農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的測(cè)定農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（杭州）農(nóng)藥研究分析，高人云集杭州，出自浙江國(guó)家環(huán)保局南京環(huán)境科學(xué)研究所——蔡道基院士中國(guó)農(nóng)科院茶葉科學(xué)研究所——陳宗懋研究員浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)植保系環(huán)境毒理研究所——樊德方、劉乾開(kāi)教授浙江省農(nóng)科院——葉興祥、于志光研究員中國(guó)農(nóng)科院水稻研究所——梁天錫研究員浙江大學(xué)環(huán)資學(xué)院副院長(zhǎng)——?jiǎng)⒕S屏教授副院長(zhǎng)——朱利中教授副院長(zhǎng)——徐建明教授浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院植保系——朱國(guó)念教授中國(guó)農(nóng)科院副院長(zhǎng)——王運(yùn)浩研究員安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)副校長(zhǎng)——岳永德教授吉林農(nóng)大食品系分析中心主任——范志先教授浙江省現(xiàn)在的幾家從事農(nóng)殘檢測(cè)的部門(mén)（杭州市）農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試檢中心（杭州）農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥質(zhì)量與殘留檢測(cè)中心（杭州）農(nóng)業(yè)部稻米及制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)中心農(nóng)業(yè)部茶葉質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心中國(guó)農(nóng)科院茶葉研究所浙江省出入境檢驗(yàn)檢疫局浙江省技術(shù)監(jiān)督局中國(guó)土畜產(chǎn)浙江茶葉進(jìn)出口公司農(nóng)藥殘留測(cè)定面臨的挑戰(zhàn)農(nóng)藥的多殘留分析

———一個(gè)樣品中要求檢測(cè)40-80種不同的農(nóng)藥殘留組份快速

———盡量縮短分析時(shí)間，快速告知檢測(cè)結(jié)果靈敏度高

———隨著國(guó)內(nèi)外“食品安全性”檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的提高，要求的檢測(cè)限愈來(lái)愈低，要求檢測(cè)儀器及方法有足夠高的靈敏度。準(zhǔn)確度

———要求方法的準(zhǔn)確度能符合標(biāo)準(zhǔn)的要求檢測(cè)實(shí)例樣品名稱：烏龍茶，普洱茶樣品編號(hào)：2002-F-357-358背景材料2002年5月底，廣州某單位一批出口茶葉，依照日本客戶要求檢測(cè)有機(jī)氯，有機(jī)磷及菊酯類共33種農(nóng)殘組份，由農(nóng)業(yè)部介紹，承擔(dān)該項(xiàng)任務(wù)。農(nóng)殘檢測(cè)中的幾個(gè)基本概念靈敏度準(zhǔn)確度精確度最低檢測(cè)量CCTB/T5009.1-1996）

