細(xì)菌學(xué)第一頁(yè)，共65頁(yè)。第1節(jié)細(xì)菌的形態(tài)一、細(xì)菌的個(gè)體形態(tài)細(xì)菌的各種形態(tài)示意圖及電鏡照片球菌桿菌螺形菌螺旋體球菌（coccus）雙球菌（Diplococcus）鏈球菌（Streptococcus）葡萄球菌（Staphylococcus）四聯(lián)球菌（tetracoccus）八疊球菌（sarcina）桿菌（bacillus）螺形菌（spiralbacterium）第二頁(yè)，共65頁(yè)。二、細(xì)菌的群體形態(tài)菌落細(xì)菌在人工培養(yǎng)基中以菌落形式出現(xiàn)。在適宜的固體培養(yǎng)基中，經(jīng)一定的時(shí)間培養(yǎng)，細(xì)菌在培養(yǎng)基表面或內(nèi)部分裂增殖形成大量菌體細(xì)胞，形成肉眼可見的、有一定形態(tài)的獨(dú)立群體，稱為菌落。第三頁(yè)，共65頁(yè)?；窘Y(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)等第2節(jié)細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)第四頁(yè)，共65頁(yè)。壁磷壁酸OMP（脂蛋白）OMP（微孔蛋白）OMP表層蛋白肽聚糖LPS細(xì)胞壁細(xì)胞膜外膜細(xì)胞膜周質(zhì)間隙A革蘭陽(yáng)性菌B革蘭陰性菌細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)模式圖（據(jù)Salyers等）膜磷壁酸一、細(xì)胞壁第五頁(yè)，共65頁(yè)。細(xì)胞壁革蘭陽(yáng)性菌革蘭陰性菌強(qiáng)度較堅(jiān)韌較疏松厚度20-80nm10-15nm肽聚糖層數(shù)可多達(dá)560層1-2層肽聚糖含量占細(xì)胞壁干重50%-80%占細(xì)胞壁干重5%-20%磷壁酸有無外膜無有G+菌與G-菌細(xì)胞壁的比較第六頁(yè)，共65頁(yè)。二、細(xì)胞膜為于細(xì)胞壁內(nèi)緊包細(xì)胞質(zhì)，結(jié)構(gòu)與真核細(xì)胞基本相同。為脂層雙層結(jié)構(gòu)。功能分泌呼吸跨膜蛋白脂質(zhì)雙層物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)生物合成第七頁(yè)，共65頁(yè)。三、細(xì)胞質(zhì)

