第三十五章

DNA的重組DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁(yè)!一、同源重組(homologousrebination)發(fā)生在同源序列之間、非特異性重組交換區(qū)具有相同或相似的序列

兩個(gè)DNA分子重組酶——涉及到雙螺旋的斷裂、修復(fù)、連接和重組體的釋放

相同的部位不同部位（異位重組）中心環(huán)節(jié)DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁(yè)!片段重組體拼接重組體DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁(yè)!產(chǎn)生3’單鏈末端DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁(yè)!（二）細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移與重組1、細(xì)菌的接合作用（conjugation）——遺傳物質(zhì)從供體(donor)轉(zhuǎn)移到受體(receptor)的重組過(guò)程。供體細(xì)胞：雄性受體細(xì)胞：雌性接合質(zhì)粒：編碼接合相關(guān)蛋白（如性菌毛）致育因子（fertilityfactor）、F因子、性因子DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁(yè)!5’DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁(yè)!2、細(xì)菌的遺傳轉(zhuǎn)化（transformation）——細(xì)菌吸收外源DNA而發(fā)生遺傳性狀的改變特點(diǎn)：（1）感受態(tài)與感受態(tài)因子

細(xì)菌能從環(huán)境吸收DNA的生理狀態(tài)主要受感受態(tài)因子(蛋白)影響感受態(tài)一般出現(xiàn)在細(xì)菌對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期，可以誘導(dǎo)或加強(qiáng)感受態(tài)DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁(yè)!3、細(xì)菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)（transduction）——細(xì)菌基因通過(guò)噬菌體而轉(zhuǎn)移4、細(xì)菌的細(xì)胞融合——細(xì)胞質(zhì)膜融合發(fā)生的基因轉(zhuǎn)移與重組DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁(yè)!烈性噬菌體DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁(yè)!普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)（generalizedtransduction）DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁(yè)!局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)（restrictedtransduction）特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)溶原期時(shí)噬菌體DNA整合在細(xì)菌染色體特定部位，噬菌體DNA發(fā)生偏差分離，將自身一段DNA留在細(xì)菌染色體上，而帶走了細(xì)菌DNA上的基因。當(dāng)其轉(zhuǎn)導(dǎo)并整合到受體菌中，使受體菌獲得供體菌的某些遺傳性狀?！D(zhuǎn)導(dǎo)的只限于供體菌上個(gè)別的基因DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁(yè)!普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)與局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)的區(qū)別區(qū)別要點(diǎn)普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)導(dǎo)發(fā)生的時(shí)期裂解期溶原期轉(zhuǎn)導(dǎo)的遺傳物質(zhì)供體菌DNA任何部位或質(zhì)粒噬菌體及供體菌特定部位DNA轉(zhuǎn)導(dǎo)的后果完全轉(zhuǎn)導(dǎo)或流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)受體菌獲得供體菌DNA特定部位的遺傳特性轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率較低增加1000倍DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁(yè)!2、recBCD酶解旋酶活性：在SSB存在時(shí)解開雙螺旋ATP酶活性核酸外切酶活性核酸內(nèi)切酶活性——產(chǎn)生DNA單鏈DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁(yè)!3、RecA有兩種不同的活性形式SOS反應(yīng)中的蛋白酶活性促進(jìn)單鏈DNA和雙鏈分子中互補(bǔ)鏈配對(duì)（單鏈置換雙鏈中的同源鏈）

單鏈吸收/單鏈同化Single-strandassimilationDNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁(yè)!只要在入侵單鏈和雙鏈之間有自由的末端RecA即可促進(jìn)單鏈的同化DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁(yè)!分支遷移DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁(yè)!4、RuvAB復(fù)合物——置換RecARuvA（四聚體）識(shí)別Holliday連接體的結(jié)構(gòu)在交換點(diǎn)處與DNA四條鏈結(jié)合RuvB（六聚體）ATP酶，有解旋酶活性——為分支遷移提供動(dòng)力DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁(yè)!核酸內(nèi)切酶切開Holliday連接體識(shí)別不對(duì)稱位點(diǎn)ATTG5、RuvCDNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁(yè)!二、特異位點(diǎn)重組（一）λ噬菌體DNA的整合與切除1、λ噬菌體DNA的物理狀態(tài)裂解phage：為獨(dú)立分子形式在受侵染細(xì)菌中為環(huán)狀溶原狀態(tài)：是細(xì)菌染色體的整合部分（原噬菌體）整合切除整合在附著位點(diǎn)（attachmentsites）上發(fā)生DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁(yè)!特異的重組位點(diǎn)—附著位點(diǎn)細(xì)菌∽attB，由BOB’組成噬菌體∽attP，由POP’組成O稱為核心序列、B、P稱為臂重組酶——λ整合酶（integrase，Int）非細(xì)菌重組所必需整合宿主因子（integrationhostfactor，IHF）Xis蛋白：改變DNA結(jié)構(gòu)，使其對(duì)整合呈惰性參與切除反應(yīng)噬菌體編碼宿主編碼整合反應(yīng)DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁(yè)!交錯(cuò)7bp切開DNADNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁(yè)!（二）鼠傷寒沙門氏菌的鞭毛相變（三）免疫球蛋白基因的重排DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁(yè)!（一）細(xì)菌的轉(zhuǎn)座因子1、插入序列（InsertionSequence，IS）——是簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)座模序只編碼起始自己轉(zhuǎn)座的蛋白轉(zhuǎn)座頻率各異結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：兩側(cè)末端為倒轉(zhuǎn)重復(fù)序列（invertedrepeats）旁側(cè)為宿主DNA短正向重復(fù)序列DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁(yè)!2、轉(zhuǎn)座子——帶有編碼轉(zhuǎn)座功能酶的基因及抗性（或其他標(biāo)記）基因

