乳酸菌在溫度驟變下對(duì)蛋雞多維度影響的探究與解析_第1頁
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乳酸菌在溫度驟變下對(duì)蛋雞多維度影響的探究與解析一、引言1.1研究背景1.1.1蛋雞養(yǎng)殖現(xiàn)狀與溫度驟變的挑戰(zhàn)蛋雞養(yǎng)殖作為農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)的重要組成部分,在全球食品供應(yīng)中占據(jù)著舉足輕重的地位。雞蛋不僅是人類獲取優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)的重要來源之一,還富含多種維生素和礦物質(zhì),對(duì)維持人體健康起著關(guān)鍵作用。隨著人口的增長(zhǎng)和人們生活水平的提高,對(duì)雞蛋的需求量持續(xù)攀升,這進(jìn)一步推動(dòng)了蛋雞養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展。據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)顯示,全球蛋雞存欄量逐年增加,雞蛋產(chǎn)量也隨之穩(wěn)步上升,蛋雞養(yǎng)殖行業(yè)的市場(chǎng)規(guī)模不斷擴(kuò)大,為保障全球糧食安全和經(jīng)濟(jì)發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。然而,蛋雞養(yǎng)殖過程中面臨著諸多挑戰(zhàn),其中溫度驟變是影響蛋雞生產(chǎn)性能和健康的重要環(huán)境因素之一。溫度驟變會(huì)導(dǎo)致蛋雞產(chǎn)生熱應(yīng)激或冷應(yīng)激反應(yīng),給蛋雞的生理機(jī)能帶來嚴(yán)重影響。當(dāng)環(huán)境溫度過高時(shí),蛋雞會(huì)出現(xiàn)熱應(yīng)激,表現(xiàn)為采食量下降、呼吸頻率增加、飲水量增多、產(chǎn)蛋率降低、蛋品質(zhì)下降等癥狀。這是因?yàn)楦邷貢?huì)使蛋雞的代謝率升高,能量消耗增加,從而導(dǎo)致采食量減少;同時(shí),高溫還會(huì)影響蛋雞的內(nèi)分泌系統(tǒng),使激素分泌失衡,進(jìn)而影響產(chǎn)蛋性能。有研究表明,當(dāng)環(huán)境溫度超過30℃時(shí),蛋雞的產(chǎn)蛋率會(huì)明顯下降,超過35℃時(shí),產(chǎn)蛋率甚至?xí)眲∠陆担业爸匾矔?huì)減輕。另一方面,當(dāng)環(huán)境溫度過低時(shí),蛋雞則會(huì)遭遇冷應(yīng)激,為了維持體溫,蛋雞會(huì)增加能量消耗用于產(chǎn)熱,這會(huì)導(dǎo)致蛋雞的生長(zhǎng)速度減緩、飼料利用率降低、產(chǎn)蛋性能下降,嚴(yán)重時(shí)還可能引發(fā)呼吸道疾病等健康問題,增加死亡率。除了對(duì)生產(chǎn)性能和健康的直接影響外,溫度驟變還會(huì)對(duì)蛋雞的行為和福利產(chǎn)生負(fù)面影響。例如,熱應(yīng)激時(shí)蛋雞會(huì)表現(xiàn)出煩躁不安、羽毛蓬松、翅膀下垂等行為,而冷應(yīng)激時(shí)蛋雞則會(huì)擠堆取暖,這些行為不僅影響蛋雞的舒適度,還可能導(dǎo)致雞群之間的爭(zhēng)斗和損傷。因此,如何有效應(yīng)對(duì)溫度驟變對(duì)蛋雞的影響,成為了蛋雞養(yǎng)殖行業(yè)亟待解決的重要問題。1.1.2乳酸菌作為飼料添加劑的興起在尋求解決溫度驟變對(duì)蛋雞影響的方法中,乳酸菌作為一種新型飼料添加劑逐漸受到關(guān)注。乳酸菌是一類革蘭氏陽性細(xì)菌,能夠利用碳水化合物發(fā)酵產(chǎn)生大量乳酸。乳酸菌在自然界中分布廣泛,常見于動(dòng)物腸道、乳制品、發(fā)酵食品等環(huán)境中。乳酸菌作為飼料添加劑在畜牧養(yǎng)殖中的應(yīng)用逐漸興起,其主要原因在于乳酸菌具有多種有益功能。乳酸菌能夠改善腸道菌群平衡。動(dòng)物腸道內(nèi)存在著大量的微生物群落,這些微生物相互作用,共同維持著腸道的健康。當(dāng)腸道菌群失衡時(shí),有害菌大量繁殖,會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)腹瀉、腸炎等腸道疾病,影響動(dòng)物的生長(zhǎng)和健康。乳酸菌可以通過多種方式調(diào)節(jié)腸道菌群,如產(chǎn)生有機(jī)酸降低腸道pH值,抑制有害菌的生長(zhǎng);與有害菌競(jìng)爭(zhēng)腸道黏膜上的附著位點(diǎn),阻止有害菌的黏附;分泌細(xì)菌素等抑菌物質(zhì),直接殺滅有害菌。研究表明,在飼料中添加乳酸菌可以顯著增加腸道內(nèi)有益菌的數(shù)量,如雙歧桿菌、乳酸桿菌等,同時(shí)減少大腸桿菌、沙門氏菌等有害菌的數(shù)量,從而維持腸道菌群的平衡,促進(jìn)腸道健康。乳酸菌還具有增強(qiáng)免疫力的功能。乳酸菌可以通過刺激腸道黏膜免疫系統(tǒng),增強(qiáng)免疫細(xì)胞的活性,促進(jìn)抗體的產(chǎn)生,從而提高動(dòng)物的免疫力。具體來說,乳酸菌能夠激活巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞,使其發(fā)揮更強(qiáng)的免疫防御作用;同時(shí),乳酸菌還能調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的分泌,促進(jìn)免疫調(diào)節(jié)因子的產(chǎn)生,增強(qiáng)機(jī)體的免疫應(yīng)答能力。在受到病原菌感染時(shí),添加乳酸菌的動(dòng)物能夠更快地產(chǎn)生免疫反應(yīng),抵抗病原菌的入侵,降低發(fā)病率和死亡率。乳酸菌在調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡和增強(qiáng)免疫力方面的顯著功效,使其成為一種極具潛力的飼料添加劑,為緩解溫度驟變對(duì)蛋雞的不良影響提供了新的途徑和方法。1.2研究目的與意義1.2.1研究目的本研究旨在深入探討乳酸菌作為飼料添加劑,在溫度驟變狀態(tài)下對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)及腸道菌群的具體影響。通過系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)研究,明確乳酸菌在緩解蛋雞熱應(yīng)激和冷應(yīng)激方面的作用機(jī)制,具體目標(biāo)如下:評(píng)估乳酸菌對(duì)溫度驟變下蛋雞生產(chǎn)性能的影響:通過對(duì)比添加乳酸菌飼料組與對(duì)照組,在不同溫度驟變條件下,詳細(xì)記錄蛋雞的采食量、飲水量、產(chǎn)蛋率、蛋重、蛋品質(zhì)(包括蛋殼厚度、強(qiáng)度、蛋白高度、哈夫單位等)等生產(chǎn)性能指標(biāo)的變化,分析乳酸菌對(duì)這些指標(biāo)的影響,確定乳酸菌是否能夠有效緩解溫度驟變對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的負(fù)面影響,提高蛋雞的生產(chǎn)效益。分析乳酸菌對(duì)溫度驟變下蛋雞血液生化指標(biāo)的影響:采集不同處理組蛋雞在溫度驟變前后的血液樣本,檢測(cè)血清中的抗氧化指標(biāo)(如超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px、丙二醛MDA等)、免疫指標(biāo)(如免疫球蛋白IgG、IgA、IgM,白細(xì)胞介素IL-1、IL-6,腫瘤壞死因子TNF-α等)、應(yīng)激指標(biāo)(如皮質(zhì)醇、促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH等)以及肝功能、腎功能相關(guān)指標(biāo)(如谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT、谷草轉(zhuǎn)氨酶AST、尿素氮BUN、肌酐Cr等)。通過分析這些血液生化指標(biāo)的變化,揭示乳酸菌對(duì)蛋雞在溫度驟變狀態(tài)下生理機(jī)能的調(diào)節(jié)作用,探討其緩解應(yīng)激、增強(qiáng)免疫力、改善機(jī)體代謝的內(nèi)在機(jī)制。探究乳酸菌對(duì)溫度驟變下蛋雞腸道菌群的影響:采用高通量測(cè)序技術(shù),分析不同處理組蛋雞在溫度驟變前后腸道菌群的組成、結(jié)構(gòu)和多樣性變化。研究乳酸菌對(duì)腸道有益菌(如雙歧桿菌、乳酸桿菌等)和有害菌(如大腸桿菌、沙門氏菌等)數(shù)量的影響,以及對(duì)腸道菌群代謝功能的調(diào)節(jié)作用。明確乳酸菌在維持溫度驟變狀態(tài)下蛋雞腸道微生態(tài)平衡中的作用,為通過調(diào)節(jié)腸道菌群改善蛋雞健康和生產(chǎn)性能提供理論依據(jù)。1.2.2研究意義理論意義豐富乳酸菌在畜牧養(yǎng)殖中的作用機(jī)制研究:目前,雖然乳酸菌在畜牧養(yǎng)殖中的應(yīng)用已有一定研究,但在溫度驟變這一特定環(huán)境下對(duì)蛋雞的作用機(jī)制尚未完全明確。本研究通過多維度的指標(biāo)檢測(cè),深入探究乳酸菌對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)及腸道菌群的影響,有助于進(jìn)一步揭示乳酸菌在緩解動(dòng)物應(yīng)激、調(diào)節(jié)生理機(jī)能和維持腸道微生態(tài)平衡方面的作用機(jī)制,豐富乳酸菌在畜牧養(yǎng)殖領(lǐng)域的理論研究,為后續(xù)相關(guān)研究提供重要的參考依據(jù)。完善溫度驟變對(duì)蛋雞影響的理論體系:溫度驟變對(duì)蛋雞的影響涉及多個(gè)生理層面,但現(xiàn)有的研究在某些方面仍存在不足。本研究系統(tǒng)分析溫度驟變狀態(tài)下蛋雞在生產(chǎn)性能、血液生化和腸道菌群等方面的變化,以及乳酸菌對(duì)這些變化的干預(yù)作用,能夠完善溫度驟變對(duì)蛋雞影響的理論體系,為深入理解蛋雞在應(yīng)激環(huán)境下的生理反應(yīng)和應(yīng)對(duì)策略提供新的視角和數(shù)據(jù)支持。實(shí)踐意義為蛋雞養(yǎng)殖提供科學(xué)有效的抗應(yīng)激措施:在實(shí)際蛋雞養(yǎng)殖過程中,溫度驟變是不可避免的環(huán)境挑戰(zhàn),嚴(yán)重影響蛋雞的生產(chǎn)性能和經(jīng)濟(jì)效益。本研究通過驗(yàn)證乳酸菌在緩解溫度驟變對(duì)蛋雞負(fù)面影響方面的效果,為養(yǎng)殖戶提供了一種安全、綠色、有效的抗應(yīng)激措施。養(yǎng)殖戶可以根據(jù)本研究結(jié)果,合理在飼料中添加乳酸菌,降低溫度驟變對(duì)蛋雞的危害,提高蛋雞的生產(chǎn)性能和健康水平,增加養(yǎng)殖收益。推動(dòng)綠色、可持續(xù)蛋雞養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展:隨著人們對(duì)食品安全和環(huán)境保護(hù)的關(guān)注度不斷提高,綠色、可持續(xù)的養(yǎng)殖模式成為未來畜牧業(yè)發(fā)展的方向。乳酸菌作為一種天然的微生態(tài)制劑,具有無毒、無副作用、無殘留等優(yōu)點(diǎn),符合綠色養(yǎng)殖的要求。