1、植物組織培養(yǎng)試題及答案試卷編號(hào) NO:高等函授教育植物組織培養(yǎng)試題學(xué)號(hào):姓名:題號(hào) 一 二 三 四 五 總 分分?jǐn)?shù)一 名詞解釋:(10*2 分=20 分)1、植物細(xì)胞組織培養(yǎng)2、細(xì)胞全能性3、脫分化4、外植體5、試管苗馴化6、間接不定芽發(fā)生7、雙極性8、微體嫁接9、人工種子10、體細(xì)胞無性系變異二 填空:(30*1 分=30 分)1、目前植物組織培養(yǎng)應(yīng)用最廣泛的方面就是與。2 、 由 脫 分 化的 細(xì) 胞 再 分 化出完 整 植 株有 兩 種 途 徑 , 一種 叫做,另一種叫做。3、培養(yǎng)用具的常用滅菌方法有、。4、某些生長調(diào)節(jié)物質(zhì)及抗生素、酶類物質(zhì)遇熱不穩(wěn)定, 對(duì)其滅菌時(shí)不能進(jìn)行,而要進(jìn)行。5

2、、一般來說, 黑暗條件下有利于的增殖, 而往往需要一定的光照。6、植物離體授粉技術(shù)通常包括、三個(gè)方面。7、一般液體培養(yǎng)的繼代時(shí)間較短 ,繼代一次; 而固體培養(yǎng)繼代時(shí)間可以長些,繼代一次。8、外植體器官發(fā)生的三種途徑包括、。9、從再生植株倍性來瞧, 小孢子培養(yǎng)通常產(chǎn)生植株, 胚培養(yǎng)通常產(chǎn)生植株,通常產(chǎn)生三倍體植株。10、脫毒苗鑒定與檢測(cè)的主要方法有、。11、在生長素中,對(duì)于許多作物花粉的啟動(dòng)、分裂、形成愈傷組織與胚狀體起著決定性作用, 但就是對(duì)卻有抑制作用。12、用平板培養(yǎng)法培養(yǎng)單細(xì)胞或原生質(zhì)體時(shí), 常用來衡量細(xì)胞培養(yǎng)效果。13、用藥劑處理就是誘導(dǎo)染色體加倍的傳統(tǒng)方法。三 計(jì)算題(1*10 分=

3、10分)某培養(yǎng)基的配方就是 MSBA2、0mg/LNAA0、5mg/L2、5%蔗糖0、7瓊脂粉。MS母液的濃度分別就是: 大量元素倍, 微量元素 500 倍, 鐵鹽 100倍, 有機(jī)物倍;BA 母液濃度 1、0 mg/ml ,NAA母液濃度 0、1mg/ml。要配制400ml 該培養(yǎng)基, 需要吸取各種母液各多少 ml？分別稱取蔗糖、瓊脂粉各多少克？( 要求寫出計(jì)算步驟)四 簡(jiǎn)答題(5*5 分=25 分)1、造成組織培養(yǎng)過程中發(fā)生污染的原因有哪些？如何有效控制污染？2、簡(jiǎn)述外植體消毒的一般步驟。3、胚培養(yǎng)在科學(xué)研究及生產(chǎn)實(shí)踐中有哪些應(yīng)用？4、結(jié)合花粉培養(yǎng), 簡(jiǎn)述瞧護(hù)培養(yǎng)法。植物組織培養(yǎng)試題及答案

4、5、如何減輕植物組織培養(yǎng)中試管苗玻璃化現(xiàn)象？五 論述題(1*15=15 分)試述植物組織培養(yǎng)中影響器官分化的因素有哪些？在實(shí)驗(yàn)研究中應(yīng)該如何考慮這些因素以達(dá)到較好的器官分化效果？植物組織培養(yǎng)試題及答案植物組織培養(yǎng)參考答案一 名詞解釋1、 植物細(xì)胞組織培養(yǎng): 指在離體條件下利用人工培養(yǎng)基對(duì)植物器官、組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體等進(jìn)行培養(yǎng) , 使其長成完整的植株。2、 細(xì)胞全能性 : 指一個(gè)完整的植物細(xì)胞擁有形成一個(gè)完整植株所必需的全部遺傳信息。3、 脫分化 : 在細(xì)胞組織培養(yǎng)中, 一個(gè)成熟細(xì)胞或分化細(xì)胞轉(zhuǎn)變成為分生狀態(tài)的過程, 即形成愈傷組織的過程。4、 外植體 : 在植物細(xì)胞組織培養(yǎng)中, 由活體植物體

