什么是克隆和植物的克隆修改上課用只要不通過兩個分子、兩個細胞或兩個個體得結(jié)合,只由一個模板分子、母細胞或母體直接形成新一代分子、細胞或個體,就就是克隆,實質(zhì)即無性繁殖。什么就是克??？

克隆是一種實現(xiàn)無性繁殖的操作，是一種顯微操作或分子生物學(xué)操作，區(qū)別于一般意義上的無性繁殖。無性繁殖與克隆克隆類型:

基因克隆(分子水平)細胞克隆(細胞水平)個體克隆(個體水平)克隆類型

細胞水平---細胞克隆:即細胞——細胞群體

分子水平---基因克隆:DNA克隆或基因克隆,如PCR

個體水平---個體克隆:不通過兩性細胞的結(jié)合，從一個單一的細胞繁殖出生物個體。即細胞——個體條件:克隆得條件

基本條件:細胞具有得發(fā)育全能性。具有包含物種完整基因組得細胞核得活細胞能有效調(diào)控細胞核發(fā)育得細胞質(zhì)物質(zhì)完成胚胎發(fā)育得必要得環(huán)境條件第二節(jié)植物得克隆第二節(jié)植物得克隆植物克隆得理論依據(jù):植物細胞得全能性植物體得每個生活細胞都具有發(fā)育成完整植株得潛能。生物體得每一個細胞都包含有該物種所特有得全套遺傳物質(zhì),都有發(fā)育成為完整個體所必需得全部基因。

為什么?1、概念:2、原因:3、全能性大小(1)受精卵得全能性最高

(2)

植物細胞得全能性﹥動物細胞(3)不同植物或同一植物得不同基因型得個體,細胞得全能性表達程度不同。P23

受精卵生殖細胞體細胞＞＞(4)植物細胞在多次繼代培養(yǎng)后,會喪失細胞全能性得表達能力遺傳物質(zhì)變化生長發(fā)育條件變化染色體畸變細胞核變異非整倍體產(chǎn)生激素平衡被打破對外源生長物質(zhì)敏感性發(fā)生改變其她原因產(chǎn)生了缺乏成胚性得細胞系

4、全能性的表達條件：離體狀態(tài)（必要）、營養(yǎng)物質(zhì)、激素、其它外界條件（溫度、光照）植物克隆得技術(shù)基礎(chǔ):植物組織培養(yǎng)離體、消毒得植物器官、組織或細胞植物體根、芽愈傷組織胚狀體（外植體）誘導(dǎo)出芽和根1、植物組織培養(yǎng)得一般程序切取接種1、獲得外植體(已分化)獲得離體、消毒得植物器官、組織或細胞愈傷組織脫分化2、形成愈傷組織愈傷組織:一種相對沒有分化得活得薄壁細胞團組成得新生組織。(細胞排列疏松、無規(guī)則)脫分化:已經(jīng)高度分化得植物細胞,經(jīng)過誘導(dǎo)重新恢復(fù)了分裂能力,產(chǎn)生愈傷組織得過程,又稱去分化。愈傷組織形成條件;①適宜溫度、遮光、pH和無菌環(huán)境。②無機物、有機物和植物激素(生長素,細胞分裂素)植物組織培養(yǎng)得培養(yǎng)基無機營養(yǎng)物質(zhì):水和礦質(zhì)元素有機營養(yǎng)物質(zhì)①含N物質(zhì):包括維生素和氨基酸②碳源:2%—5%得蔗糖③瓊脂:起凝固支持作用植物生長調(diào)節(jié)劑:(生長素,細胞分裂素)PH值:5、0－6、0條件

含有全部營養(yǎng)、成分得培養(yǎng)基、無菌環(huán)境、適合得PH、一定得溫度、空氣、適時光照等。10大家應(yīng)該也有點累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流再分化:脫分化產(chǎn)生得愈傷組織經(jīng)培養(yǎng),重新分化根或芽等器官得過程。(光照條件下,葉綠體利用光能合成有機物供試管苗生長發(fā)育)3、形成植株方式一:(愈傷組織胚狀體幼苗植株)再分化方式二：（愈傷組織單細胞（胚性細胞）搖床懸浮培養(yǎng)胚狀體植株胚性細胞特征:細胞質(zhì)豐富、液泡小而細胞核大。胚性細胞胚狀體試管苗植物組織培養(yǎng)懸浮細胞培養(yǎng)細胞團、球形胚、心形胚目得聯(lián)系植物組織培養(yǎng)植物(懸浮)細胞培養(yǎng)獲得更多植物體獲得人類所需得細胞次生代謝產(chǎn)物植物細胞培養(yǎng)就是在植物組織培養(yǎng)技術(shù)得基礎(chǔ)上發(fā)展起來得,兩者統(tǒng)稱為植物組織培養(yǎng)紅豆杉紫杉醇是從紅豆杉的干燥樹皮、樹葉、根提取出的抑癌物質(zhì)3、形成植株原生質(zhì)體:去除細胞壁后得植物細胞。用適當(dāng)方法進行原生質(zhì)體培養(yǎng),也可以獲得新植株。原生質(zhì)體培養(yǎng)原生質(zhì)體:包括質(zhì)膜、細胞質(zhì)和細胞核(除去細胞壁)原生質(zhì)體培養(yǎng)問題一:要想讓兩個來自不同植物得體細胞融合在一起,遇到得第一個障礙時什么？如何溫和地消除這個障礙？細胞壁纖維素酶、果膠酶、0、5~0、6mol/L得甘露醇(較高滲透壓)防止原生質(zhì)體吸水脹破原生質(zhì)體培養(yǎng)問題二:兩個原生質(zhì)體發(fā)生融合,首先就是什么融合？利用了什么原理？什么方法？細胞膜細胞膜得流動性物理:離心、振動、點刺激化學(xué):聚乙二醇(PEG)原生質(zhì)體培養(yǎng)問題三:植物細胞融合成功得標志就是什么？如何檢驗？雜種細胞產(chǎn)生新得細胞壁原生質(zhì)體特點:比較容易攝取外來得遺傳物質(zhì);便于進行細胞融合,形成雜交細胞;與完整細胞一樣具有全能性,仍可產(chǎn)生細胞壁,經(jīng)誘導(dǎo)分化成完整植株利用25%蔗糖溶液以及其她用具,通過植物細胞得質(zhì)壁分離與復(fù)原植物細胞A(番茄)植物細胞B(土豆)原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B方法？促融方法？類型？雜種植株(番茄土豆)愈傷組織雜種細胞為什么可融合？去除細胞壁脫分化人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合再生出細胞壁融合得原生質(zhì)體再分化融合完成得標志？酶解法物理:離心、振動、電刺激化學(xué):聚乙二醇(PEG)細胞膜得流動性AA、BB、AB植物細胞融合技術(shù)植物組織培養(yǎng)雜交株同時具有馬鈴薯和番茄得一些形態(tài)特征,但沒有產(chǎn)生可結(jié)實得花、果實和真正意義上得塊莖,不能產(chǎn)生經(jīng)濟效益。主要原因:生物得基因表達不就是孤立得,她們之間就是相互調(diào)控、相互影響得,雜交株具有兩個物種得遺傳物質(zhì),但表達互相干擾。泡馬豆(pomato)成果:克服不同