支氣管肺泡灌洗液細胞形態(tài)學檢驗中國專家共識（2023）解讀匯報人：xxx2025-07-26引言BALF細胞形態(tài)學檢驗目的標本采集標本接收與處理檢驗程序報告模式目錄生物參考區(qū)間臨床意義質量控制共識更新亮點與未來展望總結目錄01PART引言BALF細胞形態(tài)學檢驗重要支氣管肺泡灌洗液（BALF）細胞形態(tài)學檢驗在呼吸系統(tǒng)疾病的診斷、鑒別診斷、療效評估及發(fā)病機制研究中占據(jù)重要地位。BALF檢驗地位隨著臨床對肺部疾病精準診斷需求的不斷增加，規(guī)范BALF細胞形態(tài)學檢驗流程和標準至關重要。精準診斷需求增規(guī)范BALF檢驗流程和標準共識發(fā)布指導隨著臨床對肺部疾病精準診斷需求的不斷增加，規(guī)范支氣管肺泡灌洗液（BALF）細胞形態(tài)學檢驗流程和標準至關重要。權威指導發(fā)布《支氣管肺泡灌洗液細胞形態(tài)學檢驗中國專家共識（2023）》發(fā)布，為臨床實驗室開展相關檢驗提供權威指導。深入解讀共識深入解讀《支氣管肺泡灌洗液細胞形態(tài)學檢驗中國專家共識（2023）》，理解其背景、目的、意義及主要內(nèi)容。解讀支氣管肺泡灌洗液共識01共識背景與目的深入解讀共識，理解其背景、目的、意義及主要內(nèi)容。共識旨在規(guī)范BALF細胞形態(tài)學檢驗，提高肺部疾病診斷準確性。02共識意義與影響共識的發(fā)布對臨床實驗室開展BALF細胞形態(tài)學檢驗具有權威指導價值，有助于提升檢驗質量和效率。02PARTBALF細胞形態(tài)學檢驗目的細胞計數(shù)與分類炎癥細胞量化分析精確計數(shù)BALF細胞，含紅細胞、白細胞，精準分類有核細胞，識別巨噬細胞、淋巴細胞、中性粒細胞、嗜酸性粒細胞等比例，為肺部健康提供量化指標。炎癥類型判斷依據(jù)中性粒細胞增多常見于細菌感染性肺部疾病，而淋巴細胞增多可能提示病毒感染、結節(jié)病或過敏性肺炎等，協(xié)助醫(yī)生判斷炎癥類型，為治療提供依據(jù)。細胞形態(tài)識別在肺癌診斷中，通過識別癌細胞的異形性、核仁增大、染色質增粗等特點，為肺癌的早期診斷提供依據(jù)。異常細胞識別關鍵清晰識別細胞形態(tài)，觀察細胞大小、形態(tài)、胞質內(nèi)容物、核質比例等特征，對于發(fā)現(xiàn)異常細胞至關重要。形態(tài)分析助診斷0102鑒別寄生蟲和結晶種類，發(fā)現(xiàn)細菌、真菌及其他有形成分，對感染性疾病的病原學診斷和非感染性肺部疾病的病因判斷具有重要意義。感染性病原學診斷雷登結晶常見于嗜酸性粒細胞性肺部疾病，含鐵血黃素細胞提示可能存在肺出血等，有助于非感染性肺部疾病的精準病因判斷。非感染病因判斷病原體及其他有形成分檢測03PART標本采集采集要求紅細胞＜10%，上皮細胞＜5%。防血液干擾，減污染風險，保障結果精準。血液及上皮細胞混入限制特殊標注兒童標本采集宜≥40%，過低影響準確。確保細胞充足，干擾少，結果可靠。多部位灌洗需標記部位與液體，并棄去首管以提高標本質量，確保檢測結果準確無誤。兒童BALF標本采集需嚴格遵循相應標準，考慮到兒童呼吸系統(tǒng)的獨特解剖與生理特點?