實驗動物質(zhì)量標準和監(jiān)測張鈺廣東省實驗動物監(jiān)測所實驗動物是指經(jīng)人工培育、遺傳背景清楚、對其質(zhì)量實行控制、用于科學試驗及產(chǎn)品生產(chǎn)的動物。區(qū)別于實驗用動物。近交系、封閉群、雜交群近交系：至少連續(xù)20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系內(nèi)所有個體都可以追溯到起源20代或以后代數(shù)的一對祖先。近交系數(shù)應(yīng)大于99%。封閉群：以非近親交配方式進行繁殖生產(chǎn)的一個實驗動物種群，在不從外界引入新個體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上。雜交群：由不同品系或種群之間雜交產(chǎn)生的后代。遺傳監(jiān)測重要性保障品系的遺傳特性防止發(fā)生遺傳突變和遺傳污染實驗動物寄生蟲學等級及檢測GB14922.1實驗動物寄生蟲學檢測方法GB/T18448.1-18448.10實驗動物微生物學等級及檢測GB14922.2實驗動物微生物學檢測方法（1）GB/T14926.42-14926.43

實驗動物微生物學檢測方法（2）GB/T14926.1-14926.6；GB/T14926.8-14926.17；GB/T14926.41；GB/T14926.44-14926.49實驗動物微生物學檢測方法（3）GB/T14926.50-14926.55實驗動物質(zhì)量（8）實驗動物檢測方法（4）GB/T14926.18-14926.32GB/T14926.56-14926.64SPF雞微生物學監(jiān)測總則GB/T17998

類別病原菌病毒寄生蟲動物種類小鼠、大鼠豚鼠、兔犬、猴小鼠、大鼠豚鼠、兔犬、猴小鼠、大鼠豚鼠、兔犬、猴項目沙門菌、支原體、泰澤病原體等沙門菌、多殺巴氏桿菌、支氣管鮑特桿菌等志賀菌、結(jié)核桿菌等鼠痘病毒、漢坦病毒、仙臺病毒和小鼠肝炎病毒等兔瘟、仙臺病毒等B病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒等體外寄生蟲、弓形體等弓形體、兔腦原蟲、球蟲等弓形體、溶組織阿米巴等數(shù)量（項）161491489765SPF級動物監(jiān)測項目我國實驗動物質(zhì)量要求的最低標準，其它行業(yè)、地方標準不能低于國家標準要求。保證實驗研究的順利進行和工作人員的身體健康。確保實驗數(shù)據(jù)的準確性和可重復性。質(zhì)量監(jiān)測意義實驗動物的微生物學、寄生蟲學質(zhì)量監(jiān)測

實驗動物環(huán)境設(shè)施（2）實驗動物環(huán)境與設(shè)施GB14925實驗動物設(shè)施建筑技術(shù)規(guī)范GB50447實驗動物營養(yǎng)和飼料（12）實驗動物配合飼料通用質(zhì)量標準GB14924.1

實驗動物配合飼料衛(wèi)生標準GB14924.2實驗動物小鼠、大鼠配合飼料GB14924.3實驗動物兔配合飼料GB14924.4實驗動物豚鼠配合飼料GB14924.5實驗動物地鼠配合飼料GB14924.6實驗動物犬配合飼料GB14924.7實驗動物猴配合飼料GB14924.8實驗動物配合飼料常規(guī)營養(yǎng)成分的測定GB/T14924.9實驗動物配合飼料氨基酸的測定GB/T14924.10實驗動物配合飼料礦物質(zhì)和微量元素的測定GB/T14924.12實驗動物配合飼料維生素的測定GB/T14924.11籠具（地方標準）塑料籠箱；隔離器；代謝籠；籠架；層流架；飲水瓶；IVC動物編號外觀檢查麻醉皮膚取樣取血無菌解剖檢測檢測報告真菌檢查

分離血清，檢查病毒抗體或其他病原抗體

氣管分泌物、腸內(nèi)容物、臟器分離細菌采用抽樣檢測。檢測程序包括監(jiān)測項目的選定、采樣、檢測。檢測頻率普通級動物：每三個月至少檢測動物一次。清潔級動物：每三個月至少檢測動物一次。無特定病原體動物：每三個月至少檢測動物一次。

無菌動物：每年檢測動物一次。每2-4周檢查一次動物的生活環(huán)境標本和糞便標本。監(jiān)測方法細菌檢測病毒檢測寄生蟲檢測病原檢測（細菌、真菌）檢測抗體方法病原檢測分離培養(yǎng)血清學檢測（ELISA、IEA、IFA、HI）鏡檢（直接涂片法、飽和鹽水漂浮法或沉淀法、透明膠紙肛門周圍粘取法、組織或器官剖面壓印法、病變組織切片或壓片法、尿液的離心法）GB/T14926.1-14926.64GB/T18448.1-18448.10水生實驗動物的質(zhì)量控制水生生物終生生活在水中，絕大部分體外受精、體外發(fā)育，在許多領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，是毒性試驗、環(huán)境監(jiān)測、發(fā)育生物學、生理學、生態(tài)學、遺傳學等研究常用的實驗材料。目前還沒有質(zhì)量監(jiān)測標準，來保障實驗用水生生物的質(zhì)量。檢測類別水體質(zhì)量問題

