傳染病標(biāo)本的采集、保存、運(yùn)送管理規(guī)范為保證所采集標(biāo)本的質(zhì)量和操作人員的健康安全,特制定本規(guī)范。 (一)標(biāo)本采集1.標(biāo)本采集時(shí)的生物安全。 (1)采樣時(shí)要戴手套,防止手套有小的破損。 (2)采樣時(shí)盡可能穿防護(hù)服,根據(jù)傳染病的種類,選擇不同級(jí)別的防護(hù)。 (3)將用過(guò)的針頭直接放在專門的盒子里單獨(dú)保存并按規(guī)定消毒或銷毀。 (4)對(duì)污染區(qū)的表面和溢出物進(jìn)行消毒時(shí),要戴厚橡膠手套、穿防護(hù)服。 (5)污染的不可廢棄的設(shè)備或材料應(yīng)先消毒后清洗,可以廢棄的應(yīng)先消毒后廢棄。 (6)特殊情況下為避免吸人病原還需使用口罩、防護(hù)鏡和呼吸面罩。 (7)特殊情況下可在現(xiàn)場(chǎng)搭建簡(jiǎn)易焚燒爐,將污染物焚燒后廢棄物深埋。2.標(biāo)本采集的時(shí)間。細(xì)菌感染時(shí)盡量在使用抗生素之前采集樣本,否則標(biāo)本在分離培養(yǎng)時(shí)要加藥物拮抗劑。根據(jù)不同疾病的特點(diǎn)和臨床表現(xiàn),采樣時(shí)間也不盡一致。做病毒分離和病毒抗原檢測(cè)的標(biāo)本,應(yīng)在發(fā)病初期和急性期采樣,病毒分離樣本最好在發(fā)病1~2天內(nèi)采取。尸體標(biāo)本最好在死后6小時(shí)內(nèi)采集。3.標(biāo)本的標(biāo)識(shí)。采集和運(yùn)送標(biāo)本的容器必須有標(biāo)簽,標(biāo)明標(biāo)本的種類、原始采樣容器、標(biāo)本性質(zhì)、數(shù)量、運(yùn)送人和接收人及其聯(lián)系方式、包裝日期、運(yùn)輸日期、統(tǒng)一識(shí)別編號(hào)及病人姓名、檢驗(yàn)?zāi)康摹⑴R床診斷等信息;接收標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)室也應(yīng)記錄接收日期和時(shí)間、接收標(biāo)本者的姓名、標(biāo)本性質(zhì)和狀態(tài)等。4.各種標(biāo)本的采集方法。對(duì)于尸體標(biāo)本來(lái)說(shuō),可以直接采集有病理變化的臟器或組織,而對(duì)于臨床標(biāo)本,應(yīng)根據(jù)不同疾病的特征和病程,以及不同病原在人體的分布和排除部位及檢測(cè)目的,采集不同的標(biāo)本,不可用消毒劑,必要時(shí)以無(wú)菌生理鹽水沖洗,拭干后再取樣。盡可能采取病變明顯部位的材料。臨床標(biāo)本的采集主要有以下幾種: (1)用于細(xì)菌、病毒分離或檢測(cè)抗原用的標(biāo)本,如:糞便、咽拭子、痰液、尿液、、腦脊液等。①糞便標(biāo)本:應(yīng)在急性腹瀉期及用藥前采集自然排出的糞便,挑取黏液或膿血部分,液狀糞便采取絮狀物1~3ml;成型糞便至少取蠶豆大小糞塊(約5g),盛于滅菌容器內(nèi),加人保存液或增菌液后送檢。尿液或水勿混人糞便或容器內(nèi)。任何容器均應(yīng)以橡皮塞塞緊或用螺旋蓋旋緊,注意貼好標(biāo)簽。所采取的糞便標(biāo)本應(yīng)不得超過(guò)2小時(shí)送到化驗(yàn)室,運(yùn)送時(shí)間超過(guò)2小時(shí)者,應(yīng)保存在4~8℃溫度下送檢。②咽拭子、洗漱液或痰液:令患者仰頭張口,用壓舌板壓舌,將無(wú)菌棉拭子伸人口腔涂抹咽部數(shù)次后,放人裝有2mlHanksS液試管中。棉拭子接觸手的部分應(yīng)及時(shí)用無(wú)菌鑷子將其折斷去掉,然后將管子用橡皮塞蓋緊或旋緊;洗漱液是生理鹽水(0.9%)或自配淡鹽水15m1。方法是,先讓患者咳嗽,然后以洗漱液反復(fù)洗漱咽部1分鐘,洗漱畢直接吐人試管內(nèi)。采取標(biāo)本的時(shí)間一般在發(fā)病的第一日采集,最遲不得超過(guò)3日。最好是在體溫38℃以上時(shí)采集。肺部感染應(yīng)采取痰標(biāo)本,以清晨第一口痰最佳。③腦脊液:在無(wú)菌條件下進(jìn)行腰椎穿刺,用無(wú)菌試管收集3-5m1(做厭氧菌培養(yǎng)時(shí)標(biāo)本應(yīng)注人厭氧瓶?jī)?nèi)),操作最好由醫(yī)院有經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)生按腰椎穿刺術(shù)常規(guī)進(jìn)行。用于細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,標(biāo)本大多不需要運(yùn)送培養(yǎng)基且不能冷凍。用于病毒培養(yǎng)時(shí)也無(wú)須運(yùn)送培養(yǎng)基,在4-8℃最多可維持48小時(shí),更長(zhǎng)時(shí)間需在-70℃保存。④血標(biāo)本:做血液病原培養(yǎng)時(shí),嚴(yán)格用無(wú)菌穿刺法采靜脈血,成人10-15m1,兒童2-5m1,嬰兒0.5-2m1,移人無(wú)菌的有螺口的抗凝的容器或培養(yǎng)瓶中送檢。