PAGEPAGE1

擬征求意見的食品添加劑名單一、食品工業(yè)用酶制劑新品種序號(hào)酶來源供體1.乳糖酶Lactase黑曲霉Aspergillusniger米曲霉Aspergillusoryzae食品工業(yè)用酶制劑的質(zhì)量規(guī)格要求應(yīng)符合《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑食品工業(yè)用酶制劑》（GB1886.174）的規(guī)定。二、食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑新品種中文名稱：2’-巖藻糖基乳糖英文名稱：2’-fucosyllactose，2’-FL功能分類：食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑（一）用量及使用范圍食品分類號(hào)食品名稱使用量備注01.03.02調(diào)制乳粉(僅限兒童用乳粉)0.7-2.4g/L以即食狀態(tài)計(jì)，粉狀產(chǎn)品按沖調(diào)倍數(shù)增加使用量13.01.01嬰兒配方食品13.01.02較大嬰兒和幼兒配方食品13.01.03特殊醫(yī)學(xué)用途嬰兒配方食品（二）質(zhì)量規(guī)格要求1范圍本質(zhì)量規(guī)格適用于以乳糖等為原料，經(jīng)發(fā)酵、提純、干燥等工藝制得的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑2'-巖藻糖基乳糖。2’-巖藻糖基乳糖的生產(chǎn)菌應(yīng)經(jīng)過安全性評(píng)估并符合附錄D的要求。化學(xué)名稱、分子式、結(jié)構(gòu)式和相對(duì)分子質(zhì)量化學(xué)名稱α-L-吡喃巖藻糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-D-吡喃葡萄糖分子式C18H32O15結(jié)構(gòu)式相對(duì)分子質(zhì)量488.44（按2020年國(guó)際相對(duì)原子質(zhì)量）技術(shù)要求感官要求1

表1感官要求指 標(biāo)要 求檢驗(yàn)方法色澤白色至類白色取適量試樣置于清潔、干燥的白瓷盤或燒杯中，在自然光線下，觀察其色澤和狀態(tài)。狀態(tài)粉末理化指標(biāo)2

表2理化指標(biāo)項(xiàng) 目指標(biāo)檢驗(yàn)方法2'-巖藻糖基乳糖（以干基計(jì)），w/%≥94.0附錄A中的A.2D-乳糖，w/%≤3.0附錄A中的A.3二巖藻糖基乳糖，w/%≤2.0附錄A中的A.3水分，w/%≤9.0GB5009.3卡爾?費(fèi)休法殘留蛋白含量/（mg/kg）≤100附錄B灰分，w/%≤0.5GB5009.4總砷（以As計(jì)）/（mg/kg）≤0.2GB5009.11鉛（Pb）/（mg/kg）≤0.05GB5009.12微生物指標(biāo)微生物指標(biāo)應(yīng)符合表3的規(guī)定。表3微生物指標(biāo)項(xiàng) 目指 標(biāo)檢驗(yàn)方法菌落總數(shù)/(CFU/g) ≤500GB4789.2腸桿菌科/(CFU/g) ＜10GB4789.41沙門氏菌/(25g)不得檢出GB4789.4PAGEPAGE4附錄A 檢驗(yàn)方法一般規(guī)定GB/T6682規(guī)定GB/T601GB/T602GB/T6032’-巖藻糖基乳糖（以干基計(jì)）的測(cè)定方法提要2’-巖藻糖基乳糖溶于水或溶劑，在親水保留色譜柱或酰胺鍵合色譜柱的液相色譜條件下分離，示差折光檢測(cè)器檢測(cè)，用面積歸一化法或外標(biāo)法定量。試劑和材料2'-巖藻糖基乳糖對(duì)照品：純度≥95%。水：GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。乙腈：色譜純。三乙胺：色譜純。A.2.2.5溶劑：乙腈:水=50:50（v/v）。儀器和設(shè)備高效液相色譜儀：配備示差折光檢測(cè)器。參考色譜條件親水保留色譜柱色譜條件如下：色譜柱：親水保留色譜柱，250mm×4.6mm,3.5μm或等效色譜柱。582.8g857.2g10mL的三乙胺。柱溫：25。示差折光檢測(cè)器溫度：35。流速：1mL/min。進(jìn)樣量：5μL。運(yùn)行時(shí)間：45min。酰胺鍵合柱色譜條件如下：色譜柱：酰胺鍵合色譜柱，150mm×4.6mm,3μm或等效色譜柱。流動(dòng)相：乙腈:水=64:36(v/v)。柱溫：25℃。示差折光檢測(cè)器溫度：37℃。流速：1.1mL/min。進(jìn)樣量：5μL。運(yùn)行時(shí)間：8min。分析步驟標(biāo)準(zhǔn)溶液配制親水保留色譜柱色譜條件標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制2’-巖藻糖基乳糖對(duì)照品，轉(zhuǎn)移到合適的容量瓶中，用水溶解對(duì)照品。