慢性乙型肝炎的檢測(cè)與診斷銅川市人民醫(yī)院張碧瑩2023/10/1401病毒性疾病病程的診斷與評(píng)價(jià)02慢性乙型肝炎概覽03慢性乙肝的檢測(cè)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)慢性乙型肝炎的臨床診斷總結(jié)0405病毒性疾病病程的診斷與評(píng)病毒性疾病病程的診斷與評(píng)價(jià)

病毒性疾病病程的診斷與評(píng)價(jià)

0101病毒性疾病病程的診斷與評(píng)價(jià)

感染與免疫狀態(tài)的評(píng)價(jià)，這是實(shí)驗(yàn)室的任務(wù)。在對(duì)感染性疾病復(fù)雜的診斷性試驗(yàn)之前，應(yīng)先評(píng)價(jià)感染的常用參數(shù)。發(fā)熱、血沉增高和淋巴細(xì)胞相對(duì)增多，是病毒感染的典型表現(xiàn)。病毒感染所引發(fā)的直接或間接的結(jié)果是疾病的診斷與預(yù)后，臨床醫(yī)生的任務(wù)。通常利用實(shí)驗(yàn)室參數(shù)分析器官功能。病毒性疾病病程的診斷與評(píng)價(jià)病毒性實(shí)驗(yàn)室診斷的主要技術(shù)

檢測(cè)病毒性傳染病光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡病毒的細(xì)菌培養(yǎng)（雞胚、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物）用特定的抗體作病毒結(jié)構(gòu)成分的檢測(cè)分子生物學(xué)診斷

用特定抗原檢測(cè)病毒誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答體液免疫反應(yīng)的測(cè)定細(xì)胞免疫反應(yīng)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抗體產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)病毒性疾病病程的診斷與評(píng)病毒性疾病病程的診斷與評(píng)價(jià)

慢性乙型肝炎概覽

慢性乙型肝炎病原學(xué)02乙型肝炎病毒（Dane顆粒）結(jié)構(gòu)模式L蛋白M蛋白S蛋白C蛋白02病原學(xué)

乙肝病毒（HBV）蛋白質(zhì)的基因組成HBV四個(gè)開放讀碼框包括S區(qū)、C區(qū)、P區(qū)、X區(qū)均可能發(fā)生突變，導(dǎo)致乙肝病毒生物學(xué)改變，進(jìn)而干擾臨床的檢測(cè)與治療。S基因編碼表面蛋白，經(jīng)蛋白水解裂酶裂解為小蛋白的HBsAg，是病毒外殼主要的表面蛋白質(zhì)C基因編碼病毒的核心蛋白，表現(xiàn)為一個(gè)更長(zhǎng)的蛋白（及HBeAg），由于折疊的方式不同，具有不同的免疫原性，是HBcAg.產(chǎn)物的非直接標(biāo)志物。P基因編碼在病毒顆粒中出現(xiàn)的DNA聚合酶X基因可能在HBV相關(guān)的原發(fā)性肝細(xì)胞癌中扮演重要角色。03病原學(xué)當(dāng)HBV侵入肝細(xì)胞后，形成共價(jià)閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)；cccDNA半衰期較長(zhǎng)，難以從體內(nèi)徹底清除，對(duì)慢性感染起重要作用。HBV至少有9個(gè)基因型（A~I），我國(guó)以B型和C型為主。HBV基因型與疾病進(jìn)展和干擾素治療應(yīng)答有關(guān)，與C基因型感染者相比，B基因型感染者較少進(jìn)展為慢性肝炎、肝硬化和HCC。其中HBsAg膜外區(qū)的“a”決定簇

是突變的熱區(qū)。目前HBsAg檢測(cè)試劑盒主要檢測(cè)“a”決定簇的AA141-145表位，其突變后，檢測(cè)試劑無法識(shí)別HBsAg，臨床上會(huì)出現(xiàn)HBsAg檢測(cè)結(jié)果為陰性（隱匿型乙型肝炎）病原學(xué)2、免疫組化法顯示：（1）、早在發(fā)病前幾周在肝細(xì)胞漿內(nèi)和細(xì)胞核內(nèi)可分別檢測(cè)出HBsAg和HBcAg.。（2）在潛伏期：HBV-DNA、HBsAg、HBeAg和抗HBc-IgM會(huì)在血清中相繼出現(xiàn)陽性。（3）、在發(fā)病期（40-60天），HBsAg濃度達(dá)峰值.（4）、大約5%病例在發(fā)病期HBsAg為陰性，在此情況下，急性病例只能靠檢測(cè)高濃度的HBc-IgM滴度來確診（5）、5%-10%的成年人和90%的新生兒在感染后沒有能力清除病毒，成為慢性肝炎的攜帶者。02慢性乙型肝炎概覽

全球約有2400萬人攜帶HBV慢性乙肝（CHB）是全球第十大死因2014年全國(guó)1—29歲人群乙型肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，1-4歲、5-14歲、15-29歲人群流行率分別為0.32%、0.94%、4.38%（中國(guó)CDC）中國(guó)乙型肝炎呈慢性化的主要原因是感染多始于幼齡，已母嬰垂直傳播為主。病毒性疾病病程的診斷與評(píng)病毒性疾病病程的診斷與評(píng)價(jià)

