演講人：日期:自然殺傷細胞（NK細胞）研究概述CATALOGUE目錄01生物學(xué)基礎(chǔ)02功能機制03受體系統(tǒng)04疾病相關(guān)性05臨床轉(zhuǎn)化研究06研究方法01生物學(xué)基礎(chǔ)細胞定義與特性定義自然殺傷細胞（NK細胞）是一類無需預(yù)先致敏就能自發(fā)殺傷靶細胞的淋巴細胞。特性具有細胞毒性和細胞因子分泌功能，不表達特異性抗原識別受體，通過表面活化受體和抑制性受體對自身和非己進行識別。重要性在機體抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)中起重要作用。發(fā)育分化路徑調(diào)控因素發(fā)育分化過程受多種細胞因子和轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控，如IL-15、IL-2、Eomes等。分化路徑經(jīng)過多步分化發(fā)育成熟，包括從CD34+前體細胞分化為CD56+的NK細胞前體，最終發(fā)育為具有完全功能的NK細胞。來源NK細胞來源于骨髓造血干細胞。組織分布特征分布廣泛NK細胞廣泛分布于外周血、骨髓、淋巴結(jié)、脾臟、肝臟、肺臟等多個組織和器官中。組織特異性在不同組織中，NK細胞的表型、功能和分布有所不同，如肝臟NK細胞具有更強的細胞毒性，而子宮NK細胞則與妊娠免疫耐受相關(guān)。動態(tài)變化NK細胞在感染、炎癥和腫瘤等病理條件下，數(shù)量和功能可發(fā)生動態(tài)變化，參與免疫應(yīng)答和疾病進程。02功能機制靶細胞識別原理識別正常細胞和癌細胞激活或抑制信號受體與配體結(jié)合NK細胞能夠識別正常細胞和癌細胞表面的MHC（主要組織相容性復(fù)合體）分子，從而區(qū)分自我和非我。NK細胞表面有多種受體，可以與靶細胞表面的配體結(jié)合，這些受體包括NKG2D、NKp46、NKp30等。受體與配體結(jié)合后，會產(chǎn)生激活或抑制信號，決定NK細胞是否對靶細胞進行殺傷。NK細胞通過釋放穿孔素和顆粒酶等物質(zhì)，誘導(dǎo)靶細胞凋亡。細胞毒性作用方式穿孔素/顆粒酶途徑NK細胞表面的FasL等死亡受體與靶細胞表面的相應(yīng)受體結(jié)合，啟動靶細胞凋亡程序。死亡受體途徑NK細胞通過Fc受體與靶細胞表面的IgG抗體結(jié)合，從而殺傷靶細胞。抗體依賴的細胞毒性作用（ADCC）免疫調(diào)節(jié)功能調(diào)節(jié)T細胞功能NK細胞通過分泌細胞因子和殺傷T細胞等方式，調(diào)節(jié)T細胞的活化和增殖，從而維持免疫平衡?？共《靖腥綨K細胞在病毒感染早期發(fā)揮重要作用，能夠識別并清除被病毒感染的細胞，從而防止病毒在體內(nèi)擴散。參與免疫記憶NK細胞在初次免疫應(yīng)答中起重要作用，并且可以形成記憶細胞，在二次免疫應(yīng)答中更加迅速和有效地應(yīng)對相同抗原。03受體系統(tǒng)活化性受體類型NCRs(NaturalCytotoxicityReceptors)包括NKp30,NKp44,NKp46等，識別靶細胞表面應(yīng)激誘導(dǎo)的配體。KIRs(KillerCellImmunoglobulin-LikeReceptors)識別靶細胞表面HLA-I類分子，傳遞活化信號。NKG2D識別靶細胞表面MICA/MICB等應(yīng)激誘導(dǎo)的配體，激活NK細胞殺傷活性。抑制性受體功能識別自身組織細胞表面MHC-I類分子，傳遞抑制信號，避免對自身正常細胞的殺傷。01.抑制受體與活化受體競爭結(jié)合，使NK細胞處于靜息狀態(tài)，避免過度活化。02.整合多種抑制信號，提高NK細胞對自身正常細胞的耐受性。03.信號傳導(dǎo)通路PI3K途徑通過活化PI3K，激活A(yù)kt、mTOR等分子，調(diào)控NK細胞增殖、活化、殺傷等功能。MAPK途徑通過活化MAPK，激活ERK、JNK等分子，調(diào)控NK細胞殺傷活性和細胞因子分泌。Ca2+信號途徑通過活化PLCγ，水解磷脂酰肌醇，產(chǎn)生IP3和DAG，進而調(diào)控Ca2+內(nèi)流和細胞骨架重排，影響NK細胞殺傷活性。