藥理學(xué)實驗講義藥理學(xué)實驗指導(dǎo)實驗一藥理學(xué)實驗基礎(chǔ)知識與常用動物捉拿、給藥【目的】1、學(xué)習(xí)藥理學(xué)實驗基礎(chǔ)知識；2、掌握藥理學(xué)實驗常用動物捉拿、給藥方法?！酒鞑摹?ml、5ml.20ml注射器，大、小鼠灌胃針頭，250ml燒杯、鼠籠（或鐵絲籠），電子稱?！舅幤贰?.9%生理鹽水。【動物】小白鼠1只、大鼠1只、家兔1只?！緝?nèi)容】一、實驗動物的捉拿方法1、 蛙和蟾蜍左手握持蛙或蟾蜍，食指和中指夾住左前肢，拇指壓住右前肢；右手將雙下肢拉直，左手無名指及小指將其壓住而固定。此法用于淋巴囊注射。毀腦和毀脊髓則用左手食指和中指夾持蛙或蟾蜍的頭部，拇指和無名指小指握持雙下肢，右手持刺針進行操作。2、 小白鼠可采取雙手法和單手法兩種形式。雙手法：右手提起鼠尾，放在鼠籠蓋或其他粗糙面上，向后方輕拉，小白鼠則將前肢固定于粗糙面上。此時迅速用左手拇指和食指捏住小白鼠頸背部皮膚，并以小指與手掌尺側(cè)夾持其尾根部，固定于手中。單手法：小白鼠置于籠蓋上，先用左手食指與拇指抓住鼠尾，手掌尺側(cè)及小指夾住尾根部，然后用左手拇指與食指捏住頸部皮膚。3、 大白鼠大白鼠容易激怒咬人，捉持時左手應(yīng)戴防護手套或用厚布蓋住大鼠，先用右手抓住鼠尾，再用左手拇指和食指握住頭部，其余手指與手掌握住背部和腹部。不要用力過大，切勿捏其頸部，以免窒息致死。4、 家兔用左手抓住頸背部皮膚（抓的面積越大，其吃重點越分散）。將兔提起，以左手托住其臀部，使兔呈坐位。二、實驗動物的給藥途徑與方法1、小白鼠給藥途徑與方法灌胃(ig):左手固定小鼠，右手持灌胃器，灌胃針頭自口角進入口腔，緊貼上腭插入食道。如遇阻力，將灌胃針頭抽回重插，以防損傷。常用灌胃量為0.1?0.2ml/10g。皮下注射(ih):可用腹部、背部、腹股溝的皮下，此處皮膚比較松弛，也可由助手協(xié)助。注藥量一般為0.1?0.2ml/10g。肌肉注射(im):一人抓住小鼠頭部皮膚和尾巴，另一人持連4號針頭的注射器，將針頭刺入后腿外側(cè)肌肉。注射量一般不超過0.1?0.2ml/只。靜脈注射(iv)：將小鼠置入固定器，酒精涂擦尾部使血管擴張。自尾部末端刺入，刺入血管后抽針芯可見回血。常用注射量為0.1?0.2ml/10g。腹腔注射(ip):將小鼠固定后，從下腹部外側(cè)進針，深度較皮下注射深(圖3-8)。常用注射量為0.1?0.2ml/10g。2、 大鼠給藥途徑與方法灌胃、腹腔注射、皮下注射及尾靜脈注射與小鼠相似。靜脈注射也可在麻醉下行舌下靜脈注射。3、 家兔給藥途徑與方法灌胃：一人將兔身固定于腋下，一手固定兔頭，另一手將開口器放入兔口。另一人將胃管從開口器孔插入口內(nèi)，再慢慢插入食道和胃。為慎重起見，可將胃管外端放入水中，如無氣泡，則可證實胃管在胃內(nèi)。灌胃量一般為10ml/kg。如用兔固定盒，可由一人操作。靜脈注射:一人固定兔身和兔頭，另一人在使兔耳邊緣血管(耳緣靜脈)擴張后，將針頭從靜脈末端刺入血管，左手拇指和食指固定針頭和兔耳，右手注藥。注藥量一般為2ml/kg，等滲液可達10ml/kg。皮下、肌肉、腹腔注射與鼠類相似。常用注藥量分別為0.5、1.0、5.0ml/kg。三、實驗動物的處死方法頸椎脫位法：小白鼠和大白鼠：術(shù)者左手持鑷子或用拇指、食指固定鼠頭后部，右手捏住鼠尾，用力向后上方牽拉，聽到鼠頸部喀嚓聲即頸椎脫位，脊髓斷裂，鼠瞬間死亡。豚鼠：術(shù)者左手倒持豚鼠，用右手掌尺側(cè)或木棒猛擊頸部，使頸椎脫位迅速死亡。斷頭、毀腦法：常用于蛙類。可用剪刀剪去頭部或用金屬探針經(jīng)枕骨大孔破壞大腦和脊髓而致死。大鼠和小鼠也可用斷頭法處死，術(shù)者需戴手套，兩手分別抓住鼠頭與鼠身，拉緊并顯露頸部，由助手持剪刀，從頸部剪斷頭部?？