2025年醫(yī)學(xué)檢驗微生物學(xué)技術(shù)高頻試卷考試時間：______分鐘總分：______分姓名：______一、選擇題（請將最佳選項的字母填在括號內(nèi)）1.下列哪種微生物的營養(yǎng)要求最高？A.真菌B.病毒C.放線菌D.細菌2.能使革蘭氏陽性菌和陰性菌都著色的染色法是？A.鞭毛染色B.革蘭氏染色C.抗酸染色D.莢膜染色3.在微生物檢驗中，用于分離培養(yǎng)腸道致病菌的常用培養(yǎng)基是？A.血瓊脂平板B.麥康凱瓊脂平板C.中國藍瓊脂平板D.沙氏培養(yǎng)基4.下列哪種方法不屬于微生物傳統(tǒng)的生化鑒定手段？A.碳水化合物發(fā)酵試驗B.協(xié)同發(fā)酵試驗C.活化酶試驗D.16SrRNA基因序列分析5.細菌產(chǎn)生抗生素耐藥性的主要機制不包括？A.耐藥基因突變B.質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性傳遞C.細菌生物被膜的形成D.特異性抗體介導(dǎo)6.無菌操作中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是？A.手部消毒B.環(huán)境清潔C.物理性消毒滅菌D.操作者的無菌觀念和規(guī)范操作7.從一患者痰液中分離到一種革蘭氏陰性桿菌，氧化酶試驗陽性，產(chǎn)膿，易形成生物被膜，該菌最可能是？A.大腸埃希菌B.肺炎克雷伯菌C.銅綠假單胞菌D.變形桿菌8.診斷結(jié)核病最特異性的實驗室方法是？A.痰液涂片抗酸染色B.結(jié)核菌培養(yǎng)C.PPD皮膚試驗D.結(jié)核菌基因檢測9.下列哪項不是醫(yī)院獲得性感染的主要傳播途徑？A.醫(yī)務(wù)人員手部傳播B.環(huán)境表面污染C.患者之間的直接接觸D.空氣飛沫傳播（針對呼吸道感染）10.血液培養(yǎng)標本采集時，以下做法錯誤的是？A.采集前停用可能影響結(jié)果的藥物B.嚴格無菌操作，避免污染C.采血量應(yīng)足夠（通常成人非感染部位≥5ml）D.標本采集后應(yīng)立即劇烈搖晃11.微生物從液體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到固體培養(yǎng)基上，常用的接種方法是？A.涂布接種B.劃線接種C.傾注接種D.挑取菌落接種12.能夠同時檢測多種微生物抗原或核酸片段的技術(shù)是？A.病毒培養(yǎng)B.單克隆抗體技術(shù)C.聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）D.毛細管電泳13.耐藥性監(jiān)測（WMSS）中，常用哪種方法測定細菌對某種抗生素的最低抑菌濃度（MIC）？A.顯微鏡直接計數(shù)法B.比濁法測定濁度C.K-B紙片擴散法D.瓊脂稀釋法或肉湯稀釋法14.關(guān)于細菌生物被膜，以下描述錯誤的是？A.是細菌聚集在生物表面形成的微生物群落B.由細菌分泌的胞外多聚物基質(zhì)構(gòu)成C.菌體在生物被膜中通常對抗生素敏感D.與醫(yī)院獲得性感染密切相關(guān)15.下列哪種消毒劑對細菌芽孢的殺滅效果最好？A.70-75%乙醇B.0.1%苯扎溴銨C.1%過氧化氫D.20%甲醛二、填空題1.微生物按細胞結(jié)構(gòu)可分為______、______和______三大類。2.革蘭氏陰性菌的細胞壁較薄，其外膜主要由______和______組成。3.從臨床標本中分離培養(yǎng)細菌時，選擇合適的______是獲得可靠結(jié)果的關(guān)鍵。4.細菌的遺傳變異包括______、______和______三種主要類型。5.無菌操作要求所有操作都在______環(huán)境下進行，并嚴格遵守______原則。6.臨床微生物檢驗報告通常包括______、______、______和______等信息。7.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）是對______耐藥的金黃色葡萄球菌。8.真菌感染中，常見的機會性致病菌有______和______等。9.細菌的合成代謝產(chǎn)物包括______、______、______和______等。10.實驗室廢棄物處理必須符合______要求，防止環(huán)境污染和傳播疾病。三、簡答題1.簡述革蘭氏染色的基本步驟及其原理。2.簡述臨床標本采集和運送過程中應(yīng)注意的關(guān)鍵事項。3.簡述細菌耐藥性產(chǎn)生的機制。4.簡述微生物檢驗中質(zhì)量控制的主要內(nèi)容和目的。5.簡述結(jié)核病的實驗室診斷方法及其優(yōu)缺點。四、論述題1.結(jié)合臨床案例，論述制定一份合理微生物檢驗方案的思路和依據(jù)。2.論述生物安全在醫(yī)學(xué)微生物實驗室中的重要性，并列舉至少三項關(guān)鍵措施。---試卷答案一、選擇題1.D2.B3.B4.D5.D6.D7.C8.D9.D10.D11.B12.C13.D14.C15.D二、填空題1.