ICS07080

A40.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T33526—2017

轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品數(shù)字PCR檢測(cè)方法

GeneticallymodifiedorganismdetectionmethodbydigitalPCR

2017-02-28發(fā)布2017-09-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T33526—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)生化檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院廣西出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心中國(guó)

:、、

農(nóng)業(yè)大學(xué)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院油菜作物研究所

、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人付偉杜智欣王勤王慧煜許文濤吳剛朱水芳劉曉飛

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T33526—2017

轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品數(shù)字PCR檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)的數(shù)字方法

PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于玉米大豆油菜水稻馬鈴薯苜蓿棉花等轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品的轉(zhuǎn)基因成分?jǐn)?shù)字

、、、、、、

檢測(cè)

PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)所能達(dá)到的檢測(cè)低限為質(zhì)量分?jǐn)?shù)

0.1%()。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)通用要求和定義

GB/T19495.1

轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸提取純化方法

GB/T19495.3

轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)抽樣和制樣方法

GB/T19495.7

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

31

.

18srRNA基因18srRNAgene

轉(zhuǎn)錄自是細(xì)胞核糖體的組分之一

18srDNA,。

32

.

CaMV35s啟動(dòng)子基因CaMV35spromotor

來自花椰菜花葉病毒的啟動(dòng)子

(Cauliflowermosaicvirus,CaMV)35s。

33

.

NOS終止子基因NOSterminitor

來自胭脂堿合成酶基因的終止子

NOS。

4原理

數(shù)字其技術(shù)原理是通過將原始反應(yīng)體系進(jìn)行分割進(jìn)而對(duì)所有小的反應(yīng)體系進(jìn)行擴(kuò)增

PCRPCR,

并后續(xù)檢測(cè)通過對(duì)反應(yīng)體系進(jìn)行有限的分割從而使整個(gè)反應(yīng)體系可以更加耐受核酸抑制因子并且

。,,

更加穩(wěn)定準(zhǔn)確快速地對(duì)痕量的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行精準(zhǔn)鑒定

、、。

現(xiàn)階段數(shù)字的實(shí)現(xiàn)形式包括芯片式數(shù)字與微滴式數(shù)字兩種其中芯片式數(shù)字

PCRPCRPCR。

通過微流控芯片實(shí)現(xiàn)對(duì)原始反應(yīng)體系的分割這種分割方式具有穩(wěn)定性好均一性好的優(yōu)點(diǎn)但是

PCR,、,

這種分割方式的實(shí)驗(yàn)成本相對(duì)