2’5.0g/100mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。該溶4℃~8℃4酰胺鍵合柱色譜條件標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制2’-巖藻糖基乳糖對(duì)照品，用溶劑溶解，容量瓶中定容，得到1232’-巖藻糖基乳糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度分別約為4.2mg/mL、5.0mg/mL和6.0mg/mL。該溶液在冰箱中4℃~8℃保存，有效期4周。試樣溶液配制親水保留色譜柱色譜條件試樣溶液的配制5g±0.51100mL2cm50mg/mL的試樣溶液。相同試樣做三個(gè)平行實(shí)驗(yàn)。5g，可相應(yīng)按照比例折算所需精確稱取的樣品量，配置成濃度50mg/mL的試樣溶液。酰胺鍵合柱色譜條件試樣溶液的配制47.0mg~54.0mg10mL容量瓶中，用溶劑溶解并定容至刻度。相同試樣做三個(gè)平行實(shí)驗(yàn)。系統(tǒng)適用性試驗(yàn)親水保留色譜柱色譜條件的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)3——化合物保留時(shí)間重復(fù)性的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差＜1.0%（n＝3）；——化合物響應(yīng)值重復(fù)性的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差＜1.0%（n＝3）；——洗脫液的色譜圖應(yīng)為純基線。親水保留色譜柱色譜條件下2’-巖藻糖基乳糖對(duì)照品的參考色譜圖譜見附錄C.1。酰胺鍵合柱色譜條件的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)當(dāng)滿足以下條件時(shí)，可進(jìn)行試樣溶液的測(cè)定：——連續(xù)進(jìn)樣溶劑5次。最后一次進(jìn)樣在色譜圖4min~7min保留時(shí)間段內(nèi)未發(fā)現(xiàn)色譜峰；——進(jìn)樣對(duì)照品溶液2時(shí)，計(jì)算得到的2’-巖藻糖基乳糖信噪比≥100，保留時(shí)間約為5min~6min；——連續(xù)3次進(jìn)樣試樣溶液獲得的峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)＜1.0%?！凑障盗袠?biāo)準(zhǔn)溶液，試樣測(cè)試溶液，系列標(biāo)準(zhǔn)溶液序列測(cè)試。試樣溶液前后測(cè)得系列標(biāo)準(zhǔn)溶液中相同濃度的2’-巖藻糖基乳糖峰面積的相對(duì)偏差需小于2.0%。如不滿足偏差要求，需復(fù)測(cè)。酰胺鍵合柱色譜條件下2’-巖藻糖基乳糖對(duì)照品的參考色譜圖譜見附錄C.2。2’-巖藻糖基乳糖含量測(cè)定面積歸一化法在親水保留色譜柱參考色譜條件下，2’-巖藻糖基乳糖含量以面積歸一化法定量。2'）1按式（A.1計(jì)算。式中：

（A.1）A1——試樣溶液中2'-巖藻糖基乳糖的峰面積；S1——試樣溶液中除溶劑峰外所有成分峰面積的和。外標(biāo)法在酰胺鍵合柱參考色譜條件下，2’-巖藻糖基乳糖含量以外標(biāo)法定量。以系列標(biāo)準(zhǔn)溶液中2’-巖藻糖基乳糖的濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)繪制過零點(diǎn)的線性標(biāo)準(zhǔn)曲線，依試樣溶液的峰面積在標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定其中2’-巖藻糖基乳糖的濃度。22按式（A.2計(jì)算。（A.2）式中：C1——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的試樣溶液中2’-巖藻糖基乳糖的濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；V1——試樣的定容體積，單位為毫升（mL）；m1——試樣的質(zhì)量，單位為毫克（mg）?！?按式（A.3計(jì)算。（A.3）式中：ω——產(chǎn)品水分含量的實(shí)測(cè)值，%。精密度在重復(fù)性測(cè)定條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過其算術(shù)平均值的1%。D-乳糖和二巖藻糖基乳糖的測(cè)定方法提要2’-巖藻糖基乳糖溶于水或溶劑，在親水保留色譜柱或氨基聚合物柱的液相色譜條件下D-乳糖和二巖藻糖基乳糖對(duì)照品的保留時(shí)間定性，外標(biāo)法或面積歸一化法定量。