大多數(shù)病原體在環(huán)境溫度下24小時(shí)之內(nèi)送檢可做血培養(yǎng),如時(shí)間長(zhǎng)需4-8℃運(yùn)送。⑤尿液:培養(yǎng)細(xì)菌關(guān)鍵是無(wú)菌操作并在用藥前進(jìn)行。主要是中段尿采集法,先用肥皂水清洗外陰部,再以無(wú)菌水洗凈,一般取首次晨尿的中段尿10-20m1于無(wú)菌試管內(nèi)。最好2-3小時(shí)內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),否則可在4-8℃保存運(yùn)送樣品,不要冷凍。⑥取尸體標(biāo)本時(shí),每個(gè)標(biāo)本用單獨(dú)的無(wú)菌活檢針,至少取1-2g感染部位標(biāo)本,放人單獨(dú)的裝有相應(yīng)培養(yǎng)基的無(wú)菌容器中。同時(shí)注意貼牢標(biāo)簽和擰緊螺口。已固定的標(biāo)本可在常溫下保存或運(yùn)送,用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本可在運(yùn)送培養(yǎng)基中常溫保存24小時(shí),用于病毒培養(yǎng)的標(biāo)本在病毒運(yùn)送培養(yǎng)基或無(wú)菌鹽水中4-8℃保存24-48小時(shí),長(zhǎng)期保存最好在-70℃。⑦用于核酸檢測(cè)的標(biāo)本:采集咽拭子或肛拭子等用于檢測(cè)核酸時(shí)要使用滅菌人造纖維拭子或塑料棒。 (2)用于病原抗體檢測(cè)的標(biāo)本,包括血液和腦脊液。①血液標(biāo)本:采集血清標(biāo)本可取10m1靜脈血移人無(wú)抗凝劑的無(wú)菌螺口管,室溫靜置30分鐘使之凝集,然后置冰盒中4-8℃至少1-2小時(shí)(在此溫度下可存放48-72小時(shí))。血清標(biāo)本也可在實(shí)驗(yàn)室低速離心(1000g,10分鐘)以棄去殘存血細(xì)胞。用于檢測(cè)1gM的血清一般采于發(fā)病1個(gè)月內(nèi);用于檢測(cè)1gG的血液應(yīng)收集兩次,第一次于發(fā)病初期(1-3天),越早越好,第二次血樣一般在恢復(fù)期(第一次采血后3-4周)。雙份血清同時(shí)檢測(cè)。如果能立即檢測(cè),應(yīng)該在室溫下24小時(shí)內(nèi)盡快分離血清。如果24小時(shí)內(nèi)不能送達(dá)實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)在運(yùn)送前盡可能分離血清。血清可在4-8℃最多保存10天。如果長(zhǎng)期不檢測(cè),應(yīng)凍存血清。如果在現(xiàn)場(chǎng)不能分離血清,血標(biāo)本應(yīng)在4-8℃保存,未分離的血標(biāo)本不能冷凍保存。②腦脊液:采集方法同血液標(biāo)本,一般于出現(xiàn)神經(jīng)癥狀時(shí)采集,查1gM只需1份腦脊液,查1gG則需收集兩次標(biāo)本。 (二)病原微生物標(biāo)本保存1.用于分離培養(yǎng)細(xì)菌的標(biāo)本應(yīng)在運(yùn)送培養(yǎng)基中運(yùn)送并保存于合適的溫度。除了腦脊液、尿液、唾液,其他標(biāo)本若能在24小時(shí)處理,多數(shù)可存放在室溫,若長(zhǎng)期保存,應(yīng)存放在4-8℃,但一些低溫敏感的細(xì)菌除外。直腸拭子或新鮮糞便若在48小時(shí)內(nèi)檢測(cè),保存于4℃,若在48小時(shí)后檢測(cè),保存于-70℃。2.用于分離病毒的標(biāo)本,一般應(yīng)放在保溫容器(0~4℃)里,放置不可超過(guò)2天,如無(wú)條件立即運(yùn)送或不能立即分離病毒時(shí),應(yīng)將標(biāo)本冷凍保存。長(zhǎng)期儲(chǔ)存,最好在-70℃冷凍。3.用于寄生蟲調(diào)查的糞便標(biāo)本,應(yīng)于所取糞便中加人10%甲醛和PVA防腐劑(充分混合),存于4℃,新鮮糞便可存于-15℃。4.用于檢測(cè)抗原或抗體的標(biāo)本應(yīng)在4~8℃保存(24~48小時(shí)),如需保存更長(zhǎng)時(shí)間應(yīng)在-20℃保存。有些標(biāo)本需要特殊處理(如冷凍)。檢測(cè)抗體的血清可以在4℃保存約一個(gè)星期,最長(zhǎng)10天,超過(guò)一周最好在-20℃下冰凍。避免反復(fù)凍融。5.保證樣品運(yùn)送所需溫度的方法:為維持4~8℃,運(yùn)送盒中圍繞第二層容器至少要填充4個(gè)冰袋,可冷藏2~3天。為保證-20℃條件,在外包裝袋內(nèi)用2kg干冰,可冷凍1~2天。為保證-70℃條件,可采用液氮儲(chǔ)存和運(yùn)送。 (三)微生物標(biāo)本的運(yùn)送1.分離培養(yǎng)細(xì)菌、病毒的標(biāo)本大多數(shù)要求冷藏運(yùn)送,不耐寒冷的腦膜炎球菌等應(yīng)在35~37℃