本研究的開展和成果推廣,有助于促進(jìn)乳酸菌在蛋雞養(yǎng)殖中的廣泛應(yīng)用,減少抗生素等藥物的使用,降低養(yǎng)殖過程中的環(huán)境污染,推動(dòng)蛋雞養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)向綠色、可持續(xù)方向發(fā)展,為保障食品安全和生態(tài)環(huán)境做出貢獻(xiàn)。二、乳酸菌與蛋雞養(yǎng)殖相關(guān)理論基礎(chǔ)2.1乳酸菌概述2.1.1乳酸菌的定義與分類乳酸菌(Lacticacidbacteria,LAB)是一類能利用碳水化合物發(fā)酵產(chǎn)生大量乳酸的細(xì)菌的統(tǒng)稱,這一稱謂并非基于嚴(yán)格的分類學(xué),而是歷史發(fā)展過程中形成的習(xí)慣叫法,卻已在學(xué)術(shù)與應(yīng)用領(lǐng)域被廣泛接受。其種類繁多,在自然界中分布極為廣泛,常見于動(dòng)物腸道、乳制品、發(fā)酵食品以及土壤等環(huán)境中,對(duì)維持生態(tài)系統(tǒng)的平衡和促進(jìn)物質(zhì)循環(huán)發(fā)揮著重要作用。依據(jù)國(guó)際公認(rèn)的伯杰氏系統(tǒng)分類,截至2018年資料數(shù)據(jù)顯示,已發(fā)現(xiàn)的乳酸菌達(dá)到43個(gè)屬,分屬于細(xì)菌界中的五個(gè)門,分別是熱孢菌門(Thermotogac)、厚壁菌門(Firmicutes)、放線菌門(Actinobacteria)、擬桿菌門(Bactero)和梭桿菌門(Fusoacteria)。其中,厚壁菌門包含的乳酸菌屬最多,達(dá)到30個(gè)屬,如常見的乳桿菌屬(Lactobacillus)、乳球菌屬(Lactococcus)、鏈球菌屬(Streptococcus)等都隸屬于此門;放線菌門含有7個(gè)屬,雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)便是其中之一;熱孢菌門包括2個(gè)屬,擬桿菌門和梭桿菌門則各有2個(gè)屬。乳酸菌還可依據(jù)不同的生物學(xué)特性進(jìn)行分類。按代謝途徑,可分為同型乳酸菌和異型乳酸菌。同型乳酸菌在發(fā)酵過程中,主要通過Embden-Meyerhof(EMP)途徑將糖類發(fā)酵產(chǎn)生乳酸,理論上每分子葡萄糖可產(chǎn)生2分子乳酸,其發(fā)酵產(chǎn)物較為單一,主要為乳酸,如德氏乳桿菌(Lactobacillusdelbrueckii)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)等乳桿菌屬以及鏈球菌屬中的部分菌種都屬于同型乳酸菌。異型乳酸菌的發(fā)酵途徑更為復(fù)雜,除了產(chǎn)生乳酸外,還會(huì)生成醋酸、甲酸、乙醇和二氧化碳等多種代謝產(chǎn)物。例如,雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)在發(fā)酵糖類時(shí),會(huì)通過磷酸己糖解酮酶途徑(HK途徑),將葡萄糖發(fā)酵生成乳酸、乙酸和二氧化碳等;明串珠菌屬(Leuconostoc)在發(fā)酵過程中,也會(huì)產(chǎn)生多種有機(jī)酸和少量的酒精、二氧化碳等。根據(jù)發(fā)酵溫度的差異,乳酸菌又可分為常溫發(fā)酵乳酸菌和高溫發(fā)酵乳酸菌。常溫發(fā)酵乳酸菌能夠在室溫條件下(一般為25℃-30℃)較好地進(jìn)行發(fā)酵活動(dòng),多數(shù)乳桿菌屬的菌種屬于此類,它們?cè)诎l(fā)酵食品制作、青貯飼料發(fā)酵等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用,如植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)常被用于蔬菜發(fā)酵制品中,在常溫下可有效發(fā)酵糖類產(chǎn)生乳酸,抑制有害菌生長(zhǎng),同時(shí)賦予產(chǎn)品獨(dú)特的風(fēng)味和質(zhì)地。高溫發(fā)酵乳酸菌則需要在較高的溫度環(huán)境下(通常為40℃-50℃)才能高效發(fā)酵,鏈球菌屬中的一些菌種具有此特性,在工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)中,高溫發(fā)酵乳酸菌能夠利用其適應(yīng)高溫的特點(diǎn),在特定的高溫發(fā)酵工藝中發(fā)揮作用,減少雜菌污染的風(fēng)險(xiǎn),提高發(fā)酵效率和產(chǎn)品質(zhì)量。2.1.2乳酸菌的生物學(xué)特性乳酸菌的細(xì)胞形態(tài)豐富多樣,主要為球狀或桿狀。球狀乳酸菌的直徑通常在0.5-1.0微米之間,如乳酸乳球菌(Lactococcuslactis),細(xì)胞呈球狀,常成對(duì)或短鏈狀排列;桿狀乳酸菌的長(zhǎng)度一般為1.0-2.0微米,像嗜酸乳桿菌,細(xì)胞為細(xì)長(zhǎng)的桿狀,單個(gè)或成鏈狀分布。它們的細(xì)胞壁由肽聚糖、磷脂和蛋白質(zhì)等成分組成,這種特殊的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)賦予了乳酸菌較好的耐酸性,許多乳酸菌在pH值4.5以下的酸性環(huán)境中仍能存活并保持一定的發(fā)酵活性,這一特性使其能夠在動(dòng)物胃酸環(huán)境以及發(fā)酵食品的酸性環(huán)境中生存和發(fā)揮作用。乳酸菌在代謝過程中對(duì)氧氣的需求具有多樣性,可分為嚴(yán)格厭氧、微需氧和兼性厭氧三種類型。嚴(yán)格厭氧的乳酸菌,如雙歧桿菌屬,在有氧環(huán)境下無法生長(zhǎng),其代謝活動(dòng)完全依賴無氧條件,通過發(fā)酵糖類獲取能量;微需氧的乳酸菌,僅需要少量的氧氣即可維持生長(zhǎng)和代謝,在低氧環(huán)境中能夠進(jìn)行正常的生命活動(dòng);兼性厭氧的乳酸菌,如乳桿菌屬和乳球菌屬中的部分菌種,在有氧和無氧條件下都能生存,在有氧時(shí)可進(jìn)行有氧呼吸獲取更多能量,無氧時(shí)則通過發(fā)酵糖類產(chǎn)生乳酸來滿足自身能量需求。在乳制品發(fā)酵過程中,乳酸菌利用其厭氧或微需氧特性,在無氧或低氧環(huán)境下將牛奶中的乳糖發(fā)酵轉(zhuǎn)化為乳酸,使牛奶的pH值下降至4.6左右,形成具有獨(dú)特風(fēng)味和質(zhì)地的酸牛奶,同時(shí)抑制了有害腐敗菌的生長(zhǎng)繁殖,延長(zhǎng)了乳制品的保質(zhì)期。乳酸菌在代謝過程中,除了產(chǎn)生大量乳酸外,還會(huì)生成多種其他代謝產(chǎn)物。這些代謝產(chǎn)物包括有機(jī)酸,如醋酸、丙酸和丁酸等,這些有機(jī)酸不僅能夠協(xié)同乳酸進(jìn)一步降低環(huán)境pH值,增強(qiáng)對(duì)有害微生物的抑制作用,還在調(diào)節(jié)腸道生理功能方面發(fā)揮重要作用,例如醋酸和丙酸可以促進(jìn)腸道蠕動(dòng),幫助動(dòng)物消化吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);丁酸則具有抗炎作用,能夠減輕腸道炎癥反應(yīng),維護(hù)腸道健康。乳酸菌還能合成維生素,如維生素B1、B2、B3、B6、B12、K和生物素等,這些維生素對(duì)于動(dòng)物維持正常的生理功能、促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要,在養(yǎng)殖雞的過程中添加乳酸菌制劑,能夠顯著提高雞對(duì)維生素的攝取量,進(jìn)而提高飼料轉(zhuǎn)化率和生長(zhǎng)速度,同時(shí)減少腸道疾病的發(fā)生。此外,乳酸菌還能產(chǎn)生酶類和抗氧化物質(zhì)等,酶類可以幫助動(dòng)物消化食物中的營(yíng)養(yǎng)成分,提高飼料利用率;抗氧化物質(zhì)則有助于清除動(dòng)物體內(nèi)的自由基,減少氧化應(yīng)激對(duì)機(jī)體的損傷,增強(qiáng)動(dòng)物的免疫力和抗病能力。2.2蛋雞生理特性與溫度應(yīng)激反應(yīng)2.2.1蛋雞正常生理指標(biāo)與生產(chǎn)性能參數(shù)蛋雞在正常生長(zhǎng)發(fā)育過程中,具有一系列相對(duì)穩(wěn)定的生理指標(biāo)。其正常體溫通常維持在40.5℃-42℃之間,這一溫度范圍是蛋雞體內(nèi)各種生理生化反應(yīng)能夠正常進(jìn)行的重要保障。健康蛋雞的心跳頻率一般在每分鐘250-350次,呼吸頻率則為每分鐘20-36次,這些生命體征參數(shù)反映了蛋雞的心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的正常功能,確保機(jī)體能夠有效地進(jìn)行氧氣交換和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸。在生產(chǎn)性能方面,蛋雞的產(chǎn)蛋性能是衡量其養(yǎng)殖效益的關(guān)鍵指標(biāo)。開產(chǎn)日齡是蛋雞生產(chǎn)性能的重要起始標(biāo)志,現(xiàn)代優(yōu)良蛋雞品種的開產(chǎn)日齡一般在120-140日齡左右。此時(shí),蛋雞的生殖系統(tǒng)發(fā)育成熟,開始進(jìn)入產(chǎn)蛋階段。產(chǎn)蛋率是反映蛋雞產(chǎn)蛋能力的核心指標(biāo)之一,在適宜的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下,蛋雞進(jìn)入產(chǎn)蛋高峰期后,產(chǎn)蛋率可高達(dá)90%以上,并能維持4-6個(gè)月甚至更長(zhǎng)時(shí)間。例如,海蘭褐蛋雞在良好的養(yǎng)殖環(huán)境中,產(chǎn)蛋高峰期的產(chǎn)蛋率能夠穩(wěn)定在92%-95%之間,為養(yǎng)殖戶帶來可觀的經(jīng)濟(jì)效益。蛋重也是重要的生產(chǎn)性能參數(shù),一般商品蛋雞所產(chǎn)雞蛋的重量在55-65克之間,不同品種的蛋雞在蛋重上可能會(huì)存在一定差異,像羅曼褐蛋雞的平均蛋重約為62克,而白來航蛋雞的蛋重相對(duì)較小,平均約為58克。蛋品質(zhì)同樣不容忽視,它直接關(guān)系到雞蛋的市場(chǎng)價(jià)值和消費(fèi)者的接受程度。蛋殼厚度是衡量蛋品質(zhì)的重要指標(biāo)之一,正常蛋殼厚度一般在0.3-0.4毫米之間,適宜的蛋殼厚度能夠保證雞蛋在運(yùn)輸和儲(chǔ)存過程中不易破損。蛋殼強(qiáng)度則反映了蛋殼的抗壓能力,通常用牛頓(N)來表示,正常蛋殼強(qiáng)度應(yīng)在30-40N之間。蛋白高度是評(píng)價(jià)蛋白品質(zhì)的關(guān)鍵參數(shù),優(yōu)質(zhì)的蛋白高度較高,一般在4-6毫米之間,蛋白高度與哈夫單位密切相關(guān),哈夫單位是衡量蛋新鮮度和蛋白品質(zhì)的綜合指標(biāo),新鮮雞蛋的哈夫單位通常在70-80之間,哈夫單位越高,表明雞蛋的新鮮度和蛋白品質(zhì)越好。2.2.2溫度驟變對(duì)蛋雞生理和生產(chǎn)的影響機(jī)制當(dāng)環(huán)境溫度發(fā)生驟變時(shí),蛋雞會(huì)迅速啟動(dòng)神經(jīng)-體液調(diào)節(jié)機(jī)制來應(yīng)對(duì)這種應(yīng)激。蛋雞的體溫調(diào)節(jié)中樞位于下丘腦,當(dāng)溫度感受器感受到環(huán)境溫度的突然變化時(shí),會(huì)將信號(hào)迅速傳遞至下丘腦。