諝馑ㄈǎ盒g(shù)者用50?100ml注射器，向靜脈血管內(nèi)迅速注入空氣，氣體栓塞心腔和大血管而使動物死亡。使貓與家兔致死的空氣量為10?20ml，犬為70?150ml。大量放血法：鼠可用摘除眼球，從眼眶動靜脈大量放血而致死。如不立即死亡，可摘除另一眼球。貓可在麻醉狀態(tài)下切開頸三角區(qū)，分離出動脈，鉗夾上下兩端，插入動脈插管，再松開下方鉗子，輕壓胸部可放大量血液，動物可立即死亡。對于麻醉犬，可橫向切開股三角區(qū)，切斷股動靜脈，血液噴出；同時用自來水沖洗出血部位(防止血液凝固)，3?5min動物死亡。采集病理切片標(biāo)本宜用此法。實驗二不同給藥途徑對藥物作用的影響【目的與原理】不同給藥途徑可影響藥物的作用。依據(jù)藥效出現(xiàn)時間從快到慢，其順序一般為：靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、口服。就作用性質(zhì)而言，同一藥物隨著給藥途徑改變將會產(chǎn)生不同的藥效。如硫酸鎂口服具有導(dǎo)泄和利膽作用，注射具有抗驚厥和降壓作用，外用則具有消炎和鎮(zhèn)痛作用。本實驗主要觀察不同給藥途徑對藥物效應(yīng)的影響?！酒鞑摹?ml注射器2支，灌胃針頭1個，小鼠籠，電子秤。【藥品】10%硫酸鎂(magnesiumsulfate)【動物】小白鼠2只?！痉椒ā?.取體重接近、性別相同的小白鼠2只，稱重并標(biāo)記。觀察動物正?；顒忧闆r。2.1號鼠灌胃10%硫酸鎂溶液0.15ml/10g，2號鼠腹腔注射10%硫酸鎂溶液0.15ml/10g。3.觀察并比較兩鼠在呼吸、肌張力、大便有何不同?！窘Y(jié)果】將實驗結(jié)果填入下表：表2-1硫酸鎂不同給藥途徑對藥物作用的影響鼠號 給藥途徑 給藥體積（ml/只） 呼吸肌張力大便 死亡情況1號2號實驗三不同給藥劑量對藥物作用的影響【目的與原理】藥理效應(yīng)與劑量在一定范圍內(nèi)成正比，稱為劑量-效應(yīng)關(guān)系，藥物效應(yīng)的強弱呈連續(xù)增減的變化，可用具體數(shù)量或最大反應(yīng)的百分率表示的稱為量反應(yīng)，如果藥理效應(yīng)不隨藥物劑量或濃度呈連續(xù)性量的變化，則變現(xiàn)為反應(yīng)性質(zhì)的變化，稱為質(zhì)反應(yīng)，一般藥物劑量過小，藥物作用不明顯，劑量過大，則可能出現(xiàn)不良反應(yīng)，甚至毒性反應(yīng)。本實驗主要觀察不同給劑量對藥物作用效果的影響。【器材】1ml注射器3支，小鼠籠，電子秤?！舅幤贰?.2%、0.4%和0.8%戊巴比妥鈉（sodiumpentobarbital）溶液【動物】小白鼠3只?！痉椒ā?.取體重接近、性別相同的小白鼠3只，稱重并標(biāo)記3、4、5。觀察正?；顒印?2.3號、4號和5號小鼠分別腹腔注射0.2%、0.4%和0.8%戊巴比妥鈉溶液0.1ml/10g.觀3.察翻正反射消失、恢復(fù)的時間，并比較三鼠有何不同現(xiàn)象發(fā)生?！窘Y(jié)果】將所觀察的實驗結(jié)果填入下表：表3-1不同劑量戊巴比妥鈉對藥物作用的影響鼠號濃度給藥途徑給藥體積（ml/只）現(xiàn)象 顯效時間恢復(fù)時間3號4號5號實驗四不同給藥劑型對藥物作用的影響【目的】觀察不同給劑型對藥物作用效果的影響。【器材】1ml注射器2支，小鼠籠，電子秤。【藥品】8%烏拉坦（urethane）水溶液，8%烏拉坦膠漿液（含2.5%羧甲基纖維素）【動物】小白鼠2只?！痉椒ā?.取體重接近、性別相同的小白鼠2只，稱重并標(biāo)記6、7。觀察正常活動。2.6號鼠皮下注射8%烏拉坦水溶液0.15ml/10g，7號鼠皮下注射8%烏拉坦膠漿液0.15ml/10g，觀察小鼠對所注射藥