2025年綜合類(lèi)-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(5卷套題【單選100題】)_第1頁(yè)
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2025年綜合類(lèi)-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(5卷套題【單選100題】)2025年綜合類(lèi)-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(篇1)【題干1】電子顯微鏡的主要成像原理基于什么?A.可見(jiàn)光波長(zhǎng)B.電子束波長(zhǎng)C.X射線波長(zhǎng)D.紅外線波長(zhǎng)【參考答案】B【詳細(xì)解析】電子顯微鏡利用電子束與樣品相互作用產(chǎn)生散射信號(hào),經(jīng)探測(cè)器轉(zhuǎn)換為電信號(hào)形成圖像。電子束波長(zhǎng)(約0.02-0.04nm)遠(yuǎn)小于可見(jiàn)光(400-700nm),可分辨更細(xì)微結(jié)構(gòu),故選B。其他選項(xiàng)不符合成像原理。【題干2】超薄切片厚度一般為多少納米?A.1-5nmB.5-10nmC.50-100nmD.200-500nm【參考答案】C【詳細(xì)解析】超薄切片需控制在50-100nm以避免電子束散射重疊,過(guò)厚(>100nm)導(dǎo)致圖像模糊,過(guò)?。?lt;50nm)則樣品易斷裂。選項(xiàng)C為正確范圍?!绢}干3】樣品固定常用的方法不包括哪項(xiàng)?A.戊二醛固定B.丙酮固定C.甲醛固定D.冷凍固定【參考答案】B【詳細(xì)解析】戊二醛(生物大分子固定)、甲醛(小分子固定)和冷凍固定(快速保存結(jié)構(gòu))均為常用方法。丙酮易使樣品脫水脆化,不適用于固定,故選B?!绢}干4】超薄切片染色常用哪種染色劑?A.蘇木精-伊紅B.甲苯胺藍(lán)C.重金屬鹽(如鉬酸銨)D.結(jié)晶紫【參考答案】C【詳細(xì)解析】超薄切片因厚度極薄,需重金屬鹽(如鉬酸銨、醋酸鈾)染色增強(qiáng)反差。蘇木精-伊紅(組織切片)、甲苯胺藍(lán)(細(xì)胞質(zhì)染色)和結(jié)晶紫(常規(guī)染色)均不適用,故選C?!绢}干5】電子顯微鏡的物鏡光闌主要控制什么?A.樣品質(zhì)量B.電子束強(qiáng)度C.景深范圍D.分辨率【參考答案】B【詳細(xì)解析】物鏡光闌通過(guò)調(diào)節(jié)通光孔徑控制電子束強(qiáng)度,進(jìn)而影響圖像亮度和噪聲。樣品質(zhì)量由樣品臺(tái)控制,景深與物鏡數(shù)值孔徑相關(guān),分辨率由光闌和樣品厚度共同決定?!绢}干6】制備超薄切片時(shí),切片刀的常用類(lèi)型是?A.金剛石刀B.玻璃刀C.陶瓷刀D.不銹鋼刀【參考答案】A【詳細(xì)解析】超薄切片需金剛石刀(硬度高、切面光滑)切割樣品。玻璃刀(切割常規(guī)組織)、陶瓷刀(磨片用)和不銹鋼刀(不達(dá)標(biāo))均不適用,故選A?!绢}干7】電子顯微鏡成像中,低電壓下主要呈現(xiàn)哪種圖像特征?A.高對(duì)比度B.高分辨率C.高信噪比D.暗場(chǎng)像【參考答案】A【詳細(xì)解析】低電壓(<100kV)下電子束穿透力強(qiáng),樣品整體散射信號(hào)占比高,形成高對(duì)比度整體像。