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文檔簡介
1、熱性中藥高良姜對大鼠能量代謝的影響【摘要】目的觀察熱性中藥高良姜對大鼠能量代謝的影響。方法給正常大鼠灌服6.0和3.0gkg-1高良姜水煎液,連續(xù)給藥43d,測定給藥期前及給藥后每5d老鼠體質(zhì)量,檢測能量代謝相關(guān)酶活性及脂肪代謝的影響,同時(shí)采用放免法檢測血清中的T3,T4,TSH含量。結(jié)果高良姜能增加大鼠體質(zhì)量,增加大鼠肝臟Na+-K+-ATP酶、a2+-g2+-ATP酶、SDH活性,增加血清游離脂肪酸含量、脂蛋白脂酶、肝脂酶活性,同時(shí)升高血清T3,T4,TSH含量。結(jié)論熱性中藥高良姜能促進(jìn)大鼠能量代謝,其促進(jìn)能量代謝的機(jī)制與升高血清甲狀腺素程度有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】能量代謝;高良姜;藥性生物能量是
2、維持機(jī)體生命的重要物質(zhì)根底,能量代謝是人體物質(zhì)代謝的最根本形式。中醫(yī)的寒熱證型與機(jī)體能量代謝的關(guān)系密不可分,寒熱中藥可能通過影響能量代謝的某些環(huán)節(jié),實(shí)現(xiàn)對寒熱證的調(diào)節(jié)1。本實(shí)驗(yàn)擬通過對典型熱性中藥高良姜對機(jī)體能量代謝的影響,探究熱性中藥的作用規(guī)律和藥性特征,進(jìn)一步為藥性的科學(xué)評價(jià)打好根底,從而更好地指導(dǎo)中藥的臨床運(yùn)用。1材料與儀器1.1受試藥物高良姜,購自北京市鶴元堂醫(yī)藥科技,產(chǎn)地廣東。1.2試劑SD大鼠36只,雄性,體質(zhì)量160180g,均由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)提供,答應(yīng)證編號為SXK(京)2002-0003。1.3試劑ATP酶測試盒、考馬斯亮藍(lán)蛋白測定試劑盒、琥珀酸脫氫酶SDH測試盒、游
3、離脂肪酸測試盒、總脂酶試劑盒,均購自南京建成生物工程研究所;T3放射免疫分析測試盒、T4放射免疫分析測試盒均購自北京科美東雅生物技術(shù)。1.4儀器實(shí)驗(yàn)UV-2000型紫外可見分光光度計(jì)尤尼柯上海儀器、Labfuge400R,臺式低溫離心機(jī)(德國Heraeus公司產(chǎn)品)、電熱恒溫水浴鍋北京長安科學(xué)儀器廠,G911放射免疫計(jì)數(shù)器中國科大中佳光電。2方法2.1藥物制備取定量的高良姜置入砂鍋中,參加8倍蒸餾水浸泡60in,快速加熱至沸騰,而后保持微沸狀態(tài)30in,趁熱過濾;剩余藥渣中參加6倍蒸餾水,快速加熱至沸騰,而后保持微沸20in,趁熱過濾。合并兩次濾液,水浴濃縮至含生藥量0.6g生藥/l,4儲存?zhèn)?/p>
4、用。2.2動(dòng)物分組及給藥隨機(jī)分為3組,即為空白對照組、高良姜低劑量組和高劑量組。空白對照組給予等容量蒸餾水;高良姜高劑量組給予高良姜水煎液6.0g生藥/kg,高良姜低劑量組給予高良姜水煎液3.0g生藥/kg,每日上、下午各1次。2.3檢測方法從分組當(dāng)天起每5日稱量大鼠體重并記錄,第44天將大鼠稱重,麻醉后由心臟取血,2000r/in離心10in,別離血清,取出肝臟備用。2.3.1大鼠肝臟Na+-K+-ATP酶、a2+-g2+-ATP酶、SDH活性的測定準(zhǔn)確稱量一定量肝臟組織,按重量體積比加9倍生理鹽水,制成10%的勻漿,1500r/in離心10in,取上清液按試劑盒法進(jìn)展肝臟Na+-K+-AT
5、P酶、a2+-ATP酶、SDH活性的測定,組織蛋白的測定采用考馬斯亮藍(lán)法。2.3.2血清游離脂肪酸(NEFA)、脂蛋白脂酶LPL和肝脂酶HL的測定取血清200l按試劑盒說明書進(jìn)展NEFA的測定,取50l按試劑盒說明書進(jìn)展LPL及HL的測定。2.3.3血清T3、T4、TSH的測定取血清0.5l,放免法進(jìn)展T3,T4,TSH含量測定。2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS15.0進(jìn)展統(tǒng)計(jì)分析。資料經(jīng)過方差齊性檢驗(yàn),數(shù)據(jù)用s表示。組間差異比擬用t檢驗(yàn)。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.3結(jié)果3.1高良姜對大鼠體質(zhì)量變化量的影響結(jié)果見表1。與空白對照組比擬,高良姜高、低劑量均可使動(dòng)物體重明顯增加。表1高良姜對大鼠體質(zhì)量變化
