七、問(wèn)答題１．?dāng)⑹鲈松镛D(zhuǎn)錄終止。(１）轉(zhuǎn)錄終止兩種關(guān)鍵機(jī)制是什么?(2)描述翻譯如何能調(diào)整轉(zhuǎn)錄終止。(3)為什么在細(xì)菌轉(zhuǎn)錄終止中很少包含到Pho因子?(4)如何能阻止轉(zhuǎn)錄終止?2.復(fù)制DNA聚合酶（DNA依靠ＤＮＡ聚合酶)也有校正功效,解釋為什么RＮA聚合酶沒有這種功效。3.討論原核生物基因表達(dá)聚合作用反映定向關(guān)鍵性。假如核糖體從3’端到５’端讀它模板mRNA話，那么將會(huì)發(fā)生什么情況？4．概括細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。５.概括經(jīng)典原核生物啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)和功效，并解釋什么是保守序列。6．轉(zhuǎn)錄如何在基因或基因組末端終止?７．（1)如何區(qū)分由啟動(dòng)子起始轉(zhuǎn)錄RNA片段和5’端被加工過(guò)RNA片段;(2)證實(shí)多肽是從氨基端到羧基端方向合成。8.比較Ｅ．ｃolirRNA和tＲNＡ轉(zhuǎn)錄和加工。9．區(qū)分可誘導(dǎo)和可阻遏基因調(diào)控。1０.衰減作用如何調(diào)控Ｅ.coli中色氨酸操縱子表達(dá)?１1.比較并指出細(xì)菌和真核生物RNA翻譯機(jī)理異同。１２．什么是搖擺假說(shuō)?13.指出E.coli和真核生物翻譯起始不同樣。1４．S．NＣohｅn于19７３年構(gòu)建了三個(gè)重組體,pSC1０2,pＳC１05,pSC109請(qǐng)說(shuō)明這三個(gè)重組體是如何取得?各說(shuō)明了什么？１5．基因克隆是如何使具有單個(gè)基因DNA片段得到純化?16.什么是細(xì)菌限制—修飾系統(tǒng)（resｔｒictiｏｎ-modiｆicａt(yī)ｏｎsystem,R－Ｍsystｅm)17.細(xì)菌限制—修飾系統(tǒng)有什么意義?１８．說(shuō)明限制性內(nèi)切核酸酶命名標(biāo)準(zhǔn)關(guān)鍵點(diǎn)。1９.Ⅰ類限制酶具有哪些特點(diǎn)?在基因工程中有什么作用？2０．Ⅲ類限制酶有哪些特點(diǎn)？21．何謂限制性內(nèi)切核酸酶切割頻率?22．什么是限制性內(nèi)切核酸酶星號(hào)活性?受哪些因素影響?23．雙酶消化法（douｂｌedigeｓｔs)繪制限制性內(nèi)切核酸酶酶譜原理。24.什么是ＤNＡ多態(tài)性（DNApoｌymorpｈiｓm）?25．限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(restｒiｃtｉonfragmeｎtlengthpolymoｒphism，ＲFＬP）。2６.計(jì)算下列三種酶各自在某染色體DＮＡ序列上辨認(rèn)位點(diǎn)間平均距離：ＡｌuⅠ：5’ＡGＣＴ3”EcoRⅠ：5’ＧＡATTC３’3TCGA５’３’CＴTAGＧ５’ＡcyⅠ:5’GPuCGPyC３’３’CＰyＧＣPu５’(注：Ｐｙ=任何一個(gè)嘧啶；Pｕ=任何一個(gè)嘌呤)圖15.1酶切電泳圖譜1～2：HindⅢ切割；3～4：ＥcoRV切割；5～6：HindⅢ+ＥcoRV；圖15.1酶切電泳圖譜1～2：HindⅢ切割；3～4：ＥcoRV切割；5～6：HindⅢ+ＥcoRV；1、3、5是質(zhì)粒DNA：2、4、6是15號(hào)克隆。圖15.2用EcoRⅠ、HpaⅡ單獨(dú)切割及用這兩種酶混合切割30kbBamHⅠ片段產(chǎn)生DNA帶(1)繪制具有插入片段和不含插入片段時(shí)pＢPl限制性圖譜，并標(biāo)明四環(huán)素抗性基因位置—；(2)假如用克隆在另一個(gè)和pBP1完全不同樣源載體上四環(huán)素抗性基因作為探針，進(jìn)行Souｔheｒn印跡雜交，估計(jì)上述電泳圖會(huì)出現(xiàn)什么樣雜交帶?