04疾病相關(guān)性抗病毒感染作用早期抗病毒反應(yīng)NK細胞可在病毒感染初期，通過直接殺傷被感染的細胞和釋放細胞因子等方式，迅速控制病毒復(fù)制和傳播。激活其他免疫細胞NK細胞可刺激和激活其他免疫細胞，如T細胞和巨噬細胞，增強整體抗病毒免疫能力。免疫記憶NK細胞可通過免疫記憶機制，對同種病毒進行快速和高效的免疫應(yīng)答，防止二次感染。腫瘤免疫監(jiān)視機制識別和殺傷腫瘤細胞NK細胞可直接識別和殺傷某些腫瘤細胞，釋放穿孔素和顆粒酶等物質(zhì)，導(dǎo)致腫瘤細胞裂解。01激活T細胞免疫應(yīng)答NK細胞可通過表達和釋放細胞因子，激活T細胞免疫應(yīng)答，協(xié)同殺傷腫瘤細胞。02免疫逃逸的抵抗NK細胞可識別和殺傷腫瘤細胞，即使腫瘤細胞發(fā)生了免疫逃逸，NK細胞仍可對其進行殺傷。03自身免疫病關(guān)聯(lián)性自身免疫病的發(fā)生NK細胞功能異?？梢l(fā)自身免疫病，如NK細胞數(shù)量減少或活性降低，可能導(dǎo)致自身免疫病的發(fā)生。自身免疫病的治療NK細胞可用于自身免疫病的治療，如通過輸注NK細胞或調(diào)節(jié)NK細胞功能等方式，達到治療自身免疫病的目的。自身免疫病的調(diào)節(jié)NK細胞在自身免疫病中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，通過殺傷自身免疫細胞和釋放細胞因子等方式，控制自身免疫反應(yīng)的強度和范圍。05臨床轉(zhuǎn)化研究過繼性免疫治療NK細胞與其他免疫細胞聯(lián)合應(yīng)用將NK細胞與其他免疫細胞（如T細胞、巨噬細胞等）聯(lián)合應(yīng)用，提高免疫治療的效果。03利用健康捐贈者的NK細胞，經(jīng)過特殊處理后輸注給患者，實現(xiàn)免疫治療效果。02異體NK細胞治療自體NK細胞治療采集患者自身的NK細胞，經(jīng)過體外擴增和活化后再回輸給患者，以增強其免疫功能。01通過基因工程技術(shù)將嵌合抗原受體（CAR）導(dǎo)入NK細胞，使其能夠特異性地識別和殺傷腫瘤細胞。CAR-NK技術(shù)進展CAR-NK細胞的構(gòu)建通過基因編輯、改造等技術(shù)手段，提高CAR-NK細胞的抗腫瘤活性、持久性和安全性。CAR-NK細胞的優(yōu)化目前CAR-NK細胞已在多種腫瘤的臨床試驗中顯示出良好的治療效果和安全性。CAR-NK細胞的臨床應(yīng)用化療藥物能夠破壞腫瘤細胞的DNA，使其更容易被NK細胞識別和殺傷；同時，NK細胞也能夠增強化療藥物的敏感性，提高治療效果。聯(lián)合治療方案NK細胞與化療聯(lián)合應(yīng)用放療能夠直接殺傷腫瘤細胞，同時也能夠刺激NK細胞的增殖和活化，提高免疫治療的效果。NK細胞與放療聯(lián)合應(yīng)用免疫治療藥物（如免疫檢查點抑制劑）能夠解除腫瘤細胞的免疫逃逸機制，使其更容易被NK細胞識別和殺傷；同時，NK細胞也能夠增強免疫治療藥物的療效，實現(xiàn)協(xié)同治療作用。NK細胞與免疫治療藥物聯(lián)合應(yīng)用06研究方法體外功能檢測技術(shù)NK細胞活性檢測通過放射性同位素標(biāo)記或流式細胞術(shù)等方法，測定NK細胞對靶細胞的殺傷活性。01細胞因子分泌測定通過ELISA或流式細胞術(shù)等方法，檢測NK細胞在特定刺激下分泌細胞因子的水平。02受體表達分析通過流式細胞術(shù)或PCR技術(shù)，檢測NK細胞表面活化受體和抑制受體的表達情況。03動物模型應(yīng)用小鼠模型利用小鼠NK細胞與人類NK細胞相似的特性，構(gòu)建小鼠NK細胞缺陷模型，研究NK細胞在體內(nèi)的功能和作用機制。轉(zhuǎn)基因動物模型通過基因編輯技術(shù)，構(gòu)建NK細胞特異性基因敲除或轉(zhuǎn)基因小鼠，研究特定基因?qū)K細胞功能和發(fā)育的影響。移植瘤模型將人類腫瘤細胞移植到小鼠體內(nèi)，研究NK細胞在腫瘤免疫監(jiān)視和殺傷中的作用。單細胞分析策略單細胞測序技術(shù)通過單細胞RNA測序技術(shù)，分析NK細胞