紫外可見分光光度計基本知識2023/2/51姓名：于貝貝學(xué)號：662085216150學(xué)院：先進化學(xué)制造研究院

紫外-可見分光光度法紫外的發(fā)展史儀器的原理儀器組成固體紫外與液體紫外的區(qū)別紫外應(yīng)用實例2023/2/52發(fā)展簡史1、早在1665年，牛頓首次通過分光光度法發(fā)現(xiàn)太陽光是復(fù)合光的事實。2、1815年夫瑯和費(J.Fraunhofer)仔細觀察了太陽光譜，發(fā)現(xiàn)太陽光譜中有600多條暗線，并且對主要的8條暗線標(biāo)以A、B、C、D…H的符號。這就是人們最早知道的吸收光譜線，被稱為“夫瑯和費線”。3、朗伯(Lambert)早在1760年就發(fā)現(xiàn)物質(zhì)對光的吸收與物質(zhì)的厚度成正比，后被人們稱之為朗伯定律；比耳(Beer)在1852年又發(fā)現(xiàn)物質(zhì)對光的吸收與物質(zhì)濃度成正比，后被人們稱之為比耳定律。在應(yīng)用中，人們把朗伯定律和比耳定律聯(lián)合起來，又稱之為朗伯—比耳定律。2023/2/536、美國Beckman公司于1945年，推出世界上第一臺成熟的紫外可見分光光度計商品儀器5、1862年密勒(Miller)應(yīng)用石英攝譜儀測定了一百多種物質(zhì)的紫外吸收光譜。他把光譜圖表從可見區(qū)擴展到了紫外區(qū)，并指出：吸收光譜不僅與組成物質(zhì)的基團質(zhì)有關(guān)。4、1859年本生(R．Bunsen)和基爾霍夫(G．Kirchhoff)發(fā)現(xiàn)由食鹽發(fā)出的黃色譜線的波長和“夫瑯和費線，；中的D線波長完全一致，才知一種物質(zhì)所發(fā)射的光波長（或頻率），與它所能吸收的波長（或頻率）是一致的。發(fā)展簡史2023/2/54

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它是利用物質(zhì)的分子或離子對某一波長范圍的光的吸收作用，對物質(zhì)進行定性分析、定量分析及結(jié)構(gòu)分析,所依據(jù)的光譜是分子或離子吸收入射光中特定波長的光而產(chǎn)生的吸收光譜。

按所吸收光的波長區(qū)域不同，分為紫外分光光度法和可見分光光度法，合稱為紫外-可見分光光度法。基本原理2023/2/56

設(shè)入射光強度為I0，吸收光強度為Ia,透射光強度為It，反射光強度為Ir，則

I0=Ia+It+Ir由于反射光強度很弱，其影響很小，上式可簡化為：

I0=Ia+It一、吸光度和透光度基本原理----朗伯-比爾定律2023/2/57吸光度:為透光度倒數(shù)的對數(shù)，用A表示，即A=lg1/T=lgI0/It透光度：透光度為透過光的強度It與入射光強度I0之比，用T表示：即T=It/I02023/2/58二、朗伯-比爾定律

朗伯-比爾定律：當(dāng)一束平行單色光通過含有吸光物質(zhì)的稀溶液時，溶液的吸光度與吸光物質(zhì)濃度、液層厚度乘積成正比，即

A=κcl

式中比例常數(shù)κ與吸光物質(zhì)的本性，入射光波長及溫度等因素有關(guān)。c為吸光物質(zhì)濃度，l為透光液層厚度。2023/2/59

紫外-可見分光光度法紫外的發(fā)展史儀器的原理儀器組成固體紫外與液體紫外的區(qū)別紫外應(yīng)用實例2023/2/5100.575光源單色器吸收池檢測器顯示基本組成--單光束分光光度計光源：提供符合要求的入射光。要求：在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。

單色器：將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成連續(xù)光譜并可從中選出任一波長單色光的光學(xué)系統(tǒng)。11

檢測器：利用光電效應(yīng)將透過吸收池的光信號變成可測的電信號。

吸收池：又叫比色皿，用于盛放待測溶液和決定透光液層厚度的器件。

主要有石英吸收池和玻璃吸收池兩種。在紫外區(qū)須采用石英吸收池，可見區(qū)一般用吸收玻璃池。吸收池

主要規(guī)格0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm和5.0cm注意事項：手執(zhí)兩側(cè)的毛面，盛放液體高度四分之三。2023/2/512

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液體紫外

固體紫外儀器組成無積分球有積分球測量參數(shù)吸光度漫反射所測樣品

液體樣品懸濁樣品和不透明類樣品固體紫外與液體紫外區(qū)別2023/2/514固體紫外與液體紫外區(qū)別---儀器構(gòu)成2023/2/515積分球的原理：光線由輸入孔入射后，光線在此球內(nèi)部被均勻的反射及漫射，因此輸出孔所得到的光線為相當(dāng)均勻之漫射光束。而且入射光之入射角度、空間分布、及極化皆不會對輸出之光束強度及均勻度造成影響[1]。積分球的基本工作原理2023/2/5積分球是紫外可見分光光度計最為重要的附屬裝置，由于積分球的使用，大大擴展了光度計可以測定的樣品形態(tài)和種類，比如懸濁樣品和不透明類樣品。分析測試中心的紫外-可見分光光度計（U-3310）配置的積分球裝置如圖所示：16雙光束積分球式分光光度測試儀有兩個光柵和兩個檢測器。測量時光源只閃一次，同樣測樣品和參比白。這樣就克服了系統(tǒng)變化所帶來的誤差，測量數(shù)據(jù)的精度非常高。固體紫外與液體紫外區(qū)別---積分球2023/2/517

紫外-可見分光光度法紫外的發(fā)展史儀器的原理儀器組成固體紫外與液體紫外的區(qū)別紫外應(yīng)用實例2023/2/518固體紫外實例--60nm的金顆粒負載在聚合物中2023/2/51920液體紫外應(yīng)用實例--40nmAuNPs的uv數(shù)據(jù)2023/2/5（55nm,534.2nm）21528.2nm波長對應(yīng)金顆粒的粒徑為40nm左右2023/2/5液體紫外應(yīng)用實例--40nmAuNPs的uv數(shù)據(jù)[2]不同粒徑的金顆粒2023/2/522[1]王高明，郭城，張亮亮等.積分球光能均勻性的MonteCarlo模擬[J].微光與紅外，2009,39(1)