（３)假如用克隆１5果蠅DNＡ片段作為探針進(jìn)行Ｓouthｅｍ印跡雜交,放射自顯影結(jié)果又是如何?28．為什么大多數(shù)內(nèi)切酶被稱為“限制”酶。29.據(jù)Ｓｃience雜志報(bào)道:一個(gè)關(guān)鍵遺傳疾病可由導(dǎo)致DNＡ中堿基替換誘變劑在體外進(jìn)行人工誘導(dǎo)。設(shè)計(jì)一個(gè)快速用以鑒定疾病基因型檢測(cè)方法。3０．為了繪制長(zhǎng)為３.0kbBａmHⅠ限制性片段限制性圖譜，分別用ＥcoＲⅠ、HpａⅡEcoＲⅠ十HpaⅡ消化這一片段三個(gè)樣品，然后通過(guò)凝膠電泳分離DＮＡ片段，溴化乙錠染色后觀測(cè)DNＡ帶型(圖１5.2)。請(qǐng)依據(jù)這些結(jié)果,繪制一個(gè)限制性圖譜，要標(biāo)明E.coRⅠ和ＨｐaⅡ辨認(rèn)位點(diǎn)間相對(duì)位置，和它們之間距離(kｂ）。31.1９6７年，有5個(gè)實(shí)驗(yàn)室?guī)缀跬瑫r(shí)獨(dú)立發(fā)現(xiàn)了DNA連接酶，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)有什么特點(diǎn)？３2.簡(jiǎn)述DNＡ和ＲNA連接酶催化反映機(jī)制。3３.影響DNA連接酶催化連接反映因素有哪些？3４．什么是Klenｏw酶?有哪些活性?在基因工程中有什么作用?35．如何運(yùn)用Ｔ４DNＡ聚合酶制備3’隱含末端或雙鏈平末端?36．如何運(yùn)用T4DNA聚合酶進(jìn)行雙鏈DNA3’末端標(biāo)記?3７.如何運(yùn)用T4DNA聚合酶制備平末端?3８．反轉(zhuǎn)錄酶有兩種類型,一是起源于禽類骨髓母細(xì)胞瘤病毒(ＡMY,aviammyeｌoblａstoｓiｓｖｉrus)，另一個(gè)起源于鼠類莫洛尼氏白血病毒（Ｍ—MLV,Ｍolｏneymｕrｉｎeleukｅｍｉaviｒｕs)，它們之間有什么不同樣?３9．和E.ｃoliRNA聚合酶相比,細(xì)菌噬菌體SP６RNA聚合酶、T７ＲNA聚合酶和T３RNA聚合酶具有哪些優(yōu)越性？40.什么是多核苷酸激酶向前反映和互換反映?4１．細(xì)菌堿性磷酸酯酶和小牛腸堿性磷酸酯酶有什么不同樣?在基因工程中有什么用途?42.λ外切核酸酶(lａｍbdaexonucleaｓe）基礎(chǔ)活性是什么?在基因工程中有什么應(yīng)用?4３．Mｎ2+、Mg2+對(duì)DＮaseⅠ（deｏxyriｂonｕcｌeaｓｅⅠ)活性有什么影響?ＤＮaseⅠ在基因工程中有什么作用?４4．比較S1-Ｍａppiｎg和Ｆooｔprintiｎg在原理上、方法上、應(yīng)用上有何不同樣？4５.什么是復(fù)制子(ｒｅpｌｉｃon)？４6.什么是質(zhì)粒相容性?什么是不相容群?機(jī)制是什么？47.什么是質(zhì)粒帶動(dòng)轉(zhuǎn)移?4８.說(shuō)明變性定位法和限制性內(nèi)切核酸酶定位法研究質(zhì)粒復(fù)制起點(diǎn)原理。49．Co１Eｌ衍生質(zhì)?？截悢?shù)調(diào)整機(jī)理機(jī)理是什么？５０．R１質(zhì)?？截悢?shù)受到如何調(diào)整控制?５1.質(zhì)粒如何維持在細(xì)胞中穩(wěn)定?5２．引發(fā)質(zhì)粒不相容性關(guān)鍵因素是什么？53．由于基因工程是人為改變遺傳信息操作，所以必需注意被操作基因安全,進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控，質(zhì)粒載體安全性是十分關(guān)鍵。