1、 電子處于激發(fā)態(tài)是不穩(wěn)定狀態(tài)，返回基態(tài)時，通過輻射電子處于激發(fā)態(tài)是不穩(wěn)定狀態(tài)，返回基態(tài)時，通過輻射躍遷躍遷(發(fā)光發(fā)光)和無輻射躍遷等方式失去能量；和無輻射躍遷等方式失去能量；傳遞途徑傳遞途徑輻射躍遷熒光延遲熒光磷光內(nèi)轉(zhuǎn)移外轉(zhuǎn)移系間跨越振動弛預(yù)無輻射躍遷 激發(fā)態(tài)停留時間短、返回速度快的途徑，發(fā)生的幾率大，發(fā)光強度相對大；熒光熒光：10-710 -9 s,第一激發(fā)單重態(tài)單重態(tài)的最低振動能級基態(tài)；磷光磷光：10-310s；第一激發(fā)三重態(tài)三重態(tài)的最低振動能級基態(tài)；S2S1S0T1吸吸收收發(fā)發(fā)射射熒熒光光發(fā)發(fā)射射磷磷光光系間跨越內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫能量l l 2l l 1l l 3 外轉(zhuǎn)換l l 2T2內(nèi)轉(zhuǎn)換

2、振動弛豫 熒光發(fā)射熒光發(fā)射：電子由第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級基態(tài)（ 多為 S1 S0躍遷），發(fā)射波長為 l 2的熒光； 10-710 -9 s 。 由圖可見，發(fā)射熒光的能量比分子吸收的能量小，波長長； l 2 l 2 l 1 ； 磷光發(fā)射磷光發(fā)射：電子由第一激發(fā)三重態(tài)的最低振動能級基態(tài)（ T1 S0躍遷）； 電子由S0進入T1的可能過程：（ S0 T1禁阻躍遷） S0 激發(fā)振動弛豫內(nèi)轉(zhuǎn)移系間跨越振動弛豫 T1 發(fā)光速度很慢： 10-310 s 。 光照停止后，可持續(xù)一段時間。分子產(chǎn)生熒光必須具備的條件分子產(chǎn)生熒光必須具備的條件1）具有合適的結(jié)構(gòu)；2）具有一定的熒光量子產(chǎn)率。 熒光量子產(chǎn)率（）

3、：吸收的光量子數(shù)發(fā)射的光量子數(shù) 熒光量子產(chǎn)率與激發(fā)態(tài)能量釋放各過程的速率常數(shù)有關(guān)，如外轉(zhuǎn)換過程速度快，不出現(xiàn)熒光發(fā)射； 測量熒光的儀器主要由測量熒光的儀器主要由四個部分四個部分組成：激發(fā)光源、樣品組成：激發(fā)光源、樣品池、雙單色器系統(tǒng)、檢測器。池、雙單色器系統(tǒng)、檢測器。 特殊點特殊點：有兩個單色器，光源與檢測器通常成直角。 基本流程如圖：基本流程如圖：單色器單色器：選擇激發(fā)光波長的第一單色器和選擇發(fā)射光(測量)波長的第二單色器；光源光源：燈和高壓汞燈，染料激光器(可見與紫外區(qū))檢測器檢測器：光電倍增管。特點特點1 1）靈敏度高）靈敏度高 比紫外-可見分光光度法高24個數(shù)量級；為什么？ 檢測下限：

4、0.10.1g/cm-3 相對靈敏度：0.05mol/L 奎寧硫酸氫鹽的硫酸溶液。2 2）選擇性強）選擇性強 既可依據(jù)特征發(fā)射光譜，又可根據(jù)特征吸收光譜；3 3）試樣量少）試樣量少 缺點缺點：應(yīng)用范圍小。1、ASA和SA貯備溶液的配制（1）ASA貯備液的配制：稱取0.4000g乙酰水楊酸溶于1醋酸-氯仿溶液中，用 1醋酸氯仿溶液定容于1000mL容量瓶中，搖勻，備用；（2）SA貯備液的配制：稱取0.750g水楊酸溶于1醋酸氯仿溶液中，用 1醋酸氯仿溶液定容于1000mL容量瓶中，搖勻，備用。2、ASA和SA激發(fā)光譜和熒光光譜的繪制將ASA和SA貯備液分別稀釋100倍(分二次完成，每次稀釋10倍

5、)。用得到的溶液分別掃描ASA和SA的激發(fā)光譜和熒光光譜曲線，并分別確定它們的最大激發(fā)波長和最大發(fā)射波長。3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作(1) ASA標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 用移液管分別準(zhǔn)確移取濃度為4.00 gmL-1的ASA溶液2、4、6、8、10 mL至5只50mL容量瓶中，用1醋酸氯仿溶液稀至刻度，搖勻。分別測量它們的熒光強度.(2) SA標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 用移液管分別準(zhǔn)確移取濃度為7.5gmL-1 的SA溶液2、4、6、8、l0mL至5只50mL容量瓶中，用 1醋酸氯仿溶液稀釋至刻度，搖勻。分別測量它們的熒光強度4、阿斯匹林藥片中乙酰水楊酸和水楊酸的測定 取5片阿司匹林藥片磨成粉末，準(zhǔn)確稱取0.40mg用1醋酸氯仿溶液溶解，全部轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用1醋酸氯仿溶液稀釋至刻度。迅速通過定量濾紙干過濾，用該濾液在與標(biāo)準(zhǔn)溶液同樣的測定條件下測量SA熒光強度。 將上述濾液稀釋1000倍(用三次稀釋來完成)，在與標(biāo)準(zhǔn)溶液同樣的測定條件下測量ASA熒光強度。數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)處理 1、從繪制的ASA和SA激發(fā)光譜和熒光光譜曲線上，確定它們的最大激發(fā)波長和最大發(fā)