高分辨率需高電壓(>200kV)縮短電子波長(zhǎng)以增強(qiáng)細(xì)節(jié),故選A。【題干8】超薄切片干燥常用哪種方式?A.自然風(fēng)干B.臨界點(diǎn)干燥C.液氮冷凍干燥D.真空干燥【參考答案】B【詳細(xì)解析】臨界點(diǎn)干燥(溫度/壓力使樣品無(wú)液態(tài)存在)可避免切片皺縮或變形,為超薄切片標(biāo)準(zhǔn)干燥方法。自然風(fēng)干(易污染)、液氮干燥(快速但可能脆化)和真空干燥(不達(dá)標(biāo))均不適用?!绢}干9】電子顯微鏡的電子束在樣品上產(chǎn)生的散射類(lèi)型有哪些?A.彈性散射B.非彈性散射C.兩者均有D.僅彈性散射【參考答案】C【詳細(xì)解析】電子束與樣品原子核/電子發(fā)生彈性散射(信息成像)和非彈性散射(能量損失,用于元素分析)。兩者共同構(gòu)成成像和能譜數(shù)據(jù),故選C。【題干10】超薄切片制作過(guò)程中,染色前需進(jìn)行哪項(xiàng)處理?A.脫水B.包埋C.浸蠟D.抗原修復(fù)【參考答案】A【詳細(xì)解析】染色前需將樣品脫水(丙酮或乙醇梯度脫水),以去除水分避免染色不均。包埋(石蠟/環(huán)氧樹(shù)脂)用于常規(guī)組織切片,浸蠟是包埋步驟,抗原修復(fù)用于免疫組化?!绢}干11】電子顯微鏡的像差校正主要針對(duì)哪種像差?A.球差B.色差C.場(chǎng)差D.像散【參考答案】A【詳細(xì)解析】球差(球面像差)是電子顯微鏡的主要像差,通過(guò)球差校正器(如汞燈校正)優(yōu)化圖像銳度。色差(波長(zhǎng)依賴(lài)性)、場(chǎng)差(均勻性)和像散(傾斜像差)需其他方式校正?!绢}干12】超薄切片的切片厚度測(cè)量常用哪種方法?A.光學(xué)顯微鏡測(cè)量B.掃描電鏡測(cè)量C.原子力顯微鏡測(cè)量D.激光共聚焦顯微鏡測(cè)量【參考答案】C【詳細(xì)解析】原子力顯微鏡(AFM)可通過(guò)探針接觸樣品表面測(cè)量納米級(jí)厚度,是超薄切片的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量工具。其他選項(xiàng)分辨率不足(光學(xué)顯微鏡)或原理不符(掃描電鏡、激光共聚焦)?!绢}干13】電子顯微鏡的樣品臺(tái)溫度控制主要為了?A.減少熱噪聲B.防止冷凝C.提高分辨率D.增強(qiáng)對(duì)比度【參考答案】B【詳細(xì)解析】樣品臺(tái)低溫(如-100℃)可防止樣品水分冷凝,保持結(jié)構(gòu)完整。熱噪聲與電子源有關(guān),分辨率由電壓和光闌控制,對(duì)比度與樣品組成相關(guān)?!绢}干14】超薄切片的染色劑應(yīng)具備什么特性?A.高滲透性B.低分子量C.強(qiáng)熒光性D.高揮發(fā)性【參考答案】B【詳細(xì)解析】超薄切片染色劑需分子量小(<500Da)以穿透切片并均勻沉積,如醋酸鈾(分子量325Da)。高滲透性(如戊二醛)用于固定而非染色,強(qiáng)熒光性(如DAPI)需熒光顯微鏡檢測(cè)。【題干15】電子顯微鏡的電子束加速電壓通常為多少千伏?A.10-30kVB.30-100kVC.100-300kVD.300-500kV【參考答案】C【詳細(xì)解析】標(biāo)準(zhǔn)電子顯微鏡加速電壓為100-300kV,平衡穿透力與分辨率。