請(qǐng)問(wèn)質(zhì)粒載體安全條件包含哪多個(gè)方面?54.請(qǐng)指出質(zhì)粒pSC101部分生物學(xué)特性(包含結(jié)構(gòu)和遺傳)及在基因工程中作用。55.自然界中具有抱負(fù)條件質(zhì)粒載體為數(shù)不多，即使是Co1E1和pSC1０1這兩個(gè)自然質(zhì)粒也不盡人意,通常需要進(jìn)行改造,請(qǐng)問(wèn)質(zhì)粒改造包含哪些基礎(chǔ)內(nèi)容？５6．質(zhì)粒改造發(fā)展過(guò)程如何?５7.在質(zhì)粒中如何增減酶切點(diǎn)?58．有些人用限制性內(nèi)切核酸酶EｃoRI分別切割松弛型質(zhì)粒Ｃo１E１和嚴(yán)緊型質(zhì)粒pSC１0１(各有一個(gè)切點(diǎn)）,然后重組連接形成一個(gè)雜種質(zhì)粒pSC１34，請(qǐng)推測(cè)這種質(zhì)粒有什么特性和用途。５9.現(xiàn)分離了4種新大腸桿菌Hfr菌株,通過(guò)中止接合實(shí)驗(yàn)，針對(duì)每一菌株擬定了高頻轉(zhuǎn)移標(biāo)記基因和它們進(jìn)入F—受體時(shí)間分別為：標(biāo)記基因和第一次進(jìn)入時(shí)間Hｆｒ１Ｈf(wàn)r2Hfr3Hfr4man13ｍinmaｌ29lys１6pｕr6tｒp6ｍｅt14arｇ９trp３his23thr4maｌ２ｔhr３1pｕｒ3uvr2０hｉs32lac２3gaｌ１４(gaｌ、lac、ｍal、mａn不能發(fā)酵半乳糖、乳糖、麥芽糖和甘露糖；ａrｇ、hiｓ、mｅt、trp生長(zhǎng)需要精氨酸、組氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、嘌呤和色氨酸；ｕvｒ：紫外線敏感)。任何沒有給出標(biāo)記所有是不能高頻轉(zhuǎn)移。上述數(shù)據(jù)可以說(shuō)明大腸桿菌染色體是環(huán)狀嗎?以分鐘表達(dá)圖距構(gòu)建一個(gè)大腸桿菌染色體連鎖圖。假定整個(gè)染色體用了100分鐘轉(zhuǎn)移,并且蘇氨酸被認(rèn)為在0分鐘或1０O分鐘處。60．YAC克隆載體常出現(xiàn)哪些問(wèn)題?61．為什么野生型λ噬菌體DNA不宜作為基因工程載體？62．什么是藍(lán)白斑篩選法?６3.藍(lán)白斑篩選法為什么也會(huì)有假陽(yáng)性?6４.什么是ｃⅠ篩選法？６5．λ噬菌體載體具有哪些優(yōu)點(diǎn)和局限性?6６.什么是M13IG序列區(qū)？有何特點(diǎn)和功效?６7．將野生型M13改導(dǎo)致基因工程載體，一方面是進(jìn)行酶切位點(diǎn)改造,請(qǐng)問(wèn)M１3中ＥcoＲⅠ最初是如何引入?6８.以置換型λ噬菌體作為載體進(jìn)行克隆時(shí),為什么說(shuō)可以形成噬菌斑就一定是重組體?6９.Ｍ１３系列載體具有哪些優(yōu)缺陷?７0．粘粒載體具有哪些特點(diǎn)和局限性?71.輔助噬菌體DNＡ和相應(yīng)噬菌粒是如何協(xié)同工作？7２.克隆DNA在質(zhì)量上有什么規(guī)定？73．為什么從細(xì)胞中分離ＤNA時(shí)往往會(huì)斷裂?74.為什么苯酚要重蒸飽和后才干用于DNＡ分離？７５．為什么氧化變色酚不能直接用于ＤNＡ分離?應(yīng)如何解決?7６.在DNA分離過(guò)程中,酚通常和氯仿聯(lián)合使用,即使不聯(lián)合使用也要在苯酚抽提后用氯仿再抽提一次,為什么?77．說(shuō)明溴化乙錠—氯化鉤密度梯度離心(ethｉdｉuｍbrｏmide-cａesiumchlｏrｉdegrａdｉentcenｔrｉfugaｔiｏn)純化DＮA原理。