如何正確采集醫(yī)院衛(wèi)生學(xué)檢測(cè)標(biāo)本及細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本

前言醫(yī)院消毒是預(yù)防醫(yī)院內(nèi)感染的重要措施之一。消毒效果監(jiān)測(cè)是評(píng)價(jià)消毒設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常、消毒藥劑是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否達(dá)標(biāo)的唯一手段，因而消毒效果監(jiān)測(cè)在醫(yī)院消毒、滅菌工作中是必不可少的一環(huán)。醫(yī)院消毒效果檢測(cè)時(shí)需遵循以下原則：監(jiān)測(cè)人員須經(jīng)過(guò)專業(yè)培訓(xùn)，掌握一定的消毒知識(shí)，熟悉消毒設(shè)備和藥劑性能；選擇合理的采樣時(shí)間（消毒后、使用前）；遵循嚴(yán)格的無(wú)菌操作。采集及檢查原則1、采集后必須盡快對(duì)樣本進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的檢測(cè)；2、送檢時(shí)間不得超過(guò)6小時(shí)；3、若樣本保存于0-4度冰箱，送檢時(shí)間不得超過(guò)24小時(shí)。（酒精燈？)空氣采樣方法1、采樣時(shí)間：采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間，應(yīng)在潔凈系統(tǒng)自凈后，未從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣；未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間，在消毒或規(guī)定的通風(fēng)換氣后，未從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣；2、采樣高度：與地面垂直高度80-150cm?？諝獠蓸臃椒?、布點(diǎn)方法室內(nèi)面積≤30m2，在對(duì)角線上取三點(diǎn)，即中心一點(diǎn)、兩端各距墻1m處取一點(diǎn)；室內(nèi)面積＞30m2，取東、西、南、北、中5點(diǎn)，其中東、西、南、北點(diǎn)均距墻1m。2、采樣方法：用直徑9cm的普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板在采樣點(diǎn)上暴露規(guī)定時(shí)間后送檢培養(yǎng)。注意事項(xiàng)1、采樣時(shí)機(jī)：室內(nèi)環(huán)境清潔消毒處理后，關(guān)閉門(mén)窗，無(wú)人走動(dòng)的情況下，靜置十分鐘后采樣。2、正確操作：將平皿蓋打開(kāi)，扣放于平皿邊緣。采完后將平皿蓋平移蓋好，翻轉(zhuǎn)放置。3、暴露時(shí)間：潔凈手術(shù)室、其他潔凈場(chǎng)所（產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、重癥監(jiān)護(hù)室、血液病區(qū)等）暴露時(shí)間為15min；(應(yīng)在送檢化驗(yàn)單上注明暴露時(shí)間)。4、兒科病房、母嬰同室、治療室、婦科檢查室、注射室、治療室、換藥室、各類普通病房暴露時(shí)間為5min。物體表面采樣方法1、采樣時(shí)間：選擇在清潔消毒后或使用前采樣，如有感染暴發(fā)流行則盡可能對(duì)未消毒處理的現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行采樣。2、采樣面積：被采樣面積＜100cm2，取全部表面；被采樣面積≥100cm2，取100cm2。物體表面采樣方法用5×5cm2標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有無(wú)菌生理鹽水的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣1-4個(gè)規(guī)格板面積，將棉拭子裝入盛有1ml生理鹽水的無(wú)菌管中送檢。門(mén)把手等小型物體，則采用棉拭子直接涂抹物體表面全部的方法采樣。注意事項(xiàng)1、規(guī)格板必須密封包裝高壓消毒，應(yīng)用前打開(kāi)。用時(shí)手指捏住規(guī)格板的外緣。避免手指接觸內(nèi)緣。2、物體表面應(yīng)在清潔消毒4h內(nèi)，未操作前采樣。3、手指捏住無(wú)菌棉拭試管塞的頂部，避免捏的部位太靠下，引起污染。4、涂擦過(guò)程中，無(wú)菌棉拭子要一邊涂擦、一邊轉(zhuǎn)動(dòng)。醫(yī)護(hù)人員手采樣方法采樣時(shí)間：在手消毒后，接觸病人及從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣。采樣方法：被檢人五指并攏，將浸有無(wú)菌生理鹽水的棉拭子在手指曲面從指根到指尖來(lái)回涂擦各兩次（涂擦面積約30cm2），并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，完畢，將無(wú)菌棉拭子插入無(wú)菌管送檢。注意事項(xiàng)采樣時(shí)機(jī)：手衛(wèi)生后采樣。如：外科手消毒后，或者六步洗手法洗手后。每根手指需來(lái)回涂擦四次。拿無(wú)菌棉拭子的手法同物體表面。醫(yī)療用品采樣方法采樣時(shí)間：在消毒或滅菌處理后，保存有效期內(nèi)采樣。采樣量及采樣方法：可用破壞性方法取樣的醫(yī)療用品，如輸液（血）器、注射器等均參照《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002版）執(zhí)行。（針頭、縫合線、縫合針、刀片等小件物品），直接將被檢測(cè)物浸入盛有無(wú)菌液體的試管中送檢。注射器：取注射器用5ml無(wú)菌洗脫液反復(fù)抽吸5次，將洗脫醫(yī)療用品采樣方法液注入無(wú)菌試管中送檢。手術(shù)鉗、鑷子等大件且不能用破壞性方法取樣的醫(yī)療器械，用浸有無(wú)菌生理鹽水的棉拭子反復(fù)涂擦物體全部表面，將棉拭子插入盛有無(wú)菌管中送檢。注意事項(xiàng)所有操作必須嚴(yán)格無(wú)菌操作。小件物品以無(wú)菌手法取樣后放入無(wú)菌試管時(shí)，不能接觸試管口的邊緣。大件物品用棉拭子涂擦?xí)r，要用無(wú)菌鑷子將物品夾起來(lái)，再用棉拭子涂擦。避免直接在無(wú)菌包皮上擦涂。重的物品可以?shī)A起一端，另一端接觸無(wú)菌包皮，使其豎起進(jìn)行涂擦。棉拭子插入試管時(shí)，嚴(yán)禁接觸試管口邊緣。使用中消毒劑與無(wú)菌器械保存液的采樣方法采樣時(shí)間：采取更換前使用中的消毒劑或無(wú)菌器械保存液。在無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管吸取2ml被檢液，注入無(wú)菌空試管中送檢。

