1、1實驗七實驗七 生化反應培養(yǎng)基制備生化反應培養(yǎng)基制備2一、目的一、目的v1 1、掌握各類培養(yǎng)基的名稱和成分；、掌握各類培養(yǎng)基的名稱和成分；v2 2、掌握各類生化反應原理和結(jié)果；、掌握各類生化反應原理和結(jié)果；v3 3、掌握各類培養(yǎng)基制備程序及注意事項。、掌握各類培養(yǎng)基制備程序及注意事項。3二、內(nèi)容二、內(nèi)容v1 1、糖發(fā)酵培養(yǎng)基、糖發(fā)酵培養(yǎng)基 300ml300ml1 1組；組；v2 2、雙糖鐵培養(yǎng)基、雙糖鐵培養(yǎng)基 150ml150ml2 2組組+7+7組；組；v3 3、蛋白胨水培養(yǎng)基、蛋白胨水培養(yǎng)基150ml150ml3 3組；組；v4 4、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基150ml15

2、0ml4 4組、組、5 5組；組；v5 5、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基 150ml150ml6 6組。組。4三、操作三、操作v1 1、稱量、稱量 一定要先注一層水在燒瓶底層，然一定要先注一層水在燒瓶底層，然后倒入粉劑藥粉；后倒入粉劑藥粉；v2 2、溶化、溶化 反復溶化到肉眼見不到較大顆粒為反復溶化到肉眼見不到較大顆粒為止；溶化前需標注水線，供溶化后補水；溶止；溶化前需標注水線，供溶化后補水；溶化時需要玻棒攪拌，注意不要使培養(yǎng)基溢出；化時需要玻棒攪拌，注意不要使培養(yǎng)基溢出；5v3 3、調(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)pH pH 到到7.47.4，蛋白胨水，蛋白胨水pHpH調(diào)至調(diào)至7.27.2；v4 4、分裝、分裝

3、 每組每組2525支試管分裝；糖發(fā)酵培養(yǎng)基支試管分裝；糖發(fā)酵培養(yǎng)基和雙糖鐵培養(yǎng)基分裝和雙糖鐵培養(yǎng)基分裝2/52/5高度，其他的（葡萄高度，其他的（葡萄糖蛋白胨水、蛋白胨水、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基）糖蛋白胨水、蛋白胨水、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基）1/31/3高度；糖發(fā)酵管中小倒管一定要排空其中高度；糖發(fā)酵管中小倒管一定要排空其中氣體；氣體；6v5 5、高壓滅菌、高壓滅菌 含糖培養(yǎng)基（糖發(fā)酵、雙含糖培養(yǎng)基（糖發(fā)酵、雙糖鐵、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基）糖鐵、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基）10 10磅壓磅壓力滅菌，其他的（蛋白胨水、枸櫞酸鹽力滅菌，其他的（蛋白胨水、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基）培養(yǎng)基）15 15磅壓力滅菌；磅壓力滅菌；v6 6、

4、擺斜面、冷卻、放置冰箱保存、擺斜面、冷卻、放置冰箱保存7四、結(jié)果記錄四、結(jié)果記錄v記錄顏色、斜面、高層斜面、分析各生化實記錄顏色、斜面、高層斜面、分析各生化實驗選用什么培養(yǎng)基。驗選用什么培養(yǎng)基。8五、課后小結(jié)五、課后小結(jié)v本次實驗稱量和滅菌溫度非常重要，希望大本次實驗稱量和滅菌溫度非常重要，希望大家多加注意。家多加注意。9附注：附注：v1 1、雙糖鐵培養(yǎng)基、雙糖鐵培養(yǎng)基 成分：蛋白胨成分：蛋白胨1g 1g、牛肉膏、牛肉膏3g3g、NaCl 5gNaCl 5g、乳糖、乳糖10g10g、葡萄糖、葡萄糖1g 1g、硫代硫酸鈉、硫代硫酸鈉0.2g0.2g、硫酸亞鐵硫酸亞鐵0.2g0.2g、瓊脂、瓊脂1

5、6g16g、蒸餾水、蒸餾水1000ml1000ml、0.40.4酚紅酚紅4 46d6d。v2 2、糖發(fā)酵培養(yǎng)基、糖發(fā)酵培養(yǎng)基 成分：蛋白胨水或肉膏湯成分：蛋白胨水或肉膏湯（pH7.4pH7.47.67.6）1000ml1000ml、所需糖、醇或苷類物、所需糖、醇或苷類物質(zhì)質(zhì)5 510g10g、1.61.6溴甲酚紫乙醇溶液溴甲酚紫乙醇溶液1ml1ml。10v3 3、蛋白胨水、蛋白胨水 成分：蛋白胨成分：蛋白胨20g20g、NaCl 5gNaCl 5g、蒸、蒸餾水餾水1000ml1000ml。v4 4、葡萄糖蛋白胨水、葡萄糖蛋白胨水 成分：蛋白胨成分：蛋白胨5g5g、葡萄糖、葡萄糖5g5g、K2HPO4 5gK2HPO4 5g、蒸餾水、蒸餾水1000ml1000ml。v5 5、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基 成分：成分：NaCl 5gNaCl 5g、硫酸鎂、硫酸鎂0.2g0.2g、磷酸二氫胺、磷酸二氫胺1g 1g、枸櫞酸鈉、枸櫞酸鈉5g5