ICS65.100.10X82中華人民共和國國家標準GB/T5413.2-1997嬰幼兒配方食品和乳粉乳清蛋白的測定Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungchildren-Determinationofwheyprotein1997-05-28發(fā)布1998-09-01實施國家技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

GB/T5413.2-1997前本標準參考了日本森水公司的乳清蛋白測定方法。本系列標準從實施之日起，代替GB5413—85。本標準由中國輕工總會提出。本標準由全國乳品標準化中心歸口。本標準負責起草單位：哈爾濱森永乳品有限公司、國家乳制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心。本標準參加起草單位：衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所、浙江省輕工業(yè)研究所、雀巢(中國)投資服務有限公司。本標準主要起草人：于麗坤、張燕杰、趙勤、

中華人民共和國國家標準嬰幼兒配方食品和乳粉GB/T5413.2-1997乳清蛋白的測定代替GB5413-85Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungchildren-Determinationofwheyprotein1范圍本標準規(guī)定了酪蛋白與乳清蛋白含量比率的測定方法本標準適用于嬰幼兒配方食品和乳粉中酪蛋白與乳清蛋白含量比率的測定。2方法提要試樣用SDS-聚苯烯酰膠凝膠電泳（SDS-PAGE.Laemmli法)后.用光密度計對按分子量順序分離開的酪蛋白與乳清蛋白各譜帶進行測定，求得酪蛋白與乳清蛋白的含量比率。3試劑所有試劑，如未注明規(guī)格，均指分析純;所有實驗用水，如未注明其他要求，均指三級水.3.1電泳緩沖液：將Tris(hydroxymethyl)aminomethane7.5g、甘胺酸36g、SDS2.5g溶于蒸雷水中，定容至500mL。使用前以蒸餡水稀釋5倍后使用。3.2SDS試樣緩沖液：0.125mol/LTrsi-鹽酸(pH6.8），體積分數(shù)20%的甘油,4%(m/V)SDS,體積分數(shù)10%2-mercaptoethanol.質(zhì)量分數(shù)0.0025%的溴酚藍（bromophnolblue)。3.3染色劑：質(zhì)量分數(shù)0.1%考馬斯藍R-250(CoomassiebriliantblueR-250),體積分數(shù)10%的甲醇體積分數(shù)7.5%的乙酸。3.4脫色劑：體積分數(shù)10%的甲醇，體積分數(shù)7.5%的乙酸。3.5酪蛋白。3.6精制乳清蛋白(WPC).3.77SDS-PAGE:用梯度凝膠(10%～20%)或同效凝膠。4儀器常用實驗室儀器及：4.1平板式電泳槽。4.22供電設(shè)備。4.3光密度計。5操作步臻5.11樣液的制備將試劑按蛋白質(zhì)10～20rg/gL的