位為后續(xù)的基因克隆和功能標(biāo)記發(fā)掘奠定了基礎(chǔ)。功能標(biāo)記或稱基因標(biāo)記,是育種應(yīng)用的理想標(biāo)記,也是目前及未來(lái)的研究重點(diǎn)。從理論上講,功能標(biāo)記經(jīng)驗(yàn)證優(yōu)化后可用于所有育種材料的檢測(cè)。它的發(fā)掘是以被克隆的基因序列為前提,并需建立位點(diǎn)/標(biāo)記與性狀的關(guān)系。由于水稻和玉米等的基因序列可用于小麥功能標(biāo)記的發(fā)掘,因此表型數(shù)據(jù)短缺是發(fā)掘功能標(biāo)記的最主要限制因素。即便是功能標(biāo)記,也需要進(jìn)行驗(yàn)證,有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)例外。例如用Yr18/Lr34/Pm38的功能標(biāo)記檢測(cè)我國(guó)小麥農(nóng)家品種時(shí),85%的品種含有該基因特異性擴(kuò)增片段,但25.8%品種的田間病害反應(yīng)與預(yù)期的不一致(本實(shí)驗(yàn)室資料,2009),說(shuō)明我國(guó)農(nóng)家品種在該基因位點(diǎn)含有新的等位變異。國(guó)際公立農(nóng)業(yè)研究機(jī)構(gòu)成功應(yīng)用于小麥育種的分子標(biāo)記約60個(gè),多為功能標(biāo)記,少數(shù)為緊密連鎖的標(biāo)記,所涉及的性狀多為簡(jiǎn)單遺傳的性狀如抗銹病、抗線蟲(chóng)、抗吸漿蟲(chóng)及加工品質(zhì)等已先后育成20個(gè)品種。從2005年開(kāi)始,本實(shí)驗(yàn)室著手發(fā)掘?qū)嵱眯凸δ軜?biāo)記,同時(shí)對(duì)國(guó)內(nèi)外發(fā)表的重要標(biāo)記進(jìn)行驗(yàn)證優(yōu)化,在高分子量麥谷蛋白亞基和低分子量麥谷蛋白亞基、多酚氧化酶活性、黃色素含量、抗穗發(fā)芽的功能標(biāo)記發(fā)掘與應(yīng)用方面取得較好進(jìn)展,還建立了多重PCR反應(yīng)體系。表1為本實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證后的小麥功能標(biāo)記一覽表,其中8個(gè)為緊密連鎖的SSR標(biāo)記。我們與國(guó)內(nèi)有關(guān)育種單位合作,已將這些標(biāo)記廣泛用于親本鑒定和高世代材料的基因確認(rèn),還用于分離世代抗病性和品質(zhì)性狀的選擇,取得了一定進(jìn)展;明確了主要品質(zhì)性狀、矮稈、春化和光周期等40多個(gè)基因在中國(guó)小麥中的分布規(guī)律。國(guó)內(nèi)分子育種主要存在3個(gè)問(wèn)題,一是可用的基因標(biāo)記數(shù)量少,有關(guān)產(chǎn)量和抗性的標(biāo)記更少;二是分子標(biāo)記開(kāi)發(fā)與主流育種項(xiàng)目結(jié)合不夠緊密,缺少為育種服務(wù)的分子技術(shù)平臺(tái);三是育種家對(duì)分子標(biāo)記的進(jìn)展還不完全了解,因此培訓(xùn)顯得尤為重要。為了積累更多經(jīng)驗(yàn),盡早將已有成熟標(biāo)記用于育種建議用標(biāo)記聚合抗條銹病或白粉病或抗吸漿蟲(chóng)的主效基因,也可聚合抗條銹或白粉病或赤霉病的微效基因,以延長(zhǎng)品種抗性;還可將標(biāo)記用于改良品質(zhì)和抗穗發(fā)芽能力等。國(guó)外將標(biāo)記選擇與雙單倍體技術(shù)相結(jié)合,已在育種中取得良好效果。隨著小麥基因組測(cè)序的完成和其它相關(guān)技術(shù)的進(jìn)展,將大大加速功能標(biāo)記的發(fā)掘進(jìn)程,在既有科學(xué)分工又能緊密協(xié)作的條件下,預(yù)計(jì)國(guó)內(nèi)今后5~10年內(nèi)分子標(biāo)記將大規(guī)模用于新品種選育。