2025年醫(yī)衛(wèi)類微生物檢驗(yàn)技術(shù)(士)專業(yè)實(shí)踐能力-基礎(chǔ)知識(shí)參考題庫(kù)含答案解析一、單選題（共35題）1.下列哪項(xiàng)是鑒別細(xì)菌有無(wú)異染顆粒常用的染色方法？【選項(xiàng)】A.革蘭染色B.抗酸染色C.墨汁負(fù)染色D.阿爾伯特染色【參考答案】D【解析】異染顆粒是細(xì)菌胞質(zhì)內(nèi)的儲(chǔ)存物質(zhì)，常見(jiàn)于白喉棒狀桿菌等。阿爾伯特染色法是專用于觀察異染顆粒的特殊染色法，異染顆粒呈藍(lán)黑色，菌體呈綠色。革蘭染色用于區(qū)分細(xì)菌革蘭屬性，抗酸染色用于結(jié)核分枝桿菌等，墨汁負(fù)染色用于觀察莢膜，均不適用于異染顆粒的檢測(cè)。2.接種環(huán)滅菌的最適方法是？【選項(xiàng)】A.高壓蒸汽滅菌B.干熱滅菌C.酒精燈火焰灼燒D.紫外線照射【參考答案】C【解析】接種環(huán)需瞬時(shí)徹底滅菌，酒精燈火焰灼燒（燒至紅熱）可快速殺滅所有微生物且不殘留毒性物質(zhì)。高壓蒸汽滅菌適用于耐高溫物品（如培養(yǎng)基），干熱滅菌用于玻璃器皿，紫外線僅適用于表面消毒且穿透力弱。3.真菌培養(yǎng)的最佳溫度一般為？【選項(xiàng)】A.35-37℃B.25-28℃C.42-45℃D.18-20℃【參考答案】B【解析】多數(shù)真菌（如念珠菌、曲霉）的最適生長(zhǎng)溫度為25-28℃，此溫度利于菌絲和孢子發(fā)育。35-37℃為人體溫度，常用于細(xì)菌培養(yǎng)；42℃以上或20℃以下會(huì)明顯抑制真菌生長(zhǎng)，屬干擾選項(xiàng)。4.紫外線消毒的適用范圍是？【選項(xiàng)】A.手術(shù)器械滅菌B.空氣及物體表面消毒C.液體培養(yǎng)基滅菌D.生物安全柜內(nèi)物品滅菌【參考答案】B【解析】紫外線穿透力弱，僅能殺滅表面微生物，適用于空氣和物體表面（如桌面、器械臺(tái)）消毒。手術(shù)器械需高壓蒸汽滅菌，液體滅菌用過(guò)濾或高溫法，生物安全柜依賴高效過(guò)濾和氣流屏障而非紫外線。5.β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥機(jī)制主要與細(xì)菌產(chǎn)生哪種酶有關(guān)？【選項(xiàng)】A.透明質(zhì)酸酶B.凝固酶C.β-內(nèi)酰胺酶D.DNA旋轉(zhuǎn)酶【參考答案】C【解析】β-內(nèi)酰胺酶可水解抗生素的β-內(nèi)酰胺環(huán)，使其失效，是金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌等常見(jiàn)耐藥機(jī)制。透明質(zhì)酸酶與侵襲力相關(guān)，凝固酶為金黃色葡萄球菌毒力因子，DNA旋轉(zhuǎn)酶為喹諾酮類藥物的靶點(diǎn)。6.用于診斷傷寒沙門(mén)菌感染的血清學(xué)試驗(yàn)是？【選項(xiàng)】A.肥達(dá)試驗(yàn)B.抗鏈球菌溶血素O試驗(yàn)C.外斐試驗(yàn)D.冷凝集試驗(yàn)【參考答案】A【解析】肥達(dá)試驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)患者血清中抗傷寒沙門(mén)菌O抗原和H抗原的抗體輔助診斷傷寒。外斐試驗(yàn)用于立克次體病，抗鏈球菌溶血素O試驗(yàn)診斷鏈球菌感染，冷凝集試驗(yàn)與支原體肺炎相關(guān)。7.病毒分離培養(yǎng)最常用的細(xì)胞系是？【選項(xiàng)】A.血瓊脂平板B.伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基C.雞胚尿囊腔接種D.Hep-2細(xì)胞【參考答案】D【解析】Hep-2細(xì)胞（人喉癌上皮細(xì)胞）為病毒分離的常用傳代細(xì)胞系，適用于腺病毒、呼吸道合胞病毒等培養(yǎng)。血瓊脂與伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基用于細(xì)菌培養(yǎng)，雞胚接種多用于流感病毒。8.關(guān)于生物安全柜的選擇，處理中等風(fēng)險(xiǎn)微生物應(yīng)使用？【選項(xiàng)】A.一級(jí)生物安全柜B.二級(jí)生物安全柜C.三級(jí)生物安全柜D.超凈工作臺(tái)【參考答案】B【解析】二級(jí)生物安全柜（ClassⅡ）提供人員、產(chǎn)品與環(huán)境三重保護(hù)，適用于CDC規(guī)定的BSL-2級(jí)微生物（如流感病毒、沙門(mén)菌）。一級(jí)僅保護(hù)人員和環(huán)境，三級(jí)用于高致病性病原體，超凈工作臺(tái)無(wú)人員防護(hù)功能。9.藥敏試驗(yàn)中，K-B法質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922的抑菌環(huán)允許范圍為？【選項(xiàng)】A.頭孢他啶：16-20mmB.氨芐西林：17-22mmC.慶大霉素：19-26mmD.亞胺培南：22-30mm【參考答案】C【解析】依據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)，大腸埃希菌ATCC25922對(duì)慶大霉素的抑菌環(huán)質(zhì)控范圍為19-26mm。頭孢他啶為25-32mm，氨芐西林為16-22mm，亞胺培南為26-32mm，其他選項(xiàng)數(shù)值超出或低于標(biāo)準(zhǔn)范圍。10.革蘭染色步驟中，關(guān)鍵區(qū)別革蘭陽(yáng)性與陰性菌的環(huán)節(jié)是？【選項(xiàng)】A.結(jié)晶紫初染B.碘液媒染C.酒精脫色D.沙黃復(fù)染【參考答案】C【解析】酒精脫色是關(guān)鍵步驟：革蘭陽(yáng)性菌因細(xì)胞壁肽聚糖層厚、結(jié)構(gòu)致密，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物不易被脫去，保持紫色；陰性菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量高，易被酒精溶解脫色后再?gòu)?fù)染成紅色。初染、媒染、復(fù)染步驟為通用流程。11.有關(guān)革蘭染色法的步驟，以下描述正確的是？A.結(jié)晶紫初染→碘液媒染→95%乙醇脫色→沙黃復(fù)染B.結(jié)晶紫初染→沙黃復(fù)染→95%乙醇脫色→碘液媒染C.碘液媒染→結(jié)晶紫初染→95%乙醇脫色→沙黃復(fù)染D.沙黃復(fù)染→95%乙醇脫色→結(jié)晶紫初染→碘液媒染【選項(xiàng)】A.結(jié)晶紫初染→碘液媒染→95%乙醇脫色→沙黃復(fù)染B.結(jié)晶紫初染→沙黃復(fù)染→95%乙醇脫色→碘液媒染C.碘液媒染→結(jié)晶紫初染→95%乙醇脫色→沙黃復(fù)染D.沙黃復(fù)染→95%乙醇脫色→結(jié)晶紫初染→碘液媒染【參考答案】A【解析】革蘭染色標(biāo)準(zhǔn)步驟為：結(jié)晶紫初染1分鐘→水洗→碘液媒染1分鐘→水洗→95%乙醇脫色30秒→水洗→沙黃復(fù)染1分鐘。脫色是關(guān)鍵步驟，乙醇處理時(shí)間不足或過(guò)長(zhǎng)均會(huì)導(dǎo)致染色結(jié)果錯(cuò)誤。選項(xiàng)B、C、D的順序均不符合標(biāo)準(zhǔn)操作流程。12.SS瓊脂培養(yǎng)基主要用于分離培養(yǎng)下列哪種病原菌？A.葡萄球菌B.腸道致病性沙門(mén)菌C.結(jié)核分枝桿菌D.白喉棒狀桿菌【選項(xiàng)】A.葡萄球菌B.腸道致病性沙門(mén)菌C.結(jié)核分枝桿菌D.白喉棒狀桿菌【參考答案】B【解析】SS瓊脂是強(qiáng)選擇性培養(yǎng)基，含膽鹽、枸櫞酸鈉等抑制劑，可抑制革蘭陽(yáng)性菌和部分非致病性革蘭陰性菌（如大腸桿菌），專用于分離腸道致病菌（如沙門(mén)菌、志賀菌）。葡萄球菌在血瓊脂中生長(zhǎng)更佳，結(jié)核分枝桿菌需羅氏培養(yǎng)基，白喉棒狀桿菌需呂氏血清斜面。13.下列肝炎病毒中，主要通過(guò)非腸道途徑傳播的是？A.HAVB.HBVC.HEVD.HDV【選項(xiàng)】A.HAVB.HBVC.HEVD.HDV【參考答案】B【解析】HAV（甲肝）和HEV（戊肝）經(jīng)糞-口途徑傳播，HBV（乙肝）和HDV（丁肝）通過(guò)血液、母嬰、性接觸傳播。