試劑和材料2’-巖藻糖基乳糖對(duì)照品：純度≥95%。D-D-乳糖含量≥95%或標(biāo)明含量的等同物。二巖藻糖基乳糖對(duì)照品：純度≥84%或標(biāo)明含量的等同物。水：GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。乙腈：色譜純。三乙胺：色譜純。A.3.2.7溶劑：乙腈:水=50:50（v/v）。儀器和設(shè)備高效液相色譜儀:配備示差折光檢測(cè)器或電霧式檢測(cè)器。參考色譜條件液相色譜-示差折光檢測(cè)器條件如下：色譜柱：親水保留色譜柱，250mm×4.6mm,3.5μm或等效色譜柱。582.8g857.2g10mL的三乙胺。柱溫：25。示差折光檢測(cè)器溫度：35。流速：1mL/min。進(jìn)樣量：5μL。運(yùn)行時(shí)間：45min。液相色譜-電霧式檢測(cè)器條件如下：色譜柱：氨基聚合物柱，250mm×4.6mm,5μm或等效色譜柱。流動(dòng)相：乙腈:水=72:28v/v)。柱溫：25。流速：1.1mL/min。電霧式檢測(cè)器：霧化器溫度：35℃；數(shù)據(jù)采集速率：20Hz；功率功能：1；過濾器：5。進(jìn)樣量：10μL。運(yùn)行時(shí)間：25min。分析步驟標(biāo)準(zhǔn)溶液配制用于示差折光檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)溶液D-乳糖一水合物對(duì)照品到適宜的容量瓶中，用0.5mg/mL4℃~8℃4周。二巖藻糖基乳糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確稱取適量的二巖藻糖基乳糖對(duì)照品到適宜的容0.5mg/mL4℃~8℃4周。用于電霧式檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)溶液2'-D-乳糖一水合物對(duì)照2'-巖藻糖基乳糖濃2.5mg/mL2.5mg/mL的儲(chǔ)備液，D-3.0mg/mL的儲(chǔ)備液。D-5個(gè)不同濃度的系123455μg/mL10μg/mL20μg/mL37.5μg/mL55μg/mL；D-15μg/mL、30μg/mL、60μg/mL、120μg/mL150μg/mL。2'-巖藻糖基乳糖2020μg/mLD-60μg/mL的標(biāo)62'-2'-巖藻糖基5μg/mL7。試樣溶液制備用于示差折光檢測(cè)的試樣溶液5g±0.5g（1mg）100mL的容量瓶中，加水至約容量2cm50mg/mL的試樣溶液。同時(shí)準(zhǔn)備三份平行試樣溶液。5g，可相應(yīng)按照比例折算所需精確稱取的樣品量，配置成濃度50mg/mL的試樣溶液。用于電霧式檢測(cè)的試樣溶液49.0mg~52.0mg10mLD-乳糖或二巖藻糖基乳糖含量在工作曲線的范圍內(nèi)。系統(tǒng)適用性試驗(yàn)示差折光檢測(cè)器色譜條件的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)滿足以下條件時(shí)，可進(jìn)行樣品測(cè)試：——化合物保留時(shí)間重復(fù)性的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差＜1.0%（n＝3）；——化合物響應(yīng)值重復(fù)性的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差＜1.0%（n＝3）；——洗脫液的色譜圖應(yīng)為純基線。依據(jù)前述分析條件測(cè)定，D-乳糖和二巖藻糖基乳糖對(duì)照品的參考色譜圖譜見附錄C.1。電霧式檢測(cè)器色譜條件的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)系統(tǒng)適用性應(yīng)同時(shí)滿足以下條件：——2'-巖藻糖基乳糖的保留時(shí)間在12min14min之間；——標(biāo)準(zhǔn)溶液62'-巖藻糖基乳糖峰的不對(duì)稱度不小于0.751.25；——標(biāo)準(zhǔn)溶液6的色譜圖中，D-乳糖與2'-巖藻糖基乳糖之間的分離度大于3.0；——6D-乳糖、2'-巖藻糖基乳糖和二巖藻糖基乳糖峰2.5%；——7的色譜圖中，2'-巖藻糖基乳糖峰的信噪比≥10。如果檢測(cè)器不能到達(dá)D-乳糖、二巖藻糖基乳糖標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和試樣溶液的濃度?！?’-巖藻糖基乳糖峰面積的相對(duì)偏差或D-乳糖峰面積的相對(duì)偏差10.0%。如不滿足相對(duì)偏差要求，需復(fù)測(cè)。依據(jù)前述分析條件測(cè)定，D-乳糖、二巖藻糖基乳糖標(biāo)準(zhǔn)品的參考色譜圖譜見附錄C.3。