3國(guó)內(nèi)小麥品質(zhì)研究在我國(guó)小麥品質(zhì)研究的起步階段即2000年之前,中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)等做了大量工作.近幾年,山東農(nóng)業(yè)大學(xué)、西北農(nóng)業(yè)大學(xué)和中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育研究所等單位也加大了品質(zhì)研究的力度。我們和首都師范大學(xué)經(jīng)過(guò)10多年合作,建立了中國(guó)小麥品種品質(zhì)評(píng)價(jià)體系與分子改良技術(shù),為我國(guó)小麥品質(zhì)研究走上規(guī)范化打下了基礎(chǔ),并在國(guó)際學(xué)術(shù)界占有重要一席之地,詳細(xì)內(nèi)容曾做過(guò)專門論述。結(jié)合近幾年的最新進(jìn)展,本文只對(duì)與育種密切相關(guān)的部分予以概括。3.1建立中國(guó)面條標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室采用表型分析、生化標(biāo)記和基因標(biāo)記鑒定相結(jié)合的方法,建立了中國(guó)小麥品種品質(zhì)評(píng)價(jià)體系,包括磨粉品質(zhì)評(píng)價(jià)、加工品質(zhì)間接評(píng)價(jià)和4種主要食品(面條、饅頭、面包和餅干)實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)與選擇指標(biāo)3大部分。建立了中國(guó)面條的標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室制作與評(píng)價(jià)方法和選種指標(biāo)與分子標(biāo)記體系,在基因?qū)哟侮U釋面條品質(zhì)的內(nèi)涵,使傳統(tǒng)食品的品質(zhì)育種有規(guī)可循;明確了面包與餅干的選擇指標(biāo),對(duì)北方饅頭也做一些初步研究。3.1.1谷蛋白和醇溶蛋白含量對(duì)面包延展性的影響面筋強(qiáng)度參數(shù)如沉降值和穩(wěn)定時(shí)間等與面包評(píng)分呈顯著正相關(guān)(r=0.77~0.85),是影響面包品質(zhì)的最重要因素,其次為蛋白質(zhì)數(shù)量和籽粒硬度。低分子量谷蛋白亞基含量可解釋面筋強(qiáng)度變異的83.3%,面團(tuán)延展性由醇溶蛋白含量(r=0.73)和高低分子量谷蛋白亞基含量的比例(r=-0.60)共同決定,不溶性谷蛋白聚合體含量(%UPP)可有效預(yù)測(cè)面筋質(zhì)量和烘烤品質(zhì)。提高谷蛋白含量,降低醇溶蛋白與谷蛋白含量比例,可有效改良面筋強(qiáng)度,提高面包烘烤品質(zhì)。篩選優(yōu)良的高低分子量谷蛋白亞基(1,7+8或14+15或13+16,5+10,Glu-A3d和Glu-B3d)是提高面筋強(qiáng)度和面包品質(zhì)的關(guān)鍵,選擇硬度基因Pinb-D1b和非1B/1R易位類型是培育優(yōu)質(zhì)面包小麥品種的重要前提。3.1.2面條品質(zhì)評(píng)價(jià)提出實(shí)驗(yàn)室制作面條的最適配方(60%出粉率,35%加水量,1%鹽),建立了實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化面條制作與評(píng)價(jià)方法,將質(zhì)構(gòu)儀(與面條適口性相關(guān)系數(shù)r=0.70)和色度儀(與面條顏色相關(guān)系數(shù)r=0.73)用于面條品質(zhì)評(píng)價(jià)。面條品質(zhì)由面筋質(zhì)量、淀粉品質(zhì)、面粉色澤和蛋白質(zhì)數(shù)量等因素共同決定,對(duì)中國(guó)面條而言,品質(zhì)性狀的重要性排序?yàn)槊娼顝?qiáng)度>淀粉糊化特性>面粉顏色>籽粒硬度>蛋白質(zhì)數(shù)量。