尤其注意HDV為缺陷病毒，需依賴HBV復(fù)制，故傳播途徑與HBV一致。14.高壓蒸汽滅菌法的標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)是？A.121℃維持15-30分鐘B.100℃維持30分鐘C.160℃干烤2小時(shí)D.132℃維持5分鐘【選項(xiàng)】A.121℃維持15-30分鐘B.100℃維持30分鐘C.160℃干烤2小時(shí)D.132℃維持5分鐘【參考答案】A【解析】高壓蒸汽滅菌的標(biāo)準(zhǔn)條件是壓力103.4kPa（1.05kg/cm2）、溫度121.3℃、時(shí)間15-30分鐘。選項(xiàng)B為煮沸滅菌法，C適用于玻璃器皿干烤滅菌，D為快速滅菌參數(shù)（如預(yù)真空滅菌器），但非常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)。15.細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)中，與運(yùn)動(dòng)功能直接相關(guān)的是？A.莢膜B.鞭毛C.菌毛D.芽孢【選項(xiàng)】A.莢膜B.鞭毛C.菌毛D.芽孢【參考答案】B【解析】鞭毛是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，通過(guò)旋轉(zhuǎn)推動(dòng)菌體移動(dòng)。莢膜主要起抗吞噬作用，菌毛與粘附有關(guān)，芽孢為休眠狀態(tài)無(wú)運(yùn)動(dòng)能力。16.真菌的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中，形態(tài)學(xué)鑒定的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法是？A.血清學(xué)試驗(yàn)B.PCR檢測(cè)C.培養(yǎng)法D.直接鏡檢【選項(xiàng)】A.血清學(xué)試驗(yàn)B.PCR檢測(cè)C.培養(yǎng)法D.直接鏡檢【參考答案】C【解析】真菌培養(yǎng)法可觀察菌落形態(tài)、色素及顯微結(jié)構(gòu)（如孢子、菌絲），是形態(tài)學(xué)鑒定的金標(biāo)準(zhǔn)。直接鏡檢快速但靈敏度低，PCR和血清學(xué)為輔助手段。17.適用于厭氧菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基是？A.巧克力瓊脂B.庖肉培養(yǎng)基C.堿性蛋白胨水D.SS瓊脂【選項(xiàng)】A.巧克力瓊脂B.庖肉培養(yǎng)基C.堿性蛋白胨水D.SS瓊脂【參考答案】B【解析】庖肉培養(yǎng)基中的肉渣含不飽和脂肪酸和谷胱甘肽，可吸收氧氣促進(jìn)厭氧菌生長(zhǎng)。巧克力瓊脂用于嗜血桿菌，堿性蛋白胨水用于霍亂弧菌，SS瓊脂為腸道選擇培養(yǎng)基。18.暗視野顯微鏡常用于檢查哪種病原體？A.梅毒螺旋體B.結(jié)核分枝桿菌C.白色念珠菌D.金黃色葡萄球菌【選項(xiàng)】A.梅毒螺旋體B.結(jié)核分枝桿菌C.白色念珠菌D.金黃色葡萄球菌【參考答案】A【解析】梅毒螺旋體透明不易染色，暗視野顯微鏡通過(guò)折射光觀察其運(yùn)動(dòng)。結(jié)核分枝桿菌用抗酸染色，真菌需乳酸酚棉藍(lán)染色，葡萄球菌革蘭染色可見(jiàn)。19.病毒分離培養(yǎng)中，細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）不包括？A.細(xì)胞融合形成合胞體B.細(xì)胞變圓脫落C.菌落形成D.細(xì)胞內(nèi)包涵體【選項(xiàng)】A.細(xì)胞融合形成合胞體B.細(xì)胞變圓脫落C.菌落形成D.細(xì)胞內(nèi)包涵體【參考答案】C【解析】CPE表現(xiàn)為細(xì)胞形態(tài)改變（如圓縮、融合）、包涵體形成等。菌落形成是細(xì)菌特性，病毒在活細(xì)胞內(nèi)增殖不形成菌落。20.檢測(cè)細(xì)菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的常用方法是？A.紙片擴(kuò)散法（K-B法）B.雙紙片協(xié)同試驗(yàn)C.瓊脂稀釋法D.E試驗(yàn)【選項(xiàng)】A.紙片擴(kuò)散法（K-B法）B.雙紙片協(xié)同試驗(yàn)C.瓊脂稀釋法D.E試驗(yàn)【參考答案】B【解析】雙紙片協(xié)同試驗(yàn)通過(guò)頭孢他啶/克拉維酸與頭孢噻肟/克拉維酸的抑菌環(huán)增大現(xiàn)象判斷ESBLs產(chǎn)生。K-B法為常規(guī)藥敏試驗(yàn)，瓊脂稀釋法和E試驗(yàn)用于MIC測(cè)定。21.革蘭染色過(guò)程中，若脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致下列哪種結(jié)果？【選項(xiàng)】A.所有細(xì)菌均呈現(xiàn)紫色B.所有細(xì)菌均呈現(xiàn)紅色C.革蘭陽(yáng)性菌呈現(xiàn)紅色，革蘭陰性菌呈現(xiàn)紫色D.革蘭陽(yáng)性菌可能脫色過(guò)度呈現(xiàn)紅色假陰性【參考答案】D【解析】1.革蘭染色關(guān)鍵步驟：初染（結(jié)晶紫）→媒染（碘液）→脫色（95%乙醇）→復(fù)染（沙黃或復(fù)紅）。2.脫色時(shí)間過(guò)短，乙醇無(wú)法溶解革蘭陰性菌脂質(zhì)外膜，導(dǎo)致二者均呈紫色（假陽(yáng)性）；脫色過(guò)長(zhǎng)則革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁脂質(zhì)溶解，褪去初染紫色，復(fù)染后呈紅色（假陰性）。3.選項(xiàng)D正確：脫色過(guò)度使革蘭陽(yáng)性菌失去紫色；選項(xiàng)A、B、C邏輯錯(cuò)誤。22.紫外線消毒主要用于空氣或物體表面滅菌，其最有效殺菌波長(zhǎng)范圍為？【選項(xiàng)】A.200-240nmB.240-280nmC.280-320nmD.320-400nm【參考答案】B【解析】1.紫外線殺菌原理：破壞微生物DNA結(jié)構(gòu)，形成胸腺嘧啶二聚體，阻斷復(fù)制。2.殺菌峰值波長(zhǎng)為265nm，最有效范圍240-280nm（選項(xiàng)B）。選項(xiàng)A波長(zhǎng)過(guò)短穿透力差；選項(xiàng)C、D屬紫外A波段及可見(jiàn)光，殺菌作用弱。23.下列哪種鏈球菌的溶血現(xiàn)象屬于β溶血？【選項(xiàng)】A.肺炎鏈球菌B.草綠色鏈球菌C.化膿性鏈球菌D.牛鏈球菌【參考答案】C【解析】1.鏈球菌溶血性分類：β溶血（完全溶血，透明環(huán)，如化膿性鏈球菌）、α溶血（不完全溶血，草綠色環(huán)，如肺炎鏈球菌）、γ溶血（不溶血）。2.選項(xiàng)C化膿性鏈球菌為A群β溶血鏈球菌；選項(xiàng)A、B為α溶血；選項(xiàng)D常為α或γ溶血。24.分離培養(yǎng)腦膜炎奈瑟菌應(yīng)優(yōu)先選擇哪種培養(yǎng)基？【選項(xiàng)】A.血瓊脂平板B.巧克力瓊脂平板C.SS瓊脂平板D.麥康凱瓊脂平板【參考答案】B【解析】1.腦膜炎奈瑟菌為苛氧菌，需5%-10%CO?環(huán)境，生長(zhǎng)依賴X因子（血紅素）和V因子（輔酶Ⅰ）。2.巧克力瓊脂（選項(xiàng)B）通過(guò)加熱釋放紅細(xì)胞中的X、V因子，滿足其營(yíng)養(yǎng)需求；血瓊脂（A）中V因子被酶破壞；SS（C）、麥康凱（D）為腸道菌選擇性培養(yǎng)基。25.病毒分離培養(yǎng)中，能觀察到“細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）”的方法是？【選項(xiàng)】A.雞胚接種B.動(dòng)物接種C.細(xì)胞培養(yǎng)D.培養(yǎng)基直接培養(yǎng)【參考答案】C【解析】1.細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）指病毒在細(xì)胞培養(yǎng)中導(dǎo)致的細(xì)胞形態(tài)變化（如圓縮、聚集、脫落）。2.