注意事項(xiàng)無(wú)菌吸管可用一次性注射器替代。吸取消毒劑或無(wú)菌器械保存液時(shí)，應(yīng)將注射器插入液面下位于液體中部吸取。吸取液體注入無(wú)菌管時(shí)，注射器針頭不能接觸試管口邊緣將無(wú)菌管傾斜放置，注射器針頭要插入試管2-3cm，沿管壁緩緩注入。內(nèi)鏡消毒效果監(jiān)測(cè)檢測(cè)部位為內(nèi)鏡的內(nèi)腔面，用無(wú)菌注射器抽取含有中和劑的緩沖液10ml，從待檢內(nèi)鏡活檢口注入，用15ml的試管在活檢出口收集，2h內(nèi)送檢。臨床細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本的留取正確的標(biāo)本留取是保證培養(yǎng)結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵。因此，留取細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本需注意以下問(wèn)題：1、如何采集血培養(yǎng)標(biāo)本？應(yīng)在病人發(fā)熱1-2日或發(fā)熱高峰應(yīng)用抗生素之前采集為宜。此時(shí)陽(yáng)性率較高。以無(wú)菌手續(xù)采集靜脈血5-10ml，要采集雙側(cè)上肢靜脈血最好。將血液注入培養(yǎng)瓶，輕輕搖勻，以防凝固，有利于細(xì)菌生長(zhǎng)。如何采集血培養(yǎng)標(biāo)本？注意事項(xiàng):(1)皮膚消毒：用75%乙醇從中心點(diǎn)向外消毒皮膚，再用碘酒按同樣的方法消毒，待干后（0.5-1min）用乙醇棉球去碘跡，再用空針直接穿刺肘靜脈。（2）血培養(yǎng)瓶消毒：在采血之前，用75%乙醇消毒血培養(yǎng)瓶橡膠塞并干燥，將采集的血液標(biāo)本注入血培養(yǎng)瓶中（嚴(yán)禁直接打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋注入），然后輕輕顛倒混勻以防血液凝固。如何采集血培養(yǎng)標(biāo)本？(3):不要與其他采血同時(shí)（或在先）進(jìn)行（如血?dú)夂脱恋龋?，以防止抗凝劑?duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的影響。(4):切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本。(5):不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口取血。若從此處采集，應(yīng)在申請(qǐng)單上注明。2、如何采集膿及感染傷口標(biāo)本？在應(yīng)用抗生素之前，用無(wú)菌生理鹽水沖洗傷口，再采集深部膿液或分泌物。膿腫部位用無(wú)菌注射器抽取為好，也可在切開(kāi)排膿時(shí)，用無(wú)菌棉拭子沾取。注意事項(xiàng)：（1）應(yīng)盡可能在使用抗菌藥物前采集標(biāo)本，若患者在采集標(biāo)本前已用藥，要在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上注明應(yīng)用的抗菌藥物名稱，并在下次用藥前采集標(biāo)本。（2）對(duì)于開(kāi)放傷口，應(yīng)先采樣后清創(chuàng)。采集標(biāo)本前應(yīng)先去除表面污染菌，然后再采集標(biāo)本，以防帶入與感染無(wú)關(guān)的皮膚定植菌。（3）閉合膿腫最好是抽取內(nèi)容物送檢，盡量不用拭子采集標(biāo)本，以防標(biāo)本干燥及標(biāo)本中可能存在的厭氧菌死亡。如何采集膿及感染傷口標(biāo)本？（4）：當(dāng)用拭子采集標(biāo)本時(shí)，若預(yù)估采集的標(biāo)本量很少，為避免標(biāo)本干燥致細(xì)菌死亡，最好將無(wú)菌棉拭子先蘸少許無(wú)菌生理鹽水，然后采取靠近組織部分膿液及病灶深部的分泌物（最好從膿腫底部或膿腫壁取樣）立即送檢。

3、如何留取痰培養(yǎng)標(biāo)本？在抗生素應(yīng)用之前，清晨第一口痰液為宜。囑咐病人用生理鹽水漱口數(shù)次，用力自氣管深部咳出痰液，吐入無(wú)菌容器送檢。告知患者：咳痰時(shí)要避免唾液、鼻腔分泌物混入標(biāo)本。如何留取痰培養(yǎng)標(biāo)本？注意事項(xiàng):(1)采集標(biāo)本以清晨為佳，采集前應(yīng)先用冷開(kāi)水充分漱口，以免口腔正常菌群污染標(biāo)本。(2)標(biāo)