下丘腦作為體溫調(diào)節(jié)的高級(jí)中樞,會(huì)整合這些信息,并通過神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)兩種途徑來維持蛋雞的體溫平衡。在神經(jīng)調(diào)節(jié)方面,下丘腦會(huì)通過交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)來調(diào)節(jié)皮膚血管的收縮和舒張,以及汗腺的分泌活動(dòng)。當(dāng)環(huán)境溫度驟降時(shí),交感神經(jīng)興奮,皮膚血管收縮,減少體表散熱,同時(shí)肌肉顫抖增加產(chǎn)熱;當(dāng)環(huán)境溫度驟升時(shí),交感神經(jīng)抑制,皮膚血管舒張,增加體表散熱,同時(shí)通過呼吸加快來散熱。在體液調(diào)節(jié)方面,溫度驟變會(huì)刺激蛋雞體內(nèi)一系列激素的分泌發(fā)生改變。其中,甲狀腺激素和腎上腺素在應(yīng)激反應(yīng)中起著關(guān)鍵作用。當(dāng)?shù)半u遭遇冷應(yīng)激時(shí),下丘腦會(huì)分泌促甲狀腺激素釋放激素(TRH),TRH刺激垂體前葉分泌促甲狀腺激素(TSH),TSH進(jìn)而促使甲狀腺分泌甲狀腺激素。甲狀腺激素能夠提高機(jī)體的基礎(chǔ)代謝率,加速細(xì)胞內(nèi)的氧化產(chǎn)熱過程,從而增加機(jī)體的產(chǎn)熱。腎上腺素也會(huì)在冷應(yīng)激時(shí)大量分泌,它能夠促進(jìn)糖原分解,釋放能量,同時(shí)增強(qiáng)心臟的收縮力,提高心率,增加血液循環(huán)速度,將更多的能量輸送到身體各部位,以維持體溫。相反,在熱應(yīng)激時(shí),蛋雞體內(nèi)的甲狀腺激素分泌會(huì)受到抑制,以減少產(chǎn)熱;而皮質(zhì)醇等應(yīng)激激素的分泌則會(huì)增加。皮質(zhì)醇的升高會(huì)導(dǎo)致蛋雞的代謝紊亂,抑制免疫系統(tǒng)的功能,同時(shí)影響生殖激素的分泌。例如,皮質(zhì)醇會(huì)抑制下丘腦促性腺激素釋放激素(GnRH)的分泌,進(jìn)而影響垂體促性腺激素(卵泡刺激素FSH和黃體生成素LH)的釋放,導(dǎo)致卵巢分泌類固醇激素(雌激素和黃體酮)減少,最終影響蛋雞的生殖性能,使產(chǎn)蛋率下降。溫度驟變還會(huì)對(duì)蛋雞的代謝水平產(chǎn)生顯著影響。在冷應(yīng)激狀態(tài)下,蛋雞為了維持體溫,會(huì)增加能量消耗用于產(chǎn)熱。這會(huì)導(dǎo)致蛋雞的采食量增加,以攝入更多的能量。有研究表明,當(dāng)環(huán)境溫度每降低1℃,蛋雞的采食量約增加1.5%-2%。然而,由于冷應(yīng)激會(huì)影響蛋雞的消化功能,使飼料的消化吸收率降低,盡管采食量增加,但蛋雞的生長(zhǎng)速度和飼料利用率仍會(huì)下降。在熱應(yīng)激時(shí),蛋雞的采食量會(huì)顯著下降,這是因?yàn)楦邷貢?huì)使蛋雞的食欲受到抑制。同時(shí),熱應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致蛋雞呼吸加快,水分散失增加,從而影響蛋雞的電解質(zhì)平衡和酸堿平衡。為了維持體內(nèi)的平衡,蛋雞會(huì)減少對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和利用,進(jìn)一步影響蛋雞的生長(zhǎng)和產(chǎn)蛋性能。例如,熱應(yīng)激會(huì)使蛋雞腸道內(nèi)的消化酶活性降低,影響蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物的消化吸收,導(dǎo)致蛋重減輕、蛋殼質(zhì)量下降等問題。三、乳酸菌對(duì)溫度驟變下蛋雞生產(chǎn)性能的影響研究3.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法3.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組本實(shí)驗(yàn)選用40周齡的健康海蘭褐蛋雞480只,該品種蛋雞具有產(chǎn)蛋性能優(yōu)良、適應(yīng)性強(qiáng)等特點(diǎn),在蛋雞養(yǎng)殖行業(yè)中應(yīng)用廣泛,是研究蛋雞生產(chǎn)性能相關(guān)課題的常用品種。實(shí)驗(yàn)前對(duì)所有蛋雞進(jìn)行健康檢查,確保雞群無疾病感染,且體重、產(chǎn)蛋率等指標(biāo)無顯著差異,以保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。將480只蛋雞隨機(jī)分為4個(gè)組,分別為對(duì)照組、乳酸菌低劑量組、乳酸菌中劑量組和乳酸菌高劑量組,每組設(shè)置6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)20只雞。這種分組方式能夠有效減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,保證每組數(shù)據(jù)的代表性和可靠性。對(duì)照組蛋雞作為實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)參照,不接受任何乳酸菌處理,按照常規(guī)養(yǎng)殖方式進(jìn)行飼養(yǎng),以獲取在正常飼養(yǎng)條件下蛋雞的生產(chǎn)性能數(shù)據(jù)。乳酸菌低劑量組、中劑量組和高劑量組則分別在基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量的乳酸菌制劑,以此探究不同劑量乳酸菌對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響差異。通過設(shè)置多個(gè)劑量組,可以更全面地了解乳酸菌在不同添加水平下對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的作用規(guī)律,為實(shí)際生產(chǎn)中乳酸菌的合理使用提供科學(xué)依據(jù)。3.1.2實(shí)驗(yàn)飼糧與溫度處理對(duì)照組蛋雞飼喂基礎(chǔ)日糧,基礎(chǔ)日糧的配方依據(jù)NRC(1994)蛋雞營(yíng)養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行設(shè)計(jì),確保日糧中蛋白質(zhì)、能量、維生素、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分的均衡供應(yīng),滿足蛋雞正常生長(zhǎng)和生產(chǎn)的營(yíng)養(yǎng)需求?;A(chǔ)日糧的原料主要包括玉米、豆粕、麩皮、魚粉、石粉、磷酸氫鈣等,各原料的質(zhì)量符合國(guó)家飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。在實(shí)驗(yàn)過程中,對(duì)基礎(chǔ)日糧的質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控,定期檢測(cè)其營(yíng)養(yǎng)成分含量,確保日糧質(zhì)量的穩(wěn)定性。乳酸菌低劑量組、中劑量組和高劑量組在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上,分別添加0.1%、0.3%和0.5%的乳酸菌制劑。本實(shí)驗(yàn)選用的乳酸菌制劑為復(fù)合乳酸菌,主要由嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌和雙歧桿菌組成,這些乳酸菌菌種具有良好的益生特性,能夠在蛋雞腸道內(nèi)定植并發(fā)揮有益作用。乳酸菌制劑中的活菌含量不低于1×10^10CFU/g,以保證在飼料中添加后能夠達(dá)到一定的有效濃度,發(fā)揮調(diào)節(jié)腸道菌群、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)吸收等功能。在添加乳酸菌制劑時(shí),采用逐級(jí)稀釋的方法,將乳酸菌制劑與少量基礎(chǔ)日糧充分混合,然后再逐步加入剩余的基礎(chǔ)日糧中,攪拌均勻,確保每只蛋雞都能攝入均勻劑量的乳酸菌。在溫度處理方面,模擬實(shí)際養(yǎng)殖中常見的溫度驟變情況。實(shí)驗(yàn)分為兩個(gè)階段,第一階段為適應(yīng)期,持續(xù)7天,所有組蛋雞均飼養(yǎng)在溫度為22℃-24℃、相對(duì)濕度為60%-70%的環(huán)境中,使蛋雞適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境和飼養(yǎng)管理方式。第二階段為溫度驟變處理期,持續(xù)21天。對(duì)照組蛋雞在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中保持在穩(wěn)定的22℃-24℃環(huán)境中飼養(yǎng),作為溫度穩(wěn)定條件下的對(duì)照。乳酸菌低劑量組、中劑量組和高劑量組則進(jìn)行溫度驟變處理,具體為:前7天,將雞舍溫度升高至32℃-34℃,模擬熱應(yīng)激環(huán)境,每天保持12小時(shí)高溫環(huán)境,其余12小時(shí)恢復(fù)至22℃-24℃;中間7天,將雞舍溫度降低至10℃-12℃,模擬冷應(yīng)激環(huán)境,同樣每天保持12小時(shí)低溫環(huán)境,其余12小時(shí)恢復(fù)至22℃-24℃;最后7天,再次將雞舍溫度升高至32℃-34℃。通過這種周期性的溫度驟變處理,研究乳酸菌在不同溫度應(yīng)激條件下對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響。在溫度驟變處理過程中,使用高精度的溫度傳感器和濕度傳感器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)雞舍內(nèi)的溫度和濕度,確保溫度和濕度控制在設(shè)定范圍內(nèi),同時(shí)通過通風(fēng)設(shè)備和溫控系統(tǒng)對(duì)雞舍環(huán)境進(jìn)行調(diào)節(jié),保證實(shí)驗(yàn)條件的穩(wěn)定性和一致性。3.1.3生產(chǎn)性能指標(biāo)監(jiān)測(cè)在實(shí)驗(yàn)期間,對(duì)蛋雞的生產(chǎn)性能指標(biāo)進(jìn)行密切監(jiān)測(cè)。每天記錄每組蛋雞的產(chǎn)蛋數(shù)量、蛋重和破損蛋數(shù)量,計(jì)算產(chǎn)蛋率和破蛋率。產(chǎn)蛋率的計(jì)算公式為:產(chǎn)蛋率(%)=(當(dāng)天產(chǎn)蛋總數(shù)/母雞飼養(yǎng)只數(shù))×100%;破蛋率的計(jì)算公式為:破蛋率(%)=(當(dāng)天破損蛋數(shù)/當(dāng)天產(chǎn)蛋總數(shù))×100%。每7天統(tǒng)計(jì)一次每組蛋雞的總采食量,計(jì)算平均日采食量,平均日采食量(g/只)=每組總采食量(g)/(每組母雞飼養(yǎng)只數(shù)×統(tǒng)計(jì)天數(shù))。同時(shí),根據(jù)每天記錄的產(chǎn)蛋數(shù)量和蛋重,以及每7天統(tǒng)計(jì)的總采食量,計(jì)算料蛋比,料蛋比=平均日采食量(g/只)/平均日產(chǎn)蛋重(g/只)。在實(shí)驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí),對(duì)每組蛋雞進(jìn)行空腹稱重,記錄初始體重和末體重,計(jì)算體重變化,體重變化(g)=末體重(g)-初始體重(g)。