7８．采用什么方法保證ＤNA化學(xué)合成定期性和專一性？79．何謂簡(jiǎn)并引物(degｅｎeratｅｐrimer)？８０．簡(jiǎn)并引物設(shè)計(jì)通常標(biāo)準(zhǔn)是什么?81.雙脫氧法（dideoxyｎucleｏｔｉdｅmethod)測(cè)序基礎(chǔ)原理是什么?82．在古生物學(xué)中,尚不知道恐龍是否是溫血爬行動(dòng)物，而不像今天變溫爬行動(dòng)物。假如你得到部分恐龍DNA,你如何通過(guò)PCR和基因克隆來(lái)檢測(cè)恐龍是否是溫血爬行動(dòng)物?83．假如知道某一基因功效及其相應(yīng)蛋白質(zhì)氨基酸序列組成,可以通過(guò)何種方法克隆該基因?8４.何謂定位克隆(poｓitiｏｎalｃｌoｎinｇ)？８5.何謂染色體步移(chｒomosomewａlkｉng)?８6.在染色體步移中,用哪些方法取得克隆末端?8７．何謂表型克隆(phｅnotypeｃｌｏｎiｎg）?88.什么是基因文庫(kù)?89.什么是基因組文庫(kù)(genomｉｃliｂraｒY)?構(gòu)建基因組文庫(kù),包含哪些基礎(chǔ)過(guò)程?它同遺傳學(xué)上基因庫(kù)有什么不同樣?９0.什么是ｃDNA文庫(kù)(comｐleｍenｔDＮAｌiｂraly）?同基因組文庫(kù)有何差異?９1．粘性末端連接法是最常見連接方法,具有很多優(yōu)點(diǎn)，但是也有部分局限性,請(qǐng)指出這些局限性之處,９２．什么是同聚物加尾連接法(homoｐoｌymertailsjoinｉng)？用何種方法加尾？具有哪些優(yōu)缺陷?93．何謂接頭連接法（Iinkeｒligａｔion)?９4．什么是同裂酶?為什么說(shuō)用同裂酶進(jìn)行體外重組效率最高?95.如何使用甲基化酶對(duì)克?。腘A進(jìn)行保護(hù)?有什么意義？９6.何謂稀有酶?(舉例說(shuō)明）9７．為了大量取得很多用于生化鑒定產(chǎn)物,你想將擬南芥中一個(gè)序列已知、編碼單體酶蛋白基因在單細(xì)胞微生物中表達(dá)，你如何保證最終能得到產(chǎn)物?9８.若在進(jìn)行DNA重合群分析時(shí),你發(fā)現(xiàn)在一個(gè)編碼有價(jià)值但不穩(wěn)定蛋白質(zhì)可讀框以后,緊接著另一個(gè)可讀框，它可在蛋白質(zhì)C末端加上一個(gè)穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。舉出最少兩種取得被修飾蛋白產(chǎn)物方法。99.某一質(zhì)粒載體具有Tetr和Kａｎr表型,在Kaｎ抗性基因內(nèi)有一BglⅠ切點(diǎn)?，F(xiàn)用BｇｌⅠ切割該載體進(jìn)行基因克隆,問(wèn):(1)轉(zhuǎn)化后涂皿時(shí)應(yīng)加什么樣抗生素？(2)培養(yǎng)后長(zhǎng)出菌落具有什么樣抗性基因型？(3)如何運(yùn)用抗性改變篩選到具有插人片段重組體?1００．限制性內(nèi)切核酸酶ＢamＨⅠ和PｓｔⅠ切割某一DNA序列，結(jié)果示于圖2０．１。圖20.１BoｍHⅠ和PｓtⅠ辨認(rèn)序列處切割，只顯示辨認(rèn)位點(diǎn)核苷酸序列(1)指出被切割ＤNA分子5’端和３’端;(2）假如你將切割后DNA同DＮA聚合酶、4種dＮTP在一起溫育，這些DNA末端會(huì)有什么樣改變?（3）通過(guò)B中反映后,你還可以用T4DＮA連接酶將BaｍHⅠ末端連接起來(lái)嗎?PstⅠ末端呢?（Ｔ4DNA連接酶可以連接平末端和黏性末端）(4)(3）中連接后,可以重新形成BamHI位點(diǎn)嗎？ＰstI位點(diǎn)呢？１0１．什么是遺傳學(xué)檢測(cè)法?1０2.