原核細胞型微生物，真核細胞型微生物，非細胞型微生物2.脂質(zhì)雙層，外膜蛋白3.培養(yǎng)基4.基因突變，基因重組，接合5.超凈工作臺（或生物安全柜），無菌6.病原體名稱，檢驗項目，檢驗結(jié)果，報告日期/時間7.β-內(nèi)酰胺類抗生素8.白色念珠菌，隱球菌9.發(fā)酵產(chǎn)物，熱原質(zhì)，毒素，色素10.國家相關(guān)法律法規(guī)三、簡答題1.解析：革蘭氏染色包括初染（結(jié)晶紫染色）、媒染（碘液）、脫色（95%乙醇或丙酮）、復(fù)染（沙弗寧或堿性復(fù)紅）四個步驟。其原理基于革蘭氏陰性菌細胞壁較薄，肽聚糖層致密，且外膜存在，在脫色過程中結(jié)構(gòu)破壞，易失去結(jié)晶紫-碘復(fù)合物而著色；而革蘭氏陽性菌細胞壁厚，肽聚糖層致密，無外膜，不易脫色，保留初染顏色。2.解析：關(guān)鍵事項包括：選擇合適的標本采集部位和方法；嚴格遵守無菌操作規(guī)程，避免標本污染；采集前告知患者注意事項（如停藥、清潔等）；標本采集后及時、正確處理和運送；記錄標本信息；根據(jù)不同標本類型選擇合適的保存液和運送條件（如需冷藏）；盡快送檢（一般細菌標本2小時內(nèi)）。3.解析：細菌耐藥性產(chǎn)生機制主要包括：（1）遺傳物質(zhì)改變：如染色體基因突變導(dǎo)致靶位點改變（如青霉素結(jié)合蛋白）或代謝途徑改變；質(zhì)粒、轉(zhuǎn)座子或整合子介導(dǎo)的耐藥基因（如β-內(nèi)酰胺酶基因）的獲得或傳播。（2）生物結(jié)構(gòu)改變：如產(chǎn)生膜屏障（如外膜通透性降低）、改變外排泵系統(tǒng)功能。（3）代謝改變：如產(chǎn)生酶滅活物質(zhì)（如β-內(nèi)酰胺酶水解抗生素）或改變代謝途徑（如改變?nèi)~酸合成途徑抵抗磺胺藥）。4.解析：質(zhì)量控制內(nèi)容包括：室內(nèi)質(zhì)控（使用標準菌株進行定期監(jiān)測，評估培養(yǎng)基、試劑、操作等性能）；室間質(zhì)評（參加區(qū)域性或全國性質(zhì)評計劃，與同行比對結(jié)果）；人員培訓(xùn)與能力評估；儀器設(shè)備維護與校準；標準操作規(guī)程（SOP）的建立與執(zhí)行；生物安全監(jiān)測等。目的在于確保檢驗結(jié)果的準確性、可靠性和一致性，及時發(fā)現(xiàn)和糾正潛在誤差，保證患者得到及時、有效的診斷和治療。5.解析：結(jié)核病的實驗室診斷方法包括：（1）痰涂片抗酸染色鏡檢（AFB）：方法簡單、快速，可提供即時結(jié)果，但靈敏度低，陽性率不高，主要用于篩查和流行病學(xué)調(diào)查。（2）結(jié)核菌培養(yǎng)：靈敏度和特異性高，是診斷的金標準，可進行菌種鑒定和藥物敏感性試驗（DST），但耗時長（幾周至幾月）。（3）分子生物學(xué)檢測（如XpertMTB/RIF檢測）：快速（數(shù)小時內(nèi)），靈敏度和特異性高，能同時檢測結(jié)核菌DNA和利福平耐藥基因，適用于臨床診斷和耐藥篩查。（4）其他：如結(jié)核菌素皮膚試驗（PPD）和γ-干擾素釋放試驗（IGRA）：為細胞免疫學(xué)檢測方法，用于判斷機體是否存在結(jié)核感染，但不能區(qū)分潛伏感染和活動性結(jié)核病。各有優(yōu)缺點，常聯(lián)合應(yīng)用以提高診斷準確性。四、論述題1.解析：制定合理微生物檢驗方案的思路和依據(jù)：（1）明確臨床問題：充分了解患者癥狀、體征、病史、用藥情況及已做檢查結(jié)果。（2）選擇最佳標本：根據(jù)感染部位和可疑病原體類型，選擇最可能檢出病原體且污染最小的標本（如痰液、尿液、膿液、血液等）。注意標本采集時間、方法和運送要求。（3）選擇恰當檢驗項目：結(jié)合臨床診斷思路，選擇初步檢測（如革蘭染色鏡檢、培養(yǎng)）和必要的補充檢測（如特殊染色、生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗、分子生物學(xué)檢測等）。優(yōu)先選擇能快速提供診斷信息的檢驗項目。（4）考慮檢驗周期與成本：根據(jù)病情緊急程度，選擇合適檢驗項目組合，平衡診斷速度、準確性和經(jīng)濟性。（5）結(jié)合流行病學(xué)：對于傳染病，需考慮當?shù)亓餍胁W(xué)情況，必要時進行特殊病原體檢測。依據(jù)是：提高病原學(xué)診斷率；縮短患者診斷時間，利于早期治療；避免不必要或不恰當?shù)臋z驗，節(jié)約成本和資源；確保檢驗結(jié)果的準確性和可靠性。2.解析：生物安全在醫(yī)學(xué)微生物實驗室中的重要性體現(xiàn)在保護實驗室工作人員、患者、訪客和環(huán)境免受有害微生物（包括病原微生物和潛在危險生物因子）的危害。重要性體現(xiàn)在：（1）防止實驗室感染：通過嚴格的操作規(guī)程和防護措施，防止工作人員因接觸或吸入病原微生物而感染。（2）防止病原體外泄：防止病原微生物意外泄露到環(huán)境中，