僅細(xì)胞培養(yǎng)（選項(xiàng)C）可直接觀察CPE；雞胚接種（A）通過(guò)絨毛尿囊膜病變判斷；動(dòng)物接種（B）通過(guò)發(fā)病或死亡判斷；病毒無(wú)法在無(wú)生命培養(yǎng)基（D）中生長(zhǎng)。26.藥敏試驗(yàn)中，K-B紙片擴(kuò)散法結(jié)果判讀需在多少小時(shí)后進(jìn)行？【選項(xiàng)】A.6-8小時(shí)B.16-18小時(shí)C.24-48小時(shí)D.72小時(shí)【參考答案】B【解析】1.K-B法（Kirby-Bauer法）標(biāo)準(zhǔn)化操作要求：35℃孵育16-18小時(shí)后測(cè)量抑菌環(huán)直徑（選項(xiàng)B）。2.6-8小時(shí)（A）細(xì)菌生長(zhǎng)不足；24-48小時(shí)（C）可能致耐藥菌過(guò)度生長(zhǎng)；72小時(shí)（D）超時(shí)無(wú)效。27.肥達(dá)試驗(yàn)可用于輔助診斷的疾病是？【選項(xiàng)】A.細(xì)菌性痢疾B.傷寒C.霍亂D.結(jié)核病【參考答案】B【解析】1.肥達(dá)試驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)患者血清中O（菌體）、H（鞭毛）抗體效價(jià)，輔助診斷傷寒（沙門(mén)菌屬感染）。2.細(xì)菌性痢疾（A）由志賀菌引起，無(wú)肥達(dá)試驗(yàn)；霍亂（C）用凝集試驗(yàn)或PCR檢測(cè)；結(jié)核?。―）依賴結(jié)核菌素試驗(yàn)或γ-干擾素釋放試驗(yàn)。28.莢膜染色常采用下列哪種方法？【選項(xiàng)】A.抗酸染色B.負(fù)染色法（墨汁染色）C.革蘭染色D.鞭毛染色【參考答案】B【解析】1.莢膜不易著色，負(fù)染色法（選項(xiàng)B）通過(guò)墨汁背景襯托無(wú)色莢膜輪廓（如新型隱球菌檢測(cè)）。2.抗酸染色（A）用于分枝桿菌；革蘭染色（C）無(wú)法清晰顯示莢膜；鞭毛染色（D）針對(duì)運(yùn)動(dòng)器官。29.腸熱癥患者病原學(xué)檢測(cè)采集標(biāo)本時(shí)，第一周應(yīng)優(yōu)先選擇？【選項(xiàng)】A.糞便B.尿液C.血液D.痰液【參考答案】C【解析】1.腸熱癥（傷寒/副傷寒）病程：第一周為菌血癥期，血培養(yǎng)陽(yáng)性率高（選項(xiàng)C）；第二周糞便（A）、尿液（B）陽(yáng)性率上升；痰液（D）不典型。30.真菌培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基是？【選項(xiàng)】A.羅氏培養(yǎng)基B.沙保弱培養(yǎng)基C.伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基D.堿性蛋白胨水【參考答案】B【解析】1.沙保弱培養(yǎng)基（選項(xiàng)B）（含葡萄糖、蛋白胨，pH5.6）是真菌分離常規(guī)培養(yǎng)基。2.羅氏培養(yǎng)基（A）用于結(jié)核分枝桿菌；伊紅美藍(lán)（C）為腸道菌鑒別培養(yǎng)基；堿性蛋白胨水（D）用于霍亂弧菌增菌。31.革蘭染色法中，最關(guān)鍵的操作步驟是下列哪項(xiàng)？【選項(xiàng)】A.結(jié)晶紫初染B.碘液媒染C.95%乙醇脫色D.沙黃復(fù)染【參考答案】C【解析】革蘭染色法的關(guān)鍵在于脫色步驟：若脫色不足，革蘭陰性菌可能被誤染為紫色；脫色過(guò)度則革蘭陽(yáng)性菌可能褪色。95%乙醇脫色時(shí)間需精準(zhǔn)控制（通常20-30秒），直接影響細(xì)菌分類結(jié)果的準(zhǔn)確性。其他步驟為染色常規(guī)操作，不直接影響分類判斷。32.下列培養(yǎng)基中，主要用于腸道致病菌選擇性分離的是？【選項(xiàng)】A.血瓊脂平板B.巧克力瓊脂平板C.SS瓊脂平板D.麥康凱瓊脂平板【參考答案】C【解析】SS瓊脂含膽鹽、枸櫞酸鹽及煌綠，能強(qiáng)烈抑制革蘭陽(yáng)性菌及大腸桿菌，促進(jìn)沙門(mén)菌和志賀菌生長(zhǎng)，是腸道致病菌分離的經(jīng)典選擇培養(yǎng)基。血瓊脂用于營(yíng)養(yǎng)要求高的細(xì)菌；巧克力瓊脂用于嗜血桿菌；麥康凱雖可區(qū)分乳糖發(fā)酵，但抑制力不及SS瓊脂。33.高壓蒸汽滅菌的標(biāo)準(zhǔn)條件為？【選項(xiàng)】A.121℃,15分鐘B.115℃,20分鐘C.126℃,10分鐘D.100℃,30分鐘【參考答案】A【解析】高壓蒸汽滅菌法在121℃維持15分鐘能徹底殺滅包括芽孢在內(nèi)的所有微生物，是醫(yī)療器械和培養(yǎng)基滅菌的黃金標(biāo)準(zhǔn)。選項(xiàng)B常用于含糖培養(yǎng)基滅菌（避免碳化）；C、D條件均不足以完全滅活芽孢。34.細(xì)菌菌落計(jì)數(shù)時(shí)，適用于“菌落數(shù)在30~300之間”的平板進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，其主要依據(jù)是？【選項(xiàng)】A.減少雜菌干擾B.保證統(tǒng)計(jì)精度C.避免菌落重疊D.降低稀釋誤差【參考答案】B【解析】30~300個(gè)菌落的平板計(jì)數(shù)誤差較?。ǚ喜此煞植荚恚旱陀?0時(shí)偶然誤差增大；超過(guò)300時(shí)菌落易重疊導(dǎo)致漏計(jì)。此范圍能平衡統(tǒng)計(jì)準(zhǔn)確性與操作可行性，與雜菌、稀釋步驟無(wú)直接關(guān)聯(lián)。35.下列哪種標(biāo)本接種前需先經(jīng)均質(zhì)化處理？【選項(xiàng)】A.尿液B.血液C.組織塊D.腦脊液【參考答案】C【解析】組織塊內(nèi)含細(xì)菌分布不均，需用無(wú)菌研磨器或均質(zhì)儀破碎細(xì)胞釋放病原體，提高檢出率。尿液需離心濃縮；血液直接注入血培養(yǎng)瓶；腦脊液通常無(wú)菌處理可直接接種。二、多選題（共35題）1.下列有關(guān)革蘭氏染色法的敘述，正確的是：A.染色步驟為：結(jié)晶紫初染→碘液媒染→酒精脫色→沙黃復(fù)染B.革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁肽聚糖層厚，酒精脫色時(shí)不易失結(jié)晶紫C.脫色過(guò)度可能導(dǎo)致革蘭氏陽(yáng)性菌被誤判為陰性D.沙黃復(fù)染可使脫色后的革蘭氏陰性菌呈現(xiàn)粉紅色E.媒染劑碘液的作用是增強(qiáng)染料與菌體結(jié)合【選項(xiàng)】A.染色步驟為：結(jié)晶紫初染→碘液媒染→酒精脫色→沙黃復(fù)染B.革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁肽聚糖層厚，酒精脫色時(shí)不易失結(jié)晶紫C.脫色過(guò)度可能導(dǎo)致革蘭氏陽(yáng)性菌被誤判為陰性D.沙黃復(fù)染可使脫色后的革蘭氏陰性菌呈現(xiàn)粉紅色E.媒染劑碘液的作用是增強(qiáng)染料與菌體結(jié)合【參考答案】ABCDE【解析】1.A正確：革蘭氏染色標(biāo)準(zhǔn)步驟為結(jié)晶紫初染（1min）→碘液媒染（1min）→酒精脫色（30s）→沙黃/稀釋石炭酸復(fù)紅復(fù)染（1min）。2.B正確：革蘭氏陽(yáng)性菌肽聚糖層厚（30層以上），酒精脫水致密，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物不易滲出。3.C正確：脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致陽(yáng)性菌紫色褪去而被復(fù)染為紅色，造成假陰性結(jié)果。4.D正確：脫色后陰性菌呈無(wú)色，沙黃復(fù)染后呈粉紅色（或復(fù)紅染成紅色）。5.E正確：碘液作為媒染劑與結(jié)晶紫結(jié)合形成大分子復(fù)合物，增強(qiáng)染色穩(wěn)定性。2.關(guān)于微生物培養(yǎng)基的選擇性作用，正確的組合是：A.伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）——抑制革蘭氏陽(yáng)性菌B.SS瓊脂——抑制腸道非致病菌C.羅氏培養(yǎng)基——分離結(jié)核分枝桿菌D.巧克力瓊脂——培養(yǎng)淋病奈瑟菌E.