1、豬口腔液樣品采集技術(shù)規(guī)范1 范圍的暫存與運(yùn)輸?shù)燃夹g(shù)要求。瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬口蹄疫、豬圓環(huán)病毒病等動(dòng)物疫病檢測。2 規(guī)范性引用文件文件。NY/T 獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范NY/T 3075 畜禽養(yǎng)殖場消毒技術(shù)3 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。豬口腔液 pigoral豬口腔中的唾液以及通過口腔黏膜和齒齦溝進(jìn)入口腔的血清滲出液組成的混合液體。采樣 sampling按照規(guī)定的程序和要求從動(dòng)物及其產(chǎn)品或環(huán)境取得樣品的過程。樣品保存液 samplepreservative solution檢測的準(zhǔn)確性。4 采樣前準(zhǔn)備采樣用品4.1.1 采樣用品準(zhǔn)備采集繩、無菌自封袋、剪刀、離心

2、管（1.5mL以上規(guī)格）、樣品保存液等。4.1.2 樣品保存液的選擇（ProClin950 B化的具有保護(hù)核酸作用的樣品保存液。4.1.3 采集繩的選擇直徑1.5cm2.0cm1.0m1.2m擇符合上述要求的商品化的豬口腔液采集包，采集包內(nèi)包含一根無菌棉繩、一個(gè)無菌吸管、無菌手套、一管樣品保存液。4.1.4 采集繩數(shù)量4.1.4.1 豬飼養(yǎng)數(shù)量在 頭以內(nèi)的欄舍，懸掛一根棉繩。4.1.4.2 豬飼養(yǎng)數(shù)量大于 25頭的欄舍，每增加 15頭豬增加1根棉繩，繩子間的距離不低于 cm。4.1.5 滅菌或其他耐高溫、高壓容器中，121高壓蒸汽滅菌30min，65烘箱中烘干，將棉繩轉(zhuǎn)入無菌自封袋保存。商品化

3、采集包內(nèi)的棉繩無需滅菌。防護(hù)用品一次性口罩、手套、防護(hù)服、鞋套，消毒液、醫(yī)療廢棄物垃圾袋等。記錄用品油性記號筆、黑色中性筆、標(biāo)簽紙、采樣登記表、樣品編號表或自動(dòng)編號打印設(shè)備等。保存運(yùn)輸用品樣品保存液、采樣運(yùn)輸箱、冰袋、防震材料等。5 樣品采集技術(shù)采集時(shí)間宜在豬只較為活躍的上午且在采食前采集。采集步驟5.2.1 棉繩懸掛將棉繩懸掛于豬欄內(nèi)相對干凈的區(qū)域，遠(yuǎn)離飼喂、飲水和排便區(qū)，不接觸墻壁和豬欄。5.2.2 棉繩固定棉繩上端打結(jié)固定，下端懸掛高度與豬身肩關(guān)節(jié)齊平。5.2.3 棉繩放置時(shí)間棉繩放置至少30min，但不超過45min，期間任豬自由咀嚼。5.2.4 口腔液樣品收集5.2.4.1 棉繩放置

4、規(guī)定時(shí)間后立即進(jìn)行口腔液樣品收集，口腔液樣品采集量不少于 2。5.2.4.2 棉繩固定后脫落至地面或其他相對不干凈區(qū)域，需重新進(jìn)行樣品采集。5.2.4.3 釋放口腔液至袋底。剪掉自封袋底部一角，自封袋中口腔液傾斜倒入含有樣品保存液的離心管中備用，口腔液與樣品保存液體積比為 1:11.5:1，裝入口腔液后蓋上管蓋后混勻，用封口膜固封。5.2.5 廢棄物處置行無害化處理。采樣注意事項(xiàng)5.3.1 個(gè)人安全防護(hù)和消毒操作按照 NY/T3075執(zhí)行。5.3.2 每采集一份樣品，更換一套一次性采樣用品，避免交叉污染。5.3.3 采樣后的廢棄物等按照醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例進(jìn)行無害化處理。5.3.4 若豬啃咬欲望不

