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文檔簡介
1、P391 . 何謂蛋白質?蛋白質的主要功能是什么?答:蛋白質是指含有氨基的竣酸。是由許多不同的紡氨基酸按一定的序列通過酰胺鍵縮合而形成的,具有較穩(wěn)定的構象并具有一定功能的生物大分子。主要功能:(1)主要功能:(1)酶催化化學反應(5)保護蛋白和受體蛋白起保護作用(2)貯藏蛋白起貯藏功能(2)貯藏蛋白起貯藏功能(6)激素起調(diào)節(jié)生命活動的作用(3)收縮蛋白起收縮作用(3)收縮蛋白起收縮作用(7)結構蛋白構成生物體(4)運載小分子和離子(4)運載小分子和離子(8)調(diào)節(jié)控制細胞的生長發(fā)育.蛋白質化學結構測定得基本原則是什么?答:測定蛋白質中的氨基酸的組成。蛋白質的N端和C端的測定。應用兩種或兩種以上的
2、不同的方法將所要的測定的蛋白質肽鏈斷裂,各自得到一系列大小不同的 肽段。分離提純所產(chǎn)生的肽,并測定出它們的序列。從有重疊結構的各個肽的序列中推斷出蛋白質中全部氨基酸的排列順序。.常用于蛋白質多肽鏈 N端、C端測定得方法有哪幾種?基本原理是什么?答:Sanger反應:當DNP-多肽或DNP-蛋白質用酸水解時,所有的肽鍵被切開,DNP基仍然連N端氨基酸上,DNP-氨基酸經(jīng)紙層析,從層析圖譜上黃色斑點的位置上可鑒定N端氨基酸的種類和數(shù)目。Edman反應:蛋白質多肽鏈 N端氨基酸的 小氨基也可以PITC反應生成PTC-蛋白質,在酸性溶液 中,它就釋放出末端 PTH氨基酸和比原來少了一個氨基酸殘基的多肽
3、鏈。所得PTH-氨基酸經(jīng)乙酸乙酯提純后,層析鑒定后,確定肽鏈的N端的氨基酸的種類剩余的肽鏈可以重復應用這個方法測定N端的第二個氨基酸。4.蛋白質的一級結構決定其構象,生物功能又是建立在蛋白質的構象基礎上,你是如何理解的?答:多肽鏈并不是線形延伸的,是按照一定的折疊盤繞成的空間結構??臻g結構是以它的一級結構為基礎的。每種蛋白質分子都具有特定的結構來完成它的特定的功能,甚至只有個別氨基酸的變化就能引起功能的改變或喪失,證實了蛋白質的結構和功能的相適應性。.根據(jù)蛋白質等電點,指出下列蛋白質所指定pH條件下,電泳時得泳動方向:胃蛋白酶(pI1.0),在pH5.0 ;向正極移動血清清蛋白(pI4.9)在
4、pH6.0;向正極移動a-脂蛋白(Pi5.8 ),在pH5.0和Ph9.0 ;向負極移動和向正極移動.蛋白質變性作用變構作用有何差別?蛋白質變性后有何特點?答:蛋白質變性作用發(fā)生后,一級結構不破壞,其化學性質和生物性質多有所改變。變構效應是指 蛋白質的空間構象發(fā)生了變化,會影響蛋白質的功能的改變。蛋白質變性后的特點:變性后,氫鍵等次級鍵被破壞,蛋白質分子就從原來的有秩序的卷曲緊密結 構變?yōu)闊o秩序的松散結構。也就是二三級以上的高級結構發(fā)生改變或破壞,但一級結構沒破壞,組成成分 和相對分子量沒有變化。如果不過于激烈,是一種可逆反應。即:恢復到原來的構象,從而恢復原來的理化性質。.解釋下列名詞:構象
5、與構型:構象:指蛋白質分子中所有的原子在三維空間的排列分布和肽鏈的走向。構型:立體異構體原子或基因在空間的不同排列形式。N端和C端:通常書寫多肽或蛋白質肽鏈結構時,習慣總是把肽鏈末端有紡氨基的寫在左邊稱之為N端或氨基端用“朦示。另有a-竣基末端的寫在右邊,稱之為端或竣基末端,用Oh示。蛋白質的二級結構和三級結構二級結構:主要指蛋白質多肽鏈本身的折疊和盤繞方式。三級結構:一條多肽鏈上的所有原子,包括主鏈和殘基側鏈三維空的分布。肽:一個氨基酸的竣基和另一個氨基酸的竣基脫水縮合而成的化合物。肽鍵:氨基酸之間脫水后形成的鍵叫肽鍵氨基酸殘基與構象單元:組成多肽鏈的氨基酸單位已不是完整的氨基酸分子,因此每