；厥章什杉椒?1.局部麻醉2ml，做灌洗肺段局部麻醉，減輕患者不適。02.灌洗操作總量100-250ml，分3-5次灌注，每次25-60ml，負壓吸引回收。合適的灌洗量和力度確保獲取足夠的肺泡表面襯液。03.部位選擇病變局限者選病變段，彌漫性病變者選右肺中葉或左肺上葉舌段，確保操作便捷且能反映病情。標本容器用于病原學分析的標本需用無菌容器收集，防止外界微生物污染，保證培養(yǎng)結果準確性。病原學分析常規(guī)細胞學分析需選擇硅化的塑料容器或玻璃容器以減少細胞的黏附，確保細胞形態(tài)完整。細胞學分析標本量成人與兒童標本量成人標本量應至少為10ml，兒童則至少為3ml，確保檢測足夠細胞數(shù)量。大氣道疾病處理考慮為大氣道疾病時，建議第1管回收液單獨處理，以針對性分析大氣道細胞。非大氣道疾病處理非大氣道疾病時，可將所有標本混合后送檢，有助于全面評估肺部細胞情況。04PART標本接收與處理標本接收掃碼登記接收標本送達后，檢驗科工作人員迅速在LIS系統(tǒng)上進行掃碼登記，確保接收流程高效準確，同時細致檢查標本標識。拒收不合格標本對標識不明、采集量不足等不合格的標本，執(zhí)行標本拒收程序，確保檢驗質量，避免錯誤結果，明確拒收標準。及時檢驗標本8℃環(huán)境中保存24小時，避免微生物繁殖。避免保存過久不建議將保存24h后的標本再用于檢測分析，及時處理標本能減少細胞形態(tài)變化和微生物繁殖對結果的影響。讓步接收和讓步檢驗靈活處理不合格標本對于部分不合格標本，如上皮細胞稍增多但不影響主要細胞分類結果等情況，可執(zhí)行讓步接收和讓步檢驗。備注影響與臨床進行溝通，并在報告單中備注，說明標本狀況對檢驗結果的影響，這種靈活處理方式在保證檢驗質量的前提下。提供有用信息盡可能為臨床提供有用信息，以幫助醫(yī)生在有限的信息下做出更全面的診斷，靈活處理有助于提升診療效率。標本預處理去除黏液雜質BALF標本常含有黏液等雜質，這些雜質會影響細胞形態(tài)的觀察和分類。因此，需要采取一些措施去除這些雜質。提升細胞辨識度可采用物理方法如過濾、離心沉淀等去除黏液，也可使用化學試劑如二硫蘇糖醇（DTT）等液化黏液。DTT的使用有效的預處理能提高細胞的可辨識度，避免黏液對細胞形態(tài)觀察和分類的干擾。如DTT能破壞黏液中的二硫鍵?？刂茲舛葧r間使用DTT等化學試劑時，需注意濃度和作用時間，避免對細胞造成損傷。合理的預處理步驟是確保細胞形態(tài)學分析準確性的關鍵。05PART檢驗程序制片方法推片法適用于黏液少或預處理標本，制作涂片清晰分布，大細胞或團狀細胞聚兩側及尾端，但尾部細胞易破。操作需控推片30-45度，速度適中，確保細胞均勻分布。01涂抹法適用于黏液絮狀物或不易離心沉淀標本，涂抹法制涂片細胞不均，黏液包裹細胞，結構不清，不利于分類計數(shù)。涂抹時應盡量輕柔，避免細胞過度擠壓變形。壓拉法適用于有黏液絮狀物的標本或標本不易離心沉淀，壓拉法制涂片厚且染色深，細胞易被黏液包裹，結構不清，部分細胞受外力擠壓而破碎，需掌握力度以避免損傷。液基細胞學制片法應用此方法制片，細胞分布均勻，結構清晰，利于形態(tài)辨識，可提高細胞學標本陽性檢出率，通過特殊液基保存液收集細胞，制成薄層涂片，減少雜質干擾。