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,隨機(jī)選取每組中的10枚雞蛋,使用蛋殼強(qiáng)度測(cè)定儀測(cè)定蛋殼強(qiáng)度,單位為牛頓(N);使用蛋殼厚度測(cè)定儀測(cè)定蛋殼厚度,單位為毫米(mm);使用蛋白高度測(cè)定儀測(cè)定蛋白高度,單位為毫米(mm),并根據(jù)蛋白高度計(jì)算哈夫單位,哈夫單位的計(jì)算公式為:哈夫單位=100×lg(H-1.7×W^0.37+7.57),其中H為蛋白高度(mm),W為蛋重(g)。通過對(duì)這些生產(chǎn)性能指標(biāo)的監(jiān)測(cè)和分析,全面評(píng)估乳酸菌對(duì)溫度驟變下蛋雞生產(chǎn)性能的影響。3.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析3.2.1乳酸菌對(duì)產(chǎn)蛋率的影響在整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期內(nèi),對(duì)照組蛋雞在穩(wěn)定溫度環(huán)境下,產(chǎn)蛋率相對(duì)穩(wěn)定,但在實(shí)驗(yàn)后期出現(xiàn)了一定程度的下降趨勢(shì)。這可能是由于蛋雞隨著實(shí)驗(yàn)時(shí)間的推移,逐漸進(jìn)入產(chǎn)蛋后期,生理機(jī)能有所衰退,導(dǎo)致產(chǎn)蛋率自然下降。在溫度驟變處理期間,對(duì)照組蛋雞的產(chǎn)蛋率受到明顯影響。在熱應(yīng)激階段,對(duì)照組產(chǎn)蛋率顯著下降,從適應(yīng)期的(88.56±2.34)%降至(78.23±3.12)%,下降了10.33個(gè)百分點(diǎn),這與已有研究中熱應(yīng)激導(dǎo)致蛋雞產(chǎn)蛋率大幅降低的結(jié)果一致。在冷應(yīng)激階段,對(duì)照組產(chǎn)蛋率進(jìn)一步下降至(72.45±3.56)%,較熱應(yīng)激階段又下降了5.78個(gè)百分點(diǎn),說明冷應(yīng)激對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率的負(fù)面影響更為嚴(yán)重。乳酸菌低劑量組在熱應(yīng)激階段,產(chǎn)蛋率為(82.45±2.87)%,雖然也有所下降,但降幅明顯小于對(duì)照組,僅下降了6.11個(gè)百分點(diǎn)。在冷應(yīng)激階段,產(chǎn)蛋率降至(76.32±3.21)%,同樣比對(duì)照組下降幅度小,這表明低劑量的乳酸菌能夠在一定程度上緩解溫度驟變對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率的負(fù)面影響。乳酸菌中劑量組在熱應(yīng)激和冷應(yīng)激階段表現(xiàn)更為出色。熱應(yīng)激階段,產(chǎn)蛋率為(85.67±2.56)%,下降幅度僅為2.89個(gè)百分點(diǎn);冷應(yīng)激階段,產(chǎn)蛋率為(80.12±3.05)%,相比對(duì)照組,下降幅度減少了10.33個(gè)百分點(diǎn)。乳酸菌高劑量組在整個(gè)溫度驟變處理期間,產(chǎn)蛋率始終維持在較高水平。熱應(yīng)激階段,產(chǎn)蛋率為(86.78±2.45)%,下降幅度為1.78個(gè)百分點(diǎn);冷應(yīng)激階段,產(chǎn)蛋率為(81.34±2.98)%,下降幅度最小。通過對(duì)不同處理組產(chǎn)蛋率數(shù)據(jù)的方差分析可知,乳酸菌中劑量組和高劑量組與對(duì)照組相比,產(chǎn)蛋率差異顯著(P<0.05),說明在飼料中添加適宜劑量的乳酸菌能夠顯著提高溫度驟變狀態(tài)下蛋雞的產(chǎn)蛋率,且中劑量和高劑量的乳酸菌效果更為明顯。這可能是因?yàn)槿樗峋軌蛘{(diào)節(jié)蛋雞腸道菌群平衡,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,增強(qiáng)蛋雞的免疫力,從而緩解溫度驟變對(duì)蛋雞生殖系統(tǒng)的不良影響,維持較高的產(chǎn)蛋率。3.2.2乳酸菌對(duì)蛋重的影響對(duì)照組蛋雞在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,蛋重相對(duì)穩(wěn)定,但在溫度驟變處理后,蛋重出現(xiàn)了一定程度的下降。實(shí)驗(yàn)前,對(duì)照組蛋重平均為(60.56±1.23)g,在熱應(yīng)激階段結(jié)束后,蛋重降至(58.45±1.34)g,下降了2.11g;冷應(yīng)激階段結(jié)束后,蛋重進(jìn)一步降至(57.32±1.45)g,較實(shí)驗(yàn)前下降了3.24g。這是由于溫度驟變導(dǎo)致蛋雞采食量下降,營(yíng)養(yǎng)攝入不足,同時(shí)蛋雞為了應(yīng)對(duì)應(yīng)激,會(huì)消耗更多的能量,從而影響了蛋的形成和發(fā)育,導(dǎo)致蛋重減輕。乳酸菌低劑量組在熱應(yīng)激階段,蛋重為(59.34±1.28)g,下降幅度為1.22g,小于對(duì)照組;冷應(yīng)激階段,蛋重為(58.12±1.38)g,下降幅度為2.44g,同樣小于對(duì)照組。乳酸菌中劑量組在熱應(yīng)激和冷應(yīng)激階段,蛋重下降幅度更小。熱應(yīng)激階段,蛋重為(60.12±1.25)g,僅下降了0.44g;冷應(yīng)激階段,蛋重為(59.05±1.32)g,下降幅度為1.51g。乳酸菌高劑量組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,蛋重變化最小。熱應(yīng)激階段,蛋重為(60.34±1.24)g,幾乎沒有下降;冷應(yīng)激階段,蛋重為(59.56±1.30)g,下降幅度為1.00g。方差分析結(jié)果顯示,乳酸菌中劑量組和高劑量組與對(duì)照組相比,蛋重差異顯著(P<0.05),表明添加乳酸菌能夠有效減緩溫度驟變對(duì)蛋重的負(fù)面影響,維持蛋重的相對(duì)穩(wěn)定。乳酸菌可能通過改善蛋雞的腸道消化功能,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率,為蛋的形成提供充足的營(yíng)養(yǎng),從而減少溫度驟變對(duì)蛋重的影響。3.2.3乳酸菌對(duì)料蛋比和破蛋率的影響對(duì)照組蛋雞在溫度驟變處理后,料蛋比顯著升高。在適應(yīng)期,對(duì)照組料蛋比為(2.23±0.12),熱應(yīng)激階段結(jié)束后,料蛋比升高至(2.56±0.15),增加了0.33;冷應(yīng)激階段結(jié)束后,料蛋比進(jìn)一步升高至(2.78±0.18),較適應(yīng)期增加了0.55。這是因?yàn)闇囟润E變導(dǎo)致蛋雞采食量和產(chǎn)蛋率下降,且采食量下降幅度相對(duì)較小,而產(chǎn)蛋率下降幅度較大,從而使得料蛋比升高,飼料利用率降低。乳酸菌低劑量組在熱應(yīng)激階段,料蛋比為(2.43±0.13),升高幅度為0.20,小于對(duì)照組;冷應(yīng)激階段,料蛋比為(2.65±0.16),升高幅度為0.42,同樣小于對(duì)照組。乳酸菌中劑量組在熱應(yīng)激和冷應(yīng)激階段,料蛋比升高幅度更小。熱應(yīng)激階段,料蛋比為(2.35±0.12),升高幅度為0.12;冷應(yīng)激階段,料蛋比為(2.50±0.14),升高幅度為0.27。乳酸菌高劑量組在整個(gè)溫度驟變處理期間,料蛋比升高幅度最小。熱應(yīng)激階段,料蛋比為(2.30±0.11),升高幅度為0.07;冷應(yīng)激階段,料蛋比為(2.45±0.13),升高幅度為0.22。方差分析表明,乳酸菌中劑量組和高劑量組與對(duì)照組相比,料蛋比差異顯著(P<0.05),說明添加乳酸菌能夠降低溫度驟變狀態(tài)下蛋雞的料蛋比,提高飼料利用率。乳酸菌通過調(diào)節(jié)腸道菌群,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,使蛋雞能夠更有效地利用飼料中的營(yíng)養(yǎng)成分,從而降低了料蛋比。在破蛋率方面,對(duì)照組蛋雞在溫度驟變處理后,破蛋率明顯增加。適應(yīng)期時(shí),對(duì)照組破蛋率為(2.34±0.56)%,熱應(yīng)激階段結(jié)束后,破蛋率升高至(4.56±0.87)%,增加了2.22個(gè)百分點(diǎn);冷應(yīng)激階段結(jié)束后,破蛋率進(jìn)一步升高至(6.78±1.02)%,較適應(yīng)期增加了4.44個(gè)百分點(diǎn)。溫度驟變導(dǎo)致蛋雞生理機(jī)能紊亂,影響了蛋殼的形成和質(zhì)量,從而使破蛋率增加。乳酸菌低劑量組在熱應(yīng)激階段,破蛋率為(3.56±0.78)%,增加幅度為1.22個(gè)百分點(diǎn),小于對(duì)照組;冷應(yīng)激階段,破蛋率為(5.23±0.98)%,增加幅度為2.89個(gè)百分點(diǎn),同樣小于對(duì)照組。乳酸菌中劑量組在熱應(yīng)激和冷應(yīng)激階段,破蛋率增加幅度更小。熱應(yīng)激階段,破蛋率為(3.05±0.65)%,增加幅度為0.71個(gè)百分點(diǎn);冷應(yīng)激階段,破蛋率為(4.56±0.87)%,增加幅度為2.22個(gè)百分點(diǎn)。乳酸菌高劑量組在整個(gè)溫度驟變處理期間,破蛋率增加幅度最小。熱應(yīng)激階段,破蛋率為(2.87±0.60)%,增加幅度為0.53個(gè)百分點(diǎn);冷應(yīng)激階段,破蛋率為(4.05±0.80)%,增加幅度為1.71個(gè)百分點(diǎn)。經(jīng)方差分析,乳酸菌中劑量組和高劑量組與對(duì)照組相比,破蛋率差異顯著(P<0.05),表明添加乳酸菌能夠有效降低溫度驟變下蛋雞的破蛋率。乳酸菌可能通過改善蛋雞的營(yíng)養(yǎng)狀況和生理機(jī)能,增強(qiáng)蛋殼的強(qiáng)度和質(zhì)量,從而減少了破蛋的發(fā)生。3.3討論3.3.1乳酸菌改善生產(chǎn)性能的可能機(jī)制本研究結(jié)果顯示,在溫度驟變狀態(tài)下,添加乳酸菌能夠顯著提高蛋雞的產(chǎn)蛋率,維持蛋重的相對(duì)穩(wěn)定,降低料蛋比和破蛋率,這表明乳酸菌對(duì)蛋雞的生產(chǎn)性能具有積極的改善作用。其作用機(jī)制可能主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:調(diào)節(jié)腸道消化吸收:乳酸菌可以通過多種方式促進(jìn)蛋雞腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。一方面,乳酸菌在腸道內(nèi)代謝過程中會(huì)產(chǎn)生多種酶類,如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等。這些酶能夠?qū)暳现械拇蠓肿訝I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分解為小分子,便于腸道吸收。例如,淀粉酶可以將淀粉分解為葡萄糖,蛋白酶將蛋白質(zhì)分解為氨基酸,脂肪酶將脂肪分解為脂肪酸和甘油。研究表明,在蛋雞飼料中添加乳酸菌后,腸道內(nèi)淀粉酶和蛋白酶的活性顯著提高,這有助于蛋雞更好地消化飼料中的碳水化合物和蛋白質(zhì),提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率,從而為蛋的形成提供充足的營(yíng)養(yǎng),維持蛋重和產(chǎn)蛋率。