標準解讀

《LY/T 2745-2016 仁用杏品種鑒定技術規(guī)程 SSR分子標記法》是一項專門針對仁用杏(Prunus armeniaca L.)品種進行準確鑒定的技術標準。該標準采用SSR(簡單序列重復,Simple Sequence Repeat)分子標記技術作為主要手段,以實現(xiàn)對不同仁用杏品種的精確區(qū)分與識別。

在具體操作上,首先需要從待檢測的仁用杏樣品中提取DNA,這一步驟是整個實驗的基礎,要求所提取的DNA純度高、完整性好。接著,依據(jù)已知且適用于仁用杏的SSR引物序列信息,通過PCR(聚合酶鏈反應)擴增目標區(qū)域。這些特定的SSR位點因其高度多態(tài)性而成為品種間差異的良好指示器。完成擴增后,利用凝膠電泳等方法分離并觀察擴增產(chǎn)物,根據(jù)片段大小的不同來判斷各品種間的遺傳差異。


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....

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  • 2016-10-19 頒布
  • 2017-01-01 實施
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文檔簡介

ICS67060

B21.

中華人民共和國林業(yè)行業(yè)標準

LY/T2745—2016

仁用杏品種鑒定技術規(guī)程

SSR分子標記法

Identificationofkernel-usingapricotcultivars—SSRmarkermethod

2016-10-19發(fā)布2017-01-01實施

國家林業(yè)局發(fā)布

LY/T2745—2016

目次

前言

…………………………Ⅰ

范圍

1………………………1

術語和定義

2………………1

原理

3………………………1

儀器設備與主要試劑耗材

4、………………2

溶液配置

5…………………2

核心引物

6…………………2

操作步驟

7…………………2

指紋比對

8…………………3

結果判定

9…………………4

附錄資料性附錄儀器設備與主要試劑耗材

A()、………5

附錄資料性附錄溶液配置

B()…………6

附錄規(guī)范性附錄核心引物

C()…………8

附錄資料性附錄仁用杏品種指紋圖譜鑒定報告書

D()SSR………10

參考文獻

……………………11

LY/T2745—2016

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中國林業(yè)科學研究院提出

本標準由國家林業(yè)局歸口

。

本標準起草單位中國林業(yè)科學研究院經(jīng)濟林研究開發(fā)中心北京林業(yè)大學

:、。

本標準主要起草人傅大立劉夢培秦玥朱高浦趙罕

:、、、、。

LY/T2745—2016

仁用杏品種鑒定技術規(guī)程

SSR分子標記法

1范圍

本標準規(guī)定了利用簡單重復序列分子標記法鑒定仁用杏

(Simplesequencerepeats,SSR)

Armeniacacathayana品種的技術規(guī)程

(D.L.Fuetal.)。

本標準適用于仁用杏品種的分子指紋比對鑒定

SSR。

2術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

21

.

待檢品種testcultivar

待鑒定的仁用杏品種由送檢人提供

,。

22

.

對照品種comparingcultivar

用于與待檢品種進行指紋比對的若干品種待檢品種為新品種則對照品種為近似品種待檢品種

(,;

為假冒品種則對照品種為真品種由送檢人或他人提供

,),。

23

.

核心引物coreprimer

擴增產(chǎn)物具有高度的穩(wěn)定性和一致性沒有干擾譜帶并具有較強鑒別能力可以用于建立仁用杏

(),,

指紋比對的人工合成引物

。

24

.

指紋圖譜SSRfingerprint

采用核心引物或相當于核心引物擴增出的待檢品種和對照品種的片段通過聚丙烯

SSR()DNA,

酰胺電泳或毛細管電泳得到不同大小的片段圖譜

,DNA。

25

.

指紋比對SSRfingerprinting

將待檢品種與對照品種的指紋圖譜進行比對分析待檢品種與對照品種的指紋是否具

SSR,SSR

有差異并確定其大小

,。

3原理

簡單重復序列分子標記通常又稱為微衛(wèi)星標記分布于仁用杏整個基因組的不同位置

(SSR),“”,,

不同品種每個位點上重復單位的數(shù)量可能不同因而形成標記的多態(tài)性由于每個簡單重復序列

,SSR。

兩端的序列是高度保守的單拷貝序列因此可根據(jù)其兩端的序列設計特異引物利用技術對兩條

,,PCR

引物間的重復序列進行擴增通過電泳分離得到大小不同的擴增產(chǎn)物片段經(jīng)熒光染料標記加以

DNA

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