堿性蛋白胨水——增菌霍亂弧菌【選項(xiàng)】A.伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）——抑制革蘭氏陽(yáng)性菌B.SS瓊脂——抑制腸道非致病菌C.羅氏培養(yǎng)基——分離結(jié)核分枝桿菌D.巧克力瓊脂——培養(yǎng)淋病奈瑟菌E.堿性蛋白胨水——增菌霍亂弧菌【參考答案】ABCDE【解析】1.A正確：EMB中的伊紅和美藍(lán)可抑制G?菌（如葡萄球菌），利于G?腸道菌生長(zhǎng)。2.B正確：SS瓊脂含膽鹽、枸櫞酸鹽，抑制大腸桿菌等非致病菌，促進(jìn)沙門(mén)、志賀菌生長(zhǎng)。3.C正確：羅氏培養(yǎng)基含孔雀綠抑制雜菌，專門(mén)用于分離結(jié)核分枝桿菌。4.D正確：巧克力瓊脂通過(guò)加熱破壞紅細(xì)胞釋放X、V因子，滿足淋球菌營(yíng)養(yǎng)需求。5.E正確：堿性蛋白胨水（pH8.4-8.6）可中和胃酸，提高霍亂弧菌檢出率。3.高壓蒸汽滅菌法的操作要點(diǎn)包括：A.壓力103.4kPa時(shí)溫度達(dá)121.3℃B.滅菌時(shí)間通常為15-20分鐘C.適用于含糖培養(yǎng)基的滅菌D.滅菌結(jié)束后應(yīng)緩慢排氣防止液體沸騰E.滅菌物品體積不應(yīng)超過(guò)滅菌器容積的80%【選項(xiàng)】A.壓力103.4kPa時(shí)溫度達(dá)121.3℃B.滅菌時(shí)間通常為15-20分鐘C.適用于含糖培養(yǎng)基的滅菌D.滅菌結(jié)束后應(yīng)緩慢排氣防止液體沸騰E.滅菌物品體積不應(yīng)超過(guò)滅菌器容積的80%【參考答案】ABDE【解析】1.AB正確：標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)為103.4kPa（1.05kg/cm2）對(duì)應(yīng)121.3℃，滅菌15-20分鐘。2.C錯(cuò)誤：含糖培養(yǎng)基需115℃（68.9kPa）滅菌15分鐘，高溫會(huì)導(dǎo)致糖類焦化。3.D正確：快速排氣易引起液體劇烈沸騰，需自然冷卻至壓力表歸零后開(kāi)蓋。4.E正確：過(guò)量裝載會(huì)影響蒸汽穿透，要求物品擺放保留20%空間。4.關(guān)于細(xì)菌的培養(yǎng)條件，描述正確的是：A.專性需氧菌的代表菌為結(jié)核分枝桿菌B.空腸彎曲菌需在5%O?、10%CO?環(huán)境中培養(yǎng)C.破傷風(fēng)梭菌在庖肉培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)肉渣變紅D.腦膜炎奈瑟菌初次分離需5%-10%CO?E.幽門(mén)螺桿菌需微需氧環(huán)境（5%O?）培養(yǎng)【選項(xiàng)】A.專性需氧菌的代表菌為結(jié)核分枝桿菌B.空腸彎曲菌需在5%O?、10%CO?環(huán)境中培養(yǎng)C.破傷風(fēng)梭菌在庖肉培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)肉渣變紅D.腦膜炎奈瑟菌初次分離需5%-10%CO?E.幽門(mén)螺桿菌需微需氧環(huán)境（5%O?）培養(yǎng)【參考答案】ABDE【解析】1.A正確：結(jié)核分枝桿菌為專性需氧菌，需氧量高于多數(shù)細(xì)菌。2.B正確：空腸彎曲菌要求5%O?、10%CO?、85%N?的混合氣體環(huán)境。3.C錯(cuò)誤：破傷風(fēng)梭菌生長(zhǎng)時(shí)肉渣變黑（因分解含硫氨基酸產(chǎn)H?S），非變紅。4.D正確：腦膜炎奈瑟菌為苛養(yǎng)菌，初次分離需CO?刺激生長(zhǎng)。5.E正確：幽門(mén)螺桿菌最佳氣體條件為5%O?、10%CO?、85%N?。5.實(shí)驗(yàn)室生物安全級(jí)別（BSL）與病原體的對(duì)應(yīng)關(guān)系中，正確的是：A.BSL-1：大腸埃希菌K12（非致病株）B.BSL-2：金黃色葡萄球菌（標(biāo)準(zhǔn)株）C.BSL-3：結(jié)核分枝桿菌（耐藥株）D.BSL-2：人類免疫缺陷病毒（HIV）E.BSL-4：埃博拉病毒【選項(xiàng)】A.BSL-1：大腸埃希菌K12（非致病株）B.BSL-2：金黃色葡萄球菌（標(biāo)準(zhǔn)株）C.BSL-3：結(jié)核分枝桿菌（耐藥株）D.BSL-2：人類免疫缺陷病毒（HIV）E.BSL-4：埃博拉病毒【參考答案】ABCDE【解析】1.A正確：非致病性基因工程菌屬BSL-1，操作無(wú)需特殊防護(hù)。2.B正確：金葡菌雖能引發(fā)感染，但有效治療手段存在，屬BSL-2。3.C正確：耐藥結(jié)核分枝桿菌可經(jīng)氣溶膠傳播且治療困難，需BSL-3防護(hù)。4.D正確：HIV主要通過(guò)血液傳播，實(shí)驗(yàn)室暴露風(fēng)險(xiǎn)可控，歸為BSL-2。5.E正確：埃博拉病毒致死率高且無(wú)疫苗，必須在BSL-4實(shí)驗(yàn)室操作。6.關(guān)于病毒培養(yǎng)的方法學(xué)特征，正確的描述是：A.細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）可表現(xiàn)為合胞體形成B.雞胚尿囊腔接種常用于流感病毒增殖C.紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)用于檢測(cè)包膜病毒D.干擾素可用于病毒分離培養(yǎng)E.空斑形成單位（PFU）是定量病毒滴度的方法【選項(xiàng)】A.細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）可表現(xiàn)為合胞體形成B.雞胚尿囊腔接種常用于流感病毒增殖C.紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)用于檢測(cè)包膜病毒D.干擾素可用于病毒分離培養(yǎng)E.空斑形成單位（PFU）是定量病毒滴度的方法【參考答案】ABCE【解析】1.A正確：CPE包括細(xì)胞圓縮（腺病毒）、合胞體（呼吸道合胞病毒）等形態(tài)變化。2.B正確：流感病毒在尿囊腔中高效復(fù)制，用于疫苗制備。3.C正確：包膜病毒（如流感病毒）感染細(xì)胞后表達(dá)血凝素，可吸附紅細(xì)胞。4.D錯(cuò)誤：干擾素抑制病毒復(fù)制，會(huì)干擾培養(yǎng)過(guò)程，需避免使用。5.E正確：PFU通過(guò)單層細(xì)胞中空斑數(shù)量計(jì)算病毒感染性粒子濃度。7.下列微生物學(xué)檢驗(yàn)方法中，屬于藥敏試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)方法的是：A.紙片擴(kuò)散法（Kirby-Bauer法）B.肉湯微量稀釋法C.E試驗(yàn)（梯度擴(kuò)散法）D.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測(cè)耐藥基因E.自動(dòng)儀器法（如VITEK系統(tǒng)）【選項(xiàng)】A.紙片擴(kuò)散法（Kirby-Bauer法）B.肉湯微量稀釋法C.E試驗(yàn)（梯度擴(kuò)散法）D.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測(cè)耐藥基因E.自動(dòng)儀器法（如VITEK系統(tǒng)）【參考答案】ABCE【解析】1.A正確：KB法是CLSI推薦的定性藥敏標(biāo)準(zhǔn)方法。2.B正確：微量稀釋法可測(cè)定MIC值，被CLSI納入標(biāo)準(zhǔn)。3.C正確：E試驗(yàn)結(jié)合擴(kuò)散與稀釋原理，獲CLSI認(rèn)可。4.D錯(cuò)誤：PCR檢測(cè)耐藥基因?qū)俜肿由飳W(xué)方法，非傳統(tǒng)藥敏試驗(yàn)范疇。5.E正確：自動(dòng)化儀器法經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化驗(yàn)證，廣泛用于臨床實(shí)驗(yàn)室。8.真菌直接鏡檢時(shí)，10%KOH處理的目的是：A.溶解角質(zhì)蛋白B.殺滅細(xì)菌避免干擾C.消化標(biāo)本中的組織細(xì)胞D.增強(qiáng)菌絲折光性E.褪去色素便于觀察【選項(xiàng)】A.