以ｐB(yǎng)R3２2ＤＮA作為載體,從四環(huán)素抗性基因區(qū)克隆外源DＮＡ?xí)r,可采用環(huán)絲氨酸富集法篩選重組體,說(shuō)明其基礎(chǔ)原理和基礎(chǔ)操作過(guò)程。１０3.放射性抗體檢測(cè)法(radioactiveaｎtiｂoｄyteｓt)基礎(chǔ)原理是什么?１04.何謂液相雜交？舉例說(shuō)明在分子生物學(xué)中應(yīng)用。1０5.什么是活體標(biāo)記法(inｖiｖoｌabｅlｉng）?106．單鏈ＲNA作為探針，具有哪些單鏈ＤNA探針?biāo)鶝]有優(yōu)點(diǎn)?107.什么是隨機(jī)引物(randoｍｐrimeｒ）?如何標(biāo)記DＮA?1０８.良好固相支持物必需具有哪些優(yōu)良特性?109.以硝酸纖維素濾膜(nｉtrocelｌulｏsefｉltermｅｍbrａne）作為雜交固相支持物具有哪些優(yōu)缺陷?110．什么是印跡(bloｔtｉng)雜交?１１1.什么是斑點(diǎn)雜交(ｄothyｂridiｚａt(yī)ioｎ)和狹縫雜交(slｏthｙbridiｚａt(yī)lｏn）?11２．什么是原位菌落雜交(colｏnｙｈybｒidizatｉoｎ）？1１3.說(shuō)明Southｅrn雜交原理和方法。114.Northern印跡和Southern印跡有什么不同樣?11５．建立了一個(gè)基因文庫(kù)后,如何鑒定一個(gè)攜帶目的基因克隆?１１6．說(shuō)明原核生物基因表達(dá)正控制誘導(dǎo)型(pｏsitiveiｎducibleｃonｔrol)和負(fù)控制阻遏型（Neｇative－ｒepresibleconｔrol）調(diào)控遺傳機(jī)理。117．一個(gè)四核苷酸序列DNA分子，經(jīng)羥胺解決后，再通過(guò)兩次復(fù)制，會(huì)產(chǎn)生什么樣DNA分子？(5分)118．有一段多肽鏈Ｃ端氨基酸殘基Tｙｒ－Prｏ-Ａsn－Val-Thr－Cys－Glu，其相應(yīng)DＮA序列為（ＳS-1）ＧATAＡGCGTGＣATGＴAAGＣＣCCＡT（SS－2）CTATＴCＧＣＡCGTAＣATTCGGＧGＴA119.已知E.Cｏli基因組ＤNA具有4．2×106bp,Ｃot／2為４。雞管狀細(xì)胞內(nèi)DNＡ具有7×108,其復(fù)性動(dòng)力學(xué)曲線為:請(qǐng)求出雞細(xì)胞DＮＡ中，中度反復(fù)序列組分每一反復(fù)單位核苷酸？及反復(fù)頻率?1２0.將一個(gè)重組質(zhì)粒PＭR1分別感染三個(gè)被λphagｅ溶原E.cｏlｉ菌株（三菌株差異為λpｈaｇｅpRoR區(qū)段分別為或w．t或ｏR1—或oR2—),培養(yǎng)于含ONPG（鄰硝基苯—β—半乳糖苷）培養(yǎng)皿中，在加入不同樣ＩPＴＧ(異丙基—β—D—硫代半乳糖苷，類似于乳糖,作為效應(yīng)物分子)培養(yǎng)皿中，檢測(cè)被LacＺ酶分解OＮPＧ黃色色度，并換算成Z酶酶活，請(qǐng)依據(jù)測(cè)定結(jié)果鑒定這三條曲線分別代表哪一個(gè)測(cè)驗(yàn)菌株？為什么？121．某一生物DNAchemｉcａiｃｏｍｐlexity=8.８２×108bp,復(fù)性動(dòng)力學(xué)研究表白約有40％ＤNＡ其Coｔ(1／2）＝5,請(qǐng)較具體地說(shuō)明這部分DＮA特點(diǎn)。（E.cｏliDNＡkineｔｉcｃｏｍpｌexitｙ=chemｉｃalcomplexitｙ=4.2×１08bｐ,Ｃot（1/２)=4）1２2．分別說(shuō)明λphａｇe以下突變型表現(xiàn)型并簡(jiǎn)述其分子機(jī)理：λ[cⅠ]—,λ[cⅡ］—,λ[hfl]—，λ[cro]—１2３.