D-乳糖和二巖藻糖基乳糖含量測(cè)定面積歸一化法在液相色譜-示差折光檢測(cè)器參考色譜條件下，D-乳糖和二巖藻糖基乳糖含量以面積歸一化法定量。D-4按式A.4計(jì)算。（A.4）式中：A2——試樣溶液中D-乳糖或二巖藻糖基乳糖的峰面積；S2——試樣溶液中除溶劑峰之外的所有成分峰面積的總和。測(cè)定結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后兩位。外標(biāo)法在液相色譜-電霧式檢測(cè)器參考色譜條件下，D-乳糖和二巖藻糖基乳糖含量以外標(biāo)法定量。以系列標(biāo)準(zhǔn)溶液中各物質(zhì)的濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)計(jì)算過零點(diǎn)的二次D-乳糖和二巖藻糖基乳糖濃度。D-5按式A.5計(jì)算。式中：

（A.5）C2——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的待測(cè)樣品溶液中D-乳糖或二巖藻糖基乳糖的濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；V2——試樣的定容體積，單位為毫升（mL）；f ——稀釋因子；m2——試樣的質(zhì)量，單位為毫克（mg）。上述結(jié)果計(jì)算方法測(cè)定的D-乳糖或二巖藻糖基乳糖結(jié)果保留至小數(shù)點(diǎn)后面兩位。本方法的檢測(cè)限為0.03%。如結(jié)果低于檢測(cè)限，則結(jié)果表示為＜0.03%。PAGEPAGE15附錄B殘留蛋白含量的測(cè)定方法提要595nm試劑和材料牛血清白蛋白對(duì)照品：純度≥99%或標(biāo)明含量的等同物。0.1mg/mL1.4mg/mL蛋白含量的測(cè)定。水：GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。儀器和設(shè)備紫外-可見分光光度計(jì)。分析步驟牛血清白蛋白儲(chǔ)備溶液的制備稱取20.0mg牛血清白蛋白對(duì)照品于10mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混勻。牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備取100μL上述儲(chǔ)備溶液于10mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混勻。試樣溶液的制備稱取200mg樣品于5mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混勻。測(cè)定B.110min595nm波長(zhǎng)下依次測(cè)定混合溶液的吸光值。表B.1試樣溶液制備蛋白濃度（mg/L）試樣溶液水牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液考馬斯藍(lán)試劑空白溶液100μL800μL0μL200μL空白溶液200μL800μL0μL200μL混合溶液00600μL200μL0μL200μL混合溶液11600μL150μL50μL200μL混合溶液22600μL100μL100μL200μL混合溶液34600μL0μL200μL200μL結(jié)果計(jì)算以混合溶液的吸光值減去空白吸光值的平均值得到校準(zhǔn)吸光值。以校準(zhǔn)吸光值為縱坐B.1。圖B.16按式（.1m/g。式中：

（B.1）C3 ——（g/mL）；-1C3——通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測(cè)定混合溶液中蛋白的濃度，單位為微克每毫升（g/mL）；V3 ——試樣溶液的定容體積，單位為毫升（mL）；f ——稀釋因子；m3 ——試樣的重量，單位毫克（mg）；0.6 ——1mL0.6mL。該方法的檢測(cè)限為17mg/kg。若結(jié)果低于檢測(cè)限，則結(jié)果表示為＜17mg/kg。附錄C2’-巖藻糖基乳糖、D-乳糖和二巖藻糖基乳糖的參考高效液相色譜圖譜D圖C.1 親水保留色譜柱色譜條件下D-乳糖、2’-巖藻糖基乳糖和二巖藻糖基乳糖對(duì)照品的色譜圖表C.1 親水保留色譜柱色譜條件下各物質(zhì)的保留時(shí)間化合物保留時(shí)間（min）系統(tǒng)溶劑（水）23D-乳糖14.82’-巖藻糖基乳糖20.4二巖藻糖基乳糖30.82’-巖藻糖基乳糖對(duì)照品的色譜圖圖C.2 酰胺鍵合柱色譜條件下2’-巖藻糖基乳糖對(duì)照品的色譜圖D-乳糖、2’-巖藻糖基乳糖和二巖藻糖基乳糖對(duì)照品的色譜圖圖C.3 液相色譜-電霧式檢測(cè)器色譜條件下D-乳糖2’-巖藻糖基乳糖和二巖藻糖基乳糖對(duì)照品的色譜圖表C.2 液相色譜-電霧式檢測(cè)器色譜條件下各物質(zhì)的