細(xì)胞膜包裹的溶膠狀物質(zhì)有水、蛋白質(zhì)、脂類、核酸及少量糖和無機(jī)鹽組成細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有許多重要結(jié)構(gòu),常見有核糖體質(zhì)粒胞質(zhì)顆粒與真核細(xì)胞不同，抗菌素作用部位染色體外遺傳物質(zhì)，與遺傳變異有關(guān)異染顆粒等，可鑒別細(xì)菌第八頁(yè)，共65頁(yè)。四、核體是細(xì)菌的染色體，由裸露的雙鏈DNA堆積而成，無核膜和核仁，又稱擬核。第九頁(yè)，共65頁(yè)。第3節(jié)細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)某些細(xì)菌在一定條件下可形在一些特殊結(jié)構(gòu)，如鞭毛、菌毛、莢膜和芽孢等。第十頁(yè)，共65頁(yè)。肺炎鏈球菌莢膜是某些細(xì)菌在細(xì)胞壁外包繞的一層黏液樣物質(zhì)化學(xué)組成多糖或多肽功能：抗吞噬作用粘附作用抗有害物質(zhì)損傷作用炭疽桿菌第十一頁(yè)，共65頁(yè)。鞭毛化學(xué)組成：功能：鞭毛蛋白運(yùn)動(dòng)器官與致病有關(guān)鑒定分類細(xì)菌第十二頁(yè)，共65頁(yè)。菌毛種類與功能：化學(xué)組成：菌毛蛋白與致病有關(guān)與遺傳變異有關(guān)菌毛鞭毛第十三頁(yè)，共65頁(yè)。芽胞功能與醫(yī)學(xué)上意義：脫水而成，為細(xì)菌休眠形式對(duì)外界的抵抗力增加可發(fā)芽成繁殖體有致病性有鑒別作用應(yīng)以殺死芽胞為滅菌效果的指標(biāo)第十四頁(yè)，共65頁(yè)。一、革蘭氏染色法細(xì)菌細(xì)胞微小，無色半透明，經(jīng)過染色后，才能清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。細(xì)菌的染色方法很多。最常用最重要的是革蘭染色法。初染初染媒染脫色復(fù)染結(jié)晶紫碘液酒精沙黃第4節(jié)細(xì)菌的染色方法第十五頁(yè)，共65頁(yè)。二、瑞氏染色法三、特殊染色法（一）抗酸染色法一般對(duì)細(xì)胞壁中含有豐富蠟質(zhì)的細(xì)菌（如結(jié)核分支桿菌）染色。（二）芽孢、莢膜和鞭毛的染色法第十六頁(yè)，共65頁(yè)。第5節(jié)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖一、細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的基本條件營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)酸堿度：大多7.2-7.6溫度：嗜冷菌，嗜溫菌，嗜熱菌氣體：專性需氧，微需氧，專性厭氧，兼性厭氧滲透壓二、細(xì)菌個(gè)體的生長(zhǎng)繁殖二分裂式生長(zhǎng)，時(shí)間差別很大三、細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖遲緩期，對(duì)數(shù)期，穩(wěn)定期，衰亡期第十七頁(yè)，共65頁(yè)。第6節(jié)細(xì)菌的代謝一、細(xì)菌的基本代謝過程二、細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物及其作用熱原質(zhì)；毒素；侵襲性酶類；色素；細(xì)菌素；抗生素；維生素三、細(xì)菌的分解代謝與生化反應(yīng)氧化發(fā)酵試驗(yàn)；氧化酶試驗(yàn)；過氧化氫酶試驗(yàn)；VP試驗(yàn)；甲基紅試驗(yàn)；枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)；吲哚試驗(yàn)；硫化氫試驗(yàn)；尿素酶試驗(yàn)。第十八頁(yè)，共65頁(yè)。第7節(jié)細(xì)菌的人工培養(yǎng)一、培養(yǎng)基的概念及種類基礎(chǔ)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基第十九頁(yè)，共65頁(yè)。二、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象液體培養(yǎng)基中：混濁、沉淀、菌膜半固體培養(yǎng)基中：有動(dòng)力（即有鞭毛），呈放射狀生長(zhǎng)。固體培養(yǎng)基中：看菌落形態(tài)第二十頁(yè)，共65頁(yè)。三、人工培養(yǎng)細(xì)菌的意義細(xì)菌的鑒定傳染性疾病的診斷分子流行病調(diào)查生物制品的制備飼料或畜產(chǎn)品降生學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)第二十一頁(yè)，共65頁(yè)。第2單元細(xì)菌的感染正常菌群細(xì)菌的致病性細(xì)菌的耐藥性第二十二頁(yè)，共65頁(yè)。第1節(jié)正常菌群一、正常菌群的概念在動(dòng)物體各部分正常寄居而對(duì)動(dòng)物無害的細(xì)菌稱為正常菌群二、動(dòng)物體內(nèi)正常菌群的分布體表，消化道，呼吸道，泌尿生殖道三、正常菌群的生理作用生物頡頏作用；營(yíng)養(yǎng)作用；免疫作用第二十三頁(yè)，共65頁(yè)。細(xì)菌的致病性是指細(xì)菌侵入動(dòng)物體后突破宿主的防御功能，并引起機(jī)體出現(xiàn)不同程度病理變化的能力。通常把細(xì)菌這種不同程度的稱為細(xì)菌的毒力，即致病力的強(qiáng)弱。第2節(jié)細(xì)菌的致病性第二十四頁(yè)，共65頁(yè)。定性細(xì)菌是否有致病性，經(jīng)典的依據(jù)是柯赫法則近年來提出的分子水平的柯赫法則對(duì)此標(biāo)準(zhǔn)作了補(bǔ)充和完善。定量就某種病原菌而言，其致病性一般通過測(cè)定LD50以及ID50來定量。物質(zhì)基礎(chǔ)細(xì)菌的致病性在很大程度上取決于其毒力因子，包括侵襲力與毒素，以及毒力因子的分泌系統(tǒng)。毒素有外毒素與內(nèi)毒素之分第二十五頁(yè)，共65頁(yè)。幾個(gè)概念感染（infection）是指病原微生物在宿主體內(nèi)持續(xù)存在或增殖。發(fā)?。╠isease）表示病原微生物感染之后，對(duì)宿主造成明顯的損害。病原菌（pathogenicbacteria）是指那些導(dǎo)致機(jī)體發(fā)病的細(xì)菌。是一群高度特化了的微生物，為了自身的生存，已適應(yīng)而且必須在宿主生物體內(nèi)持續(xù)存在或增殖，有時(shí)可造成宿主發(fā)病。第二十六頁(yè)，共65頁(yè)。微生物學(xué)研究側(cè)重于感染。因?yàn)楦腥镜姆秶鼜V，發(fā)病僅僅是感染可能出現(xiàn)的后果之一。感染不一定都導(dǎo)致發(fā)病，而發(fā)病則離不開感染。如將防治傳染病的重點(diǎn)轉(zhuǎn)移到預(yù)防感染，則可收到事半功倍之效。第二十七頁(yè)，共65頁(yè)。細(xì)菌的致病性和毒力