最小檢出量（ng）×樣本 溶液定容體積（ml）最低的檢出濃度（mg/kg）＝樣本溶液進(jìn)樣體積（ul）×稱樣重量（g）色譜儀最低響應(yīng)值為S=3N準(zhǔn)確度-回收率測(cè)得的試樣中農(nóng)藥殘留量與試樣中實(shí)際含量的符合度在農(nóng)藥殘留量檢測(cè)工作中待測(cè)試樣中農(nóng)藥殘留量真實(shí)值是未知的，因此，無(wú)法判斷所采用方法的準(zhǔn)確度，通常采用模擬的方法，在空白樣本中添加一定量的待測(cè)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)樣品，制成已知含量的樣本，然后按擬定的方法對(duì)樣本進(jìn)行提取、凈化和測(cè)定，所得到的實(shí)測(cè)值與已知值比較，實(shí)測(cè)值對(duì)已知值的百分率即為方法添加回收率。它是衡量農(nóng)藥殘留量檢測(cè)方法準(zhǔn)確度的重要指標(biāo)。添加回收率應(yīng)以接近100％為最佳，但是，由于試樣種類和農(nóng)藥品種多，以及雜質(zhì)干擾、操作誤差等原因，則要求添加回收率為70－110％，平均回收率＞80％，即符合要求。精密度－變異系數(shù)同一種檢測(cè)方法對(duì)同一組試樣進(jìn)行多次重復(fù)測(cè)定，其測(cè)定結(jié)果之間的偏差程度即為方法的精確度或精密度。不同添加回收率濃度范圍，要求允許變異系數(shù)大致如下：添加濃度（mg/kg)變異系數(shù)1-1010-250.1-125-500.01-0.150-1000.001-0.01100-2001、茶葉2、水果3、甘藍(lán)類蔬菜4、茄果類蔬菜5、白菜類蔬菜7、稻米浙江省綠色農(nóng)產(chǎn)品認(rèn)定產(chǎn)品安全性檢測(cè)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)浙江水產(chǎn)品上海推薦會(huì)和綠色產(chǎn)品檢測(cè)項(xiàng)目農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（杭州）獸藥檢測(cè)項(xiàng)目磺胺甲惡唑、甲氧芐啶、磺胺嘧啶、已烯雌酚、甲睪酮、氯霉素、鏈霉素、慶大霉素、甲砜霉素、土霉素、鹽酸四環(huán)素、鹽酸金霉素、磺胺嘧啶、諾氟沙星、鹽酸克倫特羅、呋喃唑酮、伊維菌素、喹乙醇2002年8-9月農(nóng)業(yè)部“省會(huì)城市-杭州市蔬菜定點(diǎn)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留和硝酸鹽污染情況監(jiān)督抽查”總經(jīng)費(fèi)：16萬(wàn)總樣品數(shù)：約200個(gè)抽樣：基地、批發(fā)市場(chǎng)、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)有機(jī)磷品種：敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂(lè)果、樂(lè)果、毒死蜱、馬拉硫磷、對(duì)硫磷本實(shí)驗(yàn)室完成情況1、采用方法：美國(guó)加州食品農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥多殘留快速掃描方法（MRSM）2、方法概述：

30克樣品于250ml錐形瓶中，加入50ml乙腈（視樣品量加適量水），勻漿機(jī)中高速勻漿2分鐘。布氏漏斗抽濾

100ml具塞量筒內(nèi)放入5-7.5克NaCl,倒人濾液，蓋上塞子，劇烈震蕩1分鐘，在室溫下靜置約10分鐘，分層。取出25ml于平底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)濃縮蒸發(fā)器上濃縮近干，3ml丙酮定容，VarianCP-3800氣相色譜PFPD測(cè)定30克樣品于250ml錐形瓶中，加入50ml乙腈（視樣品量加適量水），勻漿機(jī)中高速勻漿2分鐘。布氏漏斗抽濾。100ml具塞量筒內(nèi)放入5-7.5克NaC1，倒入濾液，蓋上塞子，劇烈振蕩1分鐘，在室溫下靜置約10分鐘，分層。取出25ml于平底燒瓶中，旋轉(zhuǎn)濃縮蒸發(fā)器上濃縮近干，3ml丙酮定容，VarianCP-3800氣相色譜PFPD測(cè)定儀器配置

1.瓦里安CP3800全氣路電子流量控制獨(dú)立三通道的氣相色譜儀2.2個(gè)1177分流/不分流毛細(xì)柱進(jìn)樣口3.1個(gè)1079程序升溫PTV進(jìn)樣口4.脈沖火焰光度檢測(cè)器PFPD5.電子捕俘檢測(cè)器ECD6.氮磷檢測(cè)器TSD7.CP841021位自動(dòng)進(jìn)樣器8.化學(xué)工作站回收率說(shuō)明：敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂(lè)果、樂(lè)果、毒死蜱，馬拉硫磷、對(duì)硫磷、9個(gè)有機(jī)磷農(nóng)殘混合標(biāo)樣PFPD測(cè)定結(jié)果，標(biāo)樣濃度0.1－0.2ppm說(shuō)明：上述9種有機(jī)磷農(nóng)殘標(biāo)樣（0.1-0.2ppm），加入黃瓜基質(zhì)中，PFPD的測(cè)定結(jié)果。（樣品編號(hào)：1050-1）說(shuō)明：濃度為0.1-0.2ppm的敵敵畏，甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂(lè)果、樂(lè)果、毒死蜱，馬拉硫磷、對(duì)硫磷等9種農(nóng)殘標(biāo)樣加入黃瓜基質(zhì)中后PFPD測(cè)定結(jié)果。樣品編號(hào)：1111-1色譜柱型號(hào)