020304染色方法瑞氏-吉姆薩染色特殊染色巴氏染色最常用的染色方法，可使細胞核染成紫紅色或藍紫色，細胞質染成深淺不同的藍色、紅色或紫色。能清晰顯示細胞形態(tài)和結構，便于細胞分類計數(shù)。常用于腫瘤細胞篩查，能更好地顯示細胞核結構和細胞層次，有助于發(fā)現(xiàn)癌細胞的細微形態(tài)變化。在肺癌篩查中，巴氏染色可清晰顯示癌細胞的核仁、染色質等特征。針對特定病原體或細胞成分進行染色，如六胺銀染色常用于肺孢子菌的檢測，可使肺孢子菌包囊染成黑色或棕黑色；抗酸染色用于檢測分枝桿菌，使其染成紅色。顯微鏡檢查低倍鏡觀察低倍鏡下觀涂片全貌，判斷細胞分布是否均勻，有無異常細胞團塊、黏液絮狀物等，同時觀察有無寄生蟲、結晶等特殊有形成分，初步評估確定高倍鏡下重點觀察區(qū)域。油鏡觀察對于疑似腫瘤細胞、病原體等難以辨認的細胞或結構，使用油鏡進一步觀察，油鏡可提高分辨率，清晰顯示細胞細微結構，有助于準確診斷，油鏡下可觀察到癌細胞特征。高倍鏡觀察在低倍鏡基礎上，轉換高倍鏡對細胞進行詳細觀察，觀察細胞形態(tài)、大小、核質比例、胞質內(nèi)容物等特征，進行細胞分類計數(shù)，高倍鏡下需仔細辨別各類細胞。06PART報告模式報告名稱01統(tǒng)一命名支氣管肺泡灌洗液（BALF）常規(guī)細胞形態(tài)學檢驗診斷報告，簡稱為BALF常規(guī)細胞學報告。明確統(tǒng)一的報告名稱有助于臨床醫(yī)生準確識別和查閱報告。02助力診療規(guī)范報告名稱，增強檢驗報告辨識度與查閱效率，為臨床提供清晰、準確的檢驗信息，助力醫(yī)生精準評估病情，推動醫(yī)療決策科學化，提升整體診療水平。報告內(nèi)容細胞學報告分級篩查惡性細胞，從無到惡四級遞進；特殊細胞形態(tài)描述，輔助診斷精準治療。見惡性，明類型，為肺癌病理分型提供依據(jù)。常規(guī)報告包括標本一般信息（患者姓名、年齡、住院號等）、標本外觀（顏色、透明度、有無凝塊等）、有核細胞計數(shù)、細胞分類百分比等。圖文報告圖像建議或提示形態(tài)學描述鏡下精選細胞分布佳、染色優(yōu)部位，拍攝代表性圖片以輔助診斷。圖像直觀展現(xiàn)細胞形態(tài)與分布，助力臨床醫(yī)生清晰理解檢驗結果，提升診斷精準度。描述異型、腫瘤及特殊細胞形態(tài)，含分布、大小、胞質著色等。描述中性粒細胞或巨噬細胞吞噬細菌現(xiàn)象等，助臨床理解檢驗，提高診斷準確性。依據(jù)細胞形態(tài)特征，給出合理化建議或進一步檢查的方向。檢出惡性或可疑惡性細胞，建議免疫細胞化學染色等；淋巴瘤細胞需結合病史分析。纖毛柱狀或鱗狀上皮細胞>5%的標本，讓步檢驗。細胞分類時排除上皮細胞，半定量表示（5%-10%“+”，11%-20%“++”，21%-30%“+++”>30%“++++”）。上皮細胞增多有核細胞分布不均的涂片，報告時選擇對診斷疾病有價值的陽性指標（如中性粒細胞、嗜酸性粒細胞等），注明“局灶性分布”。既反映標本實際又提供有價值信息。局灶性分布讓步檢驗報告主動及時報告檢出特殊意義成分或其他影響臨床的重要發(fā)現(xiàn)，如肺孢子菌、隱球菌、惡性腫瘤細胞等，應立即報告臨床。