一定種類的病原菌在一定的條件下，能在宿主體內(nèi)引起感染的能力稱為致病性（pathogenicity）病原菌致病力的強(qiáng)弱程度稱為毒力（virulent），同一細(xì)菌的不同菌株，其毒力不一樣，因此，毒力是菌株的特征。第二十八頁(yè)，共65頁(yè)?？坪找?、細(xì)菌致病性的確定

柯赫法則（Koch’spostulates）由德國(guó)細(xì)菌學(xué)家羅伯特·柯赫（RobertKoch）于1890年提出，是確定某種細(xì)菌是否具有致病性的主要依據(jù)第二十九頁(yè)，共65頁(yè)。柯赫法則要點(diǎn)

特殊的病原菌應(yīng)在同一疾病中查見，在健康者不存在此病原菌能被分離培養(yǎng)而得到純種此純培養(yǎng)物接種易感動(dòng)物，能導(dǎo)致同樣病癥自實(shí)驗(yàn)感染的動(dòng)物體內(nèi)能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng)第三十頁(yè)，共65頁(yè)?？梢詫⒎歉腥拘约膊∨c感染性疾病區(qū)分開.中毒性疾病營(yíng)養(yǎng)缺乏性疾病魚類缺氧死亡易與感染性疾病混淆牛櫟樹葉中毒維生素E缺乏魚翻塘死亡第三十一頁(yè)，共65頁(yè)?？潞辗▌t的不足之處具一定的局限性，某些情況并不符合該法則健康帶菌或隱性感染，例:幽門螺桿菌研究表明，超過90%十二指腸潰瘍和80%左右的胃潰瘍，都是由幽門螺桿菌感染所導(dǎo)致的。成人感染率,無癥狀者可達(dá)50%左右第三十二頁(yè)，共65頁(yè)。有些病原菌迄今仍無法在體外人工培養(yǎng)

