微生物學(xué)及操作技術(shù)微生物培養(yǎng)基的滅菌實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基滅菌1培養(yǎng)基的工業(yè)滅菌2目錄頁CONTENTSPAGE1實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基滅菌間歇滅菌法過濾除菌濕熱滅菌過渡頁TRANSITIONPAGE一、間歇滅菌法間歇滅菌法：即常壓滅菌，用于一些受高溫而破壞的培養(yǎng)基的滅菌。操作方法：

a.待滅菌的物品放在滅菌器或蒸籠里，每天蒸煮1次，每次在100℃煮沸30～60min，連續(xù)3d重復(fù)進(jìn)行。

b.在每兩次蒸煮之間，將物品（指培養(yǎng)基）放在37℃恒溫條件下培養(yǎng)24h，這樣可以使每次蒸煮后未殺死殘留的芽孢萌發(fā)成營養(yǎng)體，以便下次蒸煮時(shí)殺滅。c.第三次蒸煮之后基本無菌，但為了確保無菌仍要放在37℃恒溫條件下培養(yǎng)24h，確定無菌才能使用。實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基滅菌

二、過濾除菌1、原理過濾除菌：不能用加熱滅菌的液體物質(zhì)（如維生素、血清），一般可用細(xì)菌過濾器進(jìn)行除菌。2、實(shí)操實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基滅菌二、過濾除菌2.實(shí)操1.原理實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基滅菌三、濕熱滅菌高壓蒸汽滅菌操作步驟：高壓蒸氣滅菌法的操作步驟如下：1.滅菌鍋內(nèi)加入一定量的水。

2.將待滅菌的物品放入鍋內(nèi)，并關(guān)嚴(yán)鍋蓋。注意：器物不能裝得太滿。

3.接通電源，進(jìn)行加熱。

4.排除高壓鍋內(nèi)的冷空氣，可將排氣閥打開，待溫度計(jì)指示溫度為100℃時(shí)關(guān)閉排氣閥；實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基滅菌1、高壓蒸汽滅菌3.影響濕熱滅菌的因素2.煮沸滅菌三、濕熱滅菌滅菌鍋的使用實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基滅菌1、高壓蒸汽滅菌3.影響濕熱滅菌的因素2.煮沸滅菌三、濕熱滅菌高壓滅菌實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基滅菌1、高壓蒸汽滅菌3.影響濕熱滅菌的因素2.煮沸滅菌三、濕熱滅菌實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基滅菌1、高壓蒸汽滅菌3.影響濕熱滅菌的因素2.煮沸滅菌高壓滅菌注意事項(xiàng)三、濕熱滅菌煮沸滅菌實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基滅菌2、煮沸滅菌3.影響濕熱滅菌的因素1、高壓蒸汽滅菌三、濕熱滅菌影響培養(yǎng)基濕熱滅菌的因素：（1）pH：影響微生物的耐熱性。一般，pH6.0~8.0時(shí)，微生物最不容易死亡。（2）培養(yǎng)基成分：油脂、糖類及一定濃度的蛋白質(zhì)都回增加微生物的耐熱性；高濃度的鹽類、色素則會削弱其耐熱性。（3）氣泡：影響傳熱。（4）顆粒：大顆粒（1mm以上）的傳熱系數(shù)很低，使滅菌不徹底。實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基滅菌1、高壓蒸汽滅菌3.影響濕熱滅菌的因素2.煮沸滅菌2培養(yǎng)基的工業(yè)滅菌過渡頁TRANSITIONPAGE*種子培養(yǎng)基滅菌*培養(yǎng)基的分批滅菌種子培養(yǎng)基滅菌方法1、高壓蒸汽滅菌鍋、手提式滅菌鍋。容量小。2、立式或臥式滅菌鍋。容量較大，一般能裝幾十瓶或幾百瓶。3、滅菌柜。要和蒸汽鍋爐配套，用于大量種瓶培養(yǎng)基的滅菌，一次能裝幾百至幾千瓶(袋)。1.種子培養(yǎng)基滅菌2.培養(yǎng)基的分批滅菌3.連續(xù)滅菌培養(yǎng)基的工業(yè)滅菌培養(yǎng)基的分批滅菌定義：將配制好的培養(yǎng)基輸入發(fā)酵罐中，用蒸汽加熱，使培養(yǎng)基和設(shè)備同時(shí)滅菌的一種滅菌方式，又稱實(shí)罐滅菌。2.培養(yǎng)基的分批滅菌1.種子培養(yǎng)基滅菌過程包括升溫、保溫和冷卻等三個(gè)階段，各階段對滅菌的貢獻(xiàn)：20%、75%、5%。培養(yǎng)基的升溫可由兩種方式實(shí)現(xiàn)：間接加熱，在夾套或蛇管中通入蒸汽加熱；直接加熱，在培養(yǎng)基中直接通入熱蒸汽加熱。3.連續(xù)滅菌培養(yǎng)基的工業(yè)滅菌保證分批滅菌成功的要素內(nèi)部結(jié)構(gòu)合理(主要是無死角)，焊縫及軸封裝置可靠，蛇管無穿孔現(xiàn)象壓力穩(wěn)定的蒸汽合理的操作方法培養(yǎng)基的工業(yè)滅菌1.種子培養(yǎng)基滅菌2.培養(yǎng)基的分批滅菌連續(xù)滅菌：連續(xù)滅菌（連消）：培養(yǎng)基在罐外連續(xù)進(jìn)行加熱、維持和冷卻，然后進(jìn)入發(fā)酵罐的殺菌方法。3.連續(xù)滅菌優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)

–保留較多的營養(yǎng)質(zhì)量

–容易放大

–較易自動控制；

–糖受蒸汽的影響較少縮短滅菌周期；–在某些情況下，可使發(fā)酵罐的腐蝕減少；–發(fā)酵罐利用率高；–蒸汽負(fù)荷均勻。培養(yǎng)基的工業(yè)滅菌1.種子培養(yǎng)基滅菌2.培