6、一個NH-CH-CO-單位稱為氨基酸殘基。在肽鏈局部區(qū)域肽鏈通過形成氫鍵而形成有規(guī)則的構象單元。R10.蛋白質因變性發(fā)生沉淀作用和與硫酸鏤鹽析發(fā)生沉淀作用,兩者在本質上有何差別?如何區(qū)分?(前者失活)答:差別:蛋白質由于變性而導致氫鍵等次級鍵被破壞,即二、三高級結構發(fā)生改變或破壞,從而失去活性形成聚集沉淀,而與硫酸鏤鹽發(fā)生沉淀作用只是破壞了蛋白質周圍的水膜,中和了蛋白質分子的電荷,從而產(chǎn)生沉淀,但是蛋白質的活性并沒有喪失。區(qū)分:前者失活,后者依然有生物活性。P661 .列表說明DNA和RNA在化學組成、分子結構和生物學功能各方面主要特點?;瘜W組成分子結構生物學功能級結構DNA含有D-2脫氧核糖
7、含有胞嗑咤、胸腺嗑咤鳥喋吟、腺喋吟a-雙螺旋DNA中的核音酸序 列決定了生物體的遺傳特 征RNA含有D-核糖含有胞嗑咤、尿嗑咤含有嗯吟、腺嗯吟大多數(shù)為一條單鏈在DNA的復制、轉 錄翻譯中起到一定的調(diào)控 作用,與細胞內(nèi)或細胞間 的一些物質的運輸核定位 有關2.列述DNA雙螺旋結構的要點,從分子大小和形成氫鍵兩個方面A-T配對和G-C配對是堿基配對的最佳方案,概要說明堿基配對規(guī)律在生命科學中的意義。答:雙螺旋的要點:DNA分子是由兩條方向相反的平行的多核昔酸鏈構成的一條鏈的5-末端與另一條的3末端相對兩條鏈的主鏈都是右手螺旋,由共同的螺旋軸。兩條鏈上的堿基均在主鏈的內(nèi)側A與T配對,G與C配對。成對
8、的堿基大致處于同一平面,改平面與螺旋軸基本垂直。大多數(shù) DNA屬雙鏈DNA (dsDNA ),某些病毒 DNA的單鏈DNA (ssDNA )。雙鏈上的化學鍵手堿基配對等因素的影響旋轉手限制。使DNA分子比較剛硬,呈比較伸展的結構。亦可作進一步的扭曲成三3 .列述RNA的主要類型及其結構和功能的特點型類結構功能AtRN二級結構三葉草形三級結構倒L形將氨基酸轉運到核糖體-mRNA復合物的相應的位置,用于合 蛋白質。ArRN復雜的多環(huán)多臂結構與其他的蛋白質組成核糖體,完成蛋白質的合成。NAmR分子長度差異很大進入細胞質指導蛋白質的合成。NAsnR有些具有帽子結構在翻譯水平,抑制基因的表達,DNA的復
9、制和轉錄簡述核酸結構的穩(wěn)定因素。答:(1)許多堿基間的氫鍵的能量是很大的。(2)雙螺旋區(qū)相鄰的堿基的距離使平面上下分布的電子云可以相互作用,對核酸的結構起重要的作用.(3)螺旋區(qū)外側的帶負電荷的磷酸基在不與正離子結合的狀態(tài)下有靜電斥力簡述核酸變性和復性的過程,列述影響Tm和復性的主要因素。答:變性的過程:雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂,空間結構被破壞,形成單鏈的無規(guī)則的線團狀態(tài).復性的過程:變性的核酸的互補鏈在適當?shù)臈l件下重新締合成雙螺旋的過程影響Tm主要因素:(1)G-C對的含量 G-C含量愈高Tm愈高(2)溶液的離子強度 強度愈高Tm愈高(3)高pH值下堿基廣泛失去質子而喪失形成氫鍵的能力(4)變性劑
10、也可以影響影響Tm的主要因素:單鏈片斷濃度越高,隨機碰撞的頻率越高,復性速度越快.較大的單鏈片斷擴散困難,鏈檢錯配的幾率高,復性較慢.片斷內(nèi)的重復序列多,側容易形成互補區(qū),因而復性較慢.維持溶液一定的濃度,消除林6 .簡述分子雜交及有關應用技術的要點。答:在退火的條件下,不同來源的 DNA互補區(qū)形成雙鏈,或 DNA單鏈和RNA鏈的互補區(qū)形成DNA-RNA雜和雙鏈的過程.叫分子雜交.要點:通常對天然的或人工合成的DNA或RNA片段進行放射性同位素或熒光標記,做成探針.直接用 TOC o 1-5 h z 探針與菌落或組織細胞中的核酸雜交,因而未改變核酸的位置,叫原位雜交.將核酸直接點在膜上,在與探