只有1%不到的微生物可以人工培養(yǎng)有的則沒有可用的易感動(dòng)物

主要是指只感染人類或大動(dòng)物的疾病第三十三頁(yè)，共65頁(yè)。二、細(xì)菌毒力的測(cè)定

半數(shù)致死量（medianlethaldose,LD50）是指能使接種的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在感染后一定時(shí)限內(nèi)死亡一半所需的微生物量或毒素量。第三十四頁(yè)，共65頁(yè)。測(cè)定LD50應(yīng)選取品種、年齡、體重乃至性別等各方面都相同的易感動(dòng)物，分成若干組，每組數(shù)量相同，以遞減劑量的微生物或毒素分別接種各組動(dòng)物，在一定時(shí)限內(nèi)觀察記錄結(jié)果，最后以生物統(tǒng)計(jì)學(xué)方法計(jì)算出LD50。由于半數(shù)致死量采用了生物統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，因而避免了動(dòng)物個(gè)體差異造成的誤差。第三十五頁(yè)，共65頁(yè)。

半數(shù)感染量（medianinfectiousdose,ID50）某些病原微生物只能感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、雞胚或細(xì)胞，但不引致死亡，可用ID50來表示其毒力。測(cè)定的方法與測(cè)定LD50類似，只不過在統(tǒng)計(jì)結(jié)果時(shí)以感染者代替死亡者。第三十六頁(yè)，共65頁(yè)。三、細(xì)菌的毒力因子構(gòu)成細(xì)菌毒力的物質(zhì)稱毒力因子（virulencefactor），主要有侵襲力和毒素，此外有些毒力因子尚不明確。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌的許多重要毒力因子的分泌與細(xì)菌的分泌系統(tǒng)有關(guān)。第三十七頁(yè)，共65頁(yè)。（一）侵襲力（invasiveness）病原菌在機(jī)體內(nèi)定殖，突破機(jī)體的防御屏障，內(nèi)化作用，繁殖和擴(kuò)散，這種能力稱為侵襲力。與侵襲力有關(guān)的毒力因子包括黏附或定植因子、侵襲性酶、III型分泌系統(tǒng)和干擾宿主的防御機(jī)制四類。

第三十八頁(yè)，共65頁(yè)。1.黏附或定植因子凡具有粘附作用的細(xì)菌結(jié)構(gòu)成份，統(tǒng)稱為粘附素（adhesin），通常是細(xì)菌表面的一些大分子結(jié)構(gòu)成份，粘附素主要是革蘭陰性菌的菌毛，其次是非菌毛粘附素，如某些外膜蛋白（OMP）以及革蘭陽(yáng)性菌的脂磷壁酸（LTA）等。第三十九頁(yè)，共65頁(yè)。某些粘附素?zé)o宿主特異性及組織嗜性如F1（1型菌毛）能與細(xì)胞表面的D甘露糖殘基結(jié)合大多數(shù)粘附素具有宿主特異性及組織嗜性如大腸桿菌的F4（K88）菌毛僅粘附于豬的小腸前段，F(xiàn)6（987P）僅粘附于豬的小腸后段細(xì)胞或組織表面與粘附素相互作用的成份稱為受體（receptor），多為細(xì)胞表面糖蛋白，部分粘附素受體為蛋白質(zhì)，最有代表性的是細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularmatrix,ECM)第四十頁(yè)，共65頁(yè)。2.侵襲性酶多為胞外酶類，在感染過程中能協(xié)助病原菌擴(kuò)散。第四十一頁(yè)，共65頁(yè)。3.III型分泌系統(tǒng)細(xì)菌的分泌系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)是近年為細(xì)菌致病機(jī)制研究的重要進(jìn)展，其中的Ⅲ型分泌系統(tǒng)與動(dòng)植物的許多革蘭陰性病原菌的毒力因子的分泌有關(guān)。在病原菌與宿主細(xì)胞接觸后，這一系統(tǒng)得以啟動(dòng)，具有接觸介導(dǎo)的特征。啟動(dòng)后細(xì)菌分泌與毒力有關(guān)的多種蛋白質(zhì)，與相應(yīng)的伴侶蛋白（chaperone）結(jié)合，從細(xì)菌的胞漿直接進(jìn)入宿主細(xì)胞胞漿，發(fā)揮毒性作用。第四十二頁(yè)，共65頁(yè)。4.干擾或逃避宿主的防御機(jī)制莢膜細(xì)菌表面的一些蛋白：如SPA蛋白酶細(xì)胞內(nèi)逃逸第四十三頁(yè)，共65頁(yè)。（二）毒素（toxin）

