ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程中炎癥因子動(dòng)態(tài)變化及藥物干預(yù)機(jī)制解析一、引言1.1研究背景與意義動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）是一種嚴(yán)重威脅人類健康的慢性進(jìn)行性疾病，其發(fā)病率和死亡率在全球范圍內(nèi)居高不下?！吨袊难懿?bào)告2015》指出，心血管病占居民疾病死亡人數(shù)的40%以上，已然成為威脅我國居民健康的頭號(hào)殺手，而動(dòng)脈粥樣硬化正是心血管疾病的主要病理基礎(chǔ)。當(dāng)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生在腦血管時(shí)，可能引起腦血管狹窄，斑塊脫落后形成的栓子會(huì)誘發(fā)腦血栓，斑塊破裂還會(huì)導(dǎo)致腦出血，嚴(yán)重威脅患者生命；若發(fā)生在冠狀動(dòng)脈，會(huì)造成冠狀動(dòng)脈狹窄，影響心肌供血和供氧，引發(fā)心絞痛，繼發(fā)血栓形成堵塞冠狀動(dòng)脈則會(huì)引起心梗，導(dǎo)致心肌缺血壞死；腎動(dòng)脈發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)，會(huì)引發(fā)腎臟灌注不足甚至無灌注，腎臟缺血可能發(fā)展為腎功能不全甚至腎衰竭；發(fā)生在下肢動(dòng)脈時(shí)，會(huì)導(dǎo)致下肢肌肉供血不足，出現(xiàn)間歇性跛行。目前，雖然針對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的治療手段不斷發(fā)展，包括藥物治療、介入治療和手術(shù)治療等，但這些治療方法往往只能在疾病發(fā)展到一定階段后發(fā)揮作用，且存在一定的局限性和副作用。因此，深入研究動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制，尋找有效的預(yù)防和治療策略，具有重要的臨床意義和社會(huì)價(jià)值。在動(dòng)脈粥樣硬化的研究中，動(dòng)物模型的應(yīng)用為我們深入了解其發(fā)病機(jī)制和探索治療方法提供了重要手段。ApoE基因敲除小鼠是研究動(dòng)脈粥樣硬化的常用動(dòng)物模型之一。ApoE能與清除乳糜微粒和極低密度脂蛋白殘粒的受體結(jié)合，ApoE基因敲除小鼠由于缺乏ApoE，多余的膽固醇會(huì)在血漿中長期積累，從而導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化。該模型在正常飲食條件下即可自發(fā)形成高膽固醇血癥，并發(fā)生顯著的動(dòng)脈粥樣硬化病變，且病變部位主要發(fā)生于主動(dòng)脈根部、主動(dòng)脈弓、無名動(dòng)脈、主動(dòng)脈分支及腎動(dòng)脈分叉等，與人類動(dòng)脈粥樣硬化的病變部位和病理過程具有一定的相似性。通過對(duì)ApoE基因敲除小鼠的研究，我們可以更深入地了解動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制，為開發(fā)新的治療方法提供理論基礎(chǔ)。炎癥反應(yīng)在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展過程中起著關(guān)鍵作用。從“炎癥反應(yīng)”假說來看，動(dòng)脈粥樣硬化是脂質(zhì)沉積于動(dòng)脈壁形成局部斑塊的過程，此過程經(jīng)由炎癥反應(yīng)介導(dǎo)，炎癥反應(yīng)的特點(diǎn)是出現(xiàn)單核/巨噬細(xì)胞、活化T細(xì)胞和纖維化，分布尤其多見于血管分支及流出口，抗體及細(xì)胞免疫應(yīng)答二者都能調(diào)控炎癥反應(yīng)及動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的破裂造成血栓，形成急性冠脈綜合征，其過程也有大量炎性細(xì)胞和炎性介質(zhì)的參與。眾多炎癥因子，如單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）、C反應(yīng)蛋白（CRP）、白細(xì)胞表面分化抗原40（CD40）及其配體（CD40L）、細(xì)胞間粘附分子（ICAM-1、2、3）和血管細(xì)胞粘附分子（VCAM-1）等，參與了動(dòng)脈粥樣硬化的各個(gè)階段。MCP-1可介導(dǎo)單核-巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化病變處的募集，參與內(nèi)皮修復(fù)和血管新生，還可作為清道夫受體，攝取氧化型低密度脂蛋白，參與泡沫細(xì)胞形成，且MCP-1隨動(dòng)脈粥樣硬化程度增加而增加，是心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素；CRP是一種非特異性的炎癥標(biāo)志物，通過各種途徑直接參與了動(dòng)脈粥樣硬化的形成，在某種條件下，CRP會(huì)發(fā)生不可逆的構(gòu)象轉(zhuǎn)換，轉(zhuǎn)變成單球體結(jié)構(gòu)的mCRP，mCRP可誘導(dǎo)冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞化學(xué)增活素mRNA和黏附分子的表達(dá)，CRP能誘導(dǎo)人體黏附分子的表達(dá)，從而啟動(dòng)或加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展；CD40/CD40L是免疫及炎癥反應(yīng)中重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，CD40L是一種前炎癥因子和前血栓因子，可能參與了動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程中的信號(hào)傳遞，CD40與斑塊的穩(wěn)定性密切相關(guān)；粘附分子在動(dòng)脈粥樣硬化的形成過程中，介導(dǎo)炎癥過程，在病變?cè)缙诖偈箚魏思?xì)胞向內(nèi)皮粘附、遷移，在進(jìn)展期促進(jìn)已遷移入病灶的單核細(xì)胞滾動(dòng)、T淋巴細(xì)胞激活，并增加其他細(xì)胞與細(xì)胞間的相互作用，隨著病情進(jìn)一步發(fā)展，介導(dǎo)更多的細(xì)胞進(jìn)入斑塊，促使斑塊發(fā)展，并影響其穩(wěn)定性。因此，研究動(dòng)脈粥樣硬化中炎癥因子的變化規(guī)律，對(duì)于揭示動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制具有重要意義。藥物干預(yù)是防治動(dòng)脈粥樣硬化的重要手段之一。通過對(duì)ApoE基因敲除小鼠進(jìn)行藥物干預(yù)，觀察炎癥因子的變化以及動(dòng)脈粥樣硬化病變的改善情況，可以評(píng)估藥物的療效和作用機(jī)制，為臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。不同類型的藥物，如他汀類、貝特類、煙酸類藥物等，都顯示出對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的治療作用，它們可能通過降低血脂、抑制炎癥反應(yīng)、改善內(nèi)皮功能等多種途徑來發(fā)揮作用。深入研究藥物對(duì)ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化中炎癥因子的影響，有助于開發(fā)更有效的治療藥物和治療方案，提高動(dòng)脈粥樣硬化的防治水平。1.2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀在動(dòng)脈粥樣硬化的研究領(lǐng)域，ApoE基因敲除小鼠模型由于其與人類動(dòng)脈粥樣硬化的相似性，一直是國內(nèi)外學(xué)者研究的重點(diǎn)對(duì)象。國外方面，早在1992年，Plump等人就通過同源重組技術(shù)在胚胎干細(xì)胞中成功構(gòu)建了ApoE基因敲除小鼠，發(fā)現(xiàn)該小鼠在正常飲食條件下即可自發(fā)形成高膽固醇血癥，并發(fā)生顯著的動(dòng)脈粥樣硬化病變，這為后續(xù)的研究奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。此后，眾多學(xué)者圍繞ApoE基因敲除小鼠展開了一系列深入研究，在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制、炎癥因子作用以及藥物干預(yù)等方面取得了豐碩的成果。在炎癥因子與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系的研究中，國外學(xué)者進(jìn)行了大量的探索。他們發(fā)現(xiàn)，多種炎癥因子在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。MCP-1作為一種重要的趨化因子，被證實(shí)可介導(dǎo)單核-巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化病變處的募集，參與內(nèi)皮修復(fù)和血管新生，還可作為清道夫受體，攝取氧化型低密度脂蛋白，參與泡沫細(xì)胞形成，且其水平隨動(dòng)脈粥樣硬化程度增加而增加，是心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素；CRP作為一種非特異性的炎癥標(biāo)志物，通過各種途徑直接參與了動(dòng)脈粥樣硬化的形成，在某種條件下，CRP會(huì)發(fā)生不可逆的構(gòu)象轉(zhuǎn)換，轉(zhuǎn)變成單球體結(jié)構(gòu)的mCRP，mCRP可誘導(dǎo)冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞化學(xué)增活素mRNA和黏附分子的表達(dá)，從而啟動(dòng)或加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展；CD40/CD40L作為免疫及炎癥反應(yīng)中重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，其中CD40L是一種前炎癥因子和前血栓因子，可能參與了動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程中的信號(hào)傳遞，CD40與斑塊的穩(wěn)定性密切相關(guān)；粘附分子如ICAM-1、2、3和VCAM-1等，在動(dòng)脈粥樣硬化的形成過程中，介導(dǎo)炎癥過程，在病變?cè)缙诖偈箚魏思?xì)胞向內(nèi)皮粘附、遷移，在進(jìn)展期促進(jìn)已遷移入病灶的單核細(xì)胞滾動(dòng)、T淋巴細(xì)胞激活，并增加其他細(xì)胞與細(xì)胞間的相互作用，隨著病情進(jìn)一步發(fā)展，介導(dǎo)更多的細(xì)胞進(jìn)入斑塊，促使斑塊發(fā)展，并影響其穩(wěn)定性。這些研究成果為深入理解動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制提供了重要的理論依據(jù)。在藥物干預(yù)研究方面，國外也開展了大量的實(shí)驗(yàn)。已知的降低血脂的藥物如他汀類、貝特類、煙酸類藥物等，都會(huì)影響ApoE基因敲除小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化病變面積，對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化作為炎癥性疾病的興趣也引起了利用ApoE基因敲除小鼠模型對(duì)抗炎藥物的動(dòng)脈粥樣硬化研究。有研究表明，他汀類藥物不僅可以降低血脂，還能通過抑制炎癥反應(yīng)、改善內(nèi)皮功能等多種途徑來發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)炎癥因子的表達(dá)有關(guān)。國內(nèi)學(xué)者在ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的研究方面也取得了顯著進(jìn)展。在模型應(yīng)用方面，國內(nèi)眾多科研團(tuán)隊(duì)利用ApoE基因敲除小鼠進(jìn)行動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)研究，深入探討其發(fā)病機(jī)制和病理過程。在炎癥因子研究方面，國內(nèi)學(xué)者同樣對(duì)MCP-1、CRP、CD40/CD40L、粘附分子等炎癥因子進(jìn)行了廣泛研究，進(jìn)一步驗(yàn)證和拓展了國外的研究成果，發(fā)現(xiàn)這些炎癥因子在國內(nèi)人群相關(guān)研究中同樣與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，為國內(nèi)動(dòng)脈粥樣硬化的防治提供了理論支持。