溶解角質(zhì)蛋白B.殺滅細(xì)菌避免干擾C.消化標(biāo)本中的組織細(xì)胞D.增強(qiáng)菌絲折光性E.褪去色素便于觀察【參考答案】AC【解析】1.A正確：KOH可分解角質(zhì)蛋白，軟化皮膚、毛發(fā)標(biāo)本中的角化物。2.C正確：消化上皮細(xì)胞、膿細(xì)胞等背景雜質(zhì)，凸顯真菌結(jié)構(gòu)。3.B錯(cuò)誤：KOH無(wú)殺菌作用，主要用于物理性消化。4.D錯(cuò)誤：KOH處理會(huì)降低折光性，需加墨汁背景增強(qiáng)對(duì)比（如隱球菌檢測(cè)）。5.E錯(cuò)誤：褪色需用乳酸酚棉藍(lán)染色，KOH處理不改變色素。9.關(guān)于接種環(huán)滅菌操作的要點(diǎn)，錯(cuò)誤的是：A.酒精燈外焰溫度最高，應(yīng)在此區(qū)域灼燒B.接種環(huán)需燒至紅熱并維持3-5秒C.灼燒后應(yīng)在火焰旁冷卻避免污染D.可取液體標(biāo)本直接蘸取進(jìn)行滅菌E.金屬柄需灼燒至前端20cm范圍【選項(xiàng)】A.酒精燈外焰溫度最高，應(yīng)在此區(qū)域灼燒B.接種環(huán)需燒至紅熱并維持3-5秒C.灼燒后應(yīng)在火焰旁冷卻避免污染D.可取液體標(biāo)本直接蘸取進(jìn)行滅菌E.金屬柄需灼燒至前端20cm范圍【參考答案】DE【解析】1.D錯(cuò)誤：需等待接種環(huán)冷卻再蘸取標(biāo)本，否則液體飛濺造成污染。2.E錯(cuò)誤：灼燒部位僅需涵蓋可能接觸標(biāo)本的部分（通常環(huán)部+前端5cm）。3.A正確：外焰溫度可達(dá)400-500℃，為最佳滅菌區(qū)域。4.B正確：徹底滅菌需維持紅熱狀態(tài)3秒以上。5.C正確：冷卻過(guò)程需在無(wú)菌區(qū)域（火焰旁）防止空氣微生物污染。10.血清學(xué)試驗(yàn)中，屬于直接凝集反應(yīng)的是：A.肥達(dá)試驗(yàn)（Widaltest）B.膠乳凝集試驗(yàn)檢測(cè)RF因子C.外斐試驗(yàn)（Weil-Felixtest）D.抗鏈球菌溶血素O試驗(yàn)（ASO）E.試管凝集試驗(yàn)診斷布魯菌病【選項(xiàng)】A.肥達(dá)試驗(yàn)（Widaltest）B.膠乳凝集試驗(yàn)檢測(cè)RF因子C.外斐試驗(yàn)（Weil-Felixtest）D.抗鏈球菌溶血素O試驗(yàn)（ASO）E.試管凝集試驗(yàn)診斷布魯菌病【參考答案】ACE【解析】1.A正確：肥達(dá)試驗(yàn)用傷寒菌體抗原直接檢測(cè)患者血清抗體，屬直接凝集。2.C正確：外斐試驗(yàn)以變形桿菌OX抗原檢測(cè)立克次體抗體，為直接凝集。3.E正確：布魯菌試管凝集試驗(yàn)為經(jīng)典直接凝集法。4.B錯(cuò)誤：膠乳凝集屬間接凝集（將抗原吸附于膠乳顆粒）。5.D錯(cuò)誤：ASO試驗(yàn)為中和試驗(yàn)，通過(guò)抑制鏈球菌溶血素活性判斷效價(jià)。11.關(guān)于細(xì)菌革蘭氏染色操作步驟的描述，下列選項(xiàng)正確的是？【選項(xiàng)】A.脫色是最關(guān)鍵步驟，具體方法是滴加95%乙醇至無(wú)紫色脫出B.革蘭氏染色順序?yàn)椋航Y(jié)晶紫→碘液→乙醇→復(fù)紅C.脫色后呈現(xiàn)紅色的為革蘭氏陰性菌D.苯酚復(fù)紅是革蘭氏染色的初染試劑E.染色過(guò)程中需保證染液覆蓋菌膜【參考答案】ABCE【解析】1.革蘭氏染色關(guān)鍵步驟中，脫色時(shí)間直接影響結(jié)果，95%乙醇脫色至無(wú)紫色脫出為正確操作（A正確）；2.標(biāo)準(zhǔn)染色流程為結(jié)晶紫→碘液→乙醇→復(fù)紅（B正確），D選項(xiàng)中苯酚復(fù)紅為抗酸染色試劑；3.革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量高，脫色后復(fù)染呈紅色（C正確）；4.染色時(shí)需保證菌膜完全被染液覆蓋，否則影響顯色（E正確）。12.高壓蒸汽滅菌的注意事項(xiàng)包括？【選項(xiàng)】A.滅菌包裹體積應(yīng)≤30cm×30cm×50cmB.液體滅菌需延長(zhǎng)滅菌時(shí)間至45分鐘C.滅菌后應(yīng)自然冷卻至80℃以下再開(kāi)柜門(mén)D.金屬器械與敷料需分裝在不同滅菌包內(nèi)E.132℃滅菌維持10分鐘僅適用于橡膠制品【參考答案】ABCD【解析】1.包裹體積限制避免蒸汽穿透不全（A正確）；2.液體滅菌需延長(zhǎng)至45分鐘以徹底滅菌（B正確）；3.強(qiáng)制冷卻會(huì)導(dǎo)致玻璃器皿炸裂（C正確）；4.金屬器械與敷料分裝可防止冷凝水污染（D正確）；5.132℃×10min適用于器械、橡膠、塑料等（E錯(cuò)誤）。13.下列哪些指標(biāo)可用于鑒定腸桿菌科細(xì)菌？【選項(xiàng)】A.氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性B.硝酸鹽還原試驗(yàn)陽(yáng)性C.發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣D.觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性E.耐膽鹽生長(zhǎng)能力【參考答案】BCDE【解析】1.腸桿菌科氧化酶試驗(yàn)均為陰性（A錯(cuò)誤）；2.硝酸鹽還原陽(yáng)性是特征（B正確）；3.葡萄糖發(fā)酵為基本特性（C正確）；4.觸酶陽(yáng)性（除志賀菌）（D正確）；5.麥康凱培養(yǎng)基含膽鹽，生長(zhǎng)能力為鑒別依據(jù)（E正確）。14.關(guān)于結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)特性，正確的描述是？【選項(xiàng)】A.羅氏培養(yǎng)基中呈粗糙型奶酪樣菌落B.最適生長(zhǎng)溫度為37℃C.需氧生長(zhǎng)，初次分離需5%-10%CO?D.生長(zhǎng)速度顯著快于非結(jié)核分枝桿菌E.液體培養(yǎng)基中形成菌膜生長(zhǎng)【參考答案】ABCE【解析】1.羅氏培養(yǎng)基典型菌落為干燥顆粒狀（A正確）；2.最適37℃，低于30℃不生長(zhǎng)（B正確）；3.兼性需氧，初代分離需CO?刺激（C正確）；4.結(jié)核分枝桿菌生長(zhǎng)緩慢，需2-8周（D錯(cuò)誤）；5.液體中呈表面菌膜生長(zhǎng)（E正確）。15.微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全三級(jí)（BSL-3）必須配備的設(shè)施包括？【選項(xiàng)】A.雙扉高壓滅菌器與氣密門(mén)B.定向負(fù)壓氣流系統(tǒng)C.Ⅱ級(jí)生物安全柜D.可自動(dòng)關(guān)閉的帶鎖房門(mén)E.獨(dú)立送排風(fēng)系統(tǒng)【參考答案】ABDE【解析】1.BSL-3要求設(shè)備與建筑雙通道控制（A正確）；2.必須維持實(shí)驗(yàn)室負(fù)壓（B正確）；3.BSL-3應(yīng)使用Ⅲ級(jí)安全柜（C錯(cuò)誤）；4.門(mén)禁系統(tǒng)為強(qiáng)制要求（D正確）；5.空氣需經(jīng)HEPA過(guò)濾后排放（E正確）。16.某標(biāo)本抗酸染色鏡檢發(fā)現(xiàn)紅色細(xì)長(zhǎng)略彎曲桿菌，可能的病原體包括？【選項(xiàng)】A.結(jié)核分枝桿菌B.麻風(fēng)分枝桿菌C.諾卡菌D.萎縮芽孢桿菌E.放線菌【參考答案】ABC【解析】1.結(jié)核分枝桿菌為抗酸陽(yáng)性桿菌（A正確）；2.麻風(fēng)桿菌呈束狀排列的抗酸桿菌（B正確）；3.部分諾卡菌呈弱抗酸性（C正確）；4.D、E均為革蘭氏陽(yáng)性菌，抗酸染色陰性（DE錯(cuò)誤）。17.下列微生物與所致疾病的對(duì)應(yīng)關(guān)系，錯(cuò)誤的有？【選項(xiàng)】A.鉤端螺旋體——出血性結(jié)膜炎B.立克次體——Q熱C.肺炎支原體——原發(fā)性非典型肺炎D.蒼白密螺旋體——萊姆病E.伯氏疏螺旋體——梅毒【參考答案】ADE【解析】1.鉤體病表現(xiàn)為黃疸出血（A錯(cuò)誤）；2.Q熱由貝納柯克斯體引起（B正確）；3.肺炎支原體致非典型肺炎（C正確）；4.