1、羧酸及其酯類藥物的分析羧酸及其酯類藥物的分析藥物分析學(xué)質(zhì)量控制藥 典鑒 別純度檢查含量測定藥物分析學(xué)質(zhì)量控制藥 典鑒 別純度檢查含量測定各類（個）藥物分析方法結(jié) 構(gòu) Chemical Structure of Drug（Function Group） 理化性質(zhì)Physical and Chemical Properties具體分析方法Analytical MethodRelationship? The Key各類（個）藥物分析方法結(jié) 構(gòu) Chemical Struct本章要求掌握芳酸及其酯類藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和主要性質(zhì)掌握鑒別和含量測定的基本原理和方法（以水楊酸類為代表）熟悉阿司匹林等的特殊雜質(zhì)檢

2、查了解脂肪酸及其酯類藥物的分析本章要求掌握芳酸及其酯類藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和主要性質(zhì)2022/9/265芳酸酸性強(qiáng)度依次: 無機(jī)酸、芳酸、 碳酸、 苯酚 注意（芳酸類結(jié)構(gòu)）：共同特點(diǎn)：苯環(huán)、羧基藥理作用：抗炎、止痛、退熱、抗凝血羧基游離、形成鹽或酯PKa 3-6pKa1 6.38 9.952022/9/245芳酸酸性強(qiáng)度依次: 無機(jī)酸、芳酸、 碳酸典型的非甾體抗炎藥物水楊酸類苯甲酸類芳基乙酸類芳基丙酸類 其他芳酸類阿司匹林、對氨基水楊酸鈉甲芬那酸、丙磺舒、苯甲酸鈉雙氯芬酸鈉布洛芬 普利類、他汀類、 氯鋇丁酯典型的非甾體抗炎藥物水楊酸類阿司匹林、對氨基水楊酸鈉一、典型藥物結(jié)構(gòu)sodium aminos

3、alicylate對氨基水楊酸鈉水楊酸類一、典型藥物結(jié)構(gòu)sodium aminosalicylate苯甲酸類苯甲酸類芳基烷酸類布洛芬 ibuprofen芳基烷酸類布洛芬 ibuprofen2022/9/2610氯貝丁酯 clofibrate其他芳酸類2022/9/2410氯貝丁酯 clofibrate其他芳2022/9/2611 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)苯環(huán) (phenyl ring) 羧基 (carboxyl)鄰位-酚羥基 (phenol hydroxyl)個別藥物特征取代基2022/9/2411 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)苯環(huán) (phenyl rin游離羧基阿司匹林酯鍵苯環(huán)光譜pKa = 3.49H游離羧基阿司匹林酯鍵苯環(huán)

4、pKa = 3.49H2022/9/2613 理化性質(zhì)溶解性相似相溶的原則對氨基水楊酸鈉 溶于水阿司匹林 溶于乙醇2022/9/2413 理化性質(zhì)溶解性芳酸的酸性強(qiáng)度與分子中芳環(huán)、取代基(吸電子、給電子)、及其連接位置有關(guān)酸性芳酸具游離羧基，呈酸性pKa為36，屬中等強(qiáng)度的酸或弱酸可用于含量測定芳酸的酸性強(qiáng)度與分子中芳環(huán)、取代基(吸電子、給電子)、及其連如酸性大小比較：水楊酸 阿司匹林 苯甲酸 OCOCH3鄰位-OH，吸電子基團(tuán) 酸性增加分子內(nèi)氫鍵，增加其極性 酸性增加pKa 2.953.49 4.26如酸性大小比較：OCOCH3鄰位-OH，吸電子基團(tuán) 水解性芳酸酯可水解，堿性條件下水解完全可