11、針雜交稱點雜交,使用狹縫點樣器時亦稱狹縫印記雜交.主要用于分析基因拷貝數(shù)和轉錄水平的變化,亦可用于檢測病原微生物和生物制品中的核酸污染狀況.P122 HYPERLINK .什么是酶?答:在生物體內(nèi),催化生化反應在體內(nèi)順利和迅速進行的一類物質.簡述目前采用的酶的分類法及其優(yōu)點?答:國際酶學委員會曾制定一套完整的酶的分類系統(tǒng),優(yōu)點:一切新發(fā)現(xiàn)的酶都能按照這個系統(tǒng)得到適當?shù)木幪枺皇瞧茐脑瓉硪延械南到y(tǒng).為不斷發(fā)現(xiàn)的新酶編號留下了無限的余地.解釋酶的活性部位、必需基團及二者關系.答:活性部位的基團都是必需基團,但是必需基團也可以包括那些活性部位以外的,對維持酶的空間構象必需的基團.酶除了活性部位以外
12、,其它部位不是可有可無的.試述酶催化的作用機理.(1)鄰近定向效應大大的提高了活性部位上底物的有效濃度,使分子見反應近似于分子內(nèi)的反應,同時還為分子軌道交叉提供了有利的條件.(2)張力”和形變”底物結合可以誘導酶分子構象的變化,而變化的酶分子又使底物分子的敏感鍵產(chǎn)生張力”甚至形變”從而促進酶-底物中間產(chǎn)物進入過渡狀態(tài).(3)酶活性部位上的某些基團可以作為良好的質子供體或受體對底物進行酸堿催化(4)某些美可以和底物生成不穩(wěn)定的共價中間物,,這種中間物進一步生成產(chǎn)物要比非催化反應容易得多. TOC o 1-5 h z .什么是酶活力?測定酶活力使用注意什么?答:酶的活力就是酶所加速催化的化學反應的
13、能力測定酶活力使用注意(1)測定的反應速度必須是反應初速度.否則不能得到準確的結果.(2)酶反應速度受反應條件的影響,因此在測定酶活力時,要維持在一套固定的條件下進行.影響酶催化反應的速度的因素有哪些?答:(1)酶濃度對酶作用有影響。在底物足夠過量而其他條件固定的條件下,并且反應系統(tǒng)中不含 有抑制劑酶活性的物質,及其他不利于酶發(fā)揮作用的因素時,酶促反映的速度和酶的濃度成反比。(2)底物濃度對酶作用也有影響。在底物濃度較低時,濃度增大速度增加,近乎成正比。底物濃度較高時,濃度增加速度增加不明顯。當?shù)孜餄舛冗_到一定限度時速度達到一極限值時,底物在增加反應速度幾乎不變。(3)pH對酶的作用也有影響.
14、不同的酶的最使pH不是固定的常數(shù),其數(shù)值受酶的純度底物的種類和濃 度緩沖液的種類和濃度的影響,因此酶的最適pH值只在一定條件下才有意義(4)溫度對酶作用的影響.在低溫時溫度升高反應速度增加,在溫度升到一定限度,酶活性逐漸失去,反應變慢.(5)激活劑對酶作用的影響.激活劑能夠提高酶活力.(6)抑制劑對酶作用的影響.一直技能是酶的必需基團霍梅的活性部位中的基團的化學性質改變而降低美的活力甚至喪失活性.(7)酶的別本效應.酶的別構效應可能激活也可能抑制酶的反映.試寫出米氏方程?v=VS/Km+s 或 Km=S(V/v 1) 當 v=V/2 時 Km=S.解釋:全酶:酶蛋白余輔因子單獨存在時,均無催化
15、活力,只有二者結合成完整的分子時才具有活力次完整的酶分子稱為全酶.輔酶:通常把與酶蛋白結合比較松的,用透析法可以出去的小分子有機物稱為輔酶.輔基:通常把與酶蛋白結合比較緊的,用透析法不易去除的小分子有機物稱為輔基多酶復合物:幾個每嵌合而成的復合物稱為多酶復合物 TOC o 1-5 h z 調(diào)節(jié)酶:催化活性可以被調(diào)節(jié)的酶稱之為調(diào)節(jié)酶.同工酶:從同一種屬或同一個體的不同組織或同一組織,同一細胞中發(fā)現(xiàn)有的酶具有不同分子形式但卻催化相同的化學反應,這類酶就稱為同工酶.什么稱為別構酶?答:是一類調(diào)節(jié)酶,在生物體內(nèi)具有類似血紅蛋白那樣的別構現(xiàn)象.P139什么是維生素?答:維持機體正常生命活動不可缺少的一類