梅毒由蒼白密螺旋體引起（D錯(cuò)誤）；5.伯氏疏螺旋體致萊姆病（E錯(cuò)誤）。18.關(guān)于病毒培養(yǎng)的敘述，正確的是？【選項(xiàng)】A.雞胚接種可用于流感病毒分離B.HeLa細(xì)胞適用于腸道病毒培養(yǎng)C.組織塊培養(yǎng)法現(xiàn)已被細(xì)胞培養(yǎng)取代D.動(dòng)物接種是病毒培養(yǎng)的金標(biāo)準(zhǔn)E.細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）是病毒增殖指標(biāo)【參考答案】ABCE【解析】1.流感病毒常用雞胚羊膜腔接種（A正確）；2.HeLa細(xì)胞為永生化細(xì)胞系，適合多種病毒（B正確）；3.組織塊培養(yǎng)操作復(fù)雜，現(xiàn)基本淘汰（C正確）；4.細(xì)胞培養(yǎng)已成為主要方法（D錯(cuò)誤）；5.CPE是病毒復(fù)制的重要指征（E正確）。19.藥敏試驗(yàn)中，K-B法與E-test法的差異包括？【選項(xiàng)】A.K-B法基于瓊脂擴(kuò)散原理B.E-test可檢測(cè)MIC值C.K-B法結(jié)果判讀需測(cè)量抑菌圈直徑D.E-test試條含固定濃度梯度抗生素E.K-B法不可用于苛養(yǎng)菌藥敏檢測(cè)【參考答案】ABCD【解析】1.K-B法屬瓊脂擴(kuò)散法（A正確）；2.E-test通過(guò)橢圓抑菌環(huán)讀取MIC（B正確）；3.K-B法需用游標(biāo)卡尺測(cè)量（C正確）；4.E-test試條為預(yù)置濃度梯度（D正確）；5.K-B法改良后可用于嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌（E錯(cuò)誤）。20.真菌鏡檢常用的預(yù)處理方法有？【選項(xiàng)】A.10%KOH壓片溶解角質(zhì)B.墨汁負(fù)染色觀察莢膜C.乳酸酚棉藍(lán)染色增強(qiáng)對(duì)比度D.革蘭氏染色區(qū)分酵母形態(tài)E.碘液染色顯示糖原結(jié)構(gòu)【參考答案】ABC【解析】1.KOH消化角質(zhì)便于觀察菌絲（A正確）；2.墨汁負(fù)染用于隱球菌莢膜檢測(cè)（B正確）；3.乳酸酚棉藍(lán)為真菌專用染色（C正確）；4.革蘭氏染色酵母菌呈陽(yáng)性但非首選（D錯(cuò)誤）；5.碘液用于原蟲(chóng)包囊染色（E錯(cuò)誤）。21.下列哪些培養(yǎng)基適用于分離培養(yǎng)淋病奈瑟菌？（）【選項(xiàng)】A.巧克力色血瓊脂培養(yǎng)基B.SS瓊脂培養(yǎng)基C.麥康凱瓊脂培養(yǎng)基D.羅氏培養(yǎng)基E.硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基【參考答案】A【解析】1.巧克力色血瓊脂培養(yǎng)基含血紅蛋白及生長(zhǎng)因子，可提供淋病奈瑟菌生長(zhǎng)所需的X因子（血紅素）及V因子（輔酶I），故A正確。2.SS瓊脂含膽鹽及檸檬酸鹽，主要用于腸道致病菌（如沙門(mén)氏菌、志賀菌）的分離，B錯(cuò)誤。3.麥康凱瓊脂用于革蘭陰性桿菌選擇培養(yǎng)，淋病奈瑟菌為革蘭陰性球菌，C錯(cuò)誤。4.羅氏培養(yǎng)基用于結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。5.硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基為厭氧菌增菌培養(yǎng)基，E錯(cuò)誤。22.關(guān)于高壓蒸汽滅菌法的描述，正確的選項(xiàng)是？（）【選項(xiàng)】A.適用于耐高溫、耐高濕物品的滅菌B.滅菌參數(shù)為121℃、15-20分鐘C.預(yù)真空壓力蒸汽滅菌法滅菌溫度可達(dá)134℃D.可用于油劑和粉劑的滅菌E.滅菌后物品須待壓力降為零時(shí)方可開(kāi)蓋【參考答案】ABCE【解析】1.高壓蒸汽滅菌法適用于耐高溫高壓的玻璃、金屬、橡膠制品等（A正確），常規(guī)參數(shù)121℃、15-20分鐘（B正確）。2.預(yù)真空滅菌法通過(guò)抽真空提高蒸汽滲透性，溫度可達(dá)132-134℃（C正確）。3.油劑和粉劑因蒸汽難以穿透，不宜使用此法（D錯(cuò)誤）。4.滅菌后若立即開(kāi)蓋會(huì)導(dǎo)致瓶?jī)?nèi)液體沸騰或爆炸，需待壓力歸零后操作（E正確）。23.病毒培養(yǎng)中可用于檢測(cè)病毒增殖的指標(biāo)包括？（）【選項(xiàng)】A.紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)B.細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）C.中和試驗(yàn)D.干擾現(xiàn)象E.包涵體形成【參考答案】ABDE【解析】1.紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)：某些病毒（如流感病毒）感染細(xì)胞后表達(dá)血凝素，可使紅細(xì)胞吸附（A正確）。2.CPE：病毒增殖導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變?nèi)鐖A縮、脫落（B正確）。3.中和試驗(yàn)為抗體檢測(cè)方法，非增殖指標(biāo)（C錯(cuò)誤）。4.干擾現(xiàn)象：一種病毒增殖抑制另一種病毒生長(zhǎng)（D正確）。5.包涵體為病毒復(fù)制留下的特征性結(jié)構(gòu)（E正確）。24.關(guān)于革蘭染色的操作步驟及注意事項(xiàng)，正確的是？（）【選項(xiàng)】A.初染試劑為結(jié)晶紫，時(shí)長(zhǎng)1分鐘B.媒染劑為盧戈氏碘液，增強(qiáng)染料結(jié)合C.脫色劑為95%乙醇，時(shí)間需嚴(yán)格控制D.復(fù)染劑為稀釋石炭酸復(fù)紅，時(shí)長(zhǎng)30秒E.染色結(jié)果與細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)密切相關(guān)【參考答案】ABCDE【解析】1.革蘭染色順序：結(jié)晶紫初染1分鐘（A正確）→碘液媒染1分鐘（B正確）→95%乙醇脫色至無(wú)紫色流出（C正確）→稀釋復(fù)紅復(fù)染30秒（D正確）。2.革蘭陽(yáng)性菌因肽聚糖層厚、脂質(zhì)少，保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物呈紫色；陰性菌反之，故結(jié)果與細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)直接相關(guān)（E正確）。25.血培養(yǎng)標(biāo)本采集與處理的錯(cuò)誤做法是？（）【選項(xiàng)】A.成人每次采血量10-20mlB.需氧瓶與厭氧瓶同時(shí)注入C.采血后輕輕搖動(dòng)混勻防止凝固D.24小時(shí)內(nèi)采集2-3套標(biāo)本E.標(biāo)本不能立即送檢時(shí)可4℃保存【參考答案】E【解析】1.成人血培養(yǎng)推薦采血量10-20ml/次（A正確），雙瓶培養(yǎng)可提高陽(yáng)性率（B正確）。2.采血后輕搖混勻抗凝劑（C正確），疑菌血癥者24小時(shí)內(nèi)采集2-3套（D正確）。3.血培養(yǎng)標(biāo)本需立即送檢，冷藏會(huì)抑制細(xì)菌生長(zhǎng)（E錯(cuò)誤）。26.結(jié)核分枝桿菌的生物學(xué)特性包括？（）【選項(xiàng)】A.抗酸染色陽(yáng)性B.專性需氧C.生長(zhǎng)緩慢，需2-8周長(zhǎng)出菌落D.對(duì)濕熱敏感E.75%乙醇可快速滅活【參考答案】ABC【解析】1.結(jié)核分枝桿菌為抗酸菌（A正確），專性需氧（B正確），生長(zhǎng)緩慢（C正確）。2.對(duì)濕熱抵抗力較強(qiáng)（80℃需5-10分鐘滅活，D錯(cuò)誤）；75%乙醇需接觸2分鐘以上（E錯(cuò)誤）。27.患者血涂片鏡檢提示瘧原蟲(chóng)感染，可能性最小的檢測(cè)方法是？（）【選項(xiàng)】A.吉姆薩染色法B.瑞氏染色法C.熒光染色法D.抗酸染色法E.快速瘧原蟲(chóng)抗原檢測(cè)【參考答案】D【解析】1.