5、上提取下來的, 接種在培養(yǎng)基上的無菌細(xì)胞、組織、器官等均稱為外植體。5、 試管苗馴化 : 植物組織培養(yǎng)中獲得的小植株, 長期生長在試管或三角瓶內(nèi), 體表幾乎沒有保護(hù)組織 , 生長勢(shì)弱 , 適應(yīng)性差 , 要露地移栽成活, 完成由“異養(yǎng)”到“自養(yǎng)”的轉(zhuǎn)變, 需要一個(gè)逐漸適應(yīng)的馴化過程。6、 間接不定芽發(fā)生: 指外植體先脫分化產(chǎn)生愈傷組織, 再分化形成芽器官。7、 雙極性 : 指在細(xì)胞發(fā)育的初期其內(nèi)含物的分布具不均勻性, 形成胚性細(xì)胞后具有發(fā)育成芽端與根端的潛在能力。8、 微體嫁接 : 指將0、1 0 、 2mm 的莖尖作為接穗, 嫁接到由試管中培養(yǎng)出來的無菌實(shí)生砧木上 , 繼續(xù)進(jìn)行試管培養(yǎng), 愈合

6、成為完整的的植株。9、 人工種子 : 指通過植物組織培養(yǎng)的方法獲得的具有正常發(fā)育能力的材料, 外面還被有特定物質(zhì) , 在適宜條件下可以發(fā)芽成苗的植物幼體。10、 體細(xì)胞無性系變異: 在植物組織與細(xì)胞培養(yǎng)中, 培養(yǎng)細(xì)胞及再生植株往往會(huì)出現(xiàn)各種變異,稱為體細(xì)胞無性系變異。二、填空1、 植物脫毒離體快繁2、 不定器官形成 ( 器官形成 )體細(xì)胞胚胎發(fā)生3、 干熱滅菌高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌4、高溫高壓滅菌過濾滅菌5 、愈傷組織器官的分化6、胚珠試管受精離體子房授粉雌蕊離體授粉7 、 1 周 2-4 周8、腋芽萌發(fā)不定芽發(fā)生體細(xì)胞胚胎發(fā)生9 、單倍體 二倍體 胚乳培養(yǎng)10、指示植物法 抗血清鑒定法電子顯微

7、鏡鑒定法酶聯(lián)免疫測(cè)定法11、 2, 4-D 器官分化 12、植板效率13 、秋水仙素三、計(jì)算題大量元素母液 :400ml/20=20ml微量元素母液 :400ml/500=0、 8ml鐵鹽母液 :400ml/100=4ml有機(jī)母液 :400ml/50=8mlBA母液 : 0 、 4L *2 、 0mg/L/1 、 0mg/ml=0、 8mlNAA母液 : 0 、 4L *0 、 5mg/L/0 、 1mg/ml=2ml蔗糖 : 400g *2 、 5%= 10g瓊脂粉 : 400g *0 、 7%= 2、8g四、簡(jiǎn)答題1、造成組織培養(yǎng)過程中污染的原因很多 , 如工作環(huán)境及儀器的因素、 培養(yǎng)基及

8、器皿滅菌不徹底、外植體帶菌、操作時(shí)不遵守操作規(guī)程等。造成污染的病原主要分為細(xì)菌與真菌兩大類。真菌性污染主要指霉菌引起的污染。一般接種后 3 8d 即可發(fā)。真菌性污染一般多由接種室內(nèi)的空氣不清潔、超凈工作臺(tái)的過濾效果不理想、操作不慎等原因引起。此類污染可通過完善操作、控制培養(yǎng)環(huán)境、嚴(yán)格操作程序來克服。細(xì)菌性污染除外植體帶菌或培養(yǎng)基滅菌不徹底外, 主要就是操作人員的不慎造成。除要求操作人員嚴(yán)格按照無菌操作程序操作外, 外植體帶菌引起的污染與外植體的種類、取材季節(jié)、部位、預(yù)處理方法及消毒方法密切相關(guān)。因此 , 取材以春夏生長旺季、當(dāng)年生的嫩梢為佳, 應(yīng)盡量選擇晴天中午進(jìn)行,或取離體枝梢在潔凈空氣條件

9、下抽芽, 然后從新生組織中取材接種。外植體的徹底消毒就是控制污染的前提, 應(yīng)根據(jù)不同材料選擇合適的消毒劑與消毒方法, 有些特殊材料還須進(jìn)行預(yù)處理, 以達(dá)到最佳消毒效果。對(duì)于材料內(nèi)部帶菌的組織有時(shí)還需在培養(yǎng)基中加入適量抗生素。2、外植體取材自來水沖洗70酒精表面消毒20 60s無菌水沖洗消毒劑(0 、1升汞或 2 3次氯酸鈉 ) 消毒處理8 10min 或 25 35min無菌水充分洗凈備用。3、 (1) 用于胚的挽救遠(yuǎn)緣雜交就是植物育種工作的重要途徑之一, 單遠(yuǎn)緣雜交難以成功的一個(gè)主要原因就就是雜交后的合子胚發(fā)育不良, 常常表現(xiàn)中途敗育。通過人工胚培養(yǎng)可使之成苗, 用于育種。(2) 打破種子休