一般檢查和剖檢

細菌疾病

寄生蟲疾?。ㄔx疾病、多細胞寄生蟲）非感染性和先天性疾病

腫瘤疾病

國內(nèi)外斑馬魚環(huán)境控制指標一覽表監(jiān)測指標國內(nèi)國外水溫20-30℃，28.5℃最佳27-29℃pH6.5-86.3-7.3硬度6-8dGH無要求光照300-500lx無要求光/暗12h/12h無要求氧含量無要求5.5mg/l氨含量無要求0ppm氯含量無要求0ppm鹽度無要求0.003電導率無要求93ms/m;500微米/s亞硝酸鹽無要求0.1mg/L以下水置換率/流速無要求10%/天0.1m/s銅無要求無統(tǒng)一值氣體飽和度無要求無統(tǒng)一值水體質(zhì)量問題（WaterQualityProblems）

銅毒性

氯毒性

氨毒性

亞硝酸鹽毒性

氣泡?。℅asBubbleDisease）

氨毒性表現(xiàn)：行為異常（興奮過度、厭食、生長遲緩，對病原敏感），換氣減少。顯微觀察：魚鰓上皮增生。亞硝酸鹽毒性表現(xiàn)：組織缺氧。氣泡病氣體飽和度超過當時溫度、鹽度和壓力條件下的最大值。表現(xiàn)：皮膚、魚鰭或鰓出現(xiàn)肉眼可見泡沫，眼球后組織也可見明顯泡沫，眼球突出。顯微觀察：組織切片可見泡沫。體表檢查：立體解剖顯微鏡異常：魚鰭磨損、眼球混濁、潰瘍、褪色、體表寄生蟲和腫瘤等制作濕片（Preparewetmounts）：觀察寄生蟲和其它病原體魚腮顏色解剖鏡下檢查：寄生蟲、囊腫、粘液過多和出血等制作濕片：寄生蟲、真菌和細菌剖檢：體腔：腹水、出血或其它異常腎臟：腫大、褪色心臟：是否正常內(nèi)臟器官：白色的囊腫可能感染分支桿菌組織壓片：寄生蟲、真菌或肉芽腫觸片：常用Giemsa或Diff-Quik染色對腎臟或其它感染臟器檢查原蟲和細菌組織診斷魚的整體（通?？v切）或有代表性的臟器進行固定，固定液Dietrich’s或Davidson，進行切片，染色鏡檢。細菌疾?。˙acterialDiseases）

分支桿菌?。∕ycobacteriosis）

滑動細菌（GlidingBacteria）

細菌性喉囊炎（Bacterialaerocystitis）—魚鰾細菌感染

分支桿菌病病原：海分支桿菌、膿腫分支桿菌、龜分支桿菌、偶發(fā)分支桿菌、草分支桿菌和嗜血分支桿菌等。臨床癥狀和病變：潰瘍、出血、頭部周圍充血、魚鱗凸起、魚鰭磨損、皮膚或鰓蒼白等。內(nèi)臟器官白色結(jié)節(jié)。顯微觀察：肉芽腫診斷：抗酸染色、PCR確診?；瑒蛹毦毦增w病、環(huán)境性鰓?。┎≡狐S桿菌屬、屈橈桿菌等菌屬；淡水魚主要感染柱狀黃桿菌和嗜鰓黃桿菌。臨床癥狀和病變：呼吸困難，魚鰭和魚尾表現(xiàn)特征性魚鰭腐蝕，白色。顯微觀察：上皮增生，次級鰓瓣融合，有的壞色，病變部位可見大量細菌。診斷：觀察到細菌。細菌性喉囊炎病原：不能確定具體的細菌類型，免疫抑制魚內(nèi)臟細菌移植到魚漂引起疾病。臨床癥狀和病變：嗜睡，聚集魚池底部。魚鰭基部出現(xiàn)紅斑。顯微觀察：魚漂出現(xiàn)大范圍損傷和嚴重慢性炎癥。組織切片可見明顯壞死，革蘭氏染色可見大量細菌群落。診斷：組織切片觀察到特征性損傷，多種染色證實細菌的存在。寄生蟲病天鵝絨疾?。╒elvetDisease）微孢子蟲病（Microsporidiosis）Ich（白點?。?/p>

原生動物疾?。≒rotozoanDiseases）原生動物疾病

天鵝絨疾病

病原：淡水天鵝絨（Piscinoodinium

pillulare

）——鞭毛蟲綱，腰鞭毛蟲目生活史：腰孢子蟲階段

滋養(yǎng)體分裂前體腰孢子蟲臨床癥狀：精神萎靡，浮于水體表面，呼吸困難顯微觀察：皮膚或魚鰓濕片見滋養(yǎng)體組織切片：鰓感染上皮增生，皮膚感染上皮增生和壞死診斷：切片中見滋養(yǎng)體(卵形的、不透明、無運動能力)

