實驗一植物細胞死后的鑒定(質(zhì)壁分離法)ExperienciaI Aavaliagaodamorteedovivodacelulavegetal(Metododaseparagaodasubstanciacelulareparedecelular)一．原理：OPrincipio:植物細胞是一個滲透系統(tǒng)。當細胞處于比其水勢低的變滲溶液中時，則細胞由于失水而使原生質(zhì)體體積縮小，從而引起質(zhì)壁分離。而當提變細胞外溶液的水勢使其大于細胞內(nèi)水勢時，或因溶質(zhì)透入細胞使細胞內(nèi)的水勢小于外界溶液的水勢時，則因細胞重新吸水，原生質(zhì)體體積膨脹，可見質(zhì)壁分離復(fù)原。Acelulavegetaleumsistemadoescoamento,quandacelulaestanaaguainfiltratedamudangabaixadocomparadacomasuaaparencia,aseguirovolumedaprotoprotoplasmadiminueporcausadaperdadaaguadacelula,ecausaaseparagaodasubstanciacelulareparede.Masquandoosaumentosmudamasolugaoqueextracellularaaparenciadaaguafazcomquesejamaisgrandedoquenacelulaaaparenciadaagua,quandooudosoluteinfiltratesacelulaparacausarnacelulaaaparenciadaaguaemenordoqueaaparenciaexteriordasolugaodaagua,porqueentaoacelulaabsorveaagua,expansaodovolumedaprotoprotoplasma,restauragaoobviadaseparagaodasubstanciacelulareparede.活細胞與死細胞膜的透性不同，活細胞在充滲溶液中能產(chǎn)生質(zhì)壁分離，而死細胞不能產(chǎn)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象，故可以此鑒別。Apropriedadedapel^culadacelulavivaemortosaodiferentes,acelulavivainfiltratingnasolugaoparapodersuficientementeteroaseparagaodasubstanciacelulareparede,masacelulamortonaopodeterofenomenodaseparagaodasubstanciacelulareparede,podedistingaopeloassim.二．材料和設(shè)備Materialeequipamento洋蔥鱗莖或紫鴨跖草，蠶豆葉表皮等植物。顯微鏡、濾紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖刀、刀片。7%尿素、1m蔗糖液、5%乙醇溶液。Bulbodacebolaougramadodedodopedopatoroxa,epidermisdafolhafavaeoutrasplantas.Microscopio,papeldefiltro,vidrocarregado,vidrodatampa,pinga,bisturi,lamina.Aureiade7%,Hquidodosucrosede1m,solugaodeeterde5%三．步驟Passos.取洋蔥鱗片內(nèi)表皮一小塊，放在有1-2滴蒸餾水的載玻片上，蓋上蓋玻片在低倍鏡下觀察，注意細胞有無質(zhì)壁分離現(xiàn)象。.在蓋玻片的一邊，放上2-3滴1m的蔗糖液，同時在對邊用一塊濾紙片吸去水分，不要移動標本制片，在顯微鏡下連續(xù)觀察細胞有何變化(觀察時需注意調(diào)節(jié)顯微鏡的光圈，使視野中的亮度適宜)。.在從制片上的一邊小心地加數(shù)滴蒸餾水，同時用濾紙緩慢地從另一邊吸取，以洗凈蔗糖液在顯微鏡下觀察，細胞有何變化。Tiraumapartedasuperficieinternadaescamadacebola,colocanumvidrocarregadogotade1-2daaguadestilatorio,cobreovidrodatampaparaobservarsoboespelhodemultiplobaixo,prestaatengaosehaofenomenodaseparagaodasubstanciacelulareparede.Numladodovidrodatampa,poegotade2-3dol^quidodosucrosede2-3,absorveaaguacomopapeldefiltronoladooposto,naopodemoveroespecimequefaz,observacontinuamentequandoomicroscopioacelulatemquemudanga(aobservagaodevepagaraatengaoajustaaaberturadomicroscopio,ascausasnocampodobrilhodavisaoqueeapropriado)Poealgumasgoatsdaaguadestilatorionumladovidro-fazendocomcuidado,absorvetardiamenteaaguacomopapeldefiltrosimultaneamenteaomesmotempo,observasobomicroscopiocomol^quidodosucroselimpo,quemudangaacelulatem.