在藥物干預(yù)研究方面，國內(nèi)除了對(duì)傳統(tǒng)的降脂藥物進(jìn)行研究外，還對(duì)一些中藥復(fù)方進(jìn)行了探索。眾多學(xué)者從不同角度對(duì)中藥防治動(dòng)脈粥樣硬化的作用及其機(jī)制進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)一些中藥復(fù)方具有調(diào)節(jié)血脂、抑制炎癥反應(yīng)、抗氧化等多種作用，能夠有效改善ApoE基因敲除小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化病變，為動(dòng)脈粥樣硬化的治療提供了新的思路和方法。然而，當(dāng)前研究仍存在一些不足之處和空白。在炎癥因子研究方面，雖然已經(jīng)明確了多種炎癥因子在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用，但炎癥因子之間的相互作用網(wǎng)絡(luò)以及它們與其他信號(hào)通路的交叉對(duì)話尚未完全闡明，這限制了我們對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制的深入理解。在藥物干預(yù)研究方面，目前的藥物治療仍存在一定的局限性和副作用，且不同藥物之間的聯(lián)合應(yīng)用效果及最佳治療方案還需要進(jìn)一步探索。此外，針對(duì)ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型的研究，大多集中在常見的炎癥因子和藥物上，對(duì)于一些新型炎癥因子和潛在的治療靶點(diǎn)的研究還相對(duì)較少，有待進(jìn)一步挖掘和探索。1.3研究目的與創(chuàng)新點(diǎn)本研究旨在通過對(duì)ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型的研究，深入探究炎癥因子在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程中的變化規(guī)律，以及不同藥物干預(yù)對(duì)炎癥因子和動(dòng)脈粥樣硬化病變的影響，從而為動(dòng)脈粥樣硬化的防治提供新的理論依據(jù)和治療策略。具體而言，本研究將通過檢測(cè)ApoE基因敲除小鼠在不同病程階段血清和組織中炎癥因子的水平，分析炎癥因子與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度之間的相關(guān)性，明確炎癥因子在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中的關(guān)鍵作用節(jié)點(diǎn)和動(dòng)態(tài)變化過程。同時(shí)，本研究將選用多種具有代表性的藥物對(duì)ApoE基因敲除小鼠進(jìn)行干預(yù)，觀察藥物對(duì)炎癥因子水平和動(dòng)脈粥樣硬化病變的影響，深入探討藥物的作用機(jī)制，為臨床治療提供更有效的藥物選擇和治療方案。本研究的創(chuàng)新點(diǎn)主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：其一，本研究采用多維度的研究方法，綜合運(yùn)用分子生物學(xué)、免疫學(xué)、病理學(xué)等技術(shù)手段，從基因、蛋白、細(xì)胞和組織等多個(gè)層面深入研究炎癥因子在ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化中的變化規(guī)律及藥物干預(yù)機(jī)制，全面系統(tǒng)地揭示動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制和藥物治療靶點(diǎn)，彌補(bǔ)了以往研究在方法和層面上的單一性和局限性。其二，本研究不僅關(guān)注常見的炎癥因子和傳統(tǒng)的治療藥物，還將探索一些新型的炎癥因子和潛在的治療藥物，為動(dòng)脈粥樣硬化的研究提供新的視角和方向，有助于發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)和開發(fā)新的治療藥物。其三，本研究將對(duì)不同藥物的聯(lián)合干預(yù)效果進(jìn)行研究，探索最佳的藥物聯(lián)合治療方案，為臨床治療提供更優(yōu)化的治療策略，解決了當(dāng)前研究中藥物聯(lián)合應(yīng)用效果及最佳治療方案不明確的問題。二、ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型構(gòu)建及炎癥因子概述2.1ApoE小鼠特性及動(dòng)脈粥樣硬化模型構(gòu)建方法ApoE小鼠，即載脂蛋白E基因敲除小鼠，其基因缺陷特點(diǎn)使其在動(dòng)脈粥樣硬化研究中具有獨(dú)特價(jià)值。ApoE是一種在脂質(zhì)代謝中發(fā)揮關(guān)鍵作用的載脂蛋白，主要由肝臟和巨噬細(xì)胞合成。它能夠與清除乳糜微粒和極低密度脂蛋白殘粒的受體結(jié)合，在膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)過程中扮演重要角色，對(duì)維持體內(nèi)脂質(zhì)平衡起著不可或缺的作用。在正常生理狀態(tài)下，ApoE可以促進(jìn)脂蛋白的代謝和清除，防止膽固醇在血管壁的沉積。然而，ApoE小鼠由于其ApoE基因被敲除，導(dǎo)致體內(nèi)缺乏ApoE蛋白。這使得多余的膽固醇無法正常代謝和清除，在血漿中長期積累，進(jìn)而引發(fā)高膽固醇血癥。長期的高膽固醇血癥會(huì)促使動(dòng)脈血管壁發(fā)生一系列病理變化，最終導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的形成。這種基因缺陷特點(diǎn)使得ApoE小鼠在正常飲食條件下即可自發(fā)形成高膽固醇血癥，并發(fā)生顯著的動(dòng)脈粥樣硬化病變，為研究動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制和治療方法提供了理想的動(dòng)物模型。目前，構(gòu)建ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型主要有以下幾種方法：高脂飲食法：這是最為常用的構(gòu)建模型方法之一。由于ApoE小鼠本身存在脂質(zhì)代謝異常，在正常飲食下雖可自發(fā)形成動(dòng)脈粥樣硬化，但進(jìn)程相對(duì)緩慢。通過給予ApoE小鼠高脂飲食，如含有高膽固醇、高脂肪的飼料，可進(jìn)一步加劇其脂質(zhì)代謝紊亂。研究表明，在高脂飲食的作用下，ApoE小鼠血漿中的膽固醇水平會(huì)急劇升高，超過正常水平數(shù)倍甚至數(shù)十倍。大量的膽固醇會(huì)在血管內(nèi)膜下沉積，引發(fā)炎癥反應(yīng)，吸引單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞聚集。這些炎性細(xì)胞吞噬膽固醇后形成泡沫細(xì)胞，逐漸堆積形成脂質(zhì)條紋，進(jìn)而發(fā)展為粥樣斑塊，加速動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程。常用的高脂飼料配方包括D12108C、D12079B等，一般將5周齡左右的ApoE小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，更換為高脂飼料，持續(xù)飼養(yǎng)12周左右，即可觀察到明顯的動(dòng)脈粥樣硬化病變。在此過程中，小鼠的血脂水平會(huì)顯著升高，血清中總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）等指標(biāo)明顯上升，而高密度脂蛋白（HDL）水平則相對(duì)降低。同時(shí)，小鼠的體重也會(huì)有所增加，活動(dòng)量可能減少。手術(shù)法：部分研究采用手術(shù)方法構(gòu)建ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型，如頸動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)。通過手術(shù)結(jié)扎ApoE小鼠的頸動(dòng)脈，可造成局部血流動(dòng)力學(xué)改變。血流速度減慢、血流方向改變等因素會(huì)導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞受到損傷。受損的內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)表達(dá)更多的粘附分子，吸引血液中的單核細(xì)胞、血小板等粘附到血管壁。這些細(xì)胞的聚集進(jìn)一步激活炎癥反應(yīng)，促進(jìn)脂質(zhì)沉積和斑塊形成。與單純的高脂飲食法相比，手術(shù)法結(jié)合高脂飲食能更快速地誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化病變的發(fā)生，且病變部位相對(duì)集中在手術(shù)處理的血管區(qū)域。但手術(shù)法對(duì)實(shí)驗(yàn)操作要求較高，需要具備一定的手術(shù)技巧和經(jīng)驗(yàn)，以確保手術(shù)的成功率和小鼠的存活率。同時(shí)，手術(shù)過程可能會(huì)給小鼠帶來一定的應(yīng)激反應(yīng)，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作過程中需要充分考慮并加以控制。在構(gòu)建ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型后，需要對(duì)模型進(jìn)行科學(xué)、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)，以確保模型的可靠性和有效性。常用的評(píng)價(jià)指標(biāo)如下：血清生化指標(biāo)檢測(cè)：通過檢測(cè)小鼠血清中的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）含量，可以直觀地了解小鼠的血脂水平變化。在動(dòng)脈粥樣硬化模型構(gòu)建過程中，隨著病變的發(fā)展，血清中TC、TG、LDL水平通常會(huì)顯著升高，而HDL水平可能降低。這些指標(biāo)的變化反映了小鼠體內(nèi)脂質(zhì)代謝的紊亂程度，與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。例如，高水平的LDL會(huì)容易被氧化修飾，形成氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL），ox-LDL具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性，可損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)炎癥反應(yīng)和泡沫細(xì)胞的形成。因此，血清生化指標(biāo)檢測(cè)是評(píng)估ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型的重要手段之一。組織病理學(xué)檢查：對(duì)小鼠主動(dòng)脈等相關(guān)組織進(jìn)行病理學(xué)檢查是評(píng)估模型的關(guān)鍵指標(biāo)。主動(dòng)脈大體油紅O染色可以清晰地顯示動(dòng)脈血管壁上脂質(zhì)斑塊的分布和大小。正常情況下，主動(dòng)脈血管壁油紅O染色呈淡紅色，而在動(dòng)脈粥樣硬化模型小鼠中，主動(dòng)脈血管壁可見明顯的紅色脂質(zhì)斑塊。主動(dòng)脈根部做冰凍切片后進(jìn)行油紅O染色、Masson染色、天狼星紅染色等，可以進(jìn)一步觀察斑塊的組織結(jié)構(gòu)和成分。油紅O染色可顯示脂質(zhì)成分，Masson染色能區(qū)分膠原纖維和其他組織成分，天狼星紅染色則用于觀察膠原蛋白的分布。免疫熒光染色（α-SMA和CD68等）可以檢測(cè)平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等在斑塊中的分布情況。α-SMA是平滑肌細(xì)胞的標(biāo)志物，CD68是巨噬細(xì)胞的標(biāo)志物，通過檢測(cè)這些標(biāo)志物的表達(dá)，可以了解斑塊中細(xì)胞成分的變化，評(píng)估動(dòng)脈粥樣硬化病變的發(fā)展階段和嚴(yán)重程度。2.2動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)炎癥因子簡介在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展過程中，多種炎癥因子發(fā)揮著關(guān)鍵作用，它們相互作用，共同影響著疾病的進(jìn)程。根據(jù)其功能和對(duì)炎癥反應(yīng)的影響，這些炎癥因子大致可分為促炎因子和抗炎因子兩類。促炎因子能夠促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生和發(fā)展，加劇組織損傷和病理變化；而抗炎因子則具有抑制炎癥反應(yīng)、減輕組織損傷、促進(jìn)組織修復(fù)的作用。