10-30kV(低電壓顯微鏡)用于樣品損傷小但分辨率低的情況,300-500kV(高分辨電鏡)用于特殊需求?!绢}干16】超薄切片的切片刀角度一般為多少度?A.15°B.30°C.45°D.60°【參考答案】C【詳細(xì)解析】切片刀角度45°(刀口與切片面夾角)可保證切片均勻且不易斷裂,角度過(guò)?。ㄈ?5°)切面粗糙,過(guò)大(如60°)切片易卷曲?!绢}干17】電子顯微鏡成像中,物鏡與樣品的距離稱(chēng)為?A.景深B.物距C.像距D.焦距【參考答案】B【詳細(xì)解析】物距(物鏡至樣品距離)影響景深和分辨率。景深指圖像清晰范圍,像距(物鏡至成像面距離)由光學(xué)公式?jīng)Q定,焦距是物距與像距的函數(shù)?!绢}干18】超薄切片的染色順序通常是?A.固定→脫水→包埋→染色B.固定→染色→脫水→包埋C.固定→脫水→染色→浸蠟D.固定→染色→切片→染色【參考答案】B【詳細(xì)解析】超薄切片流程為固定→染色(重金屬鹽)→切片→二次染色(如鉛染)。脫水(丙酮)在染色前完成以去除水分,包埋和浸蠟用于常規(guī)組織切片?!绢}干19】電子顯微鏡的電子束在樣品上產(chǎn)生的非彈性散射主要用于?A.成像對(duì)比度B.元素分析C.結(jié)構(gòu)觀察D.免疫標(biāo)記【參考答案】B【詳細(xì)解析】非彈性散射導(dǎo)致電子能量損失,通過(guò)能譜儀(EDS)分析元素組成。彈性散射(背散射電子)用于成像對(duì)比度,結(jié)構(gòu)觀察依賴(lài)整體散射信號(hào),免疫標(biāo)記需熒光或免疫電鏡技術(shù)?!绢}干20】超薄切片的切片厚度若為150nm,其成像分辨率約為多少納米?A.0.2nmB.0.5nmC.1nmD.2nm【參考答案】C【詳細(xì)解析】分辨率公式:d=0.61λ/NA,λ為電子波長(zhǎng)(100kV時(shí)約0.037nm),NA為物鏡數(shù)值孔徑(0.65)。計(jì)算得d≈0.61×0.037/0.65≈0.035nm,但實(shí)際受樣品厚度和制備質(zhì)量影響,150nm切片分辨率通常為1nm左右。2025年綜合類(lèi)-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(篇2)【題干1】超薄切片的厚度范圍通常控制在多少納米?【選項(xiàng)】A.50-70nmB.60-80nmC.80-100nmD.100-120nm【參考答案】B【詳細(xì)解析】超薄切片的標(biāo)準(zhǔn)厚度為60-80nm,以確保電子束穿透樣品時(shí)不發(fā)生顯著散射。選項(xiàng)A(50-70nm)和C(80-100nm)偏離標(biāo)準(zhǔn)范圍,D(100-120nm)已超出切片過(guò)厚導(dǎo)致圖像模糊的臨界值?!绢}干2】電子顯微鏡樣品制備中,固定液常用的成分是?【選項(xiàng)】A.戊二醛B.多聚甲醛C.戊二醇D.丙酮【參考答案】B【詳細(xì)解析】多聚甲醛是生物組織化學(xué)固定的常用試劑,可形成交聯(lián)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定蛋白質(zhì)。戊二醛(A)多用于透射電鏡的預(yù)固定,丙酮(D)是脫水劑而非固定劑,戊二醇(C)無(wú)固定作用。【題干3】超薄切片染色中醋酸雙氧鈾的作用機(jī)制是?【選項(xiàng)】A.突出細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)B.