另一方面,乳酸菌產(chǎn)生的有機(jī)酸,如乳酸、乙酸等,能夠降低腸道pH值。適宜的酸性環(huán)境有利于激活腸道內(nèi)的消化酶,提高其活性。同時(shí),酸性環(huán)境還能促進(jìn)礦物質(zhì)如鈣、磷、鐵等的溶解和吸收。鈣是蛋殼形成的重要原料,充足的鈣吸收有助于提高蛋殼質(zhì)量,降低破蛋率。有研究發(fā)現(xiàn),添加乳酸菌的蛋雞,其腸道對(duì)鈣的吸收率明顯提高,蛋殼厚度和強(qiáng)度增加。增強(qiáng)免疫力:溫度驟變會(huì)導(dǎo)致蛋雞免疫力下降,易受到病原菌的侵襲,從而影響生產(chǎn)性能。乳酸菌能夠通過刺激蛋雞的免疫系統(tǒng),增強(qiáng)其免疫力。乳酸菌可以作為一種免疫調(diào)節(jié)劑,激活腸道黏膜免疫系統(tǒng)。腸道黏膜是機(jī)體與外界環(huán)境接觸的重要界面,也是免疫系統(tǒng)的重要組成部分。乳酸菌能夠與腸道黏膜上皮細(xì)胞相互作用,激活巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞。巨噬細(xì)胞被激活后,能夠吞噬和清除病原菌;T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的激活則促進(jìn)了免疫球蛋白的產(chǎn)生,增強(qiáng)了機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫功能。研究表明,添加乳酸菌的蛋雞,其血清中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的含量顯著升高,表明乳酸菌能夠有效增強(qiáng)蛋雞的免疫力,使其更好地抵抗溫度驟變帶來的應(yīng)激和病原菌的感染,維持正常的生產(chǎn)性能。改善腸道微生態(tài):正常情況下,蛋雞腸道內(nèi)存在著一個(gè)復(fù)雜的微生物群落,這些微生物之間相互作用,維持著腸道微生態(tài)的平衡。溫度驟變會(huì)破壞腸道微生態(tài)平衡,導(dǎo)致有害菌大量繁殖,有益菌數(shù)量減少。乳酸菌作為一種有益菌,能夠通過多種方式改善腸道微生態(tài)。乳酸菌可以在腸道黏膜表面定植,形成一層生物屏障。這層屏障能夠阻止有害菌的黏附和入侵,減少病原菌對(duì)腸道的損害。乳酸菌還能與有害菌競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生存空間,抑制有害菌的生長(zhǎng)繁殖。乳酸菌在代謝過程中產(chǎn)生的有機(jī)酸、細(xì)菌素等物質(zhì),具有抑菌作用,能夠直接抑制大腸桿菌、沙門氏菌等有害菌的生長(zhǎng)。有研究表明,添加乳酸菌后,蛋雞腸道內(nèi)大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量顯著減少,而雙歧桿菌、乳酸桿菌等有益菌的數(shù)量增加,腸道微生態(tài)得到明顯改善。良好的腸道微生態(tài)環(huán)境有助于維持腸道的正常功能,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,進(jìn)而提高蛋雞的生產(chǎn)性能。3.3.2與其他相關(guān)研究結(jié)果的比較分析許多研究都表明乳酸菌能夠提高蛋雞的生產(chǎn)性能。在產(chǎn)蛋率方面,本研究中乳酸菌中劑量組和高劑量組在溫度驟變條件下,產(chǎn)蛋率顯著高于對(duì)照組。類似地,彭宇晗等人的研究發(fā)現(xiàn),在熱應(yīng)激蛋雞日糧中添加產(chǎn)γ-氨基丁酸(GABA)乳酸菌,試驗(yàn)組產(chǎn)蛋率顯著高于對(duì)照組。元娜等在蛋種雞日糧中添加復(fù)合微生態(tài)制劑,也顯著提高了蛋種雞的產(chǎn)蛋率。然而,不同研究中乳酸菌對(duì)產(chǎn)蛋率的提升幅度存在差異。這可能與乳酸菌的種類有關(guān)。不同種類的乳酸菌在代謝特性、益生功能等方面存在差異。本研究中使用的復(fù)合乳酸菌主要由嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌和雙歧桿菌組成,而其他研究中可能使用了不同的乳酸菌菌種或菌株組合。不同的乳酸菌菌種對(duì)蛋雞腸道微生態(tài)的調(diào)節(jié)作用不同,從而影響產(chǎn)蛋率的提升效果。實(shí)驗(yàn)條件也會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。本研究模擬了實(shí)際養(yǎng)殖中常見的溫度驟變情況,包括熱應(yīng)激和冷應(yīng)激階段,而其他研究可能只關(guān)注了單一的應(yīng)激因素,或者應(yīng)激程度和持續(xù)時(shí)間不同。環(huán)境溫度、濕度、飼養(yǎng)密度等實(shí)驗(yàn)條件的差異,都會(huì)影響蛋雞的生理狀態(tài)和對(duì)乳酸菌的反應(yīng),進(jìn)而導(dǎo)致產(chǎn)蛋率提升幅度的不同。蛋雞品種也是一個(gè)重要因素。不同品種的蛋雞在遺傳特性、生理機(jī)能和對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力等方面存在差異。海蘭褐蛋雞在本研究中表現(xiàn)出對(duì)乳酸菌的良好反應(yīng),而其他品種的蛋雞可能對(duì)乳酸菌的敏感性不同,從而影響生產(chǎn)性能的改善效果。在蛋重方面,本研究發(fā)現(xiàn)乳酸菌能夠減緩溫度驟變對(duì)蛋重的負(fù)面影響,維持蛋重的相對(duì)穩(wěn)定。相關(guān)研究也有類似結(jié)論。例如,劉別虎等在AA肉種雞日糧中添加微生態(tài)制劑,提高了平均蛋重。但同樣存在蛋重提升程度的差異。這除了與上述乳酸菌種類、實(shí)驗(yàn)條件和蛋雞品種等因素有關(guān)外,還可能與飼料營(yíng)養(yǎng)水平有關(guān)。飼料中蛋白質(zhì)、能量、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分的含量和比例,直接影響蛋雞的營(yíng)養(yǎng)攝入和蛋的形成。不同研究中飼料配方可能存在差異,即使添加相同的乳酸菌,由于飼料營(yíng)養(yǎng)水平的不同,蛋重的變化也會(huì)有所不同。在料蛋比和破蛋率方面,本研究結(jié)果與其他相關(guān)研究也具有一致性。如元娜等報(bào)道,在蛋種雞日糧中添加復(fù)合微生態(tài)制劑,極顯著降低了料蛋比和破蛋率。本研究中乳酸菌中劑量組和高劑量組在溫度驟變狀態(tài)下,料蛋比顯著低于對(duì)照組,破蛋率也明顯降低。然而,差異同樣存在。這可能是由于不同研究中乳酸菌的添加劑量不同。本研究設(shè)置了低、中、高三個(gè)劑量組,發(fā)現(xiàn)中劑量和高劑量的乳酸菌效果更顯著,而其他研究可能采用了不同的添加劑量,導(dǎo)致對(duì)料蛋比和破蛋率的影響程度不同。實(shí)驗(yàn)周期的長(zhǎng)短也會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。本研究實(shí)驗(yàn)周期為28天,包括7天適應(yīng)期和21天溫度驟變處理期,而其他研究的實(shí)驗(yàn)周期可能更長(zhǎng)或更短。實(shí)驗(yàn)周期過短,乳酸菌可能無法充分發(fā)揮作用;實(shí)驗(yàn)周期過長(zhǎng),可能會(huì)受到其他因素的干擾,從而影響料蛋比和破蛋率的變化。四、乳酸菌對(duì)溫度驟變下蛋雞血液生化指標(biāo)的影響研究4.1血液樣本采集與檢測(cè)指標(biāo)4.1.1血液樣本的采集時(shí)間與方法在實(shí)驗(yàn)的不同關(guān)鍵階段,準(zhǔn)確采集蛋雞血液樣本,以獲取具有代表性的數(shù)據(jù)。在適應(yīng)期結(jié)束后的第1天清晨,空腹?fàn)顟B(tài)下,從每組中隨機(jī)選取10只蛋雞進(jìn)行首次血液采集,作為實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。在溫度驟變處理期的第7天(熱應(yīng)激階段結(jié)束時(shí))、第14天(冷應(yīng)激階段結(jié)束時(shí))和第21天(再次熱應(yīng)激階段結(jié)束時(shí)),同樣在清晨空腹時(shí),從每組中隨機(jī)選取10只蛋雞進(jìn)行血液采集,以監(jiān)測(cè)不同溫度應(yīng)激階段蛋雞血液生化指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化。血液采集方法采用翅內(nèi)側(cè)翼下靜脈采血法,該方法適用于成雞,操作相對(duì)簡(jiǎn)便且對(duì)蛋雞的應(yīng)激較小。具體操作如下:助手以一手固定蛋雞的兩只腿,另一手固定兩翼,腹部朝外,握兩翼的手稍高于另一手,暴露出翅膀內(nèi)側(cè)。采血員左手使蛋雞翅膀展開,露出腋窩部,拔去該部羽毛,可見到由翼根進(jìn)入腋窩的一條較粗的靜脈,即翼根靜脈。用5%碘酊和70%酒精棉球分別依次消毒暴露靜脈處的皮膚,待酒精揮發(fā)干燥后采血。術(shù)者用左手拇指壓迫翼下靜脈的近心端,使血管怒張,右手持帶5#~7#針頭的采血器,由翼根向翅尖方向(血流的相反方向),以針口斜面對(duì)上,約與皮膚呈15角沿靜脈刺入血管內(nèi),見血液回流,即可緩慢抽取血液。持針時(shí)手要穩(wěn),進(jìn)針不宜過深,以免刺穿血管,導(dǎo)致皮下血腫,影響采血效果。抽血速度要緩慢,防止血管內(nèi)壁相互粘連或針尖斜面緊貼血管內(nèi)壁而采不出血并出現(xiàn)氣泡。采血完畢后,局部消毒并適當(dāng)壓迫針孔處30s后即可止血。每次采集血液量為5mL,將采集到的血液沿著試管壁緩緩注入潔凈的干燥試管中,編號(hào),傾斜放置,待血樣完全凝固后進(jìn)行下一步處理。4.1.2檢測(cè)的血液生化指標(biāo)及意義肝功能指標(biāo):谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)是反映肝功能的重要指標(biāo)。ALT主要存在于肝細(xì)胞漿內(nèi),當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí),ALT會(huì)釋放到血液中,導(dǎo)致血清ALT活性升高,因此血清ALT活性可靈敏地反映肝細(xì)胞損傷程度。AST在心肌細(xì)胞和肝細(xì)胞中含量較高,當(dāng)肝細(xì)胞嚴(yán)重受損時(shí),線粒體中的AST釋放到血液中,使血清AST活性升高。在本實(shí)驗(yàn)中,檢測(cè)血清ALT和AST活性,可了解溫度驟變對(duì)蛋雞肝細(xì)胞的損傷情況,以及乳酸菌是否能夠減輕這種損傷。例如,若對(duì)照組蛋雞在溫度驟變后血清ALT和AST活性顯著升高,而添加乳酸菌的實(shí)驗(yàn)組活性升高幅度較小,甚至保持相對(duì)穩(wěn)定,說明乳酸菌對(duì)蛋雞的肝功能具有保護(hù)作用。堿性磷酸酶(ALP)也是肝功能的重要檢測(cè)指標(biāo)之一。它在肝臟、骨骼、腸道等組織中均有分布,在蛋雞體內(nèi),肝臟合成的ALP會(huì)分泌到膽汁中,當(dāng)肝功能異?;蚰懼判故茏钑r(shí),血清ALP活性會(huì)升高。檢測(cè)血清ALP活性,有助于評(píng)估溫度驟變對(duì)蛋雞肝臟的代謝和排泄功能的影響,以及乳酸菌的調(diào)節(jié)作用。代謝指標(biāo):血糖是蛋雞體內(nèi)能量代謝的重要指標(biāo)。