優(yōu)質(zhì)面條品種應(yīng)含低分子量亞基Glu-A3d和Glu-B3d,使面條咬勁適中;高淀粉糊化特性要求含Wx-B1缺失基因,使面條軟硬適中;籽粒硬度基因型應(yīng)為野生型或Pinb-D1b,Pina/Pinb的STS標(biāo)記可用于輔助選擇,使面條表面光滑;STS標(biāo)記PPO18、PPO16、PPO29和YP7A、YP7A-2、YP7B-1、YP7B-2、YP7B-3、YP7B-4可分別作為低多酚氧化酶活性和低黃色素含量的標(biāo)記,使顏色亮白。3.1.3饅頭品質(zhì)的影響因素不同面筋強(qiáng)度的品種在制作北方饅頭時(shí),其面粉的適宜加水量差異很大,強(qiáng)、中、弱筋面粉的最適加水量分別為粉質(zhì)儀吸水率的85%、80%和75%;質(zhì)構(gòu)儀壓縮張弛性參數(shù)與饅頭評(píng)分呈顯著正相關(guān)(r=0.72~0.94),可作為饅頭品質(zhì)評(píng)價(jià)的有效指標(biāo),在此基礎(chǔ)上提出了新的簡(jiǎn)化評(píng)價(jià)指標(biāo)。饅頭對(duì)小麥品種的品質(zhì)要求與制作工藝有關(guān),機(jī)械加工要求中等蛋白質(zhì)含量、中-強(qiáng)筋且延展性好的品種,中弱筋品種適于制作手工饅頭,但面粉白度對(duì)兩種工藝制作的饅頭顏色都有正向效應(yīng)。醇溶蛋白和谷蛋白含量的比例與饅頭評(píng)分呈顯著相關(guān)(r=0.79),提高谷蛋白含量、降低醇溶蛋白含量能顯著改進(jìn)饅頭品質(zhì),而高低分子量亞基的組成則對(duì)饅頭品質(zhì)影響較小。與面包、餅干和面條相比,饅頭品質(zhì)研究還處于起步階段,亟需加強(qiáng)。3.1.4餅干品質(zhì)測(cè)定吹泡儀彈性和水溶劑保持力與餅干品質(zhì)密切相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為-0.79和-0.84,可作為餅干品質(zhì)的篩選指標(biāo)。對(duì)優(yōu)質(zhì)弱筋小麥國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)提出了具體修改意見(jiàn),即餅干小麥品種的籽粒硬度SKCS值為20~40,籽粒蛋白質(zhì)含量10.0%~11.5%,吹泡儀P值≤40.0mm、彈性/延伸性(P/L)≤0.50、能量W≤75,水、碳酸鈉和蔗糖溶劑保持力分別小于53%、66%和87%,餅干直徑大于80mm。在餅干小麥品種改良中,首先考慮籽粒硬度(軟質(zhì))、蛋白質(zhì)含量(<11%、濕基14%水分)和吸水率較低(<55%),溶劑保持力簡(jiǎn)單易測(cè)試,適于進(jìn)行早代選擇,高世代材料可用吹泡儀評(píng)價(jià),建議不再應(yīng)用粉質(zhì)儀的穩(wěn)定時(shí)間等參數(shù),最終品質(zhì)優(yōu)劣要看成品品質(zhì)。上述結(jié)果已得到姚金保等和江蘇里下河地區(qū)農(nóng)科所的證實(shí)(高德榮,2010年第六屆全國(guó)小麥遺傳育種學(xué)術(shù)研討會(huì)報(bào)告)。3.2低分子量亞基的應(yīng)用為快速有效改良面筋強(qiáng)度,我們和首都師范大學(xué)合作,共同創(chuàng)立和改進(jìn)了貯藏蛋白鑒定技術(shù)。低分子量麥谷蛋白亞基的快速準(zhǔn)確鑒定是品質(zhì)改良的難點(diǎn),為此建立了可同時(shí)鑒定高、低分子量谷蛋白亞基的SDS改良方法;創(chuàng)立高、低分子量谷蛋白亞基生物質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)快速鑒定技術(shù),可在5min內(nèi)精確確定其分子量大小,但因設(shè)備昂貴,還不能大規(guī)模在育種單位應(yīng)用;明確了低分子量谷蛋白亞基與基因的對(duì)應(yīng)關(guān)系,發(fā)掘并驗(yàn)證了Glu-A3和Glu-B3的功能標(biāo)記,為低分子量亞基用于育種提供了簡(jiǎn)單可靠的技術(shù)。