增強(qiáng)細(xì)胞核對(duì)比度C.與重金屬結(jié)合顯示微細(xì)結(jié)構(gòu)D.抑制電子束散射【參考答案】C【詳細(xì)解析】醋酸雙氧鈾(unstain)通過(guò)結(jié)合細(xì)胞內(nèi)帶負(fù)電的磷酸基團(tuán),與重金屬染色劑形成沉淀,在圖像中呈現(xiàn)黑色顆粒狀結(jié)構(gòu),用于顯示細(xì)胞器超微結(jié)構(gòu)。選項(xiàng)A(膜結(jié)構(gòu))需用鋨酸染色,B(核對(duì)比度)依賴(lài)鈾-鉛雙重染色?!绢}干4】電子顯微鏡制樣過(guò)程中,臨界點(diǎn)干燥法的核心目的是?【選項(xiàng)】A.去除樣品表面氣泡B.防止切片皺縮C.脫水并去除水分D.固定細(xì)胞形態(tài)【參考答案】C【詳細(xì)解析】臨界點(diǎn)干燥通過(guò)CO2三相點(diǎn)(31℃/72.3atm)實(shí)現(xiàn)無(wú)收縮脫水,避免傳統(tǒng)干燥法導(dǎo)致的切片皺曲(B)。選項(xiàng)A(氣泡)需通過(guò)切片刀修整解決,D(形態(tài)固定)由固定液完成?!绢}干5】透射電鏡(TEM)圖像中出現(xiàn)的黑色顆粒狀結(jié)構(gòu)通常由哪種染色劑引起?【選項(xiàng)】A.鋨酸B.鈾鹽C.錫酸D.鉬酸【參考答案】A【詳細(xì)解析】鋨酸(OsO4)是超薄切片的常規(guī)染色劑,與細(xì)胞內(nèi)硫、磷等基團(tuán)結(jié)合,在TEM圖像中呈現(xiàn)黑色顆粒,增強(qiáng)細(xì)胞器(如線粒體、核糖體)的對(duì)比度。鈾鹽(B)用于unstain,錫酸(C)多用于掃描電鏡(SEM)導(dǎo)電處理。【題干6】電子顯微鏡的加速電壓范圍一般為?【選項(xiàng)】A.50-100kVB.100-200kVC.200-300kVD.300-400kV【參考答案】B【詳細(xì)解析】臨床病理診斷用透射電鏡(TEM)標(biāo)準(zhǔn)加速電壓為100-200kV,在此范圍內(nèi)可平衡穿透力和分辨率。選項(xiàng)A(50-100kV)適用于樣品較厚的研究,C(200-300kV)多用于材料科學(xué),D(300-400kV)超出常規(guī)醫(yī)療設(shè)備參數(shù)?!绢}干7】超薄切片制作中,切片刀的鋒利度通常要求達(dá)到?【選項(xiàng)】A.10μmB.5μmC.1μmD.0.1μm【參考答案】B【詳細(xì)解析】切片刀的鋒利度需達(dá)到5μm以下,以確保切片厚度均勻且無(wú)顯著毛邊。選項(xiàng)A(10μm)切片過(guò)厚易產(chǎn)生重疊,C(1μm)不符合常規(guī)要求,D(0.1μm)為納米級(jí)刀片,僅用于特殊實(shí)驗(yàn)?!绢}干8】電子顯微鏡樣品制備中,包埋劑常用的溶劑是?【選項(xiàng)】A.丙酮B.環(huán)己烷C.乙醇D.戊二醇【參考答案】B【詳細(xì)解析】環(huán)己烷是環(huán)氧樹(shù)脂包埋劑的常用溶劑,與樹(shù)脂混合后形成低粘度溶液,便于浸沒(méi)樣品。丙酮(A)用于脫水,乙醇(C)會(huì)溶解樹(shù)脂,戊二醇(D)無(wú)包埋作用?!绢}干9】掃描電鏡(SEM)樣品導(dǎo)電處理中,鍍層厚度通常為?