5、用于鑒別、特殊雜質(zhì)產(chǎn)生依據(jù)、含量測定酸性介質(zhì): 水解-酯化平衡，不可能全部水解堿性介質(zhì): 過量堿(氫氧化鈉和碳酸鈉)中和產(chǎn)生的酸， 可水解完全水解性可用于鑒別、特殊雜質(zhì)產(chǎn)生依據(jù)、含量測定酸性介質(zhì): 含酚羥基、潛在酚羥基的水楊酸類 與三氯化鐵試液反應(yīng)，顯色重氮化反應(yīng)、重氮化-偶合反應(yīng)含芳伯氨基的對氨基水楊酸鈉含硫的丙磺舒 分解生成硫化物官能團(tuán)反應(yīng)特性UV和IR特征可用于鑒別、含量測定可用于鑒別、含量測定含酚羥基、潛在酚羥基的水楊酸類 與三氯化鐵試液反應(yīng)，顯色重氮2022/9/2618堿性條件：加速水解、完全水解二、鑒別試驗(yàn) 水解反應(yīng)2022/9/2418堿性條件：加速水解、完全水解二、鑒別試20

6、22/9/2619+ CH3COONa2022/9/2419+ CH3COONa2022/9/2620加水煮沸水解加氫氧化鈉煮沸水解稀鹽酸酸化成弱酸性阿司匹林：對氨基水楊酸鈉：雙水楊酯：FeCl3紫色類配位化合物 FeCl3反應(yīng)2022/9/2420加水煮沸水解加氫氧化鈉煮沸水解稀鹽酸酸 具酚羥基或潛在酚羥基的藥物 類似紫色鐵配位化合物+-6pH43 FeClOHAr水楊酸及其鹽類：強(qiáng)酸會導(dǎo)致分解褪色，堿性會導(dǎo)致鐵鹽水解產(chǎn)生Fe(OH)3 具酚羥基或潛在酚羥基的藥物 類似紫色鐵配位化合物水楊酸 ChP（2010）鑒別 （1）取本品的水溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色例子阿司匹林 ChP（2

7、010）鑒別 （1）取本品約0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色水楊酸 ChP（2010）例子阿司匹林 2022/9/2623苯甲酸類：丙磺舒鈉鹽在pH 5.06.0 水溶液中與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成米黃色沉淀2022/9/2423苯甲酸類：丙磺舒鈉鹽在pH 5.062022/9/2624應(yīng)用：對氨基水楊酸鈉、貝諾酯水解產(chǎn)物，在稀鹽酸中與亞硝酸鈉發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成的重氮鹽再進(jìn)一步偶合作用得到有色產(chǎn)物具芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物 重氮化-偶合反應(yīng)2022/9/2424應(yīng)用：對氨基水楊酸鈉、貝諾酯水解產(chǎn)物，2022/9/2625丙磺舒的鑒別：熔融顯硫酸鹽反應(yīng) 分解

8、產(chǎn)物的反應(yīng)2022/9/2425丙磺舒的鑒別：熔融顯硫酸鹽反應(yīng) 分解產(chǎn) 紫外光譜法 最大、最小吸收波長 最大波長及其吸收系數(shù)或吸光度 兩特征吸收波長及其吸光度之比 應(yīng)注明所用溶劑、藥物的濃度等條件 UV鑒別參數(shù)： 紫外光譜法 最大、最小吸收波長 應(yīng)注明所用溶劑、藥物的濃2022/9/2627溶劑max / min A水楊酸二乙胺20g/mL乙醇257nm / 227、297nm丙磺舒20g/mL鹽酸乙醇249nm0.67甲芬那酸20g/mL鹽酸甲醇279nm350nm 0.69-0.74 0.59-0.60對氨基水楊酸鈉NaOH265nm/299nm比值： 1.50-1.56例子2022/9/

9、2427溶劑max / min A水楊酸二2022/9/2628廣泛應(yīng)用于該類藥物的原料藥中紅外：4000400 cm-1特征區(qū)： 40001300 cm-1 2800 3000 cm-1 CH3 1600 1850 cm-1 C=O 指紋區(qū)：1250400 cm-1 紅外光譜法2022/9/2428廣泛應(yīng)用于該類藥物的原料藥中紅外：2022/9/2629阿司匹林羥基OH3230 cm1羰基c=o 1660 cm1鄰位取代苯環(huán) Ar-H 775cm1苯環(huán) C=C 1610、1570、1480、1460 cm1羧酸酯CO 1310、1230、1188 cm12022/9/2429阿司匹林羥基OH