細(xì)菌毒素按其來源、性質(zhì)和作用等的不同，可分為外毒素內(nèi)毒素

在大多數(shù)情況下，外毒素一般簡(jiǎn)稱毒素第四十四頁(yè)，共65頁(yè)。外毒素（exotoxin）定義：是某些病原菌在生長(zhǎng)繁殖過程中所產(chǎn)生的對(duì)宿主細(xì)胞有毒性的可溶性蛋白質(zhì)。大多數(shù)外毒素在菌體內(nèi)合成后必須分泌于胞外，故名“外毒素”。但也有少數(shù)外毒素存在于菌體細(xì)胞的胞周間隙，只有當(dāng)菌體細(xì)胞裂解后才釋放至胞外。多種細(xì)菌能產(chǎn)生外毒素，如肉毒梭菌、破傷風(fēng)桿菌、白喉棒狀桿菌、炭疽桿菌、大腸桿菌、霍亂弧菌。第四十五頁(yè)，共65頁(yè)。特性通常具有菌種特異性，如破傷風(fēng)梭菌產(chǎn)生破傷風(fēng)毒素、炭疽桿菌產(chǎn)生炭疽毒素、霍亂弧菌產(chǎn)生霍亂毒素等。毒性強(qiáng)，如1mg純化的肉毒毒素能殺死2000萬只小鼠。外毒素的毒性具有往往有高度的特異性。破傷風(fēng)毒素選擇性地作用于脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞，引起肌肉的強(qiáng)直性痙攣肉毒毒素選擇性地作用于眼神經(jīng)和咽神經(jīng)，引起眼肌和咽肌麻痹也有一些毒素具有相同的作用，霍亂弧菌、大腸桿菌、金葡菌等許多細(xì)菌均可產(chǎn)生作用類似的腸毒素。第四十六頁(yè)，共65頁(yè)。外毒素具有良好的免疫原性可刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性的抗體，而使機(jī)體具有免疫保護(hù)作用，這種抗體稱為抗毒素（antitoxin），可用于緊急治療和預(yù)防。外毒素在0.4%甲醛溶液作用下，經(jīng)過一段時(shí)間可以脫毒，但仍保留原有抗原性，稱之為類毒素（toxoid）。類毒素注入機(jī)體后，仍可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素，可作為疫苗進(jìn)行免疫接種。第四十七頁(yè)，共65頁(yè)。多數(shù)外毒素不耐熱，一般在60℃~80℃經(jīng)10min~80min即可失去毒性，但也有少數(shù)例外，如葡萄球菌腸毒素及大腸桿菌熱穩(wěn)定腸毒素（ST）能耐100℃30min。外毒素與酶都是蛋白質(zhì)，許多性質(zhì)相似，如易被熱、酸及蛋白水解素酶滅活，具有很高的生物學(xué)活性，并具特異性。第四十八頁(yè)，共65頁(yè)。定義：內(nèi)毒素特指革蘭陰性菌外膜中的脂多糖（LPS）成分，細(xì)菌在死亡后破裂或用人工方法裂解菌體后才釋放。內(nèi)毒素（endotoxin）第四十九頁(yè)，共65頁(yè)。組成