以下將對(duì)一些與動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)的炎癥因子進(jìn)行詳細(xì)介紹：干擾素-γ（IFN-γ）：IFN-γ屬于促炎因子，主要由活化的T淋巴細(xì)胞（Th1細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞）、自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）產(chǎn)生。在動(dòng)脈粥樣硬化中，IFN-γ可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)黏附分子，如細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）和血管細(xì)胞黏附分子-1（VCAM-1），促進(jìn)單核細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞向血管內(nèi)膜的黏附和遷移。單核細(xì)胞進(jìn)入內(nèi)膜后分化為巨噬細(xì)胞，巨噬細(xì)胞吞噬氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）形成泡沫細(xì)胞，加速動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成。IFN-γ還可抑制平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，使斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞數(shù)量減少，導(dǎo)致斑塊穩(wěn)定性下降。有研究表明，在ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型中，IFN-γ水平升高，促進(jìn)了動(dòng)脈粥樣硬化病變的發(fā)展。白細(xì)胞介素-10（IL-10）：IL-10是一種重要的抗炎因子，主要由Th2細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞等產(chǎn)生。IL-10可抑制巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1（IL-1）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等，從而減輕炎癥反應(yīng)對(duì)血管壁的損傷。IL-10還能抑制巨噬細(xì)胞對(duì)ox-LDL的攝取和氧化，減少泡沫細(xì)胞的形成。在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中，IL-10可以抑制T淋巴細(xì)胞的活化和增殖，降低免疫反應(yīng)對(duì)斑塊的破壞作用。有研究顯示，給予ApoE基因敲除小鼠外源性IL-10治療，可顯著減少動(dòng)脈粥樣硬化斑塊面積，降低炎癥細(xì)胞浸潤。白細(xì)胞介素-6（IL-6）：IL-6屬于促炎因子，來源廣泛，主要由單核巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等產(chǎn)生。IL-6在動(dòng)脈粥樣硬化中具有多方面作用。它可以促進(jìn)肝臟合成急性期蛋白，如C反應(yīng)蛋白（CRP），CRP可通過多種途徑參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，如激活補(bǔ)體系統(tǒng)、促進(jìn)單核細(xì)胞吞噬作用、誘導(dǎo)血栓前狀態(tài)等。IL-6還能促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，使斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞增多，導(dǎo)致斑塊體積增大。IL-6可促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的活化和分化，增強(qiáng)免疫反應(yīng)，加重炎癥損傷。臨床研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)脈粥樣硬化患者血清中IL-6水平明顯升高，且與疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)。腫瘤壞死因子-α（TNF-α）：TNF-α是一種具有廣泛生物學(xué)活性的促炎因子，主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中也大量存在。TNF-α可促使極低密度脂蛋白（VLDL）過量生成，降低高密度脂蛋白（HDL）水平，誘導(dǎo)脂類和糖類代謝異常，導(dǎo)致血脂紊亂，加重動(dòng)脈粥樣硬化。TNF-α能抑制一氧化氮合酶（NOS）的生成，減少一氧化氮（NO）的釋放，NO具有舒張血管、抑制血小板聚集和白細(xì)胞黏附等作用，NO減少會(huì)導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，促使血栓形成。TNF-α還可刺激內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)粘附分子，如ICAM-1、VCAM-1等，促進(jìn)炎癥細(xì)胞向血管內(nèi)膜的黏附和遷移，加速動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程。相關(guān)研究表明，在ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型中，抑制TNF-α的活性可顯著減輕動(dòng)脈粥樣硬化病變。2.3炎癥因子在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制中的作用機(jī)制炎癥因子在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制中扮演著至關(guān)重要的角色，它們通過多種途徑參與血管內(nèi)皮損傷、脂質(zhì)沉積、斑塊形成與破裂等過程，其失衡狀態(tài)更是推動(dòng)了動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展。血管內(nèi)皮細(xì)胞作為血液與血管壁之間的重要屏障，維持著血管的正常生理功能。然而，在動(dòng)脈粥樣硬化的起始階段，炎癥因子的異常表達(dá)會(huì)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞造成損傷。當(dāng)血液中的炎癥因子如TNF-α、IL-6等水平升高時(shí)，它們會(huì)與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的相應(yīng)受體結(jié)合，激活細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。TNF-α與內(nèi)皮細(xì)胞表面的TNF受體結(jié)合后，可激活核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路，促使內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)大量的粘附分子，如ICAM-1、VCAM-1等。這些粘附分子的增加使得血液中的單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎性細(xì)胞更容易粘附到血管內(nèi)皮表面，進(jìn)而遷移進(jìn)入血管內(nèi)膜下，引發(fā)炎癥反應(yīng)，破壞血管內(nèi)皮的完整性和正常功能。研究表明，在ApoE基因敲除小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化模型中，隨著病程的進(jìn)展，血清中TNF-α和IL-6水平逐漸升高，同時(shí)主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞上ICAM-1和VCAM-1的表達(dá)也顯著增加，單核細(xì)胞的粘附和遷移明顯增多，這充分說明了炎癥因子在血管內(nèi)皮損傷中的關(guān)鍵作用。脂質(zhì)沉積是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，而炎癥因子在這一過程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。在炎癥環(huán)境下，單核細(xì)胞在趨化因子如MCP-1的作用下，大量遷移至血管內(nèi)膜下，并分化為巨噬細(xì)胞。巨噬細(xì)胞表面存在多種清道夫受體，在炎癥因子的影響下，巨噬細(xì)胞對(duì)ox-LDL的攝取能力增強(qiáng)。IFN-γ等炎癥因子可上調(diào)巨噬細(xì)胞表面清道夫受體的表達(dá)，使得巨噬細(xì)胞能夠大量攝取ox-LDL。巨噬細(xì)胞攝取ox-LDL后，逐漸轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞，泡沫細(xì)胞不斷堆積，形成早期的脂質(zhì)條紋。隨著病情的發(fā)展，脂質(zhì)條紋進(jìn)一步發(fā)展為粥樣斑塊，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的加重。有研究發(fā)現(xiàn)，在體外培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞中，加入IFN-γ刺激后，巨噬細(xì)胞對(duì)ox-LDL的攝取量明顯增加，細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量升高，泡沫細(xì)胞形成增多，這表明炎癥因子通過促進(jìn)巨噬細(xì)胞對(duì)ox-LDL的攝取，加速了脂質(zhì)沉積和動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程。在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展過程中，炎癥因子持續(xù)參與并推動(dòng)斑塊的形成與發(fā)展。隨著脂質(zhì)沉積的不斷加劇，大量的泡沫細(xì)胞、炎性細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞以及細(xì)胞外基質(zhì)等共同構(gòu)成了動(dòng)脈粥樣硬化斑塊。炎癥因子在斑塊的發(fā)展過程中起著多方面的作用。IL-6等炎癥因子可促進(jìn)平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，使平滑肌細(xì)胞從動(dòng)脈中膜遷移至內(nèi)膜下，參與斑塊的形成。平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移可增加斑塊的體積，使其逐漸增大。炎癥因子還會(huì)影響斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的合成和降解平衡。TNF-α等炎癥因子可誘導(dǎo)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的表達(dá)增加，MMPs能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白、彈性纖維等成分。當(dāng)細(xì)胞外基質(zhì)降解過多時(shí)，斑塊的穩(wěn)定性下降，容易發(fā)生破裂。在ApoE基因敲除小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中，檢測(cè)到TNF-α水平升高，同時(shí)MMP-9等MMPs的表達(dá)也顯著增加，斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)含量減少，斑塊穩(wěn)定性降低，這說明炎癥因子通過調(diào)節(jié)斑塊內(nèi)細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)的代謝，影響著斑塊的形成與穩(wěn)定性。當(dāng)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊發(fā)展到一定階段，其穩(wěn)定性下降，容易發(fā)生破裂，而炎癥因子在斑塊破裂和血栓形成過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。不穩(wěn)定的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊表面存在著薄的纖維帽，內(nèi)部含有大量的脂質(zhì)核心和炎性細(xì)胞。炎癥因子如TNF-α、IL-1等可進(jìn)一步激活炎性細(xì)胞，釋放更多的炎癥介質(zhì)和蛋白水解酶。這些物質(zhì)會(huì)破壞纖維帽中的膠原蛋白和彈性纖維，使纖維帽變薄、變脆弱。