ICS65.020.30B44中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T14926.25—2001代替GB/T14926.25-1994實驗動物呼腸弧病毒加型檢測方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofreovirus3（Reo3)2001-08-29發(fā)布2002-05-01實施中華人民共和國發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

GB/T14926.25-2001前本標(biāo)準(zhǔn)是對GB/T14926.25—1994《實驗動物呼腸孤病毒山型檢驗方法》的修訂。對檢測方法未作改動.僅對原標(biāo)準(zhǔn)的個別文字作了修改。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部提出并歸口，本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國實驗動物學(xué)會。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：屈霞琴。本標(biāo)準(zhǔn)于1001年1月首次發(fā)布。

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)實驗物動GB/T14926.25-2001呼腸孤病毒加型檢測方法代替GB/T14926.25-1994Laboratoryanimal-Methodforexaminationofreovirus3（Reo3)范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了呼腸孤病毒型(Reo3)的檢測方法、試劑等.本標(biāo)準(zhǔn)適用于小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠Reo3的檢測。2引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文，通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時，所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會被修訂，使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性GB/T14926.50—2001實驗動物酶聯(lián)免疫吸附試驗GB/T14926.51-2001實驗動物免疫酶試驗GB/T14926.52-2001實驗動物免疫熒光試驗3原理根據(jù)免疫學(xué)原理，采用Reo3抗原檢測小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠血清中Reo3抗體。主要試劑和器材4.1試劑：4.1.1EI.ISA抗原4.1.1.1特異性抗原Reo3感染BSC-1或BHK21細(xì)胞,當(dāng)病變達(dá)十十十～十十十十時.收獲培養(yǎng)物。凍融三次或超聲波處理后，低速離心去除細(xì)胞碎片,上清液再經(jīng)超速離心濃縮后制成ELISA抗原。4.1.1.2正?？乖瑽SC-1或BHK21細(xì)胞凍融破碎后·經(jīng)低速離心去除細(xì)胞碎片而獲得的上清液。4.1.2抗原片Reo3感染BHK21細(xì)胞，培養(yǎng)4～5d.病變達(dá)十十～+十十時用酶消化分散,PBS洗滌，涂片。室溫干燥的同時,在紫外線下20cm處照30min。冷丙酮固定10min,－20℃保存。4.1.3陽性血清Reo3抗原免疫清潔或SPF小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠所獲得的抗血清.4.1.4陰性血清SPF小鼠