10、3230 cm1羰2022/9/2630 阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查 對氨基水楊酸鈉中間氨基酚等 有關(guān)物質(zhì)的檢查甲芬那酸中 2, 3 -二甲基苯胺的檢查三、特殊雜質(zhì)檢查2022/9/2430 阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查三、特殊雜質(zhì)2022/9/2631阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查 檢查方法： （阿司匹林溶于碳酸鈉，雜質(zhì)不溶） 溶液的澄清度 檢查碳酸鈉試液中的不溶物：未反應(yīng)完全的水楊酸脫羧產(chǎn)生的 苯酚乙酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯一定量阿司匹林在碳酸鈉試液中溶解應(yīng)澄清。苯酚發(fā)生副反應(yīng)產(chǎn)生的 無羧基2022/9/2431阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查 檢查方法： 2022/9/2632Chp(2005) 檢查

11、原理及方法： 阿司匹林無酚羥基，不能與直接高鐵鹽作用 水楊酸可直接與高鐵鹽反應(yīng)呈色游離水楊酸 來源：生產(chǎn)中乙?；煌耆①A藏中水解都會產(chǎn)生檢查原因：有毒；易氧化，形成醌型有色物質(zhì)乙?；?075對照法：與一定量水楊酸對照液生成的色澤比較，控制游離水楊酸的限量。2022/9/2432游離水楊酸 來源：生產(chǎn)中乙?；煌耆?、2022/9/2633游離水楊酸 Chp(2010)檢查方法： 流動相： 乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70） 固定相： ODS 定量方法：外標(biāo)一點(diǎn)法限量規(guī)定：原料 0.1%阿司匹林片 0.3%阿司匹林腸溶片 1.5%阿司匹林栓 3.0% HPLC法為什么原料藥和制劑都

12、要進(jìn)行水楊酸的檢查？2022/9/2433游離水楊酸 Chp(2010)檢查方法2022/9/2634有關(guān)物質(zhì) 檢查方法：HPLC除“游離水楊酸”之外的其他合成副產(chǎn)物包括：對照液：供試液稀釋200倍固定相： ODS流動相: A為乙腈- 四氫呋喃- 冰乙酸-水（205570） B為乙腈（ 梯度洗脫） 苯酚 乙酸苯酯水楊酸苯酯 乙酰水楊酸苯酯雙水楊酯 乙酰水楊酰水楊酸水楊酸酐 乙酰水楊酸酐主成分自身對照法雜質(zhì)峰面積和不得大于對照液主峰面積2022/9/2434有關(guān)物質(zhì) 檢查方法：HPLC除“游離水2022/9/2635對氨基水楊酸鈉中間氨基酚等有關(guān)物質(zhì)的檢查檢查方法：HPLC有關(guān)物質(zhì)：間氨基酚、5

13、- 氨基水楊酸、其他未知雜質(zhì)來源：未反應(yīng)完全的間氨基酚原料，貯藏過程中脫羧產(chǎn)生檢查原因：易氧化成醌型化合物，使藥物變色；有毒間氨基酚：外標(biāo)法定量其它有關(guān)物質(zhì)：主成分自身對照法，限量檢查固定相：ODS流動相：甲醇-10% 四丁基氫氧化鈉溶液 -0.05 mol/LNa2HPO4-0.05 mol/LNaH2PO4（ 20019400400） 2022/9/2435對氨基水楊酸鈉中間氨基酚等有關(guān)物質(zhì)的檢2022/9/2636 酸堿滴定法 UV法 HPLC法直接滴定法水解后剩余滴定法非水溶液滴定法四、含量測定2022/9/2436 酸堿滴定法直接滴定法四、含量測定2022/9/2637直接滴定法水解

14、后剩余滴定法兩步滴定法 酸堿滴定法強(qiáng)堿滴定本類藥物的羧基 2022/9/2437直接滴定法 酸堿滴定法強(qiáng)堿滴定本類藥物酸堿中和，反應(yīng)摩爾比1:1乙醇作用：溶解ASA 防止ASA在滴定過程水解中性乙醇：對指示劑(酚酞)而言為中性直接滴定法酯鍵水解，干擾測定酸堿中和，反應(yīng)摩爾比1:1乙醇作用：溶解ASA中性乙醇：對指2022/9/2639阿司匹林 ChP（2010）注意事項(xiàng)用中性乙醇作溶劑不斷攪拌、稍快滴定，以防止局部堿度過大，促使水解適用范圍：不能用于含水楊酸過高或制劑分析，只能用于合格原料藥的含量測定2022/9/2439阿司匹林 ChP（2010）注意事項(xiàng)2022/9/2640USP（32）