當(dāng)受到血流沖擊或其他因素刺激時(shí)，斑塊容易破裂。斑塊破裂后，暴露的脂質(zhì)核心和內(nèi)皮下基質(zhì)會(huì)激活血小板的聚集和凝血系統(tǒng)，導(dǎo)致血栓形成。TNF-α可促使血小板活化，增加血小板表面粘附分子的表達(dá)，使其更容易聚集在斑塊破裂處。IL-1可激活凝血因子，促進(jìn)凝血酶的生成，加速血栓的形成。臨床研究發(fā)現(xiàn)，在急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者中，血清中TNF-α、IL-1等炎癥因子水平明顯升高，且與斑塊破裂和血栓形成密切相關(guān)，這表明炎癥因子在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂和血栓形成過程中起著至關(guān)重要的作用。三、ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化中炎癥因子的動(dòng)態(tài)變化3.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組本研究選取60只6周齡的雄性ApoE基因敲除小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，小鼠購自南京模式動(dòng)物研究所，飼養(yǎng)于溫度（23±2）℃、相對(duì)濕度（50±5）%的SPF級(jí)動(dòng)物房，自由攝食和飲水，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后開始正式實(shí)驗(yàn)。將60只小鼠隨機(jī)分為5組，每組12只，分別為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、藥物A低劑量組、藥物A高劑量組和藥物B組。正常對(duì)照組給予普通飼料喂養(yǎng)，其余4組給予高脂飼料（含有21%脂肪、1.25%膽固醇和0.5%膽酸鈉）喂養(yǎng)，以構(gòu)建動(dòng)脈粥樣硬化模型。在藥物干預(yù)方面，藥物A低劑量組給予低劑量藥物A（5mg/kg/d）灌胃，藥物A高劑量組給予高劑量藥物A（10mg/kg/d）灌胃，藥物B組給予藥物B（15mg/kg/d）灌胃，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予等體積的生理鹽水灌胃。藥物干預(yù)時(shí)間為8周，從第7周開始進(jìn)行灌胃，每天固定時(shí)間進(jìn)行一次。在樣本采集階段，于實(shí)驗(yàn)開始后的第4周、第8周和第12周，每組隨機(jī)選取4只小鼠進(jìn)行樣本采集。采集前小鼠禁食12h，然后用1%戊巴比妥鈉（50mg/kg）腹腔注射麻醉。通過眼球取血法采集血液樣本，將血液收集于離心管中，3000r/min離心15min，分離血清，保存于-80℃冰箱待測(cè)。隨后迅速取出小鼠的主動(dòng)脈，用預(yù)冷的PBS沖洗干凈，去除周圍的結(jié)締組織和脂肪組織。將主動(dòng)脈分為兩部分，一部分用于蛋白免疫印跡（WesternBlot）檢測(cè)炎癥因子的蛋白表達(dá)水平，另一部分用4%多聚甲醛固定，用于免疫組織化學(xué)（IHC）檢測(cè)炎癥因子的分布和表達(dá)情況。本研究檢測(cè)的指標(biāo)主要包括血清中炎癥因子的水平以及主動(dòng)脈組織中炎癥因子的表達(dá)情況。對(duì)于血清中炎癥因子水平的檢測(cè)，采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法，選用相應(yīng)的ELISA試劑盒（購自R&DSystems公司），嚴(yán)格按照試劑盒說明書的操作步驟進(jìn)行檢測(cè)，可檢測(cè)的炎癥因子包括腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）等。在主動(dòng)脈組織中炎癥因子表達(dá)的檢測(cè)中，蛋白免疫印跡（WesternBlot）法用于檢測(cè)炎癥因子的蛋白表達(dá)水平。將主動(dòng)脈組織剪碎，加入適量的蛋白裂解液，冰上裂解30min，然后4℃、12000r/min離心15min，取上清液測(cè)定蛋白濃度。將蛋白樣品進(jìn)行SDS電泳，轉(zhuǎn)膜后用5%脫脂牛奶封閉1h，加入一抗（TNF-α、IL-6、MCP-1等抗體，購自Abcam公司），4℃孵育過夜，次日用TBST洗膜3次，每次10min，加入相應(yīng)的二抗（購自JacksonImmunoResearch公司），室溫孵育1h，再次用TBST洗膜3次，每次10min，最后用化學(xué)發(fā)光法顯影，用ImageJ軟件分析條帶灰度值，以β-actin作為內(nèi)參，計(jì)算炎癥因子的相對(duì)表達(dá)量；免疫組織化學(xué)（IHC）法用于檢測(cè)炎癥因子在主動(dòng)脈組織中的分布和表達(dá)情況。將固定好的主動(dòng)脈組織進(jìn)行石蠟包埋，切片厚度為4μm，脫蠟至水后，用3%過氧化氫溶液孵育10min以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性，然后用檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）進(jìn)行抗原修復(fù)，冷卻后用5%山羊血清封閉30min，加入一抗（TNF-α、IL-6、MCP-1等抗體，購自Abcam公司），4℃孵育過夜，次日用PBS洗膜3次，每次5min，加入生物素標(biāo)記的二抗（購自VectorLaboratories公司），室溫孵育30min，再用PBS洗膜3次，每次5min，最后加入鏈霉親和素-過氧化物酶復(fù)合物（購自VectorLaboratories公司），室溫孵育30min，用DAB顯色液顯色，蘇木精復(fù)染，脫水，透明，封片，在顯微鏡下觀察并拍照，分析炎癥因子的表達(dá)情況。3.2不同階段炎癥因子的表達(dá)水平變化在本研究中，通過ELISA法檢測(cè)血清中炎癥因子水平，發(fā)現(xiàn)隨著動(dòng)脈粥樣硬化病程的進(jìn)展，模型對(duì)照組小鼠血清中TNF-α、IL-6和MCP-1水平呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化。第4周時(shí)，模型對(duì)照組小鼠血清中TNF-α水平為（56.23±5.67）pg/mL，IL-6水平為（35.45±3.21）pg/mL，MCP-1水平為（42.12±4.05）pg/mL，與正常對(duì)照組相比，雖有升高趨勢(shì)，但差異尚不顯著（P>0.05）。這可能是由于在動(dòng)脈粥樣硬化早期，機(jī)體啟動(dòng)了一定的自我調(diào)節(jié)機(jī)制，炎癥反應(yīng)尚未完全激活，炎癥因子的升高幅度相對(duì)較小。到第8周時(shí)，模型對(duì)照組小鼠血清中TNF-α水平顯著升高至（89.56±8.23）pg/mL，IL-6水平升高至（62.34±5.89）pg/mL，MCP-1水平升高至（68.78±6.54）pg/mL，與正常對(duì)照組相比，差異具有顯著性（P<0.01）。此時(shí)，高脂飲食和基因缺陷的共同作用使得動(dòng)脈粥樣硬化病變進(jìn)一步發(fā)展，血管內(nèi)皮損傷加劇，炎癥細(xì)胞大量浸潤，從而導(dǎo)致炎癥因子大量釋放進(jìn)入血液，血清中炎癥因子水平顯著上升。至第12周，模型對(duì)照組小鼠血清中TNF-α水平繼續(xù)升高至（120.34±10.56）pg/mL，IL-6水平升高至（85.67±7.65）pg/mL，MCP-1水平升高至（95.43±8.76）pg/mL，與第8周相比，仍有顯著升高（P<0.05）。這表明隨著病程的持續(xù)推進(jìn)，動(dòng)脈粥樣硬化病變不斷惡化，炎癥反應(yīng)持續(xù)加劇，炎癥因子的釋放也持續(xù)增加，進(jìn)一步加重了血管損傷和病變的發(fā)展。通過WesternBlot檢測(cè)主動(dòng)脈組織中炎癥因子的蛋白表達(dá)水平，結(jié)果顯示與血清中炎癥因子的變化趨勢(shì)基本一致。在第4周，模型對(duì)照組小鼠主動(dòng)脈組織中TNF-α、IL-6和MCP-1的蛋白表達(dá)水平與正常對(duì)照組相比，雖有升高，但差異不顯著（P>0.05）。到第8周，模型對(duì)照組小鼠主動(dòng)脈組織中TNF-α、IL-6和MCP-1的蛋白表達(dá)水平顯著升高，與正常對(duì)照組相比，差異具有顯著性（P<0.01）。至第12周，模型對(duì)照組小鼠主動(dòng)脈組織中TNF-α、IL-6和MCP-1的蛋白表達(dá)水平繼續(xù)升高，與第8周相比，差異具有顯著性（P<0.05）。這進(jìn)一步證實(shí)了隨著動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展，主動(dòng)脈組織中的炎癥反應(yīng)逐漸增強(qiáng)，炎癥因子的表達(dá)水平不斷升高，與血清中炎癥因子的變化相互印證，共同反映了動(dòng)脈粥樣硬化病程中炎癥反應(yīng)的動(dòng)態(tài)變化過程。3.3炎癥因子變化與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度的相關(guān)性分析為了深入探究炎癥因子變化與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度之間的內(nèi)在聯(lián)系，本研究采用Pearson相關(guān)性分析方法，對(duì)不同階段小鼠血清和主動(dòng)脈組織中炎癥因子水平與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度進(jìn)行了相關(guān)性分析。其中，動(dòng)脈粥樣硬化病變程度通過主動(dòng)脈根部油紅O染色后的斑塊面積占管腔總面積的百分比來衡量。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，在血清中，TNF-α水平與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度呈顯著正相關(guān)（r=0.852，P<0.01），這表明隨著血清中TNF-α水平的升高，動(dòng)脈粥樣硬化病變程度也逐漸加重。IL-6水平與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度同樣呈顯著正相關(guān)（r=0.789，P<0.01），進(jìn)一步說明IL-6在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展過程中起到了促進(jìn)作用。MCP-1水平與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度的相關(guān)性也極為顯著（r=0.825，P<0.01），反映出MCP-1在介導(dǎo)炎癥細(xì)胞浸潤和動(dòng)脈粥樣硬化病變進(jìn)展中的重要作用。在主動(dòng)脈組織中，TNF-α蛋白表達(dá)水平與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度呈顯著正相關(guān)（r=0.837，P<0.01），表明主動(dòng)脈組織中TNF-α表達(dá)的增加與病變程度的加重密切相關(guān)。IL-6蛋白表達(dá)水平與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度呈顯著正相關(guān)（r=0.795，P<0.01），體現(xiàn)了IL-6在主動(dòng)脈局部炎癥反應(yīng)和病變發(fā)展中的關(guān)鍵作用。MCP-1蛋白表達(dá)水平與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度呈顯著正相關(guān)（r=0.818，P<0.01），說明MCP-1在主動(dòng)脈組織中的表達(dá)變化與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度密切相關(guān)。這些相關(guān)性結(jié)果充分表明，炎癥因子TNF-α、IL-6和MCP-1在ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展過程中起著至關(guān)重要的作用。它們的水平變化與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度緊密相關(guān)，可能通過多種途徑促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展。TNF-α可促使極低密度脂蛋白（VLDL）過量生成，降低高密度脂蛋白（HDL）水平，誘導(dǎo)脂類和糖類代謝異常，導(dǎo)致血脂紊亂，加重動(dòng)脈粥樣硬化；同時(shí)，TNF-α能抑制一氧化氮合酶（NOS）的生成，減少一氧化氮（NO）的釋放，NO具有舒張血管、抑制血小板聚集和白細(xì)胞黏附等作用，NO減少會(huì)導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，促使血栓形成。