LPS由O特異多糖側(cè)鏈、非特異核心多糖和類脂A三個(gè)部分組成。具有毒性的部分是類脂A類脂A高度保守，腸桿菌科細(xì)菌的類脂A結(jié)構(gòu)完全一樣。第五十頁(yè)，共65頁(yè)。特性革蘭陰性菌內(nèi)毒素的毒性作用都大致相同，引致發(fā)熱、血循環(huán)中白細(xì)胞驟減、彌散性血管內(nèi)凝血、休克等，嚴(yán)重時(shí)亦可致死。內(nèi)毒素耐熱，加熱100℃經(jīng)1h仍不被破壞，必須加熱160℃經(jīng)2~4h，或用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或強(qiáng)氧化劑煮沸30min才失活。不能被甲醛脫毒成類毒素。內(nèi)毒素的抗原性較弱，將內(nèi)毒素注入機(jī)體可產(chǎn)生針對(duì)其中多糖抗原的相應(yīng)抗體，但此抗體并無中和內(nèi)毒素毒毒性的作用。第五十一頁(yè)，共65頁(yè)。特性外毒素內(nèi)毒素化學(xué)性質(zhì)蛋白質(zhì)脂多糖產(chǎn)生由某些革蘭陽(yáng)性菌或陰性菌分泌由革蘭陰性菌菌體裂解產(chǎn)生耐熱性通常不耐熱極為耐熱毒性作用特異性。為細(xì)胞毒素、腸毒素或神經(jīng)毒素，對(duì)特定的細(xì)胞或組織發(fā)揮特定作用全身性。致發(fā)熱、腹瀉、嘔吐毒性程度高，往往致死弱，很少致死致熱性對(duì)宿主不致熱致熱性，常致宿主發(fā)熱免疫原性強(qiáng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體（抗毒素）較弱，免疫應(yīng)答不足以中和毒性能否產(chǎn)生類毒素能，用甲醛處理不能細(xì)菌外毒素和內(nèi)毒素的基本特性比較第五十二頁(yè)，共65頁(yè)。四、細(xì)菌的侵入數(shù)量、途徑與感染病原菌侵入機(jī)體引起感染，除具有一定毒力外，還需有足夠的數(shù)量。一般來說，細(xì)菌毒力愈強(qiáng)，致病所需要菌量愈小。第五十三頁(yè)，共65頁(yè)。五、感染的類型隱性感染是指病原體侵入人體后，僅引起機(jī)體發(fā)生特異性免疫應(yīng)答，不出現(xiàn)或只出現(xiàn)不明顯的臨床癥狀、體征。但往往是傳染源。顯性感染指病原體侵入人體后，由于毒力強(qiáng)、入侵?jǐn)?shù)量多，加之機(jī)體的免疫病理反應(yīng)，導(dǎo)致組織損傷，生理功能發(fā)生改變，并出現(xiàn)一系列臨床癥狀和體征。帶菌狀態(tài)顯性或隱性感染后，病原菌在體內(nèi)繼續(xù)留存一段時(shí)間，與機(jī)體免疫力處于相對(duì)平衡狀態(tài)，稱為帶菌狀態(tài)。處于帶菌狀態(tài)的動(dòng)物稱為帶菌者。第五十四頁(yè)，共65頁(yè)。第3節(jié)細(xì)菌的耐藥性一、細(xì)菌耐藥性的概念耐藥性是指微生物多次與藥物接觸發(fā)生敏感性降低的現(xiàn)象。二、細(xì)菌耐藥性的檢測(cè)方法表型檢測(cè)法：稀釋法，紙片擴(kuò)散法耐藥基因的檢測(cè)法第五十五頁(yè)，共65頁(yè)。第三單元細(xì)菌感染的診斷樣本的采集細(xì)菌的分離鑒定第五十六頁(yè)，共65頁(yè)。第1節(jié)樣本的采集無菌操作根據(jù)不同疾病或同一疾病不同時(shí)期采集不同的標(biāo)本采集部位不要使用消毒劑樣本要新鮮，大多樣樣品可冷藏/凍輸送，糞便樣本常加入甘油緩沖液對(duì)疑似烈性傳染病或人畜共患病標(biāo)本，要嚴(yán)格按相關(guān)生物安全規(guī)定進(jìn)行。做好標(biāo)記。第五十七頁(yè)，共65頁(yè)。第2節(jié)細(xì)