C33備案號：8598-2001中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準YY/r0127.9—2001neqIsO7405：1997口腔材料生物學評價第2單元：口腔材料生物試驗方法細胞毒性試驗;瓊脂覆蓋法及分子濾過法Biologicalevaluationofdentalmaterials-Part2:BiologicalevaluationtestmethodofdentalmaterialsCytotoxicityytests：Agardiffusiontandfilteritestrdissusiontest2001-03-12發(fā)布2001-08-01實施國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布

YY/T0127.9-2001前本標準非等效采用國際標準化組織ISO7405—1997《牙科學-用于牙科的醫(yī)療器械生物相容性臨床前評價——牙科材料試驗方法》。本標準主要依據(jù)ISO7405:1997《牙科學——用于牙科的醫(yī)療器械生物相容性臨床前評價——牙科材料試驗方法》第6.1條“瓊脂覆蓋試驗"及第6.2條“分子濾過試驗”。為了便于操作，本標準在試驗操作中作了一些具體規(guī)定及編輯性修改。本標準廢除并替代YY91042一1999《牙科復合樹脂充填材料》附錄A中A2細胞毒性試驗。本標準較前版標準增加了瓊脂夏蓋法，且在試樣制備及評價指標上有所不同。本標準為YY0268—1995《口腔材料生物學評價第1單元：口腔材料生物性能評價導則》提供了具體的方法。本標準從實施之日起，同時代替YY91042-1999《牙科復合樹脂充填材料》附錄A中A2細胞毒性試驗。本標準由國家藥品監(jiān)督管理局提出。本標準由全國口腔材料和器械設備標準化技術委員會歸口、本標準由國家藥品監(jiān)督管理局北醫(yī)醫(yī)療器械質量監(jiān)督檢驗中心負責起草。本標準主要起草人：林紅、劉文一、李盛琳，

YY/T0127.9-2001ISO前育本國際標準由ISO/TC106牙科技術委員會與世界牙科聯(lián)盟(FDI)共同起草,它取代了ISO/TR7405:1984,在技術上進行了修改，并轉化成本國際標準。此國際標準是有關用于牙科醫(yī)療器械的牙科材料的臨床前試驗。它是從ISO/TR7405:1984《牙科材料生物學評價》及其附件發(fā)展而來，并取代ISO/TR7405.使用時應與ISO10993醫(yī)療器械生物學評價》系列標準結合使用。此標準在許多重要方面與ISO/TR7405不同。首先它含有一些只針對牙科材料的具體的試驗方法。以前在ISO/TR7405中的許多試驗方法現(xiàn)在已包含在ISO10993系列標準中，故在此標準中不包含這些方法的細則。其次，僅僅是委員會成員國認為已有足夠發(fā)表的資料的試驗方法才包含在本標準中。第三，推薦試驗方法時，首先要考慮盡可能地減少使用動物的原則，

中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準口腔材料生物學評價第2單元：口腔材料生物試驗方法YY/T0127.9-2001細胞毒性試驗：瓊脂覆蓋法及分子濾過法neqISO7405：1997代替YY91042-1999附錄AA2Biologicalevaluationofdentalmaterials-Part2.BiologicalevaluationtestmethodofdentalmaterialsCCytotoxicitytests：Agardiffusiontestandfilterdissusiontest1范國本標準規(guī)定了牙科材料細胞毒性試驗方法瓊脂覆蓋法及分子濾過法本標準用于檢測牙科材料在通過瓊脂或瓊脂糖擴散后或通過乙酸纖維素濾膜擴散后的非特異性細胞毒性。2引用標準下列標準所包含的條文·通過在本標準中引用而構成為本標準的條文。本標準出版時，所示版本均為有效。所有標準都會被修訂，使用本標準的各方應探討使用下列標準最新版本的可能性。GB/T16886.5—1997醫(yī)療器械生物學評價第5部分：細胞毒性試驗：體外法ISO7405:1997牙科學一—用于牙科的醫(yī)療器械生物相容性臨床前評價-牙科材料試驗方法3細胞系ATCCCCLI（NCTCclone929）小鼠成纖維細胞或ATCCCCL2（Hela）人上皮細胞系】。如能證明反應的重復性和精確性，也可選用其他細胞系。注：其他替代細胞系見附錄A。4培養(yǎng)基及染色液4.1培養(yǎng)基4.1.1生長培養(yǎng)液符合選定細胞系生長要求的含血清或無血清培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中含對試驗無影響的抗生素.PH7.2～7.4。用過濾法滅菌培養(yǎng)液?！救纾褐苽?×培養(yǎng)基，將90mLEagle'sMEM(不含L谷氨酰胺)的pH調至7.2，使用前加10mL小牛血清，1mL100×非必要氮基酸(L-谷氨酰胺)和1mL抗菌素。4.1.2瓊脂培養(yǎng)基4.1.2.1制備2×生長培養(yǎng)液配制雙倍濃度的基礎培養(yǎng)液(2×)。過濾法滅菌。例如：將2倍量的Eagle'sMEM(不含