說(shuō)明ｃｏnsｔitutivespliciｎg和ａlternatiｖesplicing,cis-sｐlｉcing和trａnｓ-spｌｉcｉｎg之間在概念及機(jī)制上區(qū)分。１24．Ｅ.Coｌi阿拉伯糖（Arabinｏse)分解酶操縱子(ａraoperon)調(diào)整基因I發(fā)生突變后，即使在培養(yǎng)基中加入效應(yīng)物(Arabｉnｏsｅ)，操縱子仍處在關(guān)閉狀態(tài)。將構(gòu)建i—/Ｉ基因部分二部體E.Ｃoli培養(yǎng)在具有阿拉伯糖培養(yǎng)基中，操縱子處在開放狀態(tài)。請(qǐng)說(shuō)明araｏperon調(diào)控類型,并推測(cè)i—突變基因基因型。(簡(jiǎn)述推論理由)１２5．簡(jiǎn)述λphagｅ選擇溶原途徑（lyｓogｅnicｐａt(yī)hway)分子生物學(xué)原理。１26.請(qǐng)說(shuō)明一個(gè)運(yùn)用PCＲ技術(shù)進(jìn)行目的基因定點(diǎn)突變技術(shù)路線及原理。127．?dāng)M應(yīng)用蘇云金稈菌中一個(gè)毒素蛋白基因哺育抗蟲作物品種。請(qǐng)?zhí)岢鲆粋€(gè)從基因分離開始到品種推廣為止實(shí)驗(yàn)方案。并指出值得注意關(guān)鍵問(wèn)題。1２８．說(shuō)明不同樣種屬植物基因組共線性發(fā)現(xiàn)理論和實(shí)踐意義。1２9.基因組研究對(duì)作物遺傳改良將會(huì)產(chǎn)生哪些影響？130．你正在克隆一個(gè)基因。現(xiàn)在你己得到了數(shù)個(gè)DNA片段。下一步你將如何從中鑒定出你所盼望得到目的基因。131.談?wù)劵蚬こ袒A(chǔ)環(huán)節(jié)，說(shuō)明關(guān)鍵工具酶在各個(gè)環(huán)節(jié)中作用。1３2.依據(jù)你對(duì)分子克隆載體了解，對(duì)克隆載體類別,用途及各自特殊性加以簡(jiǎn)述。1３3.以E.Coli為例，簡(jiǎn)述其基因重組類型，作用機(jī)理及其在分子生物學(xué)研究中應(yīng)用。１34．如何解釋抗體生成多樣性分子機(jī)理。135．假如你發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新蛋白質(zhì),你將如何進(jìn)行下一步研究?請(qǐng)按前后順序列出基礎(chǔ)方案。１36.應(yīng)用生物技術(shù)創(chuàng)建作物新種質(zhì)有哪些途徑和方法。137.分子標(biāo)記輔助選擇在作物育種中有那些關(guān)鍵作用?如何實(shí)行?1３８.說(shuō)明真核生物前體RNＡ加工類別及機(jī)理。１39．說(shuō)明原核生物和真核生物轉(zhuǎn)錄元件(ｃｉsａnｄtrans）特點(diǎn)。140．簡(jiǎn)述人類基因組研究數(shù)年來(lái)進(jìn)展。1４1.說(shuō)明DNA芯片(含ＯligonucleotｉdｅｃhｉpａｎdcDNＡmｉcroarray）技術(shù)基礎(chǔ)概念和也許用途。１4２.如何擬定細(xì)菌某一個(gè)遺傳表型是由染色體控制還是由質(zhì)?？刂啤?4３.簡(jiǎn)述DNA重組多個(gè)不同樣方法及分子機(jī)理。１４4.比較說(shuō)明原核生物和真核生物在基因表達(dá)水平上異同。145.最少列舉三例(除DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)外）說(shuō)明核酸分子結(jié)構(gòu)研究結(jié)果對(duì)分子生物學(xué)理論發(fā)展關(guān)鍵奉獻(xiàn).146．說(shuō)明生物體保證自身穩(wěn)定遺傳機(jī)制。1４7．說(shuō)明蛋白質(zhì)和DNＡ之間序列非線性相關(guān)因素。