5、強(qiáng)或不采食，可輔助采取其他采樣方式，如鼻肛拭子等。6 樣品標(biāo)記與包裝用油性記號筆在離心管管蓋和管壁上作好標(biāo)記，以阿拉伯?dāng)?shù)字標(biāo)識，并在樣品編號表（見附錄 B）填寫樣品編號對應(yīng)的欄舍編號，一式兩份。樣品名稱和數(shù)量等。必要時(shí)自封袋上貼封條，封條上加蓋采樣企業(yè)簽章及采樣人簽字，并注明貼封日期。7 樣品信息登記填寫豬口腔液采樣登記表（見附錄 ），一式兩份。另一份留存?zhèn)浒浮? 樣品的暫存與運(yùn)輸口腔液樣品在 24h處于 8，加填防震材料避免樣品晃動(dòng)?？谇灰簶悠?24h內(nèi)無法送達(dá)檢測實(shí)驗(yàn)室的，迅速轉(zhuǎn)置-20以下溫度凍存。采樣運(yùn)輸箱應(yīng)完整無損，密封不漏液，必要時(shí)經(jīng)清潔、滅菌后使用，詳細(xì)按照 NY/T 541執(zhí)行

6、。樣品運(yùn)送應(yīng)符合生物安全要求，按照 NY/T 541附 錄 A（資料性）豬口腔液采樣登記表表A.1給出了豬口腔液采樣登記表。表A.1豬口腔液采樣登記表采樣單位： 采樣時(shí)間： 采樣人： 聯(lián)系電話：*場點(diǎn)名稱 *聯(lián)系人 *聯(lián)系電話地 址 區(qū) 街（鄉(xiāng)） 村 *地理坐標(biāo) 經(jīng)度： 緯度：*場點(diǎn)類型 種豬場 商品代養(yǎng)豬場 散養(yǎng)戶 采樣數(shù)量基本情況*現(xiàn)存欄數(shù) 年出欄數(shù) 種公畜數(shù) 母畜數(shù)生產(chǎn)：后備： 序號 樣品編號（起止） 養(yǎng)殖階段 群體數(shù)量 備注樣品情況疫苗 是否免疫 疫苗類型 最后一次免疫時(shí)間 型口蹄疫 是 否 滅活苗 合成肽苗* 型口蹄疫 是 否 滅活苗 合成肽苗免疫情況豬瘟 是 否 脾淋苗 細(xì)胞苗偽狂

7、犬 是 否 弱毒苗 滅活苗豬繁殖與呼吸綜合征是 否普通型滅活苗 普通型弱毒苗高致病性滅活苗 高致病性弱毒苗其他 是 否 序號 樣品編號（起止） 養(yǎng)殖階段 群體數(shù)量樣品情況疫苗 是否免疫 疫苗類型 最后一次免疫時(shí)間 型口蹄疫 是 否 滅活苗 合成肽苗* 型口蹄疫 是 否 滅活苗 合成肽苗免疫情況豬瘟 是 否 脾淋苗 細(xì)胞苗偽狂犬 是 否 弱毒苗 滅活苗豬繁殖與呼吸綜合征是 否普通型滅活苗 普通型弱毒苗高致病性滅活苗 高致病性弱毒苗其他 是 否注：表內(nèi)帶“*”的地方必須填寫，地理坐標(biāo)，要求填寫6位數(shù)。注：樣品編號：以例如110的簡單阿拉伯?dāng)?shù)字標(biāo)識在采樣管上。注：養(yǎng)殖階段：哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、生產(chǎn)母豬、后備母豬、種公豬。注：該表格一式兩份。附 錄 B（資料性）樣品編號表表B.1給出了樣品編號表。表B.1樣品編號表場點(diǎn)名稱： 采樣人： 樣品編號 欄舍編號 樣品編號 欄舍編號 樣品編號 欄舍編號注：請?jiān)敿?xì)填寫表格，一式兩份。填表人簽字：參 考 文 獻(xiàn)1 Seddon,Y,Optimisingoralfluidcollectionfromgroupsofpigs:Effectofhousingsystemandprovision ropes.J. Vet