盡管對(duì)Glu-D3的研究取得了較大進(jìn)展,但因基因間差異較小,標(biāo)記發(fā)掘難度大,不過(guò)其對(duì)品質(zhì)的影響相對(duì)較小。通過(guò)國(guó)際合作,在對(duì)SDS改良方法、雙向電泳(2-DE方法)、生物質(zhì)譜和PCR方法比較的基礎(chǔ)上,建立了低分子量麥谷蛋白亞基的國(guó)際命名標(biāo)準(zhǔn)品種(30個(gè))和分子標(biāo)記鑒定技術(shù),有力推動(dòng)了低分子量麥谷蛋白亞基的應(yīng)用研究。另外,中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所創(chuàng)制了一套高低分子量亞基和醇溶蛋白缺失體,將在相關(guān)基礎(chǔ)研究中發(fā)揮重要作用(王道文,個(gè)人交流)。利用電子克隆技術(shù)克隆了高低分子量麥谷蛋白亞基、多酚氧化酶活性和抗穗發(fā)芽有關(guān)的基因30個(gè),在國(guó)際上正式命名8個(gè)品質(zhì)基因位點(diǎn)的35個(gè)等位基因,發(fā)掘并驗(yàn)證了25個(gè)基因標(biāo)記(表1),并已在國(guó)內(nèi)外應(yīng)用,為實(shí)現(xiàn)品質(zhì)性狀的分子輔助選擇育種邁開(kāi)了第一步。3.3小麥加工品質(zhì)及穩(wěn)定性有待提高從2000年至今,我國(guó)共育成和推廣了兩批優(yōu)質(zhì)小麥品種。第一批包括中優(yōu)9507、濟(jì)南17、豫麥47、豫麥34、小偃54、藁城8901、高優(yōu)503和龍麥26等,均是面包型或面包面條兼用型品種,其中濟(jì)南17、豫麥34和龍麥26品質(zhì)優(yōu)良,推廣面積大,成為當(dāng)?shù)氐闹髟云贩N。第一批推廣的軟質(zhì)小麥品種有皖麥18、寧麥9號(hào)和豫麥50。第二批優(yōu)質(zhì)麥包括濟(jì)麥19、濟(jì)麥20、鄭麥366、冀師02-1和西農(nóng)979,其中濟(jì)麥19、濟(jì)麥20和西農(nóng)979年推廣面積均超過(guò)67萬(wàn)公頃。另外,鄭麥9023和煙農(nóng)19的加工品質(zhì)也較好,推廣面積連續(xù)幾年超過(guò)67萬(wàn)公頃。優(yōu)質(zhì)軟麥品種揚(yáng)麥13也大面積種植。由于近幾年小麥價(jià)格上漲較快,高產(chǎn)品種更易推廣,導(dǎo)致優(yōu)質(zhì)麥面積有所下降。總體來(lái)說(shuō),我國(guó)優(yōu)質(zhì)麥的優(yōu)質(zhì)源較單一,產(chǎn)量和綜合農(nóng)藝性狀與普通小麥還有一定差距,同時(shí)加工品質(zhì)及其穩(wěn)定性還有待進(jìn)一步提高。為了進(jìn)一步深化我國(guó)小麥品質(zhì)改良工作,建議加強(qiáng)以下5個(gè)方面的工作。第一,拓寬研究領(lǐng)域,在繼續(xù)加強(qiáng)蛋白質(zhì)、淀粉、硬度、顏色等加工品質(zhì)性狀研究的同時(shí),重視鐵、鋅等微量元素及維生素、膳食纖維、抗性淀粉研究,改善營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)和保健功能,加強(qiáng)抗穗發(fā)芽和降低黑胚率的研究,提高商品糧的競(jìng)爭(zhēng)力。第二,進(jìn)一步加強(qiáng)傳統(tǒng)食品(如饅頭、餃子等)的評(píng)價(jià)方法和選種指標(biāo)研究。