148．在核苷酸測(cè)序操作中,運(yùn)用哪多個(gè)途徑分別取得一個(gè)片段兩條單鏈序列?各自理論依據(jù)是什么?試言簡(jiǎn)意賅地加以敘述。14９．到現(xiàn)在為止，在高等生物中依據(jù)性狀表現(xiàn)分離未知產(chǎn)物基因采用哪些途徑？請(qǐng)說(shuō)明多種途徑基礎(chǔ)原理并各舉一例。15０．請(qǐng)以基因組研究新進(jìn)展為例,討論分子生物學(xué)發(fā)展和生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化關(guān)系。1５１.試述作物遺傳資源關(guān)鍵性,何謂作物遺傳資源創(chuàng)新？1５２.運(yùn)用分子標(biāo)記進(jìn)行基因定位遺傳群體有多個(gè)？各有什么優(yōu)、缺陷?15３．就你所熟悉某一作物,簡(jiǎn)述作物雜種優(yōu)勢(shì)研究和運(yùn)用現(xiàn)狀。１54.你對(duì)“基因工程育種”有何評(píng)價(jià)？１55．何謂斷裂基因(spｌｉtgｅne）？何謂重合基因（overlａppiｎggene）?它們?cè)谏镞M(jìn)化和適應(yīng)上有何意義?156.何謂分子標(biāo)記?分子標(biāo)記種類有哪些?可以開展哪些領(lǐng)域研究？15７.自花授粉作物和異花授粉作物育種方法有何異同?數(shù)量性狀如何進(jìn)行改良?１58．在提取由ＣolEI所衍生質(zhì)粒(如ｐB(yǎng)Ｒ32２)時(shí)，常在培養(yǎng)攜帶質(zhì)粒大腸桿菌搖瓶中加入一定濃度氯霉素或壯觀霉素以擴(kuò)增質(zhì)粒DNA。質(zhì)粒DＮA擴(kuò)增理論依據(jù)是什么?這種質(zhì)粒ＤＮA擴(kuò)增方法為什么并不具有普遍性?１59.Ｅ.CｏｌｉＫ１２菌株限制一修飾系統(tǒng)分別由R.M基因控制現(xiàn)有Ｋ12三個(gè)突變菌系，當(dāng)用Ａ噬菌體分別感染三個(gè)突變株后，將放出噬菌體再去感染這三個(gè)菌株。得到以下不同樣eop值，請(qǐng)鑒定這三個(gè)突變株相關(guān)（R.Ｍ)基因型。放出Ａ原始菌株Ｋ1２－1K1２—２K1２—3K1２-111１K1２—210-２11K１2—３1１1160.現(xiàn)有兩種DNA片段:1）ＡTTＣＣAGGATCCTGGＣACCＧTAＡGGTCCＴAGGACCGTGGC2）CＧATＣＴCCTＡＧATCTＣACGＣＴAGAGＧATCTＡＧAGＴG分別用形成等列序列同裂酶＜Isｏsｃhizｏmeｒ＞MboI和Sau3A消化后，混合,加入連接酶，會(huì)形成什么樣DNＡ片段。１６1．現(xiàn)有枯草桿菌dnaG基因一個(gè)終止突變型菌株，當(dāng)用HA解決后，會(huì)得到什么結(jié)果?說(shuō)明理由。1６2．下表中,ａ、b、c代表E.coliLacoperoｎ中i、o、z三個(gè)基因。Ａ)依據(jù)不同樣實(shí)驗(yàn)菌株在效應(yīng)物有沒有條件下，測(cè)定Z酶表達(dá)結(jié)果，說(shuō)明ａ、b、c各代表哪個(gè)基因。B)用i、ｏ、z三個(gè)基因代號(hào)寫出第①、⑤菌株也許基因型。菌株基因型有Lａc無(wú)Ｌac①a-b+c+＋+②a＋b+ｃ-＋+③a+b-c＋/F’-a-b+ｃ-＋＋④ａ＋ｂ+c－/F’-a-b－c++－⑤a-b=c＋/F’-a=b-c-++1６3.一位科學(xué)研究λ噬菌體一個(gè)蛋白質(zhì)功效時(shí),取得了以下多個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。Ａ、當(dāng)用ＨA解決野生型λ噬菌體后,分離得到一個(gè)突變體ａ（mu＋ａ)，它只產(chǎn)生該蛋白質(zhì)一個(gè)片段。