ICS6502030

B43..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T25876—2010

牛早期胚胎性別的鑒定巢式PCR法

MethodofnestedPCRforsexidentificationofearlycattleembryo

2011-01-10發(fā)布2011-06-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國

國家標(biāo)準(zhǔn)

牛早期胚胎性別的鑒定巢式PCR法

GB/T25876—2010

*

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京復(fù)興門外三里河北街號(hào)

16

郵政編碼

:100045

網(wǎng)址

電話

:6852394668517548

中國標(biāo)準(zhǔn)出版社秦皇島印刷廠印刷

各地新華書店經(jīng)銷

*

開本印張字?jǐn)?shù)千字

880×12301/160.57

年月第一版年月第一次印刷

2011220112

*

書號(hào)

:155066·1-41599

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舉報(bào)電話:(010)68533533

GB/T25876—2010

前言

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄為規(guī)范性附錄附錄為資料性附錄

B,A。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位華中農(nóng)業(yè)大學(xué)

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人張淑君楊利國李翔劉輝劉文舉胡修忠

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T25876—2010

牛早期胚胎性別的鑒定巢式PCR法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了牛早期胚胎性別鑒定的巢式方法

PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于奶牛和肉牛胚胎或胎兒的性別鑒定

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款凡是注日期的引用文件其隨后所有

。,

的修改單不包括勘誤的內(nèi)容或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)然而鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

(),,

是否可使用這些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)

。,。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)

。

31

.

巢式PCRnestedpolymerasechainreaction

利用兩套引物巢式引物對(duì)進(jìn)行兩輪擴(kuò)增反應(yīng)在第一輪擴(kuò)增中外引物用以產(chǎn)

PCR(PCR)PCR,,

生擴(kuò)增產(chǎn)物此產(chǎn)物在內(nèi)引物的存在下作為模板進(jìn)行第二輪擴(kuò)增

,,DNA,。

32

.

SRY基因SRYgene

哺乳動(dòng)物染色體上決定雄性性別的基因

Y。

33

.

HBB基因HBBgene

珠蛋白基因位于常染色體上

β,。

4原理

利用巢式反應(yīng)的敏感性高和特異性強(qiáng)的特性對(duì)少量胚胎細(xì)胞的SRY基因片段進(jìn)行擴(kuò)增以

PCR,,

HBB基因的擴(kuò)增作為陽性參照電泳檢測擴(kuò)增產(chǎn)物根據(jù)擴(kuò)增產(chǎn)物電泳條帶鑒定胚胎性別

,PCR,。

5引物

SRY

15′CTACTCCCCAACCGTCAGAAC3′

5′AGCCCAAACCCATCAACCTA3′

SRY