第三,重視新技術(shù)的應(yīng)用,進(jìn)一步深化NIR和NIT等快速檢測(cè)技術(shù)的研究;應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法如毛細(xì)管電泳、雙向電泳、HPLC及MALDI-TOF-MS等技術(shù)鑒定和分離新的谷蛋白基因;應(yīng)用基因組學(xué)技術(shù)研究貯藏蛋白、淀粉、硬度等基因的表達(dá)及其對(duì)面包、饅頭和面條的影響與遺傳效應(yīng);應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)改良抗穗發(fā)芽能力及加工和營(yíng)養(yǎng)品質(zhì);通過(guò)分子標(biāo)記技術(shù)及轉(zhuǎn)基因與常規(guī)育種密切結(jié)合,推動(dòng)生物技術(shù)育種實(shí)用化,提高品質(zhì)遺傳改良效率。第四,加強(qiáng)品質(zhì)親本創(chuàng)新,聚合不同優(yōu)質(zhì)源,改良各類主要品質(zhì)性狀的水平及其在不同環(huán)境條件下的穩(wěn)定性,同時(shí)結(jié)合改良其綜合農(nóng)藝性狀,在短期內(nèi)盡快提高優(yōu)質(zhì)品種的產(chǎn)量潛力,增強(qiáng)國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)的競(jìng)爭(zhēng)力。第五,建立國(guó)內(nèi)小麥品質(zhì)研究協(xié)作網(wǎng),通過(guò)主要育種單位與谷物質(zhì)量檢測(cè)機(jī)構(gòu)、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)部門及大型面粉企業(yè)密切合作,推廣普及現(xiàn)有成熟實(shí)用技術(shù),研究新型品質(zhì)快速檢測(cè)技術(shù),提高制訂部門或國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)性。4價(jià)格補(bǔ)充4.1國(guó)內(nèi)小麥產(chǎn)量潛力及遺傳機(jī)理未來(lái)全球?qū)π←湹男枨笕詫⒊蚀蠓仍鲩L(zhǎng)趨勢(shì),進(jìn)一步提高單產(chǎn)是多數(shù)國(guó)家的研發(fā)重點(diǎn)。據(jù)預(yù)測(cè),從目前到2030年全球的需求量每年增長(zhǎng)1.6%,而1982—2008年的年產(chǎn)量實(shí)際增長(zhǎng)僅為1.3%。到2050年發(fā)展中國(guó)家對(duì)小麥的需求將比現(xiàn)在增長(zhǎng)60%,而氣候變化將使發(fā)展中國(guó)家小麥減產(chǎn)29%。為此,2009年11月CIMMYT成立了國(guó)際小麥產(chǎn)量潛力協(xié)作網(wǎng),其研究重點(diǎn)內(nèi)容包括改進(jìn)光合作用(主要是提高冠層的光能利用率和二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)活性),改良適應(yīng)性、產(chǎn)量和收獲指數(shù)及抗倒伏性的研究方法,通過(guò)育種重組各類主要性狀?？傮w來(lái)說(shuō),通過(guò)常規(guī)選擇和新技術(shù)來(lái)改良生理性狀是未來(lái)的研究重點(diǎn),提高產(chǎn)量潛力和縮小實(shí)際產(chǎn)量與產(chǎn)量潛力的差距同等重要,而改良各種抗性、提高品種的適應(yīng)性及改進(jìn)栽培技術(shù)也都是縮小實(shí)際產(chǎn)量與產(chǎn)量潛力差距的重點(diǎn)措施,還詳細(xì)分析了利用分子技術(shù)突破產(chǎn)量潛力的途經(jīng)。我國(guó)缺乏有關(guān)小麥需求的官方預(yù)測(cè)資料。隨著人口的增加和消費(fèi)水平的提高,預(yù)計(jì)小麥消費(fèi)量將會(huì)繼續(xù)增加,同時(shí)未來(lái)作為第二大口糧作物的地位(在北方則為第一大口糧作物)也不會(huì)改變。據(jù)測(cè)算,我國(guó)要保障2020年14.5億人口的糧食安全,小麥產(chǎn)量需在現(xiàn)有基礎(chǔ)上增加28%。另外,我國(guó)的小麥產(chǎn)量和消費(fèi)量皆居世界首位,因此國(guó)內(nèi)小麥?zhǔn)粘傻呢S欠對(duì)國(guó)際市場(chǎng)影響很大。