幫助醫(yī)生迅速采取相應治療措施，改善患者預后。特殊成分報告及時報告肺孢子菌等，臨床應立即啟動抗真菌治療。通過及時有效的治療策略，可以顯著提高患者的治療效果和生存率，減輕病情惡化風險，提升整體診療質量。及時報告07PART生物參考區(qū)間有核細胞數(shù)中性粒細胞嗜酸性粒細胞肥大細胞淋巴細胞肺泡巨噬細胞260）×10?/L，反映了健康非吸煙成年人肺泡灌洗液中有核細胞的正常數(shù)量范圍，是評估肺部細胞狀態(tài)的重要指標。96%，是健康非吸煙成年人支氣管肺泡灌洗液中的主要細胞成分，對維持肺部健康及防御機制具有關鍵作用。15%，是免疫系統(tǒng)的重要組成，參與保護機體免受感染。其比例變化可能反映肺部免疫狀態(tài)的改變或某些疾病的存在。6%，是先天免疫系統(tǒng)的一部分，負責吞噬和消滅細菌等病原體。其比例變化可能提示肺部存在感染或炎癥反應。1%，參與過敏反應和寄生蟲感染的免疫反應。在某些肺部疾病中，嗜酸性粒細胞的增加可能具有診斷意義。0.5%，與過敏反應和寄生蟲感染有關。在肺部疾病中，肥大細胞的比例變化可能反映過敏或寄生蟲感染的存在。健康非吸煙成年人參考值生物參考區(qū)間判斷檢驗結果判斷異常生物參考區(qū)間為臨床判斷檢驗結果是否異常提供了重要依據(jù)。通過對比患者的檢驗結果與參考區(qū)間范圍，可以初步判斷檢驗結果是否異常。異常原因不同人群的參考區(qū)間可能存在差異。例如，吸煙者、職業(yè)暴露人群等可能存在較高的有核細胞數(shù)或特定的細胞成分比例，需考慮這些影響因素。參考價值生物參考區(qū)間對臨床實驗室具有重要參考價值。它為檢驗結果的解讀提供了標準，幫助醫(yī)生準確判斷病情，為患者的治療提供科學依據(jù)。吸煙者BALF含煙塵巨噬細胞吸煙影響吸煙者的支氣管肺泡灌洗液中可能出現(xiàn)含煙塵巨噬細胞，其比例可能高于非吸煙者，反映吸煙對肺部健康的影響及巨噬細胞在清除煙塵中的作用。巨噬細胞作用含煙塵巨噬細胞的出現(xiàn)和比例增加，可能提示吸煙者肺部存在較明顯的煙塵積累，需引起高度重視并采取相應措施以保護肺部健康。減少吸煙危害對于吸煙者而言，了解生物參考區(qū)間及含煙塵巨噬細胞的存在和比例變化，有助于醫(yī)生評估其肺部健康狀況，提供個性化的健康建議和治療方案。08PART臨床意義感染性疾病診斷細菌感染中性粒細胞增多常提示細菌感染，如肺炎鏈球菌肺炎時，BALF中中性粒細胞比例可顯著升高，同時可查見吞噬細菌的中性粒細胞。真菌感染GM檢測具有重要診斷價值。病毒感染淋巴細胞增多可能提示病毒感染，如病毒性肺炎時，BALF中淋巴細胞比例升高。此外，通過特殊染色或免疫熒光技術，可檢測病毒包涵體、合胞體等。寄生蟲感染卡氏肺孢子蟲肺炎時，六胺銀染色可在BALF中查見肺孢子菌包囊，呈黑色或棕黑色。準確診斷寄生蟲感染，有助于及時使用針對性抗寄生蟲藥物治療。非感染性疾病診斷間質性肺疾病不同類型的間質性肺疾病在BALF細胞形態(tài)學上有不同表現(xiàn)，如特發(fā)性肺纖維化以中性粒細胞增多為主，同時可伴有肺泡巨噬細胞活化。