【選項(xiàng)】A.5-10nmB.20-30nmC.50-60nmD.100-120nm【參考答案】A【詳細(xì)解析】SEM鍍層厚度需控制在5-10nm,過(guò)厚(如B選項(xiàng))會(huì)導(dǎo)致圖像模糊,過(guò)?。–/D選項(xiàng))則導(dǎo)電性不足。該厚度可平衡導(dǎo)電性與樣品本征結(jié)構(gòu)的顯示?!绢}干10】電子顯微鏡圖像中,暗場(chǎng)像主要用于觀察?【選項(xiàng)】A.細(xì)胞膜孔徑B.細(xì)胞器膜結(jié)構(gòu)C.重金屬顆粒分布D.細(xì)胞核染色質(zhì)【參考答案】C【詳細(xì)解析】暗場(chǎng)像通過(guò)傾斜照明使樣品反射的電子束僅被特定角度檢測(cè)器接收,適用于觀察重金屬顆粒(如鈾-鉛復(fù)合染色劑)的分布。明場(chǎng)像(選項(xiàng)B/C/D)用于觀察樣品整體結(jié)構(gòu)。【題干11】超薄切片染色中,檸檬酸鉛的作用是?【選項(xiàng)】A.增強(qiáng)細(xì)胞核對(duì)比度B.與磷酸基團(tuán)結(jié)合顯示膜結(jié)構(gòu)C.與硫醇基團(tuán)結(jié)合形成沉淀D.抑制電子束散射【參考答案】C【詳細(xì)解析】檸檬酸鉛通過(guò)螯合硫醇基團(tuán)(-SH)和磷酸基團(tuán)(-PO3H2),在圖像中呈現(xiàn)明暗相間的顆粒結(jié)構(gòu),用于顯示細(xì)胞膜、核孔復(fù)合體等膜相關(guān)結(jié)構(gòu)。選項(xiàng)A(核對(duì)比度)需用鈾-鉛雙重染色,D(抑制散射)與染色無(wú)關(guān)?!绢}干12】電子顯微鏡制樣中,樣品修整的常用工具是?【選項(xiàng)】A.軟毛刷B.超聲清洗器C.金剛石刀片D.微型鑷子【參考答案】C【詳細(xì)解析】樣品修整需使用金剛石刀片(C)或玻璃刀,去除多余組織并暴露待觀察區(qū)域。軟毛刷(A)用于輕敲碎樣,超聲清洗器(B)用于清洗,微型鑷子(D)用于固定樣品?!绢}干13】透射電鏡圖像中,電子衍射斑點(diǎn)的分布特征可判斷?【選項(xiàng)】A.細(xì)胞周期階段B.晶體結(jié)構(gòu)類(lèi)型C.細(xì)胞器種類(lèi)D.樣品固定效果【參考答案】B【詳細(xì)解析】電子衍射斑點(diǎn)反映樣品中晶體的晶面間距,可推斷晶體類(lèi)型(如立方晶系、六方晶系)。選項(xiàng)A(細(xì)胞周期)需通過(guò)光鏡觀察,C(細(xì)胞器)需結(jié)合超微結(jié)構(gòu),D(固定效果)需通過(guò)切片完整性判斷?!绢}干14】超薄切片染色中,雙鉛染色(鈾-鉛)的常規(guī)比例是?【選項(xiàng)】A.1:1B.1:3C.1:5D.1:10【參考答案】C【詳細(xì)解析】鈾鹽(醋酸雙氧鈾)與鉛鹽(醋酸鉛)的常用比例為1:5,其中鈾鹽濃度為1%,鉛鹽為5%。選項(xiàng)A(1:1)濃度過(guò)高導(dǎo)致過(guò)度染色,B(1:3)和D(1:10)均影響染色效果?!绢}干15】電子顯微鏡樣品制備中,包埋劑聚合溫度通常為?【選項(xiàng)】A.60℃B.80℃C.100℃D.120℃【參考答案】B【詳細(xì)解析】環(huán)氧樹(shù)脂包埋劑(如E-202)的聚合溫度為80-90℃,在此溫度下可形成致密包埋塊,保證超薄切片的切割質(zhì)量。選項(xiàng)A(60℃)溫度不足導(dǎo)致包埋不完全,C(100℃)可能使樹(shù)脂碳化,D(120℃)超出安全范圍。【題干16】掃描電鏡樣品鍍層材料中,鍍金時(shí)常用助鍍劑是?