ICS65.020.30CCSICS65.020.30CCSB43聊 城 市 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB3715/T11—2022德州驢鮮精生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)程Thetechnicalprotocolofproductionandpreservationforfreshsemenofdezhoudonkey2022-09-20發(fā)布 2022-10-20實(shí)施聊城市場(chǎng)監(jiān)理局 發(fā)布DB3715/T11DB3715/T11—2022前 言本文按照GB/T1.1—2020《標(biāo)化作導(dǎo)則 第部分標(biāo)準(zhǔn)文的結(jié)和起規(guī)則的起草。本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。本文件由聊城市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出、組織實(shí)施并歸口。（I德州驢鮮精生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)程范圍本文件適用于德州驢鮮精生產(chǎn)與保存。（GB/T24877-2010德州驢NY/T1234-2018牛冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T3796-2020馬和驢冷凍精液下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1原精rawsemen采集后未經(jīng)離心、稀釋的精液。3.2鮮精freshsemen原精經(jīng)離心及稀釋處理后經(jīng)檢測(cè)符合保存條件的精液。3.3精液稀釋液semendiluent保護(hù)并延長(zhǎng)精子存活時(shí)間、增加精液容量的液體。3.4精液離心液semencentrifugatation保護(hù)精子在離心時(shí)不受損傷并延長(zhǎng)存活時(shí)間的液體。3.51dilutionrate采精訓(xùn)練成功的德州驢公驢。臺(tái)畜臺(tái)畜應(yīng)選擇健壯、性情溫順、無(wú)疫病的發(fā)情母驢或者仿生假臺(tái)畜。每周2～3以3月上旬～7月上旬和8月下旬～11月上旬為宜。采精場(chǎng)所要保持寬敞安靜、清潔干燥、空氣流動(dòng)平緩順暢，地面防滑，有防護(hù)欄等安全保護(hù)措施。處理室設(shè)置有精液質(zhì)檢區(qū)、平衡稀釋區(qū)、分裝區(qū)、鮮精保存區(qū)，室內(nèi)溫度22℃～25℃，避免光線直射。上崗前須經(jīng)專業(yè)化培訓(xùn)，工作時(shí)著潔凈工裝，嚴(yán)格按照有關(guān)規(guī)章制度進(jìn)行生產(chǎn)活動(dòng)。按照NY/T1234-2018的附錄A執(zhí)行。參見(jiàn)附錄A。2參見(jiàn)附錄A。采精2～3381/3準(zhǔn)備接觸液無(wú)器（括離、釋玻及料器）前2h在37℃溫中心液前2h放在32℃～37 ℃溫浴中用釋液于溫用所器和品見(jiàn)錄。原精液品質(zhì)應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1 原精量準(zhǔn)項(xiàng)目指標(biāo)顏色乳（灰）白色、淡黃色氣味無(wú)惡臭，略帶腥味射精量/mL≥40活率/%≥80活力/%≥70密度/（108個(gè)/mL）≥1畸形率/%≤20NY/T1234-20187.2～7.5NY/T3796-2020。記錄原精品質(zhì)檢測(cè)登記表參見(jiàn)附錄E。310min。1:1（1:1～1:2），30s2210min1850rpm/min（g/min）10min～15min1/42210minVmL（1）X (1)式中：V0——采精量mL；C——精子密度，單位為108個(gè)每毫升（108個(gè)/mL）；m——精子快速前進(jìn)活力%；0.7——精液離心后精子的回收系數(shù)；s——每個(gè)分裝的精子數(shù)，單位為108個(gè)/頭份；V1（mL）12～15）412h12dD。4附錄A（資料性）離心液、保存液配方及配制方法精液離心液A表A.1離心液A液配方（總體積為100ml）成份含量棉子糖0.300g乳糖0.300g葡萄糖5.000g檸檬酸鈉0.060g檸檬酸鉀0.080gHEPES0.952g青霉素15萬(wàn)單位鏈霉素15萬(wàn)單位超純水100mLA液：用校準(zhǔn)的電子天平依次稱取所需藥品，用滅菌超純水定容至100mL，配置完成后經(jīng)0.22μm濾器過(guò)濾除菌，4℃保存，保存時(shí)間不超過(guò)14d。B6g100mL，115℃高壓滅菌10min414d。A液B1:1751:42800rpm/min1hCC=1:3~1:7，414。5附錄B（資料性）驢精液質(zhì)量檢測(cè)主要儀器設(shè)備及耗材表B.1精液處理室配置儀器和用品主要儀器耗材用途100mL量筒、三角玻璃漏斗、高壓滅菌醫(yī)用紗布射精量檢測(cè)CASA5.0mL100mL量筒、載玻片、蓋玻片、 移液槍?；盍?活率檢測(cè)精子密度儀、比色皿、5mL液槍、 移液槍密度測(cè)定離心機(jī)、車載冰箱、5mL移槍、 移液槍、50mL試管原精離心處理4℃平衡柜、儲(chǔ)精瓶/儲(chǔ)精管、紗布/棉布精液保存6附錄C（）抹片35圖C.1固定1.0mL～2.0mL（3.2%），15min染色1.5h鏡檢（400X～60020020計(jì)算精子畸形率（%）＝（畸形精子數(shù)/精子總數(shù)）×100%。7DB3715/T11—20228DB3715/T11