故從國(guó)內(nèi)需求和國(guó)際責(zé)任來(lái)看,我國(guó)必須采取各種有效措施保障小麥持續(xù)增產(chǎn)。近幾年國(guó)內(nèi)糧價(jià)明顯上漲,除受國(guó)際糧價(jià)的影響外,也更清楚的表明盡管小麥連年豐收,但現(xiàn)實(shí)的糧食安全要比現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)數(shù)字嚴(yán)峻得多,國(guó)家近幾年連續(xù)提高糧食最低收購(gòu)價(jià)和出臺(tái)各種惠糧政策就是佐證。由于進(jìn)一步擴(kuò)大小麥面積的可能性很小,甚至在北部冬麥區(qū)和春麥區(qū)小麥面積可能還會(huì)繼續(xù)減少,所以首先要穩(wěn)定面積,但更重要的是進(jìn)一步提高單產(chǎn),因此高產(chǎn)更高產(chǎn)仍是我國(guó)小麥育種最基本、最重要的目標(biāo)。就全國(guó)而言,重點(diǎn)要抓冬麥,北方以黃淮冬麥區(qū)為主,北部冬麥區(qū)雖然面積不大,但冬小麥?zhǔn)俏ㄒ坏脑蕉魑?具有重要的環(huán)保價(jià)值。長(zhǎng)江中下游和四川盆地則是南方冬麥區(qū)的重點(diǎn)。如前所述,近10年來(lái)河南省和山東省小麥品種的產(chǎn)量潛力仍在繼續(xù)增長(zhǎng),兩地的穗粒數(shù)都有了顯著提高,而河南省的千粒重和穗粒重也明顯增加;兩地的株高變化都不大,但收獲指數(shù)卻顯著提高,骨干親本的育成對(duì)產(chǎn)量潛力提高起到重要作用(本實(shí)驗(yàn)室待發(fā)表)。由此看來(lái),產(chǎn)量構(gòu)成因素的改進(jìn)潛力在不同地區(qū)可能有所差異,但通過(guò)增加穗粒數(shù)和改良株型、增強(qiáng)抗倒伏性和提高收獲指數(shù)仍能繼續(xù)提高產(chǎn)量潛力,說(shuō)明常規(guī)育種還有不少潛力可挖,必須大力加強(qiáng)這一工作,品種選育才能有所前進(jìn)。從長(zhǎng)遠(yuǎn)來(lái)看,轉(zhuǎn)基因和雜交小麥也是提高產(chǎn)量的可能選擇。國(guó)內(nèi)有關(guān)小麥產(chǎn)量潛力的生理基礎(chǔ)和分子遺傳機(jī)理研究十分薄弱,遠(yuǎn)不能滿足高產(chǎn)育種的要求。建議加強(qiáng)與國(guó)際小麥產(chǎn)量潛力協(xié)作網(wǎng)的合作與交流并在黃淮冬麥區(qū)的代表性地點(diǎn)如煙臺(tái)、石家莊、濟(jì)南、新鄉(xiāng)和周口,組織工作基礎(chǔ)較好的育種單位成立協(xié)作網(wǎng),開(kāi)展以下研究:(1)在上述5個(gè)地區(qū)各遴選1個(gè)綜合性狀好、群體光能利用率高、產(chǎn)量潛力大的現(xiàn)有推廣品種作為原始高產(chǎn)品種進(jìn)行改良,并將這5個(gè)原始高產(chǎn)品種在5個(gè)地點(diǎn)進(jìn)行聯(lián)合試驗(yàn),考察其產(chǎn)量表現(xiàn)、抗倒性、抗病性、品質(zhì)和適應(yīng)性等為各點(diǎn)制定改良方案提供參考;(2)對(duì)大量國(guó)內(nèi)改良品種和少數(shù)適應(yīng)性好的國(guó)外引進(jìn)高產(chǎn)品種進(jìn)行研究,篩選高光效基因型;(3)通過(guò)與多小穗的近緣種質(zhì)或其后代雜交回交,選育穗子略長(zhǎng)、小穗略多(如增加1~3個(gè))、穗粒數(shù)和粒重協(xié)調(diào)發(fā)展的類型,即兼顧穗數(shù)的大穗大粒高產(chǎn)類型;(4)研究抗倒伏機(jī)制和種質(zhì)篩選方法,培育強(qiáng)稈抗倒伏種質(zhì);(5)開(kāi)展提高小穗數(shù)或增加穗粒數(shù)等產(chǎn)量性狀的基因定位、基因克隆與功能標(biāo)記發(fā)掘,探討7DL·7Ag等易位系及人工合成小麥在冬小麥產(chǎn)量改良中的作用,為培育高產(chǎn)品種提供理論方法和材料;(6)將上述各類優(yōu)異材料與當(dāng)?shù)馗弋a(chǎn)品種進(jìn)行雜交回交,培育名實(shí)相符的超高產(chǎn)小麥。