微孢子蟲病

病原：微孢子蟲（Microsporidium）（微孢子門、微孢子目），特定種屬名：Paeudoloma

neurophilia；生活史：專性細胞內(nèi)寄生，復雜生命周期，產(chǎn)生具有傳染性和抵抗性的孢子，通過攝入具有傳染性的孢子感染。臨床癥狀：衰弱和脊柱彎曲癥狀顯微觀察：中樞神經(jīng)系統(tǒng)（脊索和后腦）可見孢子診斷：觀察到孢子（濕片或切片）A：衰弱；B：脊柱彎曲Ich（白點?。?/p>

病原：多子小瓜蟲(Ichthyophthirius

multifiliis)（纖毛蟲綱、膜口目、凹口科）臨床癥狀和病變：粘液過多、呼吸困難和精神萎靡，皮膚凸起的白色節(jié)結(jié)白點顯微觀察：皮膚和鰓的濕片可見纖毛蟲濕片，組織切片可見上皮增生、滋養(yǎng)體。診斷：濕片見纖毛蟲，確診見到滋養(yǎng)體，寄生部位發(fā)現(xiàn)蟲體。體表白點（紅大馬哈魚Sockeyesalmon）腮的濕片（箭頭為纖毛蟲）多細胞寄生蟲（MetazoanParasites）

毛細線蟲?。–apillariasis）腎粘孢子蟲?。≧enalMyxosporidiosis）

毛細線蟲病

病原：毛細線蟲（蠕蟲），Pseudocapillaria

tomentosa是第一個鑒別的感染斑馬魚的毛細線蟲，具有廣泛的宿主。臨床癥狀和病變：發(fā)黑、衰弱、嗜睡、剖檢肝腫大和貧血。顯微觀察：雌蟲腸道濕片充滿特殊蟲卵濕片，組織切片見蠕蟲位于腸壁，感染組織嚴重蜂窩織炎切片。診斷：橢圓形、具雙極囊的卵存在；確診還需觀察到蟲體。腸道濕片腸道切片腎粘孢子蟲病

病原：粘原蟲（粘原蟲門，粘孢子蟲綱），兩極蟲屬（Myxidium）或楚克拉蟲屬（Zschokkella）生活史：滋養(yǎng)體階段和多細胞的孢子階段。魚吞食孢子或粘附鰓和皮膚感染。臨床癥狀和病變：一般無明顯臨床癥狀，可在多個器官中形成包囊。顯微觀察：病變組織切片見蟲體；粘孢子具有特殊極囊（亞甲基蘭和吉姆薩等特殊方法染色）。診斷：組織切片觀察到蟲體。位于腎小管中滋養(yǎng)體粘孢子具兩個極囊Giemsa染色返回非感染性和先天性疾病（Non-infectiousorIdiopathicDiseases）

腎鈣質(zhì)沉著癥（Nephrocalcinosis）

心臟?。盒陌e液和擴張性心肌病

卵相關(guān)炎癥（Egg-AssociatedInflammation）

肝紅細胞癥（HepaticMegalocytosis）

腎鈣質(zhì)沉著癥

鈣在腎小管和集合管中沉積而成。水中較高CO2濃度（〉12mg/L）；食物中鈣鎂較高等。臨床癥狀和病變：一般無明顯臨床癥狀。顯微觀察：組織切片見腎小管和集合管中有嗜堿性、水晶狀的沉積物。診斷：腎組織切片中鈣的沉積。鈣沉積心臟病

臨床癥狀和病變：心臟區(qū)域非常腫脹，切開出現(xiàn)嚴重出血或大塊的血栓顯微觀察：心包腔中充滿血液或蛋白樣滲出物；組織切片見心室擴張，充滿液體。診斷：剖檢心臟出血，組織學確定。

心臟區(qū)域凸出卵相關(guān)炎癥臨床癥狀和病變：腹部擴張，卵巢成實心、瘤狀物，甚至從內(nèi)到外體表出現(xiàn)白色的潰瘍顯微觀察：嚴重慢性炎癥，纖維素增生，纖維素瘤。診斷：組織學變化。體側(cè)形成潰瘍肝紅細胞癥

肝細胞的細胞質(zhì)和細胞核極度擴大。臨床癥狀和病變：無明顯臨床癥狀顯微觀察：組織切片見個別肝細胞的核過度肥大。診斷：發(fā)現(xiàn)擴張的肝細胞極度增大的細胞核。部分肝細胞腫大腫瘤疾病精原細胞瘤（Seminoma）

腸癌（IntestinalCarcinoma）

后腮瘤（UltimobranchialNeoplasia）

甲狀腺瘤（ThyroidNeoplasia）

肝臟腫瘤（HepaticNeoplasia）

梭形細胞肉瘤（SpindleCellSarcomas）血管瘤（Hemangiomas）

精原細胞瘤

肉眼變化：常見的自發(fā)性腫瘤；腹部腫脹，柔軟、白色多室性的腫塊。顯微改變：精母細胞的精原細胞