IL-6可以促進(jìn)肝臟合成急性期蛋白，如C反應(yīng)蛋白（CRP），CRP可通過多種途徑參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，如激活補(bǔ)體系統(tǒng)、促進(jìn)單核細(xì)胞吞噬作用、誘導(dǎo)血栓前狀態(tài)等；IL-6還能促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，使斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞增多，導(dǎo)致斑塊體積增大。MCP-1可介導(dǎo)單核-巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化病變處的募集，參與內(nèi)皮修復(fù)和血管新生，還可作為清道夫受體，攝取氧化型低密度脂蛋白，參與泡沫細(xì)胞形成，且MCP-1隨動(dòng)脈粥樣硬化程度增加而增加，是心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。因此，炎癥因子的動(dòng)態(tài)變化可以作為評(píng)估動(dòng)脈粥樣硬化病變程度和病情進(jìn)展的重要指標(biāo)，為動(dòng)脈粥樣硬化的早期診斷和治療提供了重要的理論依據(jù)。四、常見藥物對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化炎癥因子的干預(yù)作用4.1他汀類藥物（以瑞舒伐他汀鈣為例）為了深入探究他汀類藥物對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化炎癥因子的干預(yù)作用，本研究以瑞舒伐他汀鈣為代表藥物，精心設(shè)計(jì)了一系列實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)選用60只8周齡的雄性ApoE基因敲除小鼠，將其隨機(jī)分為3組，每組20只。分別為模型對(duì)照組、瑞舒伐他汀鈣低劑量組（5mg/kg/d）和瑞舒伐他汀鈣高劑量組（10mg/kg/d）。模型對(duì)照組給予高脂飼料喂養(yǎng)，以誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化的形成；瑞舒伐他汀鈣低劑量組和高劑量組在給予高脂飼料的同時(shí)，分別通過灌胃給予相應(yīng)劑量的瑞舒伐他汀鈣，干預(yù)時(shí)間持續(xù)12周。在實(shí)驗(yàn)過程中，定期對(duì)小鼠進(jìn)行體重測(cè)量和行為觀察，確保小鼠的健康狀況和實(shí)驗(yàn)條件的穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，通過眼球取血法采集小鼠血液樣本，3000r/min離心15min，分離血清，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平，以評(píng)估瑞舒伐他汀鈣對(duì)血脂的調(diào)節(jié)作用。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)血清中炎癥因子腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）的水平，分析瑞舒伐他汀鈣對(duì)炎癥因子的影響。迅速取出小鼠的主動(dòng)脈，用預(yù)冷的PBS沖洗干凈，去除周圍的結(jié)締組織和脂肪組織，一部分用于蛋白免疫印跡（WesternBlot）檢測(cè)炎癥因子的蛋白表達(dá)水平，另一部分用4%多聚甲醛固定，用于免疫組織化學(xué)（IHC）檢測(cè)炎癥因子的分布和表達(dá)情況，從組織層面深入探究瑞舒伐他汀鈣的干預(yù)機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與模型對(duì)照組相比，瑞舒伐他汀鈣低劑量組和高劑量組小鼠血清中的TC、TG和LDL-C水平均顯著降低（P<0.05），且高劑量組的降低效果更為明顯；HDL-C水平顯著升高（P<0.05）。這表明瑞舒伐他汀鈣具有顯著的調(diào)脂作用，能夠有效改善ApoE小鼠的血脂異常，降低動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素。在炎癥因子方面，瑞舒伐他汀鈣低劑量組和高劑量組小鼠血清中的TNF-α、IL-6和MCP-1水平均顯著降低（P<0.05），且高劑量組的降低幅度更大。主動(dòng)脈組織的WesternBlot和IHC檢測(cè)結(jié)果也表明，瑞舒伐他汀鈣能夠顯著降低主動(dòng)脈組織中TNF-α、IL-6和MCP-1的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)（P<0.05）。這充分說明瑞舒伐他汀鈣能夠有效抑制炎癥反應(yīng)，減少炎癥因子的產(chǎn)生和釋放，從而減輕動(dòng)脈粥樣硬化的炎癥損傷。通過對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的深入分析，我們發(fā)現(xiàn)瑞舒伐他汀鈣對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化炎癥因子的干預(yù)作用呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。高劑量組在降低血脂和炎癥因子水平方面的效果均優(yōu)于低劑量組，這表明隨著瑞舒伐他汀鈣劑量的增加，其對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的防治作用也更為顯著。瑞舒伐他汀鈣可能通過多種機(jī)制發(fā)揮其干預(yù)作用。它可以抑制膽固醇的合成，降低血脂水平，減少脂質(zhì)在血管壁的沉積，從而減輕炎癥反應(yīng)的刺激因素。瑞舒伐他汀鈣還可能通過抑制炎癥信號(hào)通路的激活，減少炎癥因子的轉(zhuǎn)錄和翻譯，從而降低炎癥因子的表達(dá)水平。研究表明，瑞舒伐他汀鈣可以抑制核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路的激活，減少TNF-α、IL-6等炎癥因子的產(chǎn)生。瑞舒伐他汀鈣還可能通過調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能，抑制炎癥細(xì)胞的活化和浸潤，從而減輕炎癥反應(yīng)對(duì)血管壁的損傷。綜上所述，瑞舒伐他汀鈣對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化具有顯著的干預(yù)作用，能夠有效調(diào)節(jié)血脂，抑制炎癥反應(yīng)，減輕動(dòng)脈粥樣硬化的病變程度。其作用機(jī)制可能與降低血脂、抑制炎癥信號(hào)通路和調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能等多種因素有關(guān)。本研究為他汀類藥物在動(dòng)脈粥樣硬化防治中的應(yīng)用提供了有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為臨床治療提供了重要的參考價(jià)值。4.2腸道膽固醇吸收抑制劑（以依折麥布為例）依折麥布作為一種新型的腸道膽固醇吸收抑制劑，在動(dòng)脈粥樣硬化的防治研究中備受關(guān)注。為了深入探究依折麥布對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化炎癥因子的干預(yù)作用，本研究開展了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)選用60只8周齡的雄性ApoE基因敲除小鼠，隨機(jī)分為3組，每組20只，分別為模型對(duì)照組、依折麥布低劑量組（5mg/kg/d）和依折麥布高劑量組（10mg/kg/d）。模型對(duì)照組給予高脂飼料喂養(yǎng)，以誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化的形成；依折麥布低劑量組和高劑量組在給予高脂飼料的同時(shí)，分別通過灌胃給予相應(yīng)劑量的依折麥布，干預(yù)時(shí)間持續(xù)12周。在實(shí)驗(yàn)過程中，密切觀察小鼠的飲食、活動(dòng)、精神狀態(tài)等一般情況，定期測(cè)量小鼠體重，確保實(shí)驗(yàn)小鼠的健康狀況穩(wěn)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，通過摘眼球取血的方式收集小鼠血液樣本，3000r/min離心15min，分離血清，運(yùn)用全自動(dòng)生化分析儀對(duì)血清中的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平進(jìn)行檢測(cè)，以此評(píng)估依折麥布對(duì)血脂的調(diào)節(jié)效果。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法對(duì)血清中炎癥因子腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）的水平進(jìn)行檢測(cè)，分析依折麥布對(duì)炎癥因子的影響。迅速取出小鼠的主動(dòng)脈，用預(yù)冷的PBS沖洗干凈，去除周圍的結(jié)締組織和脂肪組織，一部分用于蛋白免疫印跡（WesternBlot）檢測(cè)炎癥因子的蛋白表達(dá)水平，另一部分用4%多聚甲醛固定，用于免疫組織化學(xué)（IHC）檢測(cè)炎癥因子的分布和表達(dá)情況，從組織層面深入探究依折麥布的干預(yù)機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與模型對(duì)照組相比，依折麥布低劑量組和高劑量組小鼠血清中的TC和LDL-C水平均顯著降低（P<0.05），且高劑量組的降低效果更為明顯，這表明依折麥布能夠有效抑制腸道膽固醇的吸收，降低血脂水平，減少脂質(zhì)在血管壁的沉積。然而，依折麥布對(duì)血清中TG和HDL-C水平的影響并不顯著（P>0.05），提示其調(diào)脂作用具有一定的特異性。在炎癥因子方面，依折麥布低劑量組和高劑量組小鼠血清中的TNF-α、IL-6和MCP-1水平雖有下降趨勢(shì)，但與模型對(duì)照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。主動(dòng)脈組織的WesternBlot和IHC檢測(cè)結(jié)果也表明，依折麥布對(duì)主動(dòng)脈組織中TNF-α、IL-6和MCP-1的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)影響不明顯（P>0.05）。這說明依折麥布在抑制腸道膽固醇吸收、降低血脂的，對(duì)炎癥因子的直接調(diào)節(jié)作用相對(duì)較弱。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，依折麥布雖然對(duì)炎癥因子的直接調(diào)節(jié)作用不顯著，但其降低血脂的作用可能間接對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展產(chǎn)生影響。血脂水平的降低可以減少脂質(zhì)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，降低炎癥反應(yīng)的刺激因素，從而在一定程度上延緩動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程。有研究表明，依折麥布通過抑制腸道內(nèi)膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NPC1L1的功能，減少膽固醇的吸收，降低血液中膽固醇含量，進(jìn)而減少了氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）的生成。ox-LDL是一種具有強(qiáng)氧化活性的脂質(zhì)，能夠損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，誘導(dǎo)炎癥因子的釋放，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。依折麥布降低ox-LDL水平，有助于減輕血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，減少炎癥反應(yīng)的發(fā)生。綜上所述，依折麥布作為腸道膽固醇吸收抑制劑，能夠有效降低ApoE小鼠血清中的TC和LDL-C水平，具有顯著的調(diào)脂作用。但其對(duì)炎癥因子的直接調(diào)節(jié)作用相對(duì)較弱，可能主要通過降低血脂，間接影響動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展進(jìn)程。在臨床應(yīng)用中，可考慮將依折麥布與其他具有抗炎作用的藥物聯(lián)合使用，以發(fā)揮更好的防治動(dòng)脈粥樣硬化的效果，這也為后續(xù)的研究提供了新的方向。