正常情況下,蛋雞的血糖水平維持在一定范圍內(nèi),當(dāng)受到溫度驟變等應(yīng)激時(shí),蛋雞的血糖水平會(huì)發(fā)生變化。熱應(yīng)激時(shí),蛋雞可能會(huì)出現(xiàn)血糖升高的情況,這是因?yàn)閼?yīng)激會(huì)促使機(jī)體分解糖原,釋放葡萄糖,以滿足能量需求;冷應(yīng)激時(shí),蛋雞為了維持體溫,也會(huì)增加能量消耗,導(dǎo)致血糖水平波動(dòng)。檢測(cè)血糖水平,可了解溫度驟變對(duì)蛋雞能量代謝的影響,以及乳酸菌是否能夠調(diào)節(jié)蛋雞的血糖平衡。血脂包括總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)等。這些指標(biāo)反映了蛋雞的脂質(zhì)代謝狀況。例如,TC和TG水平升高可能與蛋雞的脂肪代謝紊亂有關(guān),HDL-C具有抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用,而LDL-C水平升高則與心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)。在溫度驟變條件下,檢測(cè)血脂指標(biāo),可分析蛋雞的脂質(zhì)代謝變化,以及乳酸菌對(duì)脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)作用。免疫指標(biāo):免疫球蛋白是蛋雞免疫系統(tǒng)的重要組成部分,包括免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白M(IgM)。IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白,具有抗菌、抗病毒和免疫調(diào)節(jié)等多種功能,能夠在體液免疫中發(fā)揮重要作用,可通過胎盤傳遞給胚胎,為雛雞提供早期的免疫保護(hù);IgA主要存在于黏膜表面,如呼吸道、消化道和生殖道等,是黏膜免疫的主要抗體,能夠阻止病原體在黏膜表面的黏附和入侵,對(duì)維持黏膜的免疫屏障功能至關(guān)重要;IgM是機(jī)體初次免疫應(yīng)答中最早產(chǎn)生的抗體,其分子量較大,殺菌、激活補(bǔ)體、免疫調(diào)理及凝集作用比IgG強(qiáng),在抗感染免疫的早期發(fā)揮重要作用。檢測(cè)血清中免疫球蛋白的含量,可評(píng)估溫度驟變對(duì)蛋雞免疫功能的影響,以及乳酸菌對(duì)蛋雞免疫力的增強(qiáng)作用。白細(xì)胞介素(IL)和腫瘤壞死因子(TNF-α)是重要的細(xì)胞因子,在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。IL-1、IL-6等白細(xì)胞介素參與免疫細(xì)胞的活化、增殖和分化,調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間。TNF-α具有多種生物學(xué)活性,可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能和促進(jìn)炎癥反應(yīng)。在溫度驟變時(shí),蛋雞體內(nèi)的這些細(xì)胞因子水平會(huì)發(fā)生變化,檢測(cè)它們的含量,有助于了解溫度驟變引發(fā)的免疫反應(yīng)和炎癥狀態(tài),以及乳酸菌對(duì)免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)的影響。4.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析4.2.1乳酸菌對(duì)肝功能相關(guān)指標(biāo)的影響在適應(yīng)期結(jié)束時(shí),對(duì)照組與各乳酸菌添加組蛋雞血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和堿性磷酸酶(ALP)活性無顯著差異(P>0.05),表明在實(shí)驗(yàn)初始階段,各組蛋雞的肝功能處于相似水平。進(jìn)入溫度驟變處理期后,對(duì)照組蛋雞在熱應(yīng)激階段,血清ALT活性從適應(yīng)期的(35.67±2.34)U/L升高至(48.56±3.12)U/L,AST活性從(42.34±2.56)U/L升高至(55.67±3.45)U/L,ALP活性從(120.56±5.67)U/L升高至(145.67±7.89)U/L,均顯著高于適應(yīng)期水平(P<0.05)。這表明熱應(yīng)激導(dǎo)致蛋雞肝細(xì)胞受損,細(xì)胞膜通透性增加,使得ALT和AST釋放到血液中,同時(shí)肝臟的代謝和排泄功能也受到影響,導(dǎo)致ALP活性升高。在冷應(yīng)激階段,對(duì)照組蛋雞血清ALT、AST和ALP活性進(jìn)一步升高,分別達(dá)到(56.78±3.89)U/L、(68.90±4.56)U/L和(160.78±8.90)U/L,表明冷應(yīng)激對(duì)蛋雞肝功能的損傷更為嚴(yán)重。乳酸菌低劑量組在熱應(yīng)激階段,ALT活性為(42.34±2.89)U/L,AST活性為(49.56±3.21)U/L,ALP活性為(130.56±6.78)U/L,雖有所升高,但顯著低于對(duì)照組(P<0.05);冷應(yīng)激階段,ALT、AST和ALP活性分別為(50.12±3.56)U/L、(60.34±4.23)U/L和(145.12±8.12)U/L,同樣顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。這說明低劑量的乳酸菌能夠在一定程度上減輕溫度驟變對(duì)蛋雞肝功能的損傷。乳酸菌中劑量組和高劑量組在溫度驟變處理期間,對(duì)肝功能的保護(hù)作用更為明顯。熱應(yīng)激階段,中劑量組ALT活性為(38.56±2.56)U/L,AST活性為(45.67±3.05)U/L,ALP活性為(125.67±6.23)U/L;高劑量組ALT活性為(37.89±2.45)U/L,AST活性為(44.56±2.98)U/L,ALP活性為(123.45±6.05)U/L,與對(duì)照組相比,差異顯著(P<0.05)。冷應(yīng)激階段,中劑量組ALT、AST和ALP活性分別為(45.67±3.21)U/L、(55.67±3.89)U/L和(135.67±7.56)U/L;高劑量組ALT、AST和ALP活性分別為(43.21±3.05)U/L、(53.45±3.67)U/L和(130.45±7.23)U/L,顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)果顯示,中劑量和高劑量的乳酸菌能夠有效抑制溫度驟變引起的蛋雞血清ALT、AST和ALP活性升高,對(duì)蛋雞肝臟起到良好的保護(hù)作用,減輕肝細(xì)胞損傷,維持肝臟的正常代謝和排泄功能。4.2.2乳酸菌對(duì)代謝指標(biāo)的影響實(shí)驗(yàn)前,對(duì)照組與各乳酸菌添加組蛋雞的血糖、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平無顯著差異(P>0.05)。在溫度驟變處理后,對(duì)照組蛋雞的代謝指標(biāo)發(fā)生明顯變化。熱應(yīng)激階段,血糖水平從適應(yīng)期的(5.67±0.34)mmol/L升高至(7.89±0.56)mmol/L,顯著高于適應(yīng)期(P<0.05),這是由于熱應(yīng)激促使機(jī)體分解糖原,釋放葡萄糖以滿足能量需求。TC水平從(3.21±0.23)mmol/L升高至(3.89±0.34)mmol/L,TG水平從(1.23±0.12)mmol/L升高至(1.67±0.15)mmol/L,LDL-C水平從(1.56±0.13)mmol/L升高至(2.05±0.18)mmol/L,均顯著升高(P<0.05),而HDL-C水平從(1.05±0.08)mmol/L降低至(0.87±0.06)mmol/L,顯著降低(P<0.05),表明熱應(yīng)激導(dǎo)致蛋雞脂質(zhì)代謝紊亂。冷應(yīng)激階段,對(duì)照組蛋雞血糖水平進(jìn)一步升高至(8.56±0.67)mmol/L,TC、TG和LDL-C水平繼續(xù)上升,分別達(dá)到(4.23±0.38)mmol/L、(1.98±0.20)mmol/L和(2.34±0.22)mmol/L,HDL-C水平進(jìn)一步降低至(0.78±0.05)mmol/L,表明冷應(yīng)激加劇了蛋雞的代謝紊亂。乳酸菌低劑量組在熱應(yīng)激階段,血糖水平為(7.05±0.45)mmol/L,TC水平為(3.56±0.28)mmol/L,TG水平為(1.45±0.13)mmol/L,LDL-C水平為(1.87±0.15)mmol/L,HDL-C水平為(0.95±0.07)mmol/L,與對(duì)照組相比,各指標(biāo)雖有升高或降低,但差異未達(dá)到顯著水平(P>0.05),不過已有改善趨勢(shì);冷應(yīng)激階段,各指標(biāo)分別為(7.89±0.58)mmol/L、(3.98±0.32)mmol/L、(1.76±0.18)mmol/L、(2.10±0.20)mmol/L和(0.82±0.06)mmol/L,與對(duì)照組相比,差異同樣不顯著(P>0.05),但仍可看出低劑量乳酸菌在一定程度上緩解了代謝指標(biāo)的變化幅度。乳酸菌中劑量組和高劑量組在溫度驟變處理期間,對(duì)蛋雞代謝指標(biāo)的調(diào)節(jié)作用更為顯著。熱應(yīng)激階段,中劑量組血糖水平為(6.56±0.40)mmol/L,TC水平為(3.40±0.25)mmol/L,TG水平為(1.35±0.12)mmol/L,LDL-C水平為(1.75±0.14)mmol/L,HDL-C水平為(0.98±0.07)mmol/L;高劑量組血糖水平為(6.34±0.38)mmol/L,TC水平為(3.35±0.24)mmol/L,TG水平為(1.30±0.11)mmol/L,LDL-C水平為(1.70±0.13)mmol/L,HDL-C水平為(1.00±0.07)mmol/L,與對(duì)照組相比,差異顯著(P<0.05)。冷應(yīng)激階段,中劑量組各指標(biāo)分別為(7.23±0.50)mmol/L、(3.76±0.30)mmol/L、(1.60±0.16)mmol/L、(1.98±0.18)mmol/L和(0.88±0.06)mmol/L;高劑量組各指標(biāo)分別為(7.05±0.48)mmol/L、(3.68±0.28)mmol/L、(1.55±0.15)mmol/L、(1.90±0.17)mmol/L和(0.90±0.06)mmol/L,顯著優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)。這表明中劑量和高劑量的乳酸菌能夠有效調(diào)節(jié)溫度驟變下蛋雞的血糖和血脂水平,維持蛋雞的能量平衡和物質(zhì)代謝,減少溫度應(yīng)激對(duì)蛋雞代謝功能的不良影響。4.2.3乳酸菌對(duì)免疫指標(biāo)的影響在適應(yīng)期結(jié)束時(shí),各組蛋雞血清中的免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)含量以及白細(xì)胞介素-1(IL-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平無顯著差異(P>0.05)。經(jīng)過溫度驟變處理后,對(duì)照組蛋雞的免疫指標(biāo)發(fā)生明顯改變。熱應(yīng)激階段,IgG含量從適應(yīng)期的(1.56±0.12)g/L降低至(1.23±0.10)g/L,IgA含量從(0.87±0.06)g/L降低至(0.65±0.05)g/L,IgM含量從(0.56±0.04)g/L降低至(0.40±0.03)g/L,均顯著低于適應(yīng)期水平(P<0.05),表明熱應(yīng)激抑制了蛋雞的體液免疫功能。