慢性乙型肝炎概覽

慢性乙肝的檢測(cè)0303慢性乙肝的檢測(cè)1、主要為實(shí)驗(yàn)室檢查，以及影像學(xué)檢查、病理檢查實(shí)驗(yàn)室檢查（主要是血清學(xué)指標(biāo)）乙肝病毒感染的不同血清學(xué)指標(biāo)的診斷意義

是否感染過？（診斷既往）病毒存在與否（診斷療效）病毒存在狀態(tài)（復(fù)制水平）有無傳染性（與HBV-DNA結(jié)合）有無免疫力（是否產(chǎn)生抗—HBs）HBsAg抗—HBsHBeAg抗—HBc抗—HBc

XMutationofS&Pre-SS基因“a”決定簇

G145R

變異，與抗-HBs的親和力降低S基因變異可導(dǎo)致隱匿性HBV感染(occultHBVinfection)，表現(xiàn)為血清HBsAg陰性，但仍可有HBV低水平復(fù)制(血清HBVDNA常<104拷貝/ml)獻(xiàn)血員人群，隱匿性HBV感染的檢出率可達(dá)0.19%14慢性乙型肝炎的檢測(cè)HBV-DNA基因型和變異檢測(cè)1、HBV-DNA定量檢測(cè)，主要用于判斷慢性HBV感染的病毒復(fù)制水平，可用于抗病毒治療適應(yīng)證的選擇和療效的判斷。2、HBV基因分型和耐藥突變株的檢測(cè)?；蛐吞禺愋砸锞酆厦告湻磻?yīng)（PCR）：敏感的檢測(cè)HBV-DNA基因序列測(cè)定法：用于檢測(cè)HBV的變異、檢測(cè)或排除感染的來源、測(cè)定HBV的基因型和血清型線性探針反向雜交法：檢測(cè)血清非典型性HBV感染的方法

生物化學(xué)方法、ALT、AST、ALP、TBA、GGT、血清白蛋白和球蛋白等1.2HBsAg檢測(cè)中存在的問題最大的問題是“假陰性”其原因由于商品化的試驗(yàn)系統(tǒng)都是應(yīng)用針對(duì)HBsAg“a決定簇”的單克隆抗體，在這個(gè)區(qū)域出現(xiàn)點(diǎn)突變就會(huì)出現(xiàn)臨界數(shù)值或陰性結(jié)果。HBsAg的含量低于檢測(cè)下限。如感染的“窗口”期，急性期后或恢復(fù)期，自限性感染末期的攜帶者等。。HCV、HDV的重疊感染可能對(duì)HBV感染或HBsAg的表達(dá)有抑制作用。測(cè)定方法所用抗體對(duì)HBV不同基因型檢測(cè)的敏感性不同鉤狀效應(yīng)標(biāo)本存放時(shí)間長(zhǎng)，反復(fù)凍融。假陽性的問題B、假陽性的問題1、內(nèi)源性干擾因素：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、治療性抗體，溶菌酶、合并其他病毒感染，自身免疫性疾病、血透。2、外源性干擾因素：溶血，細(xì)菌污染，凝固不全，操作不當(dāng)（臨近孔污染、加錯(cuò)樣）等。發(fā)病后的HBsAg發(fā)病后的HBsAg發(fā)病后的HBsAg通常不是一直陽性，并且在1-4月內(nèi)可被靈敏的方法檢測(cè)出來。大約5%的急性乙肝和一小部分慢性乙肝感染中，HBsAg可檢測(cè)不出，是屬HBsAg陰性乙肝?？捎每笻Bc-IgM和HBV-DNA。HBsAg的持續(xù)時(shí)間，HBsAg持續(xù)六個(gè)月以上，（如見于90%的新生兒和10%的成人感染），病毒不能近期被清除，即為急性乙肝或慢性HBsAg攜帶狀況。檢測(cè)中的少見模式

檢測(cè)中的少見模式一、HBsAg與抗-HBs同時(shí)陽性接種乙肝疫苗后，雖有正常的抗-HBs應(yīng)答，但仍能感染“a決定簇”變異的免疫逃逸毒株，與-HBs并存前后感染不同亞型的HBV，一種產(chǎn)生抗體，另一種沒有。由于S基因變異，其編碼的HBsAg抗原性改變，原型抗--HBs不能清除HBsAg抗-HBs滴度低，不能清除HBsAg，形成免疫復(fù)合物。少數(shù)關(guān)節(jié)炎和乙肝腎的慢性乙肝患者可出現(xiàn)。血清轉(zhuǎn)換的時(shí)刻（自然或藥物治療）例如，干擾素治療即能抑制病毒復(fù)制，又能調(diào)節(jié)宿主免疫，在治療中發(fā)生HBsAg向抗-HBs的轉(zhuǎn)換檢測(cè)中的少見模式二、HBeAg與抗--HBe同時(shí)陽性治療過程中會(huì)發(fā)生HBeAg向抗—HBe的血清轉(zhuǎn)換機(jī)體同時(shí)或先后感染了HBV的不同亞型所致三、抗-HBc陽性，其