吉姆薩、瑞氏、熒光染色及抗原檢測(cè)均為瘧原蟲(chóng)常用方法（A、B、C、E正確）。2.抗酸染色專用于分枝桿菌（如結(jié)核桿菌）、諾卡菌等（D錯(cuò)誤）。28.關(guān)于細(xì)菌耐藥性檢測(cè)，正確的描述是？（）【選項(xiàng)】A.ESBLs可由肺炎克雷伯菌產(chǎn)生B.超廣譜β-內(nèi)酰胺酶可水解三代頭孢菌素C.AmpC酶屬于誘導(dǎo)型β-內(nèi)酰胺酶D.金屬β-內(nèi)酰胺酶可被EDTA抑制E.碳青霉烯酶包括KPC、NDM等類型【參考答案】ABCDE【解析】1.ESBLs常見(jiàn)于腸桿菌科（如肺炎克雷伯菌），水解三代頭孢及氨曲南（A、B正確）。2.AmpC酶為染色體介導(dǎo)的誘導(dǎo)酶（C正確），金屬酶可被金屬螯合劑（EDTA）抑制（D正確）。3.KPC、NDM分別為A類及B類碳青霉烯酶（E正確）。29.關(guān)于真菌鏡檢的敘述，錯(cuò)誤的是？（）【選項(xiàng)】A.乳酸酚棉藍(lán)染色可用于絲狀真菌觀察B.墨汁負(fù)染適用于隱球菌莢膜檢測(cè)C.革蘭染色可顯示白念珠菌假菌絲D.KOH濕片法可溶解宿主細(xì)胞突出真菌結(jié)構(gòu)E.直接鏡檢陰性可排除真菌感染【參考答案】E【解析】1.真菌鏡檢方法包括乳酸酚棉藍(lán)（A正確）、墨汁負(fù)染（B正確）、革蘭染色（C正確）、KOH溶解法（D正確）。2.鏡檢敏感性低，陰性不能排除感染（E錯(cuò)誤），需結(jié)合培養(yǎng)及臨床表現(xiàn)。30.實(shí)驗(yàn)室生物安全操作中，錯(cuò)誤的是？（）【選項(xiàng)】A.二級(jí)生物安全柜可用于結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)B.禁止在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用手機(jī)C.銳器需丟棄于防刺破容器D.操作未知樣本時(shí)按BSL-1級(jí)防護(hù)E.污染區(qū)采用紫外線每日消毒1小時(shí)【參考答案】D【解析】1.結(jié)核分枝桿菌需在BSL-3實(shí)驗(yàn)室操作（A正確）。2.實(shí)驗(yàn)室禁用手機(jī)避免污染（B正確），銳器專用容器防刺傷（C正確），紫外線可用于空氣消毒（E正確）。3.未知樣本風(fēng)險(xiǎn)不確定，應(yīng)按最高級(jí)別防護(hù)（D錯(cuò)誤）。31.關(guān)于微生物檢驗(yàn)中革蘭染色法的描述，下列正確的是？【選項(xiàng)】A.初染劑為結(jié)晶紫，媒染劑為碘液B.脫色劑為95%乙醇，復(fù)染劑為稀釋復(fù)紅C.革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁肽聚糖層厚，脫色后保留紫色D.革蘭陰性菌因脂質(zhì)外膜被乙醇溶解而呈現(xiàn)紅色E.芽孢菌無(wú)法通過(guò)革蘭染色區(qū)分陰陽(yáng)性【參考答案】A、B、C、D【解析】1.A正確：革蘭染色步驟依次為結(jié)晶紫初染→碘液媒染→乙醇脫色→稀釋復(fù)紅復(fù)染。2.B正確：脫色劑為乙醇/丙酮混合液（常用95%乙醇），復(fù)染為對(duì)比染色。3.C正確：陽(yáng)性菌細(xì)胞壁厚且肽聚糖致密，脫色后色素不易滲出，保留紫色。4.D正確：陰性菌脂質(zhì)外膜被乙醇溶解，細(xì)胞壁通透性增加，脫色后復(fù)染顯紅色。5.E錯(cuò)誤：芽孢需用特殊染色法，但菌體仍可通過(guò)革蘭染色區(qū)分（如破傷風(fēng)桿菌為陽(yáng)性）。32.下列培養(yǎng)基中屬于鑒別培養(yǎng)基的是？【選項(xiàng)】A.SS瓊脂（志賀-沙門(mén)菌培養(yǎng)基）B.麥康凱瓊脂C.巧克力瓊脂D.伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）E.血瓊脂平板【參考答案】B、D【解析】1.B正確：麥康凱瓊脂含乳糖+中性紅，發(fā)酵乳糖的菌落呈紅色（如大腸埃希菌），不發(fā)酵者為無(wú)色（如沙門(mén)菌）。2.D正確：EMB中伊紅/美藍(lán)抑制革蘭陽(yáng)性菌，乳糖發(fā)酵菌（如大腸埃希菌）產(chǎn)金屬光澤綠色菌落。3.A錯(cuò)誤：SS瓊脂為選擇性培養(yǎng)基（含膽鹽抑制非腸道菌）。4.C錯(cuò)誤：巧克力瓊脂為營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基（加熱溶血的羊血提供X、V因子）。5.E錯(cuò)誤：血瓊脂平板為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，可觀察溶血現(xiàn)象。33.關(guān)于消毒滅菌技術(shù)，正確的描述是？【選項(xiàng)】A.高壓蒸汽滅菌法：121℃維持15-20分鐘可殺滅所有微生物B.巴氏消毒法：62-65℃加熱30分鐘主要用于牛奶消毒C.紫外線殺菌最佳波長(zhǎng)為265nm，適用于空氣和物體表面消毒D.75%乙醇可通過(guò)破壞蛋白質(zhì)氫鍵實(shí)現(xiàn)高效殺菌E.過(guò)氧乙酸對(duì)芽孢無(wú)效，僅適用于一般器械消毒【參考答案】A、B、C【解析】1.A正確：標(biāo)準(zhǔn)高壓蒸汽滅菌參數(shù)能殺滅細(xì)菌芽孢。2.B正確：巴氏消毒法保留營(yíng)養(yǎng)的同時(shí)滅活致病菌（如結(jié)核分枝桿菌）。3.C正確：紫外線265nm（近UVC段）破壞DNA，但因穿透力弱需直接照射。4.D錯(cuò)誤：乙醇通過(guò)凝固蛋白質(zhì)和溶解脂質(zhì)殺菌，75%濃度滲透性最佳；氫鍵破壞為次要作用。5.E錯(cuò)誤：過(guò)氧乙酸屬高效消毒劑，可滅活芽孢（如用于內(nèi)窺鏡滅菌）。34.關(guān)于細(xì)菌生化試驗(yàn)，以下組合正確的是？【選項(xiàng)】A.大腸埃希菌：IMViC（++--）B.產(chǎn)氣腸桿菌：IMViC（--++）C.吲哚試驗(yàn)：檢測(cè)細(xì)菌分解色氨酸產(chǎn)生硫化氫D.甲基紅試驗(yàn)陽(yáng)性表明細(xì)菌產(chǎn)酸能力強(qiáng)（pH≤4.5）E.枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)陽(yáng)性菌落周?chē)兯{(lán)色【參考答案】A、B、D、E【解析】1.A正確：大腸埃希菌IMViC（靛基質(zhì)+、甲基紅+、VP-、枸櫞酸鹽-）。2.B正確：產(chǎn)氣腸桿菌IMViC為（--++），與大腸埃希菌相反。3.C錯(cuò)誤：吲哚試驗(yàn)檢測(cè)色氨酸分解產(chǎn)物吲哚（非硫化氫，后者通過(guò)醋酸鉛試紙檢測(cè)）。4.D正確：甲基紅陽(yáng)性（紅色）表明葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)酸使pH≤4.5。5.E正確：枸櫞酸鹽陽(yáng)性菌分解枸櫞酸鹽產(chǎn)堿，溴麝香草酚藍(lán)指示劑變藍(lán)。35.病毒培養(yǎng)常用的方法包括？【選項(xiàng)】A.雞胚尿囊腔接種培養(yǎng)流感病毒B.雞胚羊膜腔接種培養(yǎng)腮腺炎病毒C.Hela細(xì)胞系常用于培養(yǎng)乙型肝炎病毒D.乳鼠腦內(nèi)接種培養(yǎng)狂犬病毒E.組織培養(yǎng)液中加入抗生素防止細(xì)菌污染【參考答案】A、B、D、E【解析】1.A正確：流感病毒在尿囊腔中增殖，收獲尿囊液。2.B正確：腮腺炎病毒需羊膜腔接種以貼近呼吸道上皮特性。3.C錯(cuò)誤：乙型肝炎病毒需人原代肝細(xì)胞或特殊細(xì)胞系（如HepG2），Hela細(xì)胞為宮頸癌細(xì)胞系。4.D正確：狂犬病毒可在乳鼠腦內(nèi)增殖，觀察神經(jīng)癥狀。5.E正確：組織培養(yǎng)中添加青霉素、鏈霉素抑制雜菌。三、判斷題（共30題）1.在細(xì)菌革蘭氏染色過(guò)程中，若用95%酒精脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，可能導(dǎo)致革蘭氏陽(yáng)性菌被染成紅色?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B.