B、當(dāng)用5Bru處量muta后，又分離出兩個(gè)突變體,ｍu+b,mｕ+c，它們也只產(chǎn)生和muta后相同長(zhǎng)度該蛋白質(zhì)一個(gè)片段。Ｃ、ｍｕ+a,ｍu+b,mu＋c分別可以在不同樣Su+基因型細(xì)胞內(nèi)合成該蛋白質(zhì)正常多肽鏈。基因型Su－Su2+Su４＋Ｓu6＋Su-→Ｓｕ+DNA序列突變5°CGA３’3°ＧＣT5’↓５°CTＡ3’3°ＧAT５’TTGAAC↓TTAＡＡTCCAGGT↓TＣAAＧTmu+aｍu+bmu+ｃ————+—+————+Ｄ、當(dāng)感染有ｍｕ+aＳu４+細(xì)菌分別和感染有mu＋bSｕ2＋感染有ｍu＋cSu6+細(xì)菌結(jié)合后,沒有野生型重組λ噬菌體產(chǎn)生，不能在野生型Su-受菌體內(nèi)繁殖,但當(dāng)感染有mu＋bSu2+和感染有mu+cSｕ6+細(xì)菌結(jié)合后很少數(shù)野生型λ噬菌體產(chǎn)生。請(qǐng)推測(cè)ｍu+a,mu+b,mｕ+c分別在su４+、sｕ2+、ｓu6+細(xì)菌內(nèi)產(chǎn)生蛋白質(zhì)和野生型λ合成該蛋白質(zhì)差異，并解釋A、B、C、Ｄ結(jié)果。（CAA為谷氨酰胺密碼子:ＵＣG為絲氨酸密碼子;UGG為色氨酸密碼子)164．大豆phａseａlｉn(菜豆朊)是在種子內(nèi)特異表達(dá)一個(gè)分泌性蛋白，請(qǐng)用線段示意出該基因在DNA水平上所有結(jié)構(gòu)區(qū)域，和Pre-mRNＡ，mａt(yī)ｕｒe-mＲNA，多肽鏈相應(yīng)區(qū)域，并標(biāo)明各區(qū)域名稱。(提醒：該基因各區(qū)域包含：Ｐroｍoｔer（含3個(gè)關(guān)鍵Sｉte或Ｂox），Termｉnator,LｅadｅrＳeq.,Ｔｒailerseq.,Sigｎaｌseq.,Chamboｎｒｕｌe,Shine-Ｄaｌｇarnｏｓeq．,２個(gè)Ｉntron,３個(gè)Eｘon,Addｉngtｒaileｒsigｎａler,Ｒepeaｔsｅq.ｉnＣTU．）16５.有些人錯(cuò)誤地認(rèn)為“E．cｏlｉtrpsyntｈetaseoperonｉc突變型是由于ic基因產(chǎn)物可以分解效應(yīng)物分子所形成”,對(duì)的了解是什么？如何用遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)否認(rèn)這一說(shuō)法？16６.用HA解決Ｗ.t枯草桿菌，得到分別兩個(gè)不同樣位點(diǎn)上發(fā)生了無(wú)意突變菌株,mut1,mut2，并證實(shí)這兩個(gè)無(wú)意突變序列不同樣。當(dāng)再用HA解決這兩個(gè)突變株后得到了以下結(jié)果。mｕｔ1muｔ2誘發(fā)DNA水平發(fā)生回復(fù)突變－-誘發(fā)一個(gè)無(wú)意序列變成另一個(gè)無(wú)意序列+-１６7.將E.cｏliＬacopeｒｏn中ＩＰO片段和yｅaｓtＨO基因組成重組DＮA分子和帶Ｌeu+基因質(zhì)粒連接,轉(zhuǎn)化到Y(jié)east2７B菌株中(基因型為HMLaLｅu-ＭAＴαＨMRaSIR．ho)將轉(zhuǎn)化子涂于分別具有Ｌacｔｏsｅ,Maltose,Ｌａctoｓe＋Gluｃose培養(yǎng)皿中,當(dāng)長(zhǎng)出菌苔后,再分別涂上DC１4菌株(ａ結(jié)合型）,DC17菌株(α結(jié)合型)，請(qǐng)鑒定在哪些培養(yǎng)皿中會(huì)出現(xiàn)二倍體雜合菌落，并說(shuō)明推論依據(jù)。27BM27BMal27BLac27BLac+Gluc27BMal27BLac27