ICS1330011100

;

A80..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T27819—2011

化學(xué)品體外哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)方法

Chemicals—Testmethodofinvitromammaliancelltransformation

2011-12-30發(fā)布2012-08-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T27819—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)與歐盟委員會法規(guī)歐洲議會和歐盟理事會關(guān)于化學(xué)品注冊評估許可和限制

440/2008:、、

的第號法規(guī)的測試方法法規(guī)的方法年體外哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)化試

(REACH)1907/2006B.21(2008)《

驗(yàn)英文版技術(shù)性內(nèi)容一致

》()。

本標(biāo)準(zhǔn)作了下列結(jié)構(gòu)和編輯性修改

:

增加了范圍一章

———;

計(jì)量單位改成我國法定計(jì)量單位

———。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國危險化學(xué)品管理標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC251)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所北京市疾病預(yù)防控制中心中國

:、、

化工經(jīng)濟(jì)技術(shù)發(fā)展中心

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人穆效群李朝林王曉兵熊曉燕趙素娟吳維皚

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T27819—2011

化學(xué)品體外哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化學(xué)品體外哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的試驗(yàn)原則試驗(yàn)方法試驗(yàn)數(shù)據(jù)和報告

、、。

本標(biāo)準(zhǔn)可以作為化學(xué)品的致癌作用的替代檢測方法

。

2試驗(yàn)原則

哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)系統(tǒng)可用于檢測化學(xué)品引起的表型改變這種改變與其在體內(nèi)系統(tǒng)的惡性

,

轉(zhuǎn)化有關(guān)廣泛使用的細(xì)胞株包括大鼠細(xì)胞主要觀察細(xì)胞的形態(tài)

。C3H10T1/2、3T3、SHE、Fischer,、

在軟瓊脂中轉(zhuǎn)化灶的形成或錨著獨(dú)立性的改變該系統(tǒng)還用于檢測細(xì)胞暴露于化學(xué)品后的其他一些生

。

理和形態(tài)學(xué)改變但應(yīng)用不廣泛目前尚無任何體外試驗(yàn)檢測終點(diǎn)被證實(shí)與癌癥發(fā)生機(jī)制有明確關(guān)系

,。。

某些檢測系統(tǒng)可以檢出促癌劑通過測定受試物對克隆形成能力克隆形成率或培養(yǎng)細(xì)胞的生長率的

。()

影響可反映其細(xì)胞毒性的大小故可通過計(jì)算染毒與毒性作用的相關(guān)性評價細(xì)胞毒性但由于有些試驗(yàn)

,,

需要延長培養(yǎng)時間或更換培養(yǎng)皿因此有時細(xì)胞毒性數(shù)據(jù)不能用于計(jì)算轉(zhuǎn)化率

,,。

3試驗(yàn)方法

31試驗(yàn)準(zhǔn)備

.

311細(xì)胞

..

很多細(xì)胞株和原代細(xì)胞都可作為受試細(xì)胞應(yīng)根據(jù)所選擇的轉(zhuǎn)化試驗(yàn)方法選擇適宜的細(xì)胞種類

,。

試驗(yàn)前研究者應(yīng)保證受試細(xì)胞接觸致癌物后會產(chǎn)生相應(yīng)的表型改變本實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)有記錄表明這種表

,,

型改變是有效可靠的

、。

312培養(yǎng)基液

..()

所用培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)適合細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)

。

313受試物

..

在細(xì)胞染毒前受試物應(yīng)與培養(yǎng)基混合均勻也可用適當(dāng)?shù)娜軇┫热芙饣蛑瞥蓱腋∫号囵B(yǎng)基中溶

,,。

劑的終濃度不應(yīng)對細(xì)胞活性生長率或轉(zhuǎn)化率造成影響

、。

314代謝活化

..

細(xì)胞應(yīng)分別在有無適宜代謝活化系統(tǒng)存在的條件下染毒當(dāng)所用細(xì)胞類型自身具備代謝活化能力

、;

時則應(yīng)考慮其活化特點(diǎn)是否適合受試物的化學(xué)特性

,。

32試驗(yàn)條件

.

321陰性對照和陽性對照

..

每個試驗(yàn)中均應(yīng)分別選用一個直接作用的化合物和一個需要代謝活化的化合物作為陽性對照