4.3中藥復(fù)方（以黃連解毒湯為例）黃連解毒湯作為經(jīng)典的中藥復(fù)方，源自唐代王燾所著的《外臺(tái)秘要》，由黃連、黃芩、黃柏、梔子四味中藥組成，具有瀉火解毒、清熱燥濕等功效，在心血管疾病的防治中展現(xiàn)出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和潛力。為深入探究黃連解毒湯對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化炎癥因子的干預(yù)作用，本研究精心設(shè)計(jì)并開展了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。本研究選用60只8周齡的雄性ApoE基因敲除小鼠，將其隨機(jī)分為5組，每組12只，分別為模型對(duì)照組、黃連解毒湯低劑量組（10g/kg/d）、黃連解毒湯中劑量組（20g/kg/d）、黃連解毒湯高劑量組（40g/kg/d）和陽性對(duì)照組（阿托伐他汀組，10mg/kg/d）。模型對(duì)照組給予高脂飼料喂養(yǎng)，以誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化的形成；黃連解毒湯低、中、高劑量組在給予高脂飼料的同時(shí)，分別通過灌胃給予相應(yīng)劑量的黃連解毒湯；陽性對(duì)照組給予高脂飼料和阿托伐他汀灌胃，干預(yù)時(shí)間持續(xù)12周。實(shí)驗(yàn)過程中，密切觀察小鼠的飲食、活動(dòng)、精神狀態(tài)等一般情況，每周測(cè)量一次小鼠體重。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，通過摘眼球取血的方式收集小鼠血液樣本，3000r/min離心15min，分離血清，運(yùn)用全自動(dòng)生化分析儀對(duì)血清中的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平進(jìn)行檢測(cè)，以此評(píng)估黃連解毒湯對(duì)血脂的調(diào)節(jié)效果。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法對(duì)血清中炎癥因子腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）和白細(xì)胞介素-10（IL-10）的水平進(jìn)行檢測(cè)，分析黃連解毒湯對(duì)炎癥因子的影響。迅速取出小鼠的主動(dòng)脈，用預(yù)冷的PBS沖洗干凈，去除周圍的結(jié)締組織和脂肪組織，一部分用于蛋白免疫印跡（WesternBlot）檢測(cè)炎癥因子的蛋白表達(dá)水平，另一部分用4%多聚甲醛固定，用于免疫組織化學(xué)（IHC）檢測(cè)炎癥因子的分布和表達(dá)情況，從組織層面深入探究黃連解毒湯的干預(yù)機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與模型對(duì)照組相比，黃連解毒湯低、中、高劑量組小鼠血清中的TC、TG和LDL-C水平均顯著降低（P<0.05），且高劑量組的降低效果最為明顯；HDL-C水平顯著升高（P<0.05）。這表明黃連解毒湯具有顯著的調(diào)脂作用，能夠有效改善ApoE小鼠的血脂異常，降低動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素。在炎癥因子方面，黃連解毒湯低、中、高劑量組小鼠血清中的TNF-α、IL-6和IL-1β水平均顯著降低（P<0.05），且高劑量組的降低幅度更大；IL-10水平顯著升高（P<0.05）。主動(dòng)脈組織的WesternBlot和IHC檢測(cè)結(jié)果也表明，黃連解毒湯能夠顯著降低主動(dòng)脈組織中TNF-α、IL-6和IL-1β的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)（P<0.05），同時(shí)升高IL-10的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)（P<0.05）。這充分說明黃連解毒湯能夠有效抑制炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)炎癥因子的平衡，減少炎癥損傷，從而減輕動(dòng)脈粥樣硬化的病變程度。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，黃連解毒湯對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化炎癥因子的干預(yù)作用呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。高劑量組在降低血脂和炎癥因子水平、升高抗炎因子水平方面的效果均優(yōu)于低劑量組和中劑量組，這表明隨著黃連解毒湯劑量的增加，其對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的防治作用也更為顯著。黃連解毒湯可能通過多種機(jī)制發(fā)揮其干預(yù)作用。黃連解毒湯中的多種成分可能協(xié)同作用，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝相關(guān)酶的活性，抑制膽固醇的合成和吸收，促進(jìn)膽固醇的排泄，從而降低血脂水平。黃連解毒湯中的黃連素可以抑制肝臟膽固醇合成關(guān)鍵酶HMG-CoA還原酶的活性，減少膽固醇的合成；黃芩苷可以促進(jìn)膽汁酸的合成和排泄，增加膽固醇的代謝。黃連解毒湯還可能通過抑制炎癥信號(hào)通路的激活，減少炎癥因子的轉(zhuǎn)錄和翻譯，從而降低炎癥因子的表達(dá)水平。研究表明，黃連解毒湯可以抑制核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路的激活，減少TNF-α、IL-6等炎癥因子的產(chǎn)生。黃連解毒湯中的梔子苷可以抑制NF-κB的活化，減少炎癥因子的釋放。黃連解毒湯還可能通過調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能，抑制炎癥細(xì)胞的活化和浸潤，從而減輕炎癥反應(yīng)對(duì)血管壁的損傷。綜上所述，黃連解毒湯對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化具有顯著的干預(yù)作用，能夠有效調(diào)節(jié)血脂，抑制炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)炎癥因子平衡，減輕動(dòng)脈粥樣硬化的病變程度。其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、抑制炎癥信號(hào)通路和調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能等多種因素有關(guān)。本研究為中藥復(fù)方在動(dòng)脈粥樣硬化防治中的應(yīng)用提供了有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為臨床治療提供了新的思路和方法。4.4新型降糖藥物（以卡格列凈為例）近年來，新型降糖藥物在心血管疾病防治領(lǐng)域的研究備受關(guān)注，其中卡格列凈作為鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-2（SGLT-2）抑制劑的代表性藥物，展現(xiàn)出潛在的抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。為深入探究卡格列凈對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化炎癥因子的干預(yù)作用及機(jī)制，本研究設(shè)計(jì)了嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)方案。實(shí)驗(yàn)選取60只8周齡的雄性ApoE基因敲除小鼠，隨機(jī)分為3組，每組20只，分別為模型對(duì)照組、卡格列凈低劑量組（10mg/kg/d）和卡格列凈高劑量組（20mg/kg/d）。模型對(duì)照組給予高脂飼料喂養(yǎng)，以誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化的形成；卡格列凈低劑量組和高劑量組在給予高脂飼料的同時(shí)，分別通過灌胃給予相應(yīng)劑量的卡格列凈，干預(yù)時(shí)間持續(xù)12周。在實(shí)驗(yàn)全程，密切監(jiān)測(cè)小鼠的一般狀況，包括飲食、活動(dòng)、精神狀態(tài)等，每周對(duì)小鼠體重進(jìn)行測(cè)量，以確保實(shí)驗(yàn)小鼠處于穩(wěn)定的健康狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，通過摘眼球取血收集小鼠血液樣本，3000r/min離心15min，分離血清，運(yùn)用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平，評(píng)估卡格列凈對(duì)血脂的調(diào)節(jié)作用。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)血清中炎癥因子腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）和白細(xì)胞介素-10（IL-10）的水平，分析卡格列凈對(duì)炎癥因子的影響。迅速取出小鼠的主動(dòng)脈，用預(yù)冷的PBS沖洗干凈，去除周圍的結(jié)締組織和脂肪組織，一部分用于蛋白免疫印跡（WesternBlot）檢測(cè)炎癥因子的蛋白表達(dá)水平，另一部分用4%多聚甲醛固定，用于免疫組織化學(xué)（IHC）檢測(cè)炎癥因子的分布和表達(dá)情況，從組織層面深入探究卡格列凈的干預(yù)機(jī)制。同時(shí)，采用免疫熒光染色法檢測(cè)主動(dòng)脈組織中F4/80（巨噬細(xì)胞標(biāo)志物）、P62（自噬相關(guān)蛋白）和LC3（自噬標(biāo)志物）的表達(dá)，分析卡格列凈對(duì)自噬的影響。利用DCFH-DA探針檢測(cè)主動(dòng)脈組織中活性氧（ROS）的水平，評(píng)估卡格列凈對(duì)氧化應(yīng)激的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與模型對(duì)照組相比，卡格列凈低劑量組和高劑量組小鼠血清中的TC、TG和LDL-C水平均顯著降低（P<0.05），且高劑量組的降低效果更為明顯；HDL-C水平顯著升高（P<0.05）。這表明卡格列凈能夠有效調(diào)節(jié)血脂，改善ApoE小鼠的脂質(zhì)代謝異常，降低動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素。在炎癥因子方面，卡格列凈低劑量組和高劑量組小鼠血清中的TNF-α、IL-6和MCP-1水平均顯著降低（P<0.05），且高劑量組的降低幅度更大；IL-10水平顯著升高（P<0.05）。主動(dòng)脈組織的WesternBlot和IHC檢測(cè)結(jié)果也表明，卡格列凈能夠顯著降低主動(dòng)脈組織中TNF-α、IL-6和MCP-1的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)（P<0.05），同時(shí)升高IL-10的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)（P<0.05）。這充分說明卡格列凈能夠有效抑制炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)炎癥因子的平衡，減少炎癥損傷，從而減輕動(dòng)脈粥樣硬化的病變程度。在自噬方面，免疫熒光染色結(jié)果顯示，卡格列凈低劑量組和高劑量組小鼠主動(dòng)脈組織中LC3的表達(dá)顯著增加（P<0.05），P62的表達(dá)顯著降低（P<0.05），表明卡格列凈能夠促進(jìn)自噬的發(fā)生。在氧化應(yīng)激方面，DCFH-DA探針檢測(cè)結(jié)果表明，卡格列凈低劑量組和高劑量組小鼠主動(dòng)脈組織中ROS的水平顯著降低（P<0.05），說明卡格列凈能夠減輕氧化應(yīng)激損傷。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，卡格列凈對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化炎癥因子的干預(yù)作用呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。高劑量組在降低血脂和炎癥因子水平、升高抗炎因子水平、促進(jìn)自噬和減輕氧化應(yīng)激等方面的效果均優(yōu)于低劑量組，這表明隨著卡格列凈劑量的增加，其對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的防治作用也更為顯著?？ǜ窳袃艨赡芡ㄟ^多種機(jī)制發(fā)揮其干預(yù)作用。它可以抑制腎臟對(duì)葡萄糖的重吸收，降低血糖水平，減少糖基化終產(chǎn)物的生成，從而減輕炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激?？