15、 水解： 剩余滴定： 2NaOH（過量）H2SO4Na2SO42H2O同時進(jìn)行空白試驗(yàn)： 不加供試品的空白試劑相同條件下試驗(yàn)水解后剩余滴定法酸堿中和、酯鍵水解，反應(yīng)摩爾比1:22022/9/2440USP（32） 水解： 2022/9/2641剩余滴定法為什么進(jìn)行空白試驗(yàn)？1ml 氫氧化鈉（0. 5mol/l）1ml 硫酸（0. 25mol/l）相當(dāng)消除空白試劑及CO2的影響空白消耗的體積與含量計算有關(guān)滴定液吸收CO2轉(zhuǎn)變成Na2CO3由于酚酞為指示劑硫酸回滴時化學(xué)計量關(guān)系不同2022/9/2441剩余滴定法為什么進(jìn)行空白試驗(yàn)？1ml 空 白滴 定NaOHH2SO4V0VV2V1剩余滴定法消耗

16、NaOHV1 V0-VNaOHH2SO4空 白滴 定NaOHH2SO4V0VV2V1剩余滴定法消耗N 反應(yīng)原理：反應(yīng)分兩步進(jìn)行 第一步 中和（酸雜質(zhì)） 第二步 水解、剩余滴定問題： 阿司匹林片、阿司匹林腸溶片可以采用酸堿滴定法嗎？輔料會不會干擾測定？（含酒石酸、水楊酸和醋酸等酸性穩(wěn)定劑）兩步滴定法 適用對象：阿司匹林片、腸溶片等制劑 反應(yīng)原理：反應(yīng)分兩步進(jìn)行問題：（含酒石酸、水第一步 中和不用于含量計算第一步 中和不用于含量計算2022/9/2645第二步 水解后剩余滴定 水解： 2NaOH（過量）H2SO4 Na2SO42H2O剩余滴定反應(yīng)摩爾比為11 2022/9/2445第二步 水解后剩

17、余滴定 水解： 2022/9/2646片劑含量測定結(jié)果的計算 原料含量2022/9/2446片劑含量測定結(jié)果的計算 原料含量2022/9/2647ChP 水楊酸二乙胺乳膏劑、丙磺舒片劑 紫外分光光度法直接UV法2022/9/2447ChP 水楊酸二乙胺乳膏劑、丙磺舒片2022/9/2648丙磺舒片劑含量測定：取本品10 片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量，置200 ml 量瓶中，加乙醇150 ml 與鹽酸溶液（9 100）4 ml，置70水浴上加熱30 min，放冷，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5 ml，置100 ml 量瓶中，加鹽酸溶液（9 100）2 ml，用乙醇稀釋至刻度，

18、搖勻，在249 nm 波長處測定吸光度，按C13H19NO4S 的吸收系數(shù)為338 計算含量。例子D=2001005=40002022/9/2448丙磺舒片劑含量測定：取本品10 片，精2022/9/2649USP 阿司匹林膠囊、栓劑（除去輔料及水楊酸的干擾）樣品填料多孔濾板柱分配色譜-UV法2022/9/2449USP 阿司匹林膠囊、栓劑樣品填料多2022/9/2650阿司匹林、水楊酸 鈉鹽同時保留洗脫 (酸性不同)：保留： 中性或堿性雜質(zhì)（除去） 只游離出阿司匹林 阿司匹林氯仿洗脫醋酸酸化冰醋酸-氯仿 測定：280nm處測定吸收度，以氯仿為空白校正對照法定量硅藻土碳酸氫鈉例子2022/9/2450阿司匹林、水楊酸 鈉2022/9/2651 ChP 對氨基水楊酸鈉、阿司匹林等芳酸制劑流動相：乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水 甲醇-1%冰醋酸水溶液 甲醇-磷酸鹽緩沖液離子抑制色譜法 高效液相色譜法要求： 色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 外標(biāo)法定量 反相HPLC-流動相？2022/9/2451 ChP 對氨基水楊酸鈉、阿司匹林等2022/9/2652TEXTTEXTTEXTTEXT 流動相中