錯(cuò)誤【解析】革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁含大量肽聚糖，脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能導(dǎo)致脫色過(guò)度，但乙醇僅去除結(jié)晶紫-碘復(fù)合物，不直接影響復(fù)染劑作用。革蘭氏陽(yáng)性菌最終應(yīng)保留紫色，沙黃復(fù)染劑會(huì)使脫色后的革蘭氏陰性菌呈紅色。題干描述錯(cuò)誤。2.SS培養(yǎng)基中膽鹽的主要作用是抑制革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A.正確【解析】SS培養(yǎng)基為強(qiáng)選擇性培養(yǎng)基，膽鹽及煌綠可抑制非腸道致病菌（如革蘭氏陽(yáng)性菌）生長(zhǎng)，同時(shí)允許沙門(mén)氏菌和志賀氏菌存活。題干描述符合SS培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)原理。3.高壓蒸汽滅菌法的標(biāo)準(zhǔn)滅菌條件是121℃、15分鐘?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A.正確【解析】高壓蒸汽滅菌法以飽和水蒸氣為介質(zhì)，121℃下維持15分鐘可徹底殺滅所有微生物繁殖體及芽胞。此參數(shù)為國(guó)際通行標(biāo)準(zhǔn)，適用于常規(guī)培養(yǎng)基和器械滅菌。4.細(xì)菌的鞭毛染色屬于負(fù)染法，常用媒染劑增強(qiáng)染色效果?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B.錯(cuò)誤【解析】鞭毛染色需用特殊媒染劑（如鞣酸）處理以增粗鞭毛直徑，但屬于**正染法**（鞭毛著色、背景無(wú)色）。負(fù)染法指背景著色而目標(biāo)物不著色（如墨汁染色隱球菌莢膜）。題干混淆染色法分類。5.微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全一級(jí)（BSL-1）適用于可通過(guò)氣溶膠傳播的高致病性病原體操作。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B.錯(cuò)誤【解析】BSL-1僅適用于對(duì)健康成人無(wú)致病性的微生物（如大腸桿菌K12）。高致病性病原體需BSL-3或BSL-4級(jí)實(shí)驗(yàn)室。題干錯(cuò)誤描述BSL-1的適用范圍。6.抗酸染色中，5%石碳酸復(fù)紅染色后需用3%鹽酸酒精脫色?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A.正確【解析】抗酸染色三步法：①石碳酸復(fù)紅初染（穿透分枝桿菌蠟質(zhì)膜）；②鹽酸酒精脫色（非抗酸菌脫色）；③亞甲藍(lán)復(fù)染。題干描述符合染色步驟。7.觸酶試驗(yàn)中，若細(xì)菌產(chǎn)生氣泡則為陽(yáng)性，常見(jiàn)于鏈球菌屬?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B.錯(cuò)誤【解析】觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性菌可分解H?O?產(chǎn)氣（如葡萄球菌），而鏈球菌觸酶陰性。題干將陽(yáng)性結(jié)果與鏈球菌關(guān)聯(lián)錯(cuò)誤。8.血瓊脂培養(yǎng)基中的血液通常需在培養(yǎng)基冷卻至50℃左右再加入，以避免溶血?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A.正確【解析】高溫（>55℃）會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞破裂，影響溶血反應(yīng)觀察。無(wú)菌脫纖維血應(yīng)在培養(yǎng)基降溫至45-50℃時(shí)混勻，確保血液成分完整。9.細(xì)菌芽胞的耐熱性主要源于其含水率低且含有吡啶二羧酸鈣。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A.正確【解析】芽胞耐熱機(jī)制包括：①脫水致密結(jié)構(gòu)（含水率僅10%-25%）；②吡啶二羧酸鈣（DPA-Ca）穩(wěn)定酶蛋白；③芽胞殼屏障作用。題干描述正確。10.肥達(dá)試驗(yàn)是一種直接凝集反應(yīng)，用于檢測(cè)傷寒沙門(mén)氏菌的抗原。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B.錯(cuò)誤【解析】肥達(dá)試驗(yàn)為**間接凝集試驗(yàn)**，用已知傷寒/副傷寒沙門(mén)氏菌抗原檢測(cè)患者血清中的特異性抗體，非直接檢測(cè)抗原。題干混淆試驗(yàn)類型。11.細(xì)菌的芽孢是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，與細(xì)菌的繁殖有關(guān)?！具x項(xiàng)】正確（?）?錯(cuò)誤（?）【參考答案】錯(cuò)誤【解析】芽孢是某些細(xì)菌在不利環(huán)境下形成的休眠體，主要功能是抵御不良環(huán)境，并非運(yùn)動(dòng)器官（鞭毛才是運(yùn)動(dòng)器官），也與繁殖無(wú)關(guān)。芽孢不具有繁殖功能，細(xì)菌通過(guò)二分裂方式進(jìn)行繁殖。12.革蘭氏染色法中，脫色步驟使用95%酒精是關(guān)鍵，脫色時(shí)間不足會(huì)導(dǎo)致革蘭氏陽(yáng)性菌被染成紅色。【選項(xiàng)】正確（?）?錯(cuò)誤（?）【參考答案】錯(cuò)誤【解析】革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁厚、肽聚糖層次多，脫色時(shí)酒精難以溶解脂質(zhì)，故保留初染的結(jié)晶紫色。脫色不足會(huì)導(dǎo)致革蘭陰性菌（本應(yīng)褪色）仍呈紫色；脫色過(guò)度則陽(yáng)性菌紫色褪去。若陽(yáng)性菌被染紅，是因復(fù)染步驟異常而非脫色不足。13.SS培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，可通過(guò)乳糖發(fā)酵和硫化氫產(chǎn)生來(lái)區(qū)分致病性與非致病性腸道桿菌?！具x項(xiàng)】正確（?）?錯(cuò)誤（?）【參考答案】錯(cuò)誤【解析】SS培養(yǎng)基是選擇性培養(yǎng)基而非鑒別培養(yǎng)基。其含膽鹽、煌綠等抑制劑，選擇性抑制革蘭陽(yáng)性菌及大多數(shù)非致病腸道菌（如大腸桿菌），允許沙門(mén)、志賀菌生長(zhǎng)。乳糖發(fā)酵與指示劑顯色是鑒別功能，但培養(yǎng)基核心性質(zhì)為"選擇性"。14.高壓蒸汽滅菌法的標(biāo)準(zhǔn)條件是121℃、15分鐘，該條件可殺滅所有微生物包括芽孢?！具x項(xiàng)】正確（?）?錯(cuò)誤（?）【參考答案】正確【解析】高壓蒸汽滅菌利用飽和蒸汽穿透力，在121℃（對(duì)應(yīng)壓力103.4kPa）維持15分鐘，可徹底滅活包括細(xì)菌芽孢、真菌孢子在內(nèi)的所有微生物。此為滅菌金標(biāo)準(zhǔn)，但需注意滅菌物品體積不宜過(guò)大以免影響熱穿透。15.病毒必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生，因其缺乏完整的酶系統(tǒng)和能量代謝系統(tǒng)。【選項(xiàng)】正確（?）?錯(cuò)誤（?）【參考答案】正確【解析】病毒無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，僅有核酸（DNA/RNA）和蛋白質(zhì)衣殼，缺乏獨(dú)立代謝必需的酶系統(tǒng)（如ATP合成酶）及核糖體。其復(fù)制依賴宿主細(xì)胞的生物合成機(jī)制，故嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，不能在無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)基中增殖。16.試管凝集試驗(yàn)中，抗體過(guò)剩引起的假