6、量的影響略3.2高良姜對大鼠肝組織Na+-K+-ATP酶、a2+-g2+-ATP酶、SDH活性的影響結(jié)果見表2。與空白組比擬,高良姜高、低劑量組均可明顯升高大鼠肝臟Na+-K+-ATP酶、a2+-ATP酶、SDH活性除低劑量組對Na+-K+-ATP酶的升高無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其他均有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05,P0.01。表2高良姜對大鼠肝臟Na+-K+-g2+-ATP酶、a2+-ATP酶和SDH活性測定略3.3高良姜對大鼠血清NEFA,LPL,HP的影響結(jié)果見表3。與空白對照組比擬,高良姜高、低劑量組均可升高大鼠血清NEFA含量和LPL、HP活性,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05。表3高良姜對大鼠血清
7、NEFA,LPL,HP的影響略3.4高姜良對大鼠血清T3,T4,TSH含量的影響結(jié)果見表4。與空白對照組比擬,高良姜高、低劑量組均可使大鼠血清T3、T4含量升高,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但高良姜高、低劑量組均可使大鼠血清TSH含量上升且有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表4高良姜對大鼠血清T3,T4,TSH含量的影響略4討論Na+-K+-ATP酶是一種膜內(nèi)在蛋白,它通過消耗ATP來維持膜內(nèi)外兩側(cè)的Na+和K+的離子濃度2。Na+-K+-ATP酶活性的增加,伴隨ATP的消耗增加。a2+-g2+-ATP酶是另一種消耗ATP來維持膜兩側(cè)a2+濃度的重要的酶2,該酶活性的升高也會伴隨ATP消耗的增加。琥珀酸脫氫酶是三羧酸循環(huán)
8、中一種重要的酶,同時(shí)也是線粒體內(nèi)膜上短呼吸鏈的重要組分,該酶活性的升高說明三羧酸循環(huán)的加快,以及線粒體經(jīng)由短呼吸鏈中ATP產(chǎn)生的增加。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),高良姜能使大鼠肝臟、骨骼肌Na+-K+-ATP酶、a2+-g2+-ATP酶、SDH活性均升高,提示高良姜可能使ATP的產(chǎn)生增加,同時(shí)使ATP的消耗亦增加。脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)都是脂蛋白代謝的關(guān)鍵酶3,是血液循環(huán)中與內(nèi)源性TG代謝有關(guān)的兩種關(guān)鍵酶。LPL存在于肝外組織毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞外表。它是分解血清乳糜微粒()、極低密度脂蛋白(VLDL)中甘油三酯(TG)的脂解酶,可將和VLDL中的甘油三酯水解為甘油和游離脂肪酸(NEFA)。而HL那
9、么僅存在于肝內(nèi)皮細(xì)胞外表,具有多種脂酶活性的脂蛋白代謝關(guān)鍵酶,直接參與HDL的逆轉(zhuǎn)運(yùn)和HDL殘粒的分解代謝,促進(jìn)肝細(xì)胞攝取HDL中的膽固醇或LDL殘粒,調(diào)節(jié)血漿中脂蛋白的濃度它主要在中間密度脂蛋白和HDL代謝中起重要作用。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),高良姜雖然能升高NEFA含量和HP、LPL的活性,但是這種升高并沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示高良姜促進(jìn)能量代謝可能與脂肪有發(fā)動(dòng)關(guān)系不親密,這也與高良姜并未使體重減輕是一致的。甲狀腺激素是影響機(jī)體能量代謝的主要物質(zhì),能使細(xì)胞內(nèi)氧化速度進(jìn)步,耗氧量增加,產(chǎn)熱增多4。促甲狀腺激素TSH是垂體前葉分泌的一種糖蛋白激素,其主要作用是調(diào)控甲狀腺的功能活動(dòng)。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),高良姜使
10、動(dòng)物血清中T3、T4增加,這種增加并沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但是高良姜能升高血清TSH的含量,提示高良姜可能是通過影響TSH而調(diào)控機(jī)體的能量代謝。高良姜味辛性熱,歸脾胃經(jīng),功能散寒止痛,溫中止嘔。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),熱性中藥高良姜對于大鼠能量代謝有影響,其影響能量代謝的機(jī)制有待于進(jìn)一步深化研究?!緟⒖嘉墨I(xiàn)】1王伽伯,金城,肖小河,等中藥藥性研究回憶與考慮J中華中醫(yī)藥雜志,2022,23(7):572.2卡爾森著,張?jiān)雒髯g.生物化學(xué)精華,第1版.上海:上??茖W(xué)普及出版社,1989:88.3hgaiN,NagaiR,iyazakiA,etal.SavengerReeptrlassBTypeIIediatedReversehlesterlsprtisinhibitedbyAdvanedGlyatinEndPrdutsJ.Bilhe.2001,276:133
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