VarianCP-SIL-24CB（MS）30mx0.25mmIDx0.5umSPB-608:30mx0.25mmIDx0.25umSPB-50:30mx0.32mmIDx0.25um程序升溫TRateHoldTotal(C0)(ml/min)(min)(min)801.001.0013050.02.004.0018050.03.008.002205.08.0024.0026020.04.0030.00國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)際組織和部分國(guó)家、地區(qū)標(biāo)準(zhǔn)比較2003年蔬菜農(nóng)藥殘留定點(diǎn)監(jiān)測(cè)1.抽檢時(shí)間：1、4、7、9、11月2.抽檢項(xiàng)目：甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂(lè)果、毒死蜱、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、克百威、抗蚜威、氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰酯3.抽檢地點(diǎn)：杭州市集貿(mào)市場(chǎng)及主要蔬菜生產(chǎn)基地采用方法1。NY/T448-2001“蔬菜上有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)方法”2。有機(jī)磷、氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留按GB/T5009.20方法規(guī)定的程序進(jìn)行操作。3。擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥殘留按GB/T14929.4方法規(guī)定的程序進(jìn)行操作。用農(nóng)殘快速測(cè)定儀進(jìn)行快速篩選，再用氣相色譜方法進(jìn)行分析有機(jī)磷、氨基甲酸酯農(nóng)藥快速檢測(cè)原理有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制昆蟲(chóng)中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶的活性，造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的積累，影響正常傳導(dǎo)，使昆蟲(chóng)中毒致死，根據(jù)這一昆蟲(chóng)毒理學(xué)原理，用在對(duì)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)中。加入反應(yīng)試劑后，用分光光度計(jì)測(cè)定吸光值隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，判斷蔬菜中含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘毒情況。即乙酰膽堿酯酶+有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥——酶活性被抑制活性被抑制樣本中含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥，乙酰膽堿酯酶+樣本提取液活性正常，中不含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥如以乙酰硫代膽堿（AsCh)為底物，在乙酰膽堿酯酶（AChE)的作用下乙酰硫代膽堿（AsCh)水解成硫代膽堿和乙酸，硫代膽堿和二硫雙對(duì)硝基苯甲酸（DTNB）產(chǎn)生顯色反應(yīng)，使反應(yīng)液呈黃色，在分光光度計(jì)410nm處有最大吸收峰，用分光光度計(jì)可測(cè)得酶活性被抑制程度。（用抑制率表示）優(yōu)點(diǎn)：快速缺點(diǎn)：不夠靈敏農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)最低檢出濃度國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)際組織和部分國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)比較表注：如果沒(méi)有限量值，參見(jiàn)CAC標(biāo)準(zhǔn)。其它蔬菜按最低限量值判定。檢測(cè)條件VarianCP-SIL-24CB（MS）30mx0.25mmIDx0.5umTSDSPB-50:30mx0.32mmIDx0.25umPFPD自動(dòng)進(jìn)樣器：8410甲胺磷檢出樣品的確證TSD：11只TSD-MSD2/11=18.2%TSD-PFPD3 只TSD-PFPD-MSD2/3=66.7%StagesofPFPDOperationPFPDEmissionReactions:SandPvs.HydrocarbonsHCemission(gatedat1-3ms)OH*+C2