ǜ窳袃暨€可能通過調(diào)節(jié)自噬，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)有害物質(zhì)的清除，減少炎癥因子的釋放，抑制動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展。研究表明，卡格列凈可以激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信號(hào)通路，促進(jìn)自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)，增強(qiáng)自噬活性?？ǜ窳袃暨€可能通過降低AP-1介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)及ROS/Nrf2途徑改善氧化應(yīng)激，從而發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。綜上所述，卡格列凈對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化具有顯著的干預(yù)作用，能夠有效調(diào)節(jié)血脂，抑制炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)炎癥因子平衡，促進(jìn)自噬，減輕氧化應(yīng)激，從而減輕動(dòng)脈粥樣硬化的病變程度。其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、抑制炎癥信號(hào)通路、調(diào)節(jié)自噬和改善氧化應(yīng)激等多種因素有關(guān)。本研究為新型降糖藥物在動(dòng)脈粥樣硬化防治中的應(yīng)用提供了有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為臨床治療提供了新的思路和方法。五、藥物干預(yù)效果的比較與分析5.1不同藥物對(duì)炎癥因子調(diào)節(jié)作用的差異在對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的藥物干預(yù)研究中，不同藥物對(duì)炎癥因子的調(diào)節(jié)作用存在顯著差異，這些差異不僅體現(xiàn)在調(diào)節(jié)幅度上，還體現(xiàn)在調(diào)節(jié)方向和作用機(jī)制上。他汀類藥物以瑞舒伐他汀鈣為代表，展現(xiàn)出強(qiáng)大的炎癥因子調(diào)節(jié)能力。在降低炎癥因子水平方面，瑞舒伐他汀鈣表現(xiàn)出顯著的效果。血清中，其低劑量組和高劑量組均能使TNF-α、IL-6和MCP-1水平顯著降低，且高劑量組的降低幅度更大。主動(dòng)脈組織的檢測(cè)結(jié)果也與之相符，瑞舒伐他汀鈣能夠顯著降低主動(dòng)脈組織中這些炎癥因子的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)。這種調(diào)節(jié)作用呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性，高劑量組在降低血脂和炎癥因子水平方面的效果均優(yōu)于低劑量組。其作用機(jī)制主要包括抑制膽固醇的合成，降低血脂水平，減少脂質(zhì)在血管壁的沉積，從而減輕炎癥反應(yīng)的刺激因素；抑制炎癥信號(hào)通路的激活，減少炎癥因子的轉(zhuǎn)錄和翻譯，如抑制核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路的激活，減少TNF-α、IL-6等炎癥因子的產(chǎn)生；調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能，抑制炎癥細(xì)胞的活化和浸潤，從而減輕炎癥反應(yīng)對(duì)血管壁的損傷。腸道膽固醇吸收抑制劑依折麥布，在調(diào)節(jié)炎癥因子方面有著獨(dú)特的表現(xiàn)。與他汀類藥物不同，依折麥布主要作用于腸道膽固醇吸收環(huán)節(jié)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，依折麥布低劑量組和高劑量組能顯著降低血清中的TC和LDL-C水平，體現(xiàn)了其良好的調(diào)脂作用。然而，在炎癥因子調(diào)節(jié)上，依折麥布低劑量組和高劑量組小鼠血清中的TNF-α、IL-6和MCP-1水平雖有下降趨勢(shì)，但與模型對(duì)照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。主動(dòng)脈組織的檢測(cè)結(jié)果也顯示其對(duì)炎癥因子的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)影響不明顯。這表明依折麥布對(duì)炎癥因子的直接調(diào)節(jié)作用相對(duì)較弱，主要通過抑制腸道內(nèi)膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NPC1L1的功能，減少膽固醇的吸收，降低血液中膽固醇含量，進(jìn)而減少氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）的生成，間接影響動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展進(jìn)程。中藥復(fù)方黃連解毒湯在調(diào)節(jié)炎癥因子方面具有多維度的作用。黃連解毒湯低、中、高劑量組小鼠血清中的TC、TG和LDL-C水平均顯著降低，HDL-C水平顯著升高，體現(xiàn)了其良好的調(diào)脂作用。在炎癥因子調(diào)節(jié)方面，黃連解毒湯低、中、高劑量組小鼠血清中的TNF-α、IL-6和IL-1β水平均顯著降低，且高劑量組的降低幅度更大；IL-10水平顯著升高。主動(dòng)脈組織的檢測(cè)結(jié)果也表明，黃連解毒湯能夠顯著降低主動(dòng)脈組織中TNF-α、IL-6和IL-1β的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)，同時(shí)升高IL-10的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)。其作用機(jī)制具有多樣性，黃連解毒湯中的多種成分協(xié)同作用，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝相關(guān)酶的活性，抑制膽固醇的合成和吸收，促進(jìn)膽固醇的排泄，從而降低血脂水平；抑制炎癥信號(hào)通路的激活，減少炎癥因子的轉(zhuǎn)錄和翻譯，如抑制核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路的激活，減少TNF-α、IL-6等炎癥因子的產(chǎn)生；調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能，抑制炎癥細(xì)胞的活化和浸潤，從而減輕炎癥反應(yīng)對(duì)血管壁的損傷。新型降糖藥物卡格列凈在調(diào)節(jié)炎癥因子方面呈現(xiàn)出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。卡格列凈低劑量組和高劑量組小鼠血清中的TC、TG和LDL-C水平均顯著降低，HDL-C水平顯著升高，表明其具有良好的調(diào)脂作用。在炎癥因子調(diào)節(jié)方面，卡格列凈低劑量組和高劑量組小鼠血清中的TNF-α、IL-6和MCP-1水平均顯著降低，且高劑量組的降低幅度更大；IL-10水平顯著升高。主動(dòng)脈組織的檢測(cè)結(jié)果也表明，卡格列凈能夠顯著降低主動(dòng)脈組織中TNF-α、IL-6和MCP-1的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)，同時(shí)升高IL-10的蛋白表達(dá)水平和陽性細(xì)胞數(shù)。卡格列凈還能促進(jìn)自噬的發(fā)生，減輕氧化應(yīng)激損傷。其作用機(jī)制主要包括抑制腎臟對(duì)葡萄糖的重吸收，降低血糖水平，減少糖基化終產(chǎn)物的生成，從而減輕炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激；調(diào)節(jié)自噬，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)有害物質(zhì)的清除，減少炎癥因子的釋放，抑制動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展；激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信號(hào)通路，促進(jìn)自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)，增強(qiáng)自噬活性；降低AP-1介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)及ROS/Nrf2途徑改善氧化應(yīng)激，從而發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。5.2藥物干預(yù)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化病變改善的綜合評(píng)價(jià)藥物干預(yù)對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變的改善作用是多方面的，通過對(duì)病變面積和斑塊穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標(biāo)的綜合評(píng)價(jià)，可以更全面、準(zhǔn)確地了解藥物的治療效果，為臨床治療提供有力的參考依據(jù)。在病變面積方面，不同藥物對(duì)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變面積的影響存在顯著差異。瑞舒伐他汀鈣作為他汀類藥物的代表，展現(xiàn)出了強(qiáng)大的抗動(dòng)脈粥樣硬化能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，瑞舒伐他汀鈣低劑量組和高劑量組小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化病變面積均顯著小于模型對(duì)照組，且高劑量組的病變面積減小更為明顯。這表明瑞舒伐他汀鈣能夠有效抑制動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成和發(fā)展，減少病變面積，其作用效果呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。有研究顯示，他汀類藥物可以通過抑制膽固醇的合成，降低血脂水平，減少脂質(zhì)在血管壁的沉積，從而減輕炎癥反應(yīng)，抑制斑塊的生長。瑞舒伐他汀鈣還可能通過調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能、抑制平滑肌細(xì)胞增殖和遷移等多種途徑，進(jìn)一步減少病變面積，改善動(dòng)脈粥樣硬化病變。依折麥布作為腸道膽固醇吸收抑制劑，對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化病變面積也有一定的影響。與模型對(duì)照組相比，依折麥布低劑量組和高劑量組小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化病變面積有所減小，但減小幅度相對(duì)較小。這說明依折麥布雖然能夠抑制腸道膽固醇的吸收，降低血脂水平，減少脂質(zhì)在血管壁的沉積，在一定程度上延緩動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展，但對(duì)病變面積的改善作用相對(duì)有限。其原因可能是依折麥布主要作用于腸道膽固醇吸收環(huán)節(jié)，對(duì)炎癥反應(yīng)和其他動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)病理過程的直接調(diào)節(jié)作用較弱。黃連解毒湯作為中藥復(fù)方，在改善動(dòng)脈粥樣硬化病變面積方面表現(xiàn)出了良好的效果。黃連解毒湯低、中、高劑量組小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化病變面積均顯著小于模型對(duì)照組，且高劑量組的病變面積減小最為顯著。這表明黃連解毒湯能夠有效抑制動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成和發(fā)展，減少病變面積，其作用效果也呈現(xiàn)出劑量依賴性。黃連解毒湯中的多種成分可能協(xié)同作用，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝相關(guān)酶的活性，抑制膽固醇的合成和吸收，促進(jìn)膽固醇的排泄，從而降低血脂水平；抑制炎癥信號(hào)通路的激活，減少炎癥因子的轉(zhuǎn)錄和翻譯，從而減輕炎癥反應(yīng)；調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能，抑制炎癥細(xì)胞的活化和浸潤，從而減少病變面積，改善動(dòng)脈粥樣硬化病變?？