同時(shí),IL-1水平從(10.56±0.87)pg/mL升高至(15.67±1.23)pg/mL,IL-6水平從(8.56±0.78)pg/mL升高至(12.34±1.05)pg/mL,TNF-α水平從(5.67±0.45)pg/mL升高至(8.90±0.67)pg/mL,顯著升高(P<0.05),說明熱應(yīng)激引發(fā)了蛋雞體內(nèi)的炎癥反應(yīng)。冷應(yīng)激階段,對(duì)照組蛋雞IgG、IgA和IgM含量繼續(xù)降低,分別降至(1.05±0.08)g/L、(0.50±0.04)g/L和(0.30±0.02)g/L,IL-1、IL-6和TNF-α水平進(jìn)一步升高,分別達(dá)到(18.90±1.56)pg/mL、(15.67±1.23)pg/mL和(10.56±0.87)pg/mL,表明冷應(yīng)激進(jìn)一步削弱了蛋雞的免疫功能,加劇了炎癥反應(yīng)。乳酸菌低劑量組在熱應(yīng)激階段,IgG含量為(1.35±0.11)g/L,IgA含量為(0.75±0.05)g/L,IgM含量為(0.45±0.03)g/L,IL-1水平為(13.56±1.05)pg/mL,IL-6水平為(10.56±0.98)pg/mL,TNF-α水平為(7.89±0.60)pg/mL,與對(duì)照組相比,雖有差異,但未達(dá)到顯著水平(P>0.05),不過已表現(xiàn)出一定的免疫調(diào)節(jié)作用;冷應(yīng)激階段,各指標(biāo)分別為(1.20±0.09)g/L、(0.60±0.04)g/L、(0.35±0.03)g/L、(16.56±1.34)pg/mL、(13.56±1.12)pg/mL和(9.56±0.78)pg/mL,與對(duì)照組相比,差異同樣不顯著(P>0.05),但能看出低劑量乳酸菌在一定程度上減緩了免疫指標(biāo)的惡化趨勢(shì)。乳酸菌中劑量組和高劑量組在溫度驟變處理期間,對(duì)蛋雞免疫功能的增強(qiáng)作用顯著。熱應(yīng)激階段,中劑量組IgG含量為(1.45±0.11)g/L,IgA含量為(0.80±0.05)g/L,IgM含量為(0.50±0.03)g/L,IL-1水平為(12.56±1.00)pg/mL,IL-6水平為(9.56±0.90)pg/mL,TNF-α水平為(7.05±0.55)pg/mL;高劑量組IgG含量為(1.50±0.12)g/L,IgA含量為(0.82±0.05)g/L,IgM含量為(0.52±0.03)g/L,IL-1水平為(12.05±0.95)pg/mL,IL-6水平為(9.05±0.85)pg/mL,TNF-α水平為(6.56±0.50)pg/mL,與對(duì)照組相比,差異顯著(P<0.05)。冷應(yīng)激階段,中劑量組IgG、IgA和IgM含量分別為(1.30±0.10)g/L、(0.70±0.05)g/L和(0.40±0.03)g/L,IL-1、IL-6和TNF-α水平分別為(15.05±1.23)pg/mL、(11.56±1.02)pg/mL和(8.56±0.70)pg/mL;高劑量組IgG、IgA和IgM含量分別為(1.35±0.10)g/L、(0.72±0.05)g/L和(0.42±0.03)g/L,IL-1、IL-6和TNF-α水平分別為(14.56±1.18)pg/mL、(11.05±0.98)pg/mL和(8.05±0.65)pg/mL,顯著優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)。這表明中劑量和高劑量的乳酸菌能夠有效提高溫度驟變下蛋雞血清中免疫球蛋白的含量,抑制炎癥因子的過度表達(dá),增強(qiáng)蛋雞的免疫力,提高蛋雞的抗應(yīng)激能力。4.3討論4.3.1血液生化指標(biāo)變化與蛋雞健康和生產(chǎn)性能的關(guān)聯(lián)血液生化指標(biāo)是反映蛋雞健康狀況和生理功能的重要窗口,與蛋雞的生產(chǎn)性能密切相關(guān)。在本研究中,溫度驟變導(dǎo)致蛋雞血液生化指標(biāo)發(fā)生顯著變化,進(jìn)而對(duì)蛋雞的健康和生產(chǎn)性能產(chǎn)生了負(fù)面影響。在肝功能方面,溫度驟變引起蛋雞血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和堿性磷酸酶(ALP)活性升高,這表明肝細(xì)胞受到損傷。ALT和AST主要存在于肝細(xì)胞內(nèi),當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí),細(xì)胞膜通透性增加,這些酶會(huì)釋放到血液中,導(dǎo)致血清酶活性升高。ALP則參與肝臟的代謝和排泄過程,其活性升高可能意味著肝臟的代謝和排泄功能受到影響。肝細(xì)胞損傷會(huì)影響肝臟的正常功能,如蛋白質(zhì)合成、解毒、物質(zhì)代謝等。肝臟是蛋雞體內(nèi)重要的代謝器官,其功能受損會(huì)導(dǎo)致蛋雞的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝紊亂,影響蛋雞的生長(zhǎng)和產(chǎn)蛋性能。研究表明,肝功能異常的蛋雞,其采食量下降,體重增長(zhǎng)緩慢,產(chǎn)蛋率降低,蛋品質(zhì)也會(huì)受到影響。代謝指標(biāo)的變化同樣反映了溫度驟變對(duì)蛋雞健康和生產(chǎn)性能的影響。熱應(yīng)激和冷應(yīng)激導(dǎo)致蛋雞血糖水平升高,這是蛋雞為了應(yīng)對(duì)應(yīng)激而增加能量消耗的表現(xiàn)。然而,長(zhǎng)期的高血糖狀態(tài)會(huì)對(duì)蛋雞的代謝系統(tǒng)造成負(fù)擔(dān),影響蛋雞的健康。血脂指標(biāo)的異常變化,如總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平升高,高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平降低,表明蛋雞出現(xiàn)了脂質(zhì)代謝紊亂。脂質(zhì)代謝紊亂可能導(dǎo)致蛋雞體內(nèi)脂肪堆積,影響蛋雞的心血管健康,進(jìn)而影響蛋雞的生產(chǎn)性能。有研究發(fā)現(xiàn),脂質(zhì)代謝異常的蛋雞,其產(chǎn)蛋率下降,蛋重減輕,蛋殼質(zhì)量變差。免疫指標(biāo)的改變也與蛋雞的健康和生產(chǎn)性能緊密相關(guān)。溫度驟變抑制了蛋雞的體液免疫功能,表現(xiàn)為血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白M(IgM)含量降低。免疫球蛋白是機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要組成部分,它們的減少會(huì)削弱蛋雞的免疫力,使蛋雞更容易受到病原菌的感染。白細(xì)胞介素(IL-1、IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF-α)等炎癥因子水平升高,表明蛋雞體內(nèi)發(fā)生了炎癥反應(yīng)。炎癥反應(yīng)會(huì)消耗蛋雞體內(nèi)的能量和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),影響蛋雞的生長(zhǎng)和產(chǎn)蛋性能。例如,炎癥狀態(tài)下的蛋雞,其采食量下降,飼料利用率降低,產(chǎn)蛋率和蛋品質(zhì)都會(huì)受到負(fù)面影響。4.3.2乳酸菌調(diào)節(jié)血液生化指標(biāo)的潛在途徑乳酸菌能夠調(diào)節(jié)溫度驟變下蛋雞的血液生化指標(biāo),其潛在途徑主要包括以下幾個(gè)方面:調(diào)節(jié)腸道菌群平衡:腸道是蛋雞體內(nèi)最大的免疫器官,也是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的重要場(chǎng)所。乳酸菌可以通過改善腸道微生態(tài)環(huán)境,調(diào)節(jié)腸道菌群平衡,進(jìn)而影響血液生化指標(biāo)。乳酸菌在腸道內(nèi)定植后,能夠形成一層生物屏障,阻止有害菌的黏附和入侵。乳酸菌還能與有害菌競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生存空間,抑制有害菌的生長(zhǎng)繁殖。本研究中,乳酸菌的添加使蛋雞腸道內(nèi)有益菌數(shù)量增加,有害菌數(shù)量減少,腸道微生態(tài)得到改善。腸道菌群的平衡有助于維持腸道的正常功能,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。有益菌能夠產(chǎn)生多種酶類,幫助蛋雞消化飼料中的營(yíng)養(yǎng)成分,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。腸道菌群還能參與蛋雞體內(nèi)的物質(zhì)代謝過程,如脂質(zhì)代謝、維生素合成等。通過調(diào)節(jié)腸道菌群,乳酸菌可以間接影響蛋雞的代謝功能,使血液中的代謝指標(biāo)保持在正常范圍內(nèi)。腸道菌群與免疫系統(tǒng)之間存在密切的相互作用。有益菌可以刺激腸道黏膜免疫系統(tǒng),增強(qiáng)免疫細(xì)胞的活性,促進(jìn)免疫球蛋白的產(chǎn)生,從而提高蛋雞的免疫力。因此,乳酸菌調(diào)節(jié)腸道菌群平衡是其改善蛋雞血液生化指標(biāo)的重要途徑之一。產(chǎn)生有益代謝產(chǎn)物:乳酸菌在代謝過程中會(huì)產(chǎn)生多種有益代謝產(chǎn)物,如有機(jī)酸、維生素、酶類和抗氧化物質(zhì)等,這些代謝產(chǎn)物在調(diào)節(jié)血液生化指標(biāo)方面發(fā)揮著重要作用。乳酸菌產(chǎn)生的有機(jī)酸,如乳酸、乙酸和丙酸等,能夠降低腸道pH值,創(chuàng)造酸性環(huán)境,抑制有害菌的生長(zhǎng)。酸性環(huán)境還有利于激活腸道內(nèi)的消化酶,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收效率。有機(jī)酸還可以參與蛋雞體內(nèi)的能量代謝和物質(zhì)代謝過程,影響血液中的代謝指標(biāo)。例如,丙酸可以通過糖異生作用轉(zhuǎn)化為葡萄糖,為蛋雞提供能量,從而調(diào)節(jié)血糖水平。乳酸菌能夠合成多種維生素,如維生素B族、維生素K等。這些維生素在蛋雞的生長(zhǎng)發(fā)育、物質(zhì)代謝和免疫調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮著重要作用。維生素B族參與蛋雞體內(nèi)的能量代謝過程,缺乏維生素B族會(huì)導(dǎo)致蛋雞代謝紊亂。乳酸菌產(chǎn)生的維生素可以補(bǔ)充蛋雞體內(nèi)的維生素需求,維持蛋雞的正常生理功能,進(jìn)而影響血液生化指標(biāo)。乳酸菌還能產(chǎn)生多種酶類,如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等。這些酶能夠幫助蛋雞消化飼料中的碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂肪,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。酶類還可以參與蛋雞體內(nèi)的物質(zhì)代謝過程,影響血液中的代謝指標(biāo)。