16、小分子化合物,不是機體的結構物質和能源物質,主要生理功能是對物質代謝起著重要調(diào)節(jié)的作用.P88(1)生物膜的功能是什么?細胞及各種內(nèi)膜系統(tǒng),統(tǒng)稱為生物膜.細胞膜的功能:1.物質傳送作用細胞在生命活動中,不斷地與外界進行物質的交換,需依賴于細胞 膜上專一性的傳送載體蛋白或通道蛋白,實現(xiàn)細胞內(nèi)外物質的交換.保護作用生物膜具有自我封閉的特點,細胞膜作為細胞外周屆膜,對保持細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定起著重 要的彳用.信息傳遞作用細胞膜上有各種受體,能特異的結合激素等信號分子.一旦受體與激素結合,就可將信 號跨膜串鄉(xiāng)細胞內(nèi)的酶系,產(chǎn)生特定的生理效應.高等生物中細胞內(nèi)膜系統(tǒng)的功能已經(jīng)高度分化.線粒體內(nèi)膜機葉綠體類囊
17、體含有許多酶積極蛋白質組成的復雜體系,是進行氧化磷酸化和廣和磷酸化的主要場所,具有能量轉換的功能.內(nèi)質網(wǎng)的糟面內(nèi)質網(wǎng)膜于蛋白質合成及運輸有關,光華內(nèi)質網(wǎng)則和脂肪膽固醇代謝與糖原的分截脂溶性的毒素解毒有關. TOC o 1-5 h z .高爾基體膜的主要功能是為細胞提供一個內(nèi)部的運輸系統(tǒng).核膜作為細胞核與細胞質之間的重要界膜,對穩(wěn)定核的形態(tài)和化學成分起著重要的作用.為什么說信息傳遞和細胞識別與細胞膜有關?答:細胞膜上有各種受體,能特異的結合激素等信號分子.一旦受體與激素結合,就可將信號跨膜串鄉(xiāng) 細胞內(nèi)的酶系,產(chǎn)生特定的生理效應.所以信息傳遞與細胞膜有關.細胞識別作用是一種發(fā)身在細胞表面的現(xiàn)象,其
18、本質是細胞通過細胞膜上的特定的膜受體或膜抗原與外來的信號物質的特異結合.相同個體內(nèi)的合組織器官都有相同的相容性抗原,可自相識別.不同個體間因相容性抗原不同而相互排斥.所以細胞識別與細胞膜有關.P158什么是新陳代謝?生物體的新陳代謝有哪些共同的特點?研究代謝有哪些主要方法?答:新陳代謝是生物與外界環(huán)境進行物質交換與能量交換的全過程.是生物體把從外界攝取含低能量的較簡單的化合物,轉換成含高能量的復雜的細胞結構的化合物的過程新陳代謝的共同的特點:生物體內(nèi)的絕大多數(shù)代謝反應式在溫和的條件下,由酶所催化進行的.生物體內(nèi)反應與步驟雖然繁多,但互相配合,有條不紊,彼此協(xié)調(diào),而有嚴格的順序性.生物體對內(nèi)外反
19、應條件有高度的適應性和靈敏的自動調(diào)節(jié)研究的方法有:活體內(nèi)和活體外實驗.同位素示蹤法.代謝途徑阻斷法.解釋下列名詞?生物氧化:有機物質在生物體細胞內(nèi)的氧化稱之為生物氧化呼吸鏈:代謝物上的氫原子,被脫氫酶及或脫落后,經(jīng)過一系列的傳遞體,最后傳遞給被激活的氫原子,而 生成水的全部體系叫呼吸鏈.通常也稱之為電子傳遞體系,或電子傳遞鏈.細胞色素氧化酶:是一類以鐵葉琳為輔基的蛋白質,在呼吸鏈中依靠貼得的化合價的變化而傳遞電子的酶類.標準氧化還原電位 E :E :底物水平磷酸化:是在被氧化的底物上進行的磷酸化作用,其過程中形成了某些高能磷酸化合物的中間產(chǎn)物,通過酶的的彳用可使 ADP生成ATP.磷氧比:指每消耗一摩爾氧所消耗無機磷酸的摩爾數(shù).磷酸甘油穿梭:在真核生物月液中的 NADH不能通過正常的
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