組合因子：插入序列標(biāo)記基因插入序列兩類結(jié)構(gòu)復(fù)合因子：轉(zhuǎn)座酶基因

反向重復(fù)解離酶基因反向重復(fù)

標(biāo)記基因DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁(yè)!3、轉(zhuǎn)座過(guò)程轉(zhuǎn)座酶識(shí)別形成中間體DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第37頁(yè)!復(fù)制型轉(zhuǎn)座（replicativetransponsition）DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第38頁(yè)!保守型轉(zhuǎn)座（conservativetransposition）類似于噬菌體的整合DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第39頁(yè)!或者直接填補(bǔ)空隙或者進(jìn)行復(fù)制產(chǎn)生共整合體DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第40頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第41頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第42頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第43頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第44頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第45頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第46頁(yè)!（一）同源重組的分子模型

—Holliday模型DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第47頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第48頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第49頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第50頁(yè)!DNA修復(fù)DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第51頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第52頁(yè)!F因子化學(xué)本質(zhì)是DNA以自主狀態(tài)存在或整合到細(xì)菌的染色體上可在細(xì)菌細(xì)胞間轉(zhuǎn)移并傳遞遺傳物質(zhì)DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第53頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第54頁(yè)!性導(dǎo)(sexduction)與F?因子DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第55頁(yè)!（2）供體DNA與受體細(xì)胞結(jié)合結(jié)合發(fā)生在受體細(xì)胞特定部位對(duì)供體DNA片段有一定要求結(jié)合過(guò)程是一個(gè)可逆過(guò)程（3）DNA攝取及整合結(jié)合點(diǎn)飽和后，細(xì)菌開始攝取外源DNA多為單鏈攝入，另一條鏈在膜上降解DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第56頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第57頁(yè)!溫和噬菌體DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第58頁(yè)!完全轉(zhuǎn)導(dǎo)流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)未整合整合DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第59頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第60頁(yè)!（三）重組有關(guān)的酶

保守的8堿基非對(duì)稱序列大腸桿菌DNA每5-10Kb自然發(fā)生一次被recBCD酶所識(shí)別刺激重組——重組熱點(diǎn)1、chi位點(diǎn)DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第61頁(yè)!RecBCD從一端靠近Chi位點(diǎn)在移動(dòng)中降解DNA在Chi位點(diǎn)3’4-6bp行使內(nèi)切酶活性丟掉RecD只保留解旋酶活性DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第62頁(yè)!χ(chi)—sequence具有物種，基因和genomeseq.的特異性inE.coligenome1000chi-seq.chiRecBCD4-6bpOHRecA-pDNA解旋再螺旋DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第63頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第64頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第65頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第66頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第67頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第68頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第69頁(yè)!特異位點(diǎn)重組的結(jié)果倒位切除DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第70頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第71頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第72頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第73頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第74頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第75頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第76頁(yè)!三、轉(zhuǎn)座重組轉(zhuǎn)座子（transposon）——可以發(fā)生轉(zhuǎn)座的DNA轉(zhuǎn)座元件本身可導(dǎo)致：序列的缺失、插入以及將宿主序列轉(zhuǎn)到新位點(diǎn)同源便攜區(qū)（portableregionofhomology）——為重組提供底物位點(diǎn)對(duì)表型有積極/消極的作用（SelfishDNA）DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第77頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第78頁(yè)!組合轉(zhuǎn)座子結(jié)構(gòu)DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第79頁(yè)!DNA的復(fù)制、修復(fù)和重組共89頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第80頁(yè)!非復(fù)制型轉(zhuǎn)座（nonreplicativetransponsition）缺口不被修復(fù)后果嚴(yán)重DNA的復(fù)