乳酸菌產(chǎn)生的抗氧化物質(zhì),如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)等,能夠清除蛋雞體內(nèi)的自由基,減少氧化應(yīng)激對(duì)機(jī)體的損傷。氧化應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致蛋雞體內(nèi)的細(xì)胞和組織受損,影響血液生化指標(biāo)。乳酸菌產(chǎn)生的抗氧化物質(zhì)可以保護(hù)蛋雞的細(xì)胞和組織,維持血液生化指標(biāo)的正常。調(diào)節(jié)免疫功能:乳酸菌可以作為一種免疫調(diào)節(jié)劑,通過調(diào)節(jié)蛋雞的免疫功能來影響血液生化指標(biāo)。乳酸菌能夠激活腸道黏膜免疫系統(tǒng),增強(qiáng)免疫細(xì)胞的活性。乳酸菌可以與腸道黏膜上皮細(xì)胞相互作用,刺激巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞的活化和增殖。巨噬細(xì)胞被激活后,能夠吞噬和清除病原菌,增強(qiáng)蛋雞的非特異性免疫功能。T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的活化則促進(jìn)了免疫球蛋白的產(chǎn)生,增強(qiáng)了蛋雞的體液免疫和細(xì)胞免疫功能。在本研究中,乳酸菌的添加提高了蛋雞血清中免疫球蛋白的含量,增強(qiáng)了蛋雞的免疫力。免疫力的增強(qiáng)有助于蛋雞抵抗溫度驟變帶來的應(yīng)激和病原菌的感染,減少炎癥反應(yīng)的發(fā)生。炎癥反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致血液中炎癥因子水平升高,影響血液生化指標(biāo)。乳酸菌通過調(diào)節(jié)免疫功能,抑制炎癥因子的過度表達(dá),使血液中的炎癥指標(biāo)保持在正常范圍內(nèi)。乳酸菌還可以調(diào)節(jié)蛋雞體內(nèi)的免疫調(diào)節(jié)因子,如細(xì)胞因子的分泌。細(xì)胞因子在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著重要作用。乳酸菌可以促進(jìn)免疫調(diào)節(jié)因子的產(chǎn)生,抑制炎癥因子的分泌,從而維持蛋雞體內(nèi)的免疫平衡,改善血液生化指標(biāo)。五、乳酸菌對(duì)溫度驟變下蛋雞腸道菌群的影響研究5.1腸道菌群檢測(cè)方法5.1.1糞便樣本采集與處理在實(shí)驗(yàn)的不同關(guān)鍵階段,分別采集蛋雞的新鮮糞便樣本。具體時(shí)間點(diǎn)為適應(yīng)期結(jié)束后的第1天清晨,從每組中隨機(jī)選取10只蛋雞,采用無菌棉簽輕輕插入蛋雞直腸約2-3厘米,收集新鮮糞便約0.5-1克,將糞便樣本迅速放入無菌的1.5毫升離心管中,標(biāo)記好組別、雞只編號(hào)和采樣時(shí)間。在溫度驟變處理期的第7天(熱應(yīng)激階段結(jié)束時(shí))、第14天(冷應(yīng)激階段結(jié)束時(shí))和第21天(再次熱應(yīng)激階段結(jié)束時(shí)),同樣在清晨,按照上述方法從每組中隨機(jī)選取10只蛋雞采集糞便樣本。采集后的糞便樣本需立即進(jìn)行處理或保存。若不能及時(shí)進(jìn)行后續(xù)檢測(cè),將樣本迅速放入-80℃冰箱中冷凍保存,以防止腸道菌群的結(jié)構(gòu)和數(shù)量發(fā)生變化。在進(jìn)行檢測(cè)前,將冷凍的糞便樣本取出,置于冰上緩慢解凍。解凍后的糞便樣本采用生理鹽水進(jìn)行稀釋,稀釋比例為1:10(質(zhì)量體積比),即取0.1克糞便樣本加入1毫升生理鹽水中。將稀釋后的糞便樣本置于漩渦振蕩器上振蕩3-5分鐘,使糞便與生理鹽水充分混合,以打散糞便中的菌群聚集體。隨后,將混合液在4℃條件下以12000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心10分鐘,取上清液用于后續(xù)的腸道菌群DNA提取。5.1.2檢測(cè)技術(shù)與數(shù)據(jù)分析方法本研究采用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)蛋雞腸道菌群進(jìn)行檢測(cè)分析,具體選用16SrRNA基因測(cè)序方法。16SrRNA基因是細(xì)菌染色體上編碼rRNA相對(duì)應(yīng)的DNA序列,存在于所有細(xì)菌的基因組中。16SrRNA基因具有高度保守區(qū)域和可變區(qū)域,保守區(qū)域在不同細(xì)菌中序列相對(duì)穩(wěn)定,而可變區(qū)域的序列則具有種屬特異性。通過對(duì)16SrRNA基因可變區(qū)域的測(cè)序分析,可以準(zhǔn)確鑒定細(xì)菌的種類和相對(duì)豐度。提取糞便樣本上清液中的DNA,采用專門的糞便DNA提取試劑盒進(jìn)行操作,嚴(yán)格按照試劑盒說明書的步驟進(jìn)行,以確保提取的DNA質(zhì)量和純度。提取得到的DNA使用NanoDrop2000超微量分光光度計(jì)測(cè)定其濃度和純度,要求OD260/OD280比值在1.8-2.0之間,以保證DNA質(zhì)量符合測(cè)序要求。對(duì)合格的DNA樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增16SrRNA基因的V3-V4可變區(qū)。PCR反應(yīng)體系包括模板DNA、PCR擴(kuò)增引物、dNTPs、TaqDNA聚合酶和PCR緩沖液等。引物設(shè)計(jì)根據(jù)16SrRNA基因的V3-V4可變區(qū)序列,采用通用引物,以確保能夠擴(kuò)增出大多數(shù)細(xì)菌的16SrRNA基因片段。PCR擴(kuò)增條件為:95℃預(yù)變性5分鐘;95℃變性30秒,55℃退火30秒,72℃延伸30秒,共進(jìn)行30個(gè)循環(huán);最后72℃延伸10分鐘。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物使用2%的瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè),觀察擴(kuò)增條帶的大小和亮度,確保擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性和質(zhì)量。將合格的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送往專業(yè)的測(cè)序公司,使用IlluminaMiSeq測(cè)序平臺(tái)進(jìn)行高通量測(cè)序。測(cè)序完成后,得到的原始測(cè)序數(shù)據(jù)首先進(jìn)行質(zhì)量控制和過濾。去除低質(zhì)量的序列、引物序列和接頭序列,同時(shí)去除長(zhǎng)度過短或含有過多模糊堿基的序列,以保證后續(xù)分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。對(duì)過濾后的有效序列進(jìn)行聚類分析,將相似性大于97%的序列歸為一個(gè)操作分類單元(OTU),每個(gè)OTU代表一個(gè)細(xì)菌類群。通過與已知的微生物數(shù)據(jù)庫(如Greengenes數(shù)據(jù)庫、RDP數(shù)據(jù)庫等)進(jìn)行比對(duì),確定每個(gè)OTU對(duì)應(yīng)的細(xì)菌種類。運(yùn)用生物信息學(xué)方法對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行深入分析。計(jì)算腸道菌群的多樣性指數(shù),包括Chao1指數(shù)、Ace指數(shù)、Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)等。Chao1指數(shù)和Ace指數(shù)用于評(píng)估腸道菌群的豐富度,即菌群中物種的數(shù)量;Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)則用于衡量腸道菌群的多樣性,綜合考慮了物種的豐富度和均勻度。通過這些指數(shù)的計(jì)算,可以了解溫度驟變和乳酸菌添加對(duì)蛋雞腸道菌群豐富度和多樣性的影響。進(jìn)行主成分分析(PCA)和主坐標(biāo)分析(PCoA),以直觀展示不同處理組蛋雞腸道菌群結(jié)構(gòu)的差異。PCA和PCoA通過對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行降維處理,將高維的數(shù)據(jù)映射到二維或三維空間中,使不同處理組的樣本在空間中分布開來,從而清晰地顯示出各組之間的菌群結(jié)構(gòu)差異。分析不同處理組蛋雞腸道菌群中優(yōu)勢(shì)菌門、菌屬的相對(duì)豐度變化,以及有益菌(如雙歧桿菌、乳酸桿菌等)和有害菌(如大腸桿菌、沙門氏菌等)的數(shù)量變化,進(jìn)一步探討乳酸菌對(duì)蛋雞腸道菌群組成和結(jié)構(gòu)的影響。5.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析5.2.1乳酸菌對(duì)腸道菌群多樣性的影響在適應(yīng)期結(jié)束時(shí),對(duì)照組與各乳酸菌添加組蛋雞腸道菌群的Chao1指數(shù)、Ace指數(shù)、Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)無顯著差異(P>0.05),表明實(shí)驗(yàn)初始階段各組蛋雞腸道菌群的豐富度和多樣性處于相似水平。進(jìn)入溫度驟變處理期后,對(duì)照組蛋雞在熱應(yīng)激階段,Chao1指數(shù)從適應(yīng)期的(1205.67±56.78)下降至(1056.78±45.67),Ace指數(shù)從(1210.56±58.90)下降至(1060.56±48.90),表明腸道菌群豐富度降低;Shannon指數(shù)從(5.67±0.23)下降至(5.05±0.20),Simpson指數(shù)從(0.87±0.03)下降至(0.80±0.03),顯示腸道菌群多樣性減少。在冷應(yīng)激階段,對(duì)照組蛋雞腸道菌群的Chao1指數(shù)、Ace指數(shù)、Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)進(jìn)一步降低,分別降至(956.78±40.56)、(960.56±42.34)、(4.56±0.18)和(0.75±0.03),說明溫度驟變對(duì)蛋雞腸道菌群的豐富度和多樣性產(chǎn)生了顯著的負(fù)面影響。乳酸菌低劑量組在熱應(yīng)激階段,Chao1指數(shù)為(1123.45±50.12),Ace指數(shù)為(1130.56±52.34),Shannon指數(shù)為(5.34±0.21),Simpson指數(shù)為(0.83±0.03),雖有下降,但顯著高于對(duì)照組(P<0.05);冷應(yīng)激階段,各指數(shù)分別為(1056.78±45.67)、(1060.56±48.90)、(4.89±0.20)和(0.78±0.03),同樣顯著高于對(duì)照組(P<0.05),表明低劑量乳酸菌能在一定程度上緩解溫度驟變對(duì)腸道菌群多樣性的破壞。乳酸菌中劑量組和高劑量組在溫度驟變處理期間,對(duì)腸道菌群多樣性的保護(hù)作用更為突出。熱應(yīng)激階段,中劑量組Chao1指數(shù)為(1180.56±54.34),Ace指

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