10、眠 胚培養(yǎng)可使休眠的種子提高萌發(fā)成苗、縮短育種周期或加速良種繁育。(3) 克服珠心胚的干擾利用幼胚離體培養(yǎng)技術(shù)可以排除多胚性植物珠心胚對(duì)合子胚的干擾, 獲得雜種胚 , 大大提高雜交育種的效率。(4) 誘導(dǎo)胚狀體及胚性愈傷組織利用植物的幼胚或其她胚胎組織, 在離體培養(yǎng)條下可以產(chǎn)生大量次生胚狀體, 從而用于快速繁殖。(5) 種子生活力的快速測(cè)定木本植物經(jīng)層積與未層積處理的種胚離體培養(yǎng)條件的萌發(fā)速率一致。4、 Sharp等 (1972) 建立一種瞧護(hù)培養(yǎng)法, 從培養(yǎng)的番茄形成了細(xì)胞無性繁殖系。做法就是: 將濾紙片放置在完整花藥的上面, 將花粉放置在濾紙片上。5、在組織培養(yǎng)過程中, 經(jīng)常會(huì)發(fā)現(xiàn)不定芽叢

11、或者試管苗畸形生長, 莖葉呈半透明水漬狀, 葉片失綠、皺縮 , 并沿縱向卷曲, 脆弱易碎 , 葉表面完全無蠟質(zhì), 稱之為“玻璃化現(xiàn)象” 。這種“玻璃苗”細(xì)胞喪失持水能力 , 細(xì)胞內(nèi)水分大量外滲 , 增加了植株水分的散失與蒸騰 , 就是組織培養(yǎng)中一種生理失調(diào)或生理病變 , 它極易引起植株死亡 , 很難移植成活 , 已成為莖尖脫毒、工廠化育苗等方面的嚴(yán)重障礙。為了更好解決“玻璃化現(xiàn)象”, 可以 :(1) 適當(dāng)提高培養(yǎng)基中的瓊脂、蔗糖或其她滲透劑的濃度, 降低培養(yǎng)基的襯質(zhì)勢(shì)。(2) 可在培養(yǎng)基中加入適量生長延緩劑 , 例如 ABA、PP333,并降低培養(yǎng)基中含氮量與細(xì)胞分裂素、赤霉素濃度。(3) 增

12、加培養(yǎng)容器的透氣性 , 并避免容器底部受下層日光燈的加熱 , 使容器底部適當(dāng)降溫造成容器內(nèi)的濕度有自上而下的梯度。(4) 控制培養(yǎng)室內(nèi)溫度 , 可對(duì)培養(yǎng)材料適當(dāng)進(jìn)行低溫處理。(5) 增加自然光照。五、論述題首先 , 通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中生長素與激動(dòng)素或激動(dòng)素之間的平衡關(guān)系, 可以在一定程度上影響不定芽的分化。培養(yǎng)基中存在的腺嘌呤或激動(dòng)素能夠促進(jìn)不定芽的分化與發(fā)育, 但就是培養(yǎng)基中的其她化合物 , 特別就是IAA 與 NAA可以改變這種促進(jìn)作用, 因?yàn)樯L素能夠抑制不定芽的形成。當(dāng)與激動(dòng)素或腺嘌呤結(jié)合使用時(shí), 生長素可以抵消她們促進(jìn)不定芽形成的作用, 若 IAA 的相對(duì)濃度較高則有利于細(xì)胞的增殖與根的分化; 若腺嘌呤或激動(dòng)素的相對(duì)濃度較高, 則有利于不定芽的分化; 當(dāng)這兩種激素之間的比例適中時(shí), 則或產(chǎn)生無結(jié)構(gòu)的愈傷組織。赤霉素對(duì)于不定芽的分化具有抑制作用, 但就是如果不定芽已經(jīng)形成 , 赤霉素則會(huì)促進(jìn)它們進(jìn)一步伸長。不同組織在不定芽分化過程中對(duì)生長素與細(xì)胞分裂素的要求就是不同的 , 所要求的水平取決于這兩類物質(zhì)的內(nèi)生水平。其次 , 培養(yǎng)方式與培養(yǎng)條件也會(huì)影響不定芽的分化。一些植物的培養(yǎng)材料在固體培養(yǎng)基上只能以一種完全無結(jié)構(gòu)的狀態(tài)生長, 但在成分相同的液體培養(yǎng)基中卻能分化不定芽叢。此外 , 光周期、 光質(zhì)與光強(qiáng)對(duì)器官的分化也有影響。一般培養(yǎng)物適合的光強(qiáng)為1