4.2抗條銹病育種和選育多抗品種銹病和赤霉仍是多數(shù)國(guó)家的重點(diǎn)病害,但有3個(gè)方面值得關(guān)注。一是1999年在烏干達(dá)發(fā)現(xiàn)了一種致病性極強(qiáng)的稈銹菌新小種TTKS,俗稱為Ug99。它不僅使來(lái)自1B/1R易位系的Sr31基因喪失抗性還使來(lái)自普通小麥的大多數(shù)抗稈銹基因及來(lái)自外源的Sr38喪失抗性,因而可以侵染世界各地的主要小麥品種,有可能對(duì)全球小麥生產(chǎn)帶來(lái)毀滅性影響國(guó)際上投入大量資金重新重視抗稈銹育種工作。二是就全球而言,條銹病的流行規(guī)律發(fā)生了較大變化美國(guó)、澳洲、歐洲和中東出現(xiàn)的新小種或新類型毒性更強(qiáng),據(jù)布勞格銹病研究協(xié)作網(wǎng)2010年4月報(bào)道Yr27已在中西亞和北非喪失抗性。三是慢銹性利用和基因克隆取得重大進(jìn)展,CIMMYT已建立了一套行之有效的慢病性育種方法并已育成一大批品種在生產(chǎn)中應(yīng)用,澳大利亞和美國(guó)的抗條銹育種也已轉(zhuǎn)向慢病性基因利用;更為可喜的是,已明確Yr18、Lr34和Pm38是同一基因,Yr29、Lr46和Pm39是同一基因,Yr46和Lr67也是同一基因,三者皆能抗多種病害,這為慢病性的利用和培育多抗品種提供了優(yōu)良的易用基因。已克隆的成株抗性基因有Lr34/Yr18/Pm38和Yr36,Sr2和Lr46/Yr29/Pm39的克隆已取得實(shí)質(zhì)性進(jìn)展,為利用分子標(biāo)記聚合慢病性基因提供了可用的標(biāo)記。國(guó)內(nèi)近幾年出現(xiàn)了條銹病和白粉病的新小種,不少品種可能開(kāi)始喪失抗性。持久抗性是多數(shù)育種家的追求目標(biāo),可通過(guò)主效抗性基因的累加或慢病性(成株抗性)基因的利用來(lái)實(shí)現(xiàn)。通過(guò)分子輔助選擇可有目的地進(jìn)行基因累加,但其前提是明確親本中抗病基因的分布及其等位關(guān)系,抗病基因精細(xì)定位是基礎(chǔ)。沒(méi)有與目的基因緊密連鎖的分子標(biāo)記,很難進(jìn)行基因累加,因此必須加強(qiáng)抗病基因精細(xì)定位這一基礎(chǔ)性工作,如能與基因推導(dǎo)相結(jié)合,則可大幅度提高工作效率。我們更主張利用慢病性基因來(lái)實(shí)現(xiàn)持久抗性,對(duì)條銹病和白粉病的抗性育種尤其如此。近幾年對(duì)國(guó)內(nèi)幾個(gè)條銹病和白粉病的慢病性品種的QTL定位和育種利用表明,3~5個(gè)QTL有效結(jié)合即可育成慢病性品種,這與國(guó)外的結(jié)論是一致的。建議在國(guó)內(nèi)外的品種中繼續(xù)發(fā)掘新的慢病性基因,同時(shí)用已有標(biāo)記聚合現(xiàn)有慢病性基因,培育多抗品種。其實(shí)有了慢病性親本,只要稍微調(diào)整一下選擇標(biāo)準(zhǔn),不再追求高抗免疫,用常規(guī)手段也能培育具慢病性的多抗品種。我們正在整理國(guó)內(nèi)外在慢病性方面的文獻(xiàn),擬撰寫(xiě)相關(guān)綜述,另文報(bào)道。我們已將國(guó)內(nèi)500多份主栽品種和品系送到肯尼亞進(jìn)行抗稈銹病鑒定,篩選出濟(jì)麥20等15份中抗到高抗的品種。鑒于Ug99的巨大潛在危害,在采取嚴(yán)格檢疫措施的同時(shí),建議與布勞格國(guó)際銹病協(xié)作網(wǎng)密切合作,做好技術(shù)儲(chǔ)備,為防止Ug99在我國(guó)擴(kuò)散提供科技支撐。