4.另取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮，放在已加有數(shù)滴蒸餾水的載玻片上，并在火焰上方小心加熱2-3分鐘(或用酒精浸泡及冷凍后融解等辦法處理材料)，待冷卻后于載玻片上加一滴1m蔗糖溶液，蓋上蓋片進行鏡檢，看是否發(fā)生質(zhì)壁分離。Formasdiferentes質(zhì)壁分離的不同形式Formasdiferentesdaseparagaodasubstanciacelulare

paredeA．凹形質(zhì)壁分離aseparagaodasubstanciacelulareparededeformacavadaBFormasdiferentes質(zhì)壁分離的不同形式Formasdiferentesdaseparagaodasubstanciacelulare

paredeA．凹形質(zhì)壁分離aseparagaodasubstanciacelulareparededeformacavadaB．凸形質(zhì)壁分離aseparagaodasubstanciacelulareparededeformaconvexaC．帽形質(zhì)壁分離aseparagaodasubstanciacelulareparededeformadobone1．細胞核carogocellular2,膨脹的原生質(zhì)protoprotoplasmaainchado3-液泡bolaliquida5.撕取洋蔥鱗片內(nèi)表片置于放在滴數(shù)滴7%尿素溶液載玻片上，加蓋玻片，于顯微鏡下觀察。而后固定某一初始質(zhì)壁分離的細胞，連續(xù)觀察。注意表皮細胞有何現(xiàn)象發(fā)生？記錄分析原因。Rasgaasuperficieinternadaescamadacebola,p6rnovidrocorregadocomalgumasgotassolugaodoureiade7%,colocaovidrodatampa,observamsobomicroscopio.Depoisfixaalgumacelulainicialdaseparagaodasubstanciaeparede,observacontinuamente,prestaatengaoquefenomenotemnacelulaepidermal.Registaeanalisaarazao.撕取洋蔥鱗片內(nèi)表皮置于放有數(shù)滴5%乙醇溶液的載玻片上，加蓋玻片并在顯微鏡下觀察。然后把制片換上蔗糖溶液，再在顯微鏡下觀察，細胞有何變化？Rasgaasuperf^cieinternadaescamadacebola,pornovidrocorregadocomalgumasgotassolugaodeeterde5%,colocaovidrodatampa,observasobomicroscopio.Mastrocaovidrofazendodasolugaodasacarose,observacontinuamentequemudangaacelulatem？四．質(zhì)壁分離的不同形式Formasdiferentesdasepara^aodasubstanciaeparede植物細胞的質(zhì)壁分離形式，有凸形、帽形、凹形，痙攣形(特別嚴懲的凹形)等形式。起初往往是凹形，后來漸漸變?yōu)橥剐?，質(zhì)壁分離形成的不同往往與原生質(zhì)的粘性有關(guān)。凡是原生質(zhì)粘度大的，能維持較長時間的凹形質(zhì)壁分離，甚至成為痙攣形；原生質(zhì)的粘性降低時，較快到達凸形質(zhì)壁分離，甚至不經(jīng)過凹形階段。Asformasdaseparagaodasubstanciaeparededacelulavegetal,temaformacavada,aformadochapeu,aformaconcava,aformadaconvulsao(formaconcavegrave)eoutrasformas.Noin^cioefrequentementeaformaconcava,transforma-seaformacavadamaistarde,asformasdaseparagaodasubstanciacelulareparedediferentementefrequentementetemrelagaocomaviscosidadedaprotoprotoplasma.Asviscosidadedaprotoprotoplasmagrandes,poderiamanterotempolongodaseparagaodasubstanciacelulareparededaformaconcava,transforma-semesmoaformadoconvulsao；quandaviscosidadedaprotoprotoplasmasereduz,chegaaseparagaodasubstanciacelulareparededaformacavadarapidamente,mesmonaopassaatravesdoprocessodaformaconcave.本實驗觀察由于Ca+,K+離子對原生質(zhì)粘性的不同影響而發(fā)生不同形狀的質(zhì)壁分離的現(xiàn)象。Estaexperienciaeparaobservarofenomerodasepara巽odasubstanciaeparededaformasdiferentesporcausadasinfluenciasdiferentesdaviscosidadedaprotoprotoplasmaqueo^onCa+，o^onK+da.Ca+離子能降低原生質(zhì)水合度，使原生質(zhì)粘性中大，K+離子正好相反。所以經(jīng)前者處理后，發(fā)生凹形質(zhì)壁分離，后者則發(fā)生凸形質(zhì)壁分離。O^onCa+podereduzonveldahidratagaodaprotoprotoplasma,aumentaaviscosidadedaprotoprotoplasma,o^onK+econtrario.Portanto,depoisdadisposigaocomCa+,ocorreaaseparagaodasubstanciaeparededaformaconcava,como^onK+ocorreaaseparagaodasubstanciaeparededaformacavada.當用kno3的變滲溶液進行長時間質(zhì)壁分離時，由于原生質(zhì)水合度大大增加，原生質(zhì)層變厚，似帽狀包圍在收縮的液泡兩端，因此稱為帽狀質(zhì)壁分離(見圖)Quandoprocedeaseparagaodas