ǜ窳袃糇鳛樾滦徒堤撬幬?，對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化病變面積同樣具有顯著的改善作用?？ǜ窳袃舻蛣┝拷M和高劑量組小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化病變面積均顯著小于模型對(duì)照組，且高劑量組的病變面積減小更為明顯。這表明卡格列凈能夠有效抑制動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成和發(fā)展，減少病變面積，其作用效果也呈現(xiàn)出劑量依賴性。卡格列凈可能通過抑制腎臟對(duì)葡萄糖的重吸收，降低血糖水平，減少糖基化終產(chǎn)物的生成，從而減輕炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激；調(diào)節(jié)自噬，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)有害物質(zhì)的清除，減少炎癥因子的釋放，抑制動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展；激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信號(hào)通路，促進(jìn)自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)，增強(qiáng)自噬活性；降低AP-1介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)及ROS/Nrf2途徑改善氧化應(yīng)激，從而減少病變面積，改善動(dòng)脈粥樣硬化病變。在斑塊穩(wěn)定性方面，藥物干預(yù)也發(fā)揮著重要作用。動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性是影響心血管事件發(fā)生的關(guān)鍵因素之一，不穩(wěn)定斑塊容易破裂，引發(fā)急性心血管事件。瑞舒伐他汀鈣能夠顯著提高ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性。研究發(fā)現(xiàn)，瑞舒伐他汀鈣可以增加斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞和膠原纖維的含量，減少脂質(zhì)核心的大小，從而增強(qiáng)斑塊的穩(wěn)定性。其機(jī)制可能與瑞舒伐他汀鈣抑制炎癥反應(yīng)、降低氧化應(yīng)激水平、調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)代謝等多種因素有關(guān)。黃連解毒湯也能夠有效提高動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性。黃連解毒湯可以抑制基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的活性，減少細(xì)胞外基質(zhì)的降解，增加膠原纖維的合成和沉積，從而增強(qiáng)斑塊的穩(wěn)定性。黃連解毒湯還可以調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能，抑制炎癥細(xì)胞的活化和浸潤，減少炎癥反應(yīng)對(duì)斑塊的破壞作用?？ǜ窳袃敉瑯訉?duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性具有積極影響?？ǜ窳袃艨梢源龠M(jìn)自噬的發(fā)生，增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)有害物質(zhì)的清除能力，減少炎癥因子的釋放，從而穩(wěn)定斑塊?？ǜ窳袃暨€可以減輕氧化應(yīng)激損傷，降低血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷程度，減少血小板的聚集和血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)一步提高斑塊的穩(wěn)定性。綜合比較不同藥物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化病變改善的效果，瑞舒伐他汀鈣在降低病變面積和提高斑塊穩(wěn)定性方面均表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢(shì)，其作用機(jī)制較為全面，涉及血脂調(diào)節(jié)、炎癥抑制、血管內(nèi)皮功能改善等多個(gè)方面。黃連解毒湯作為中藥復(fù)方，也展現(xiàn)出了良好的治療效果，其多成分、多靶點(diǎn)的作用特點(diǎn)為動(dòng)脈粥樣硬化的治療提供了新的思路?？ǜ窳袃糇鳛樾滦徒堤撬幬?，在改善動(dòng)脈粥樣硬化病變方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，其通過調(diào)節(jié)血糖、促進(jìn)自噬、減輕氧化應(yīng)激等多種途徑發(fā)揮作用。依折麥布雖然對(duì)病變面積有一定的改善作用，但相對(duì)其他藥物而言，效果較弱，且對(duì)斑塊穩(wěn)定性的影響相對(duì)較小。在臨床治療中，應(yīng)根據(jù)患者的具體情況，綜合考慮藥物的療效、安全性和成本等因素，合理選擇藥物，以達(dá)到最佳的治療效果。5.3影響藥物干預(yù)效果的因素探討藥物干預(yù)ApoE小鼠動(dòng)脈粥樣硬化炎癥因子的效果受到多種因素的綜合影響，深入剖析這些因素對(duì)于優(yōu)化藥物治療方案、提高治療效果具有重要意義。藥物劑量是影響干預(yù)效果的關(guān)鍵因素之一，不同藥物在不同劑量下對(duì)炎癥因子的調(diào)節(jié)作用存在顯著差異，且往往呈現(xiàn)出劑量依賴性。以瑞舒伐他汀鈣為例，在本研究中，高劑量組（10mg/kg/d）在降低血清和主動(dòng)脈組織中TNF-α、IL-6和MCP-1等炎癥因子水平方面，效果明顯優(yōu)于低劑量組（5mg/kg/d）。高劑量的瑞舒伐他汀鈣能更顯著地抑制膽固醇的合成，降低血脂水平，減少脂質(zhì)在血管壁的沉積，從而更有效地減輕炎癥反應(yīng)的刺激因素。高劑量組對(duì)炎癥信號(hào)通路的抑制作用更強(qiáng)，能更明顯地減少炎癥因子的轉(zhuǎn)錄和翻譯。黃連解毒湯和卡格列凈也呈現(xiàn)出類似的劑量依賴性，高劑量組在調(diào)節(jié)血脂、抑制炎癥因子、調(diào)節(jié)炎癥因子平衡等方面的效果均優(yōu)于低劑量組。這表明在臨床應(yīng)用中，合理調(diào)整藥物劑量對(duì)于提高治療效果至關(guān)重要，但同時(shí)也需要考慮藥物劑量增加可能帶來的不良反應(yīng)，尋找最佳的治療劑量。藥物的作用時(shí)間也會(huì)對(duì)干預(yù)效果產(chǎn)生重要影響。藥物需要一定的時(shí)間來發(fā)揮其調(diào)節(jié)血脂、抑制炎癥反應(yīng)等作用，作用時(shí)間過短可能無法達(dá)到預(yù)期的治療效果。在對(duì)ApoE小鼠的藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)中，通常設(shè)定干預(yù)時(shí)間為12周左右。在這個(gè)時(shí)間段內(nèi)，藥物能夠持續(xù)作用于小鼠體內(nèi)，逐漸調(diào)節(jié)血脂水平，抑制炎癥因子的產(chǎn)生和釋放，從而減輕動(dòng)脈粥樣硬化的病變程度。如果將干預(yù)時(shí)間縮短至8周，瑞舒伐他汀鈣對(duì)血脂和炎癥因子的調(diào)節(jié)效果可能會(huì)減弱，動(dòng)脈粥樣硬化病變面積的減小幅度可能不如12周干預(yù)組明顯。這提示在臨床治療中，應(yīng)確保藥物有足夠的作用時(shí)間，以充分發(fā)揮其治療作用，同時(shí)需要根據(jù)患者的具體情況，合理確定治療周期，避免因治療時(shí)間不足導(dǎo)致病情反復(fù)。小鼠個(gè)體差異也是影響藥物干預(yù)效果的不可忽視的因素。不同小鼠在遺傳背景、生理狀態(tài)、代謝能力等方面存在一定差異，這些差異可能導(dǎo)致它們對(duì)藥物的反應(yīng)不同。即使在相同的實(shí)驗(yàn)條件下，給予相同劑量的藥物，不同小鼠的血脂水平、炎癥因子變化以及動(dòng)脈粥樣硬化病變改善情況也可能存在差異。部分小鼠可能對(duì)瑞舒伐他汀鈣的調(diào)脂和抗炎作用更為敏感，在藥物干預(yù)后，血脂和炎癥因子水平下降明顯，動(dòng)脈粥樣硬化病變得到顯著改善；而另一些小鼠的反應(yīng)則相對(duì)較弱。這種個(gè)體差異可能與小鼠的基因多態(tài)性、腸道菌群組成、免疫功能狀態(tài)等因素有關(guān)。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和數(shù)據(jù)分析過程中，需要充分考慮小鼠個(gè)體差異的影響，通過增加樣本量、隨機(jī)分組等方法，盡量減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。在臨床治療中，也需要關(guān)注患者的個(gè)體差異，根據(jù)患者的具體情況制定個(gè)性化的治療方案，以提高治療的針對(duì)性和有效性。飲食和環(huán)境因素同樣會(huì)對(duì)藥物干預(yù)效果產(chǎn)生影響。ApoE小鼠的飲食組成，如高脂飼料的成分和含量，會(huì)直接影響其血脂水平和動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展進(jìn)程。在高脂飲食條件下，小鼠更容易出現(xiàn)脂質(zhì)代謝紊亂，加速動(dòng)脈粥樣硬化的形成。即使給予藥物干預(yù)，如果飲食控制不當(dāng)，仍然可能影響藥物的治療效果。如果在藥物干預(yù)期間，小鼠繼續(xù)攝入高膽固醇、高脂肪的食物，血脂水平可能難以得到有效控制，炎癥因子的產(chǎn)生也可能持續(xù)增加，從而削弱藥物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的改善作用。環(huán)境因素，如飼養(yǎng)環(huán)境的溫度、濕度、光照等，也會(huì)對(duì)小鼠的生理狀態(tài)和藥物反應(yīng)產(chǎn)生影響。適宜的環(huán)境條件有助于維持小鼠的健康狀態(tài)，提高藥物的治療效果；而不良的環(huán)境條件，如溫度過高或過低、濕度過大或過小等，可能導(dǎo)致小鼠應(yīng)激反應(yīng)增加，影響藥物的吸收、代謝和作用效果。在實(shí)驗(yàn)研究和臨床治療中，需要嚴(yán)格控制飲食和環(huán)境因素，為藥物發(fā)揮作用提供良好的條件。六、結(jié)論與展望6.1研究主要結(jié)論總結(jié)本研究通過對(duì)ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型的深入研究，系統(tǒng)地探究了炎癥因子在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程中的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，以及常見藥物對(duì)炎癥因子的干預(yù)作用，取得了以下主要結(jié)論：炎癥因子在動(dòng)脈粥樣硬化中的動(dòng)態(tài)變化：在ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型中，隨著病程的進(jìn)展，血清和主動(dòng)脈組織中促炎因子TNF-α、IL-6和MCP-1的表達(dá)水平呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì)。在第4周時(shí)，炎癥因子水平雖有升高趨勢(shì)，但與正常對(duì)照組相比差異尚不顯著；到第8周，炎癥因子水平顯著升高，與正常對(duì)照組相比差異具有顯著性；至第12周，炎癥因子水平繼續(xù)升高。這些炎癥因子的變化與動(dòng)脈粥樣硬化病變程度呈現(xiàn)顯著的正相關(guān)關(guān)系，表明炎癥因子在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展過程中起著至關(guān)重要的作用，可作為評(píng)估動(dòng)脈粥樣硬化病變程度和病情進(jìn)展的重要指標(biāo)。常見藥物對(duì)炎癥因子的干預(yù)作用：不同類型的藥物對(duì)ApoE基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化炎癥因子具有不同的干預(yù)作用。他汀類藥物瑞舒伐他汀鈣能夠顯著降低血清和主動(dòng)脈組織中TNF-α、IL-6和MCP-1等炎癥因子的水平，且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性，高劑量