滅菌與無(wú)菌操作第1頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第九章滅菌法滅菌法：（Sterilization）指殺死或除去所有微生物的方法。微生物包括：細(xì)菌、真菌、病毒等。細(xì)菌的芽胞具有較強(qiáng)的抗熱能力，因此滅菌效果，常以殺滅芽胞為準(zhǔn)。消毒（Disinfection）：是指用物理和化學(xué)方法將病原微生物殺死。防腐（Antisepsis）：是指低溫或化學(xué)藥品防止和抑制微生物生長(zhǎng)繁殖。第2頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、物理滅菌法（一）干熱滅菌法1、火焰滅菌法——火焰上加熱20秒以上。灼燒是最迅速、可靠、簡(jiǎn)便的滅菌方法，適用耐火焰材質(zhì)的物品、金屬制品（藥刀）、玻璃器皿（玻璃棒）以及瓷器等用具的滅菌。第3頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、干熱空氣滅菌——在高溫干熱空氣中滅菌的方法。此法適用于耐高溫的玻璃制品、金屬制品以及不允許濕氣穿透的油脂類(lèi)和耐高溫的粉末化學(xué)藥品等。粉針劑用無(wú)菌瓶的干燥就采用干熱滅菌法。缺點(diǎn)：穿透力弱，溫度不易均勻，而且滅菌溫度較高，滅菌時(shí)間較長(zhǎng)，不適于橡膠、塑料及大部分藥品。第4頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）濕熱滅菌法——是在飽和蒸氣或沸水或流通蒸氣中進(jìn)行滅菌的方法。由于蒸氣潛熱大，穿透力強(qiáng)，容易使蛋白質(zhì)變性或凝固，所以滅菌效率比干熱滅菌法高。特點(diǎn)：溫度低，時(shí)間短，可靠，最常用。蒸氣性質(zhì)：飽和蒸氣>濕飽和蒸氣、過(guò)熱蒸氣、不飽和蒸氣第5頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第6頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（2）使用熱壓滅菌器注意事項(xiàng)①必須采用飽和蒸氣，在滅菌前加入足量的水，以防產(chǎn)生過(guò)熱蒸氣；②必須將滅菌器內(nèi)的空氣排盡；③滅菌時(shí)間必須從全部?jī)?nèi)容物均已達(dá)到規(guī)定溫度時(shí)開(kāi)始計(jì)算；第7頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月④避免壓力驟然下降或遇冷，防止容器炸裂；如：放氣時(shí)不能過(guò)快；放完氣后先將鍋門(mén)打開(kāi)10cm，使冷空氣逐漸進(jìn)入冷卻，再逐漸開(kāi)大；滅菌后噴淋冷卻水快速降溫也會(huì)有危險(xiǎn)；⑤壓力表和溫度表應(yīng)靈敏、準(zhǔn)確，兩表數(shù)值應(yīng)相互對(duì)應(yīng)；不同海拔高度，不應(yīng)使用同一表壓；⑥及時(shí)清掃異物，防止疏水器和排水管堵塞。第8頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、流通蒸氣滅菌常壓100℃流通蒸氣，加熱30-60min。缺點(diǎn)：不能保證殺滅所有的芽胞。適用情況：消毒及不耐高熱的制劑的滅菌。4、煮沸滅菌法：100℃沸水，加熱30-60min。本法滅菌效果差，常用于注射器、注射針等器皿的消毒。必要時(shí)加入適當(dāng)?shù)囊志鷦?，可殺死芽胞?xì)菌。第9頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、低溫間歇滅菌法80℃加熱1小時(shí)→20-25℃保持24小時(shí)（讓芽胞變?yōu)樵鲋丑w）→再加熱，放置，反復(fù)三次，直至消滅芽胞為止。本法適用于不耐高溫的制劑的滅菌。第10頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）紫外線(xiàn)滅菌法——254nm滅菌力最強(qiáng)（200-300nm）適用于：室內(nèi)空氣或表面滅菌。注：紫外線(xiàn)對(duì)人體照射過(guò)久，能產(chǎn)生結(jié)合膜炎、紅斑及皮膚灼傷等。所以應(yīng)對(duì)工作者的皮膚及眼睛作適當(dāng)防護(hù)。第11頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（四）濾過(guò)除菌法：用濾過(guò)的方法除去活的或死的微生物的方法，是一種機(jī)械除菌的方法。除菌濾過(guò)器：微孔濾膜0.22-0.45μm（0.22，0.3）適用于：不耐熱藥液（如：生物制品，抗生素等）、氣體、水等的滅菌。第12頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（五）輻射滅菌γ射線(xiàn)（60Co）——不升溫，穿透性強(qiáng)，特別適于已經(jīng)包裝好的產(chǎn)品。缺點(diǎn)：設(shè)備費(fèi)用高，對(duì)某些藥品可能產(chǎn)生藥效降低、產(chǎn)生毒性物質(zhì)或發(fā)熱物質(zhì)，同時(shí)還要注意安全防護(hù)。中藥材以及中成藥中的應(yīng)用。（六）微波滅菌，高速熱風(fēng)滅菌第13頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、化學(xué)滅菌法（一）氣體滅菌法1、環(huán)氧乙烷機(jī)理：為烷化劑，與菌體蛋白質(zhì)中的-COOH，-NH2，-SH，-OH基結(jié)合，使之產(chǎn)生不可逆性破壞。適用于：一次性注射器、輸液器、注射針頭、敷料，對(duì)熱敏感固體藥物等。2、臭氧：空間清毒，原水消毒。3、甲醛、丙二醇、乳酸熏蒸——室內(nèi)空間的滅菌。第14頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）化學(xué)殺菌劑——物體表面滅菌。1、0.1%-0.2%新潔爾滅2、2%苯酚或甲酚皂溶液3、75%乙醇4、2%堿性戊二醛第15頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、無(wú)菌操作法：整個(gè)制備過(guò)程控制在無(wú)菌條件下進(jìn)行的一種操作方法。第16頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月無(wú)菌檢查：參照《中國(guó)藥典》，對(duì)所有注射劑均要做此項(xiàng)目方法：1、直接接種法：取一定量供試品，以無(wú)菌操作將該供試品分別接種于需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基培養(yǎng)數(shù)日，在培養(yǎng)期間應(yīng)逐日觀察并記錄是否有菌生長(zhǎng)。2、薄膜濾過(guò)接種法：將藥液用0.45μm的微孔濾膜過(guò)濾器過(guò)濾，然后加入需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基培養(yǎng)數(shù)日，在培養(yǎng)期間應(yīng)逐日觀察并記錄是否有菌生長(zhǎng)。第17頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第18頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第19頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第20頁(yè)，課件共25頁(yè)，創(chuàng)作于2023