?CH*+CO

Sulfuremission(gatedat6-26ms)H+H+S2

?S2*+H2S+S?S2*(second-orderorquadraticresponse)Phosphorusemission(gatedat4-14ms)H+PO?HPO*(firstorderorlinearresponse)PFPDSelectivitybyEmissionDelay(Gating)HydrocarbonandsulfuremissionprofilesasafunctionoftimeSemissionoccurs6msafterignitionandlastsover20ms,whereasHCrelatedemissionoccursquicklyandisoverwithin4msPFPDSelectivitybyWavelength(Filters)Hydrocarbonandsulfuremissionprofilesasafunctionofwavelength.

VarianPFPDusesa340-460nmfilter.SulfurComponentsinDieselFuel1077Injector,200:1Split,1μLinjection,DB-1,30m,0.32mmID,1μmdf,HeCarrierGasat50cm/secat230°C,Detector:200°C,Range10,Attn400PFPDFPD樣品：普洱茶，正已烷提取檢測(cè)器：ECD分析方法的質(zhì)量控制1、分析方法必須經(jīng)過(guò)認(rèn)可或周密的驗(yàn)證。2、分析程序作出明確的規(guī)定，經(jīng)考核核準(zhǔn)的人員才能進(jìn)行分析、測(cè)試，分析結(jié)果計(jì)算和記錄、校核等工作。3、使用質(zhì)量控制樣品。包括經(jīng)用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或其它國(guó)際上公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室參考物質(zhì)。推薦以下幾種質(zhì)量控制樣品：a.不含有待測(cè)物質(zhì)的空白樣品b.待測(cè)物含量等于最高殘留限量或略大于檢測(cè)限或分析方法測(cè)定低限的實(shí)際樣品。c.待測(cè)物含量高于最高殘留限量或高檢測(cè)限或分析方法測(cè)定低限的實(shí)際樣品4、每一次測(cè)試應(yīng)同時(shí)檢測(cè)質(zhì)量控制樣品，包括上述的a.b.c三個(gè)樣品，在條件不允許的情況下，可以只包括a.b樣或a.c樣品。5、用添加樣品檢查回收率、響應(yīng)線性和制作校正曲線。6、主要儀器設(shè)備，應(yīng)能滿足檢測(cè)方法的要求，并要經(jīng)常進(jìn)行校準(zhǔn)和維護(hù)。7、計(jì)算結(jié)果必須詳細(xì)說(shuō)明，其結(jié)果必須符合統(tǒng)計(jì)分析的質(zhì)量要求。農(nóng)藥殘留實(shí)驗(yàn)室規(guī)范農(nóng)藥殘留量檢測(cè)是較復(fù)雜的檢測(cè)技術(shù)。由于待測(cè)樣本中農(nóng)藥含量往往很低，幫要求各檢測(cè)步驟者應(yīng)科學(xué)、嚴(yán)密，方法靈敏度要高；由于待測(cè)農(nóng)藥品種和樣本種類多，故需要采用不同的樣本前處理和測(cè)定方法；由于檢測(cè)步驟多，流程長(zhǎng)，故要求操作人員應(yīng)具有熟練的技術(shù)和豐富的經(jīng)驗(yàn)。農(nóng)藥殘留量檢測(cè)工作特點(diǎn)決定了農(nóng)藥殘留實(shí)驗(yàn)室的特點(diǎn)：具在較豐富經(jīng)驗(yàn)和較高技術(shù)水平的專家；具有先進(jìn)的檢測(cè)儀器和配套設(shè)備；具在最大安全性和最小污染機(jī)會(huì)的條件。技術(shù)人員必須是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn)的分析化學(xué)家，不但要有該領(lǐng)域的專業(yè)知識(shí)，還要具有能勝任該項(xiàng)工作的技能和經(jīng)驗(yàn)，經(jīng)考核合格。1.明確采用的檢測(cè)方法原理及進(jìn)行每一