肺癌可在BALF中查見癌細胞，根據(jù)癌細胞形態(tài)特征可初步判斷肺癌類型，如非小細胞癌或小細胞癌。結合免疫細胞化學染色等技術，可進一步明確癌細胞的來源。肺泡蛋白沉積癥鏡下可見有核細胞數(shù)減少，中性粒細胞及淋巴細胞比例升高，細胞背景臟亂，可見泡沫細胞及非細胞小體，PAS染色（+）。療效評估在治療過程中，定期檢測BALF細胞形態(tài)學指標，如細菌感染性肺炎患者經(jīng)過抗生素治療后，BALF中中性粒細胞比例下降，細菌數(shù)量減少，提示治療有效。肺炎療效評估肺癌患者在化療或靶向治療后，BALF中癌細胞數(shù)量減少或形態(tài)改善，可作為治療有效的參考指標。定期檢測能評估治療效果，為調整治療方案提供依據(jù)。肺癌療效評估09PART質量控制室內(nèi)質量控制涂片質量控制對涂片的制作、染色等過程進行質量控制，保證涂片細胞分布均勻、染色效果良好。可采用內(nèi)部質量評估體系，對涂片進行評分，及時發(fā)現(xiàn)和糾正問題。儀器設備維護定期對顯微鏡、細胞計數(shù)儀等儀器設備進行校準和維護，確保其性能穩(wěn)定，結果準確。如顯微鏡的分辨率、清晰度等指標需定期檢測，細胞計數(shù)儀的準確性需通過標準品進行校準。人員培訓定期對檢驗人員進行BALF細胞形態(tài)學檢驗培訓，提高其識別細胞形態(tài)、判斷檢驗結果的能力。通過案例討論、讀片會等形式，不斷積累經(jīng)驗，提高檢驗水平。室間質量評價積極參加室間質量評價活動，與其他實驗室進行比對，及時發(fā)現(xiàn)自身存在的問題并改進。通過室間質量評價，可了解本實驗室在全國或地區(qū)范圍內(nèi)的檢驗水平，學習先進經(jīng)驗，提高檢驗質量。室間質評活動在室間質評中發(fā)現(xiàn)細胞分類結果與其他實驗室存在差異時，分析差異原因，可能是細胞識別標準不統(tǒng)一或操作流程存在偏差，通過組織內(nèi)部討論、重新培訓等方式進行糾正，統(tǒng)一判斷標準。質量評價應用0102質量控制記錄記錄體系完善建立完善的質量控制記錄體系，包括人員培訓記錄、儀器校準維護記錄、涂片質量評估記錄、室間質評結果及整改記錄等。這些記錄不僅能追溯檢驗過程中的各個環(huán)節(jié)。記錄分析改進定期對質量控制記錄進行分析總結，找出存在的共性問題，如人員操作不一致、儀器故障頻發(fā)等，并針對這些問題制定具體的改進措施，如加強人員培訓、及時維修或更換儀器。10PART共識更新亮點與未來展望2023版共識的主要更新標本處理精細化2023版共識細化標本預處理，明確二硫蘇糖醇等試劑使用規(guī)范，提升細胞形態(tài)觀察精準度，為BALF分析奠定堅實基礎。分級報告與圖文報告標準明確，增強可讀性，尤其腫瘤細胞分級，為臨床診療提供精準依據(jù)，促進檢驗與臨床的緊密銜接。新增非感染性疾病應用案例，細化細胞形態(tài)特征，強化共識臨床指導，助力醫(yī)生精準識別疾病，提升診療效率與準確性。強化室內(nèi)質控，細化室間質評，凸顯質控記錄關鍵，推動檢驗流程標準化與規(guī)范化，確保結果準確可靠，提升整體檢驗水平。標本處理精細化標本處理精細化標本處理精細化未來研究方向融合分子生物