經(jīng)與農(nóng)業(yè)部和植保部門協(xié)商,初步考慮以下內(nèi)容:積極參加國(guó)際銹病協(xié)作網(wǎng)的相關(guān)活動(dòng),了解國(guó)際最新進(jìn)展;建立國(guó)內(nèi)稈銹病疫情檢測(cè)圃,加強(qiáng)小種動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè),并與國(guó)際銹病協(xié)作網(wǎng)及時(shí)交換信息;將我國(guó)主要品種、苗頭品系及主要抗源送到肯尼亞進(jìn)行鑒定,明確現(xiàn)有品種的抗性水平;引入國(guó)外已篩選出的500多份抗源,在國(guó)內(nèi)對(duì)其抗病性和農(nóng)藝性狀進(jìn)行全面評(píng)價(jià);分子標(biāo)記與常規(guī)育種相結(jié)合,聚合抗病基因,培育持久抗性品種。4.3選用高效品種CIMMYT出版了《2009年小麥現(xiàn)狀與未來(lái)》?？?其中“氣候變化對(duì)小麥未來(lái)的影響”一文對(duì)國(guó)內(nèi)有重要參考價(jià)值。氣候變化對(duì)小麥生產(chǎn)的影響是多方面的,主要表現(xiàn)為溫度升高、大氣中CO2濃度增加及降雨量分布的變化,適度的增溫(1~3℃)對(duì)中高緯度地區(qū)的小麥有一定的增產(chǎn)作用,但進(jìn)一步提高溫度則會(huì)導(dǎo)致減產(chǎn);對(duì)熱帶和亞熱帶地區(qū),1~2℃的微弱增加也會(huì)造成減產(chǎn),但對(duì)高緯度的春小麥產(chǎn)區(qū)如我國(guó)的黑龍江、加拿大和美國(guó)的部分地區(qū)則會(huì)有利,表現(xiàn)為播種期提前,避開(kāi)后期晚霜霜凍,甚至可能改種冬小麥。大多數(shù)半冬性小麥產(chǎn)區(qū)的冬性會(huì)有所減弱。增加大氣CO2濃度對(duì)增產(chǎn)有利,主要原因是提高了光合作用。從育種的角度來(lái)看,氣候變化對(duì)品種的適應(yīng)性和病蟲(chóng)害的抗性提出了更高的要求,因此培育耐高溫和水分高效品種,尤其是后期耐高溫、灌漿快的品種至關(guān)重要,人工合成小麥和地方品種可能會(huì)對(duì)解決這些問(wèn)題發(fā)揮重要作用。CIMMYT在人工合成小麥的研究與應(yīng)用方面已取得顯著進(jìn)展,國(guó)內(nèi)的工作也表明,人工合成小麥對(duì)提高產(chǎn)量和改善抗逆性確能發(fā)揮重要作用(孫連發(fā),2010年第六屆全國(guó)小麥遺傳育種學(xué)術(shù)研討會(huì)報(bào)告)。為了減小氣候變化對(duì)小麥生產(chǎn)的影響,CIMMYT、美國(guó)和澳大利亞等在20世紀(jì)90年代就開(kāi)展了抗熱性研究,而國(guó)內(nèi)的相關(guān)研究則較少。中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)在抗熱性的基礎(chǔ)研究方面取得一定進(jìn)展,但尚不能用于育種工作。最近,我們與有關(guān)單位合作,正在聯(lián)合開(kāi)展灌漿期抗熱性篩選工作。石家莊農(nóng)業(yè)科學(xué)院和河北省農(nóng)林科學(xué)院旱作農(nóng)業(yè)研究所在節(jié)水品種選育方面取得較好進(jìn)展,但對(duì)與育種相關(guān)的問(wèn)題研究還很缺乏。為了應(yīng)對(duì)氣候變化,初步認(rèn)為,應(yīng)注意選育在不同播期、冬春偶發(fā)的階段性高溫或倒春寒等條件下皆表現(xiàn)穩(wěn)定的廣適性品種,除了選擇廣適性親本進(jìn)行雜交外,還要加強(qiáng)高代品系的多點(diǎn)鑒定,輔之以抗熱或抗旱/寒篩選,國(guó)內(nèi)這方面的研究十分薄弱,亟待加強(qiáng)。應(yīng)對(duì)氣候變化的另一措施是在春麥區(qū)改種冬麥,不僅能大幅度提高產(chǎn)量,而且熟期顯著提前,有利于安排農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。近幾年在寧夏和甘肅都已取得較大進(jìn)展,就是明顯的實(shí)例。這一工作起始于“九五”