標準解讀
《GB/T 40249-2021 斑節(jié)對蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程 PCR檢測法》是一項國家標準,旨在通過聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction, PCR)技術來診斷斑節(jié)對蝦中的桿狀病毒感染情況。該標準詳細規(guī)定了從樣品采集到最終結(jié)果分析的全過程要求。
首先,在樣品采集方面,標準明確了適合進行PCR檢測的樣本類型以及如何正確地收集這些樣本以確保后續(xù)實驗的有效性。這包括但不限于活體或冷凍保存的斑節(jié)對蝦組織樣本的選擇與處理方法。
接著是核酸提取步驟,此部分介紹了使用何種試劑盒或者手工操作流程來進行高質(zhì)量DNA的提取,并強調(diào)了避免污染的重要性,因為即使是微量的外源DNA也可能導致假陽性結(jié)果。
然后進入PCR擴增階段,這里描述了推薦使用的引物序列、反應條件設置等關鍵參數(shù),同時也指出了選擇合適對照組(如陰性對照和陽性對照)對于驗證實驗系統(tǒng)可靠性的必要性。
最后是對PCR產(chǎn)物的檢測與結(jié)果判定環(huán)節(jié)。根據(jù)擴增曲線及熔解曲線特征,結(jié)合凝膠電泳圖像或其他形式的數(shù)據(jù)展示方式,可以準確判斷樣品中是否存在斑節(jié)對蝦桿狀病毒DNA片段。此外,還提供了重復性和再現(xiàn)性指標,用以評估不同實驗室之間采用相同方法時的一致性水平。
整個文件不僅為從事水產(chǎn)動物疾病研究的專業(yè)人士提供了一套科學嚴謹?shù)牟僮髦改希泊龠M了行業(yè)內(nèi)關于斑節(jié)對蝦健康監(jiān)測技術交流與發(fā)展。
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2021-05-21 頒布
- 2021-12-01 實施



文檔簡介
ICS6502030
CCSB.41.
中華人民共和國國家標準
GB/T40249—2021
斑節(jié)對蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程
PCR檢測法
CodeofdiagnosisforinfectionwithPenaeusmonodon-typebaculovirus—
PCRmethod
2021-05-21發(fā)布2021-12-01實施
國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布
國家標準化管理委員會
GB/T40249—2021
前言
本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定
GB/T1.1—2020《1:》
起草
。
請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任
。。
本文件由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出
。
本文件由全國水產(chǎn)標準化技術委員會歸口
(SAC/TC156)。
本文件起草單位中國水產(chǎn)科學研究院黃海水產(chǎn)研究所全國水產(chǎn)技術推廣總站
:、。
本文件主要起草人楊冰萬曉媛黃倢李清史成銀張鋒宋曉玲余衛(wèi)忠張慶利李晨劉莉
:、、、、、、、、、、、
許華
。
Ⅰ
GB/T40249—2021
斑節(jié)對蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程
PCR檢測法
1范圍
本文件規(guī)定了斑節(jié)對蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程中普遍適用的核酸檢測技術的要求針對斑節(jié)對蝦桿
,
狀病毒Penaeusmonodon給出了檢測法所需試劑或材料儀器設備
(-typebaculovirus,MBV),PCR、、
樣品試驗步驟和結(jié)果判定
、。
本文件適用于對蝦各生活期樣品中帶毒情況的定性檢測以進行斑節(jié)對蝦桿狀病毒病的流
MBV,
行病學調(diào)查診斷檢疫和監(jiān)測
、、。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文
。,
件僅該日期對應的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于
,;,()
本文件
。
白斑綜合征診斷規(guī)程第部分組織病理學診斷法
GB/T28630.4—2012(WSD)4:
3術語和定義
本文件沒有需要界定的術語和定義
。
4縮略語
下列縮略語適用于本文件
。
堿基對
bp:(basepair)
脫氧核糖核酸
DNA:(deoxyribonucleicacid)
脫氧核糖核苷三磷酸
dNTPs:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)
溴化乙啶
EB:(ethidiumbromide)
乙二胺四乙酸
EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)
鹽酸
HCl:(hydrogenchloride)
斑節(jié)對蝦桿狀病毒Penaeusmonodon
MBV:(-typebaculovirus)
氫氧化鈉
NaOH:(sodiumhydroxide)
聚合酶鏈式反應
PCR:(polymerasechainreaction)
十二烷基硫酸
SDS:(sodiumdodecylsulfate)
Taq水生棲熱菌
:(thermusaquaticus)
鹽酸和緩沖液
TE:TrisE
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