【選項(xiàng)】A.氯化鈀B.氯化銀C.氯化銠D.氯化鎳【參考答案】A【詳細(xì)解析】鍍金前使用氯化鈀(A)作為助鍍劑,可形成導(dǎo)電的鈀膜,為后續(xù)金鍍層提供良好基底。氯化銀(B)用于銀鍍層,氯化銠(C)和氯化鎳(D)不常用于SEM鍍層。【題干17】透射電鏡樣品制備中,切片厚度與電子束穿透力的關(guān)系是?【選項(xiàng)】A.厚度越大穿透力越強(qiáng)B.厚度越大穿透力越弱C.兩者無(wú)關(guān)D.厚度與穿透力成反比【參考答案】B【詳細(xì)解析】電子束穿透力與樣品厚度成反比,厚度越大(如>100nm)導(dǎo)致電子束散射增加,穿透深度降低。選項(xiàng)A(穿透力越強(qiáng))錯(cuò)誤,C(無(wú)關(guān))不符合物理原理,D(成反比)表述不嚴(yán)謹(jǐn)?!绢}干18】超薄切片染色中,染色時(shí)間通常為?【選項(xiàng)】A.1-2分鐘B.5-10分鐘C.15-20分鐘D.30-60分鐘【參考答案】B【詳細(xì)解析】常規(guī)染色時(shí)間為5-10分鐘,過(guò)短(A選項(xiàng))導(dǎo)致染色不充分,過(guò)長(zhǎng)(C/D選項(xiàng))可能引起過(guò)度染色或背景噪聲。染色時(shí)間需根據(jù)染色劑濃度和樣品類(lèi)型調(diào)整?!绢}干19】電子顯微鏡圖像中,顆粒狀黑影(顆粒樣偽影)的常見(jiàn)原因包括?【選項(xiàng)】A.切片過(guò)厚B.染色劑未完全脫除C.樣品固定不充分D.電子束加速電壓過(guò)高【參考答案】B【詳細(xì)解析】顆粒樣偽影主要因染色劑未徹底脫除(B選項(xiàng)),重金屬顆粒在圖像中呈現(xiàn)黑色斑點(diǎn)。選項(xiàng)A(切片過(guò)厚)導(dǎo)致圖像模糊而非顆粒狀,C(固定不充分)影響切片完整性,D(電壓過(guò)高)可能增加散射而非顆粒偽影?!绢}干20】掃描電鏡樣品導(dǎo)電處理中,鍍層導(dǎo)電性不足的主要原因是?【選項(xiàng)】A.鍍層厚度不足B.樣品表面粗糙度過(guò)高C.鍍層材料不均勻D.鍍層溫度過(guò)低【參考答案】A【詳細(xì)解析】鍍層導(dǎo)電性不足(如電阻過(guò)高)通常因鍍層厚度不足(A選項(xiàng)),無(wú)法形成連續(xù)導(dǎo)電膜。選項(xiàng)B(表面粗糙度)影響鍍層均勻性,C(材料不均勻)導(dǎo)致局部導(dǎo)電性差,D(溫度過(guò)低)影響鍍層固化。2025年綜合類(lèi)-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(篇3)【題干1】電子顯微鏡樣品制備中,超薄切片的關(guān)鍵步驟是控制切片厚度在哪個(gè)范圍?【選項(xiàng)】A.2-5μmB.60-80nmC.100-200nmD.0.5-1μm【參考答案】B【詳細(xì)解析】超薄切片厚度需控制在60-80nm范圍內(nèi)以確保電子束穿透性,選項(xiàng)A和D為常規(guī)切片厚度,C為電鏡切片的過(guò)度范圍?!绢}干2】電子顯微鏡的成像原理主要基于哪種物理效應(yīng)?【選項(xiàng)】A.光的折射B.X射線衍射C.電子波的衍射D.磁場(chǎng)偏轉(zhuǎn)【參考答案】C【詳細(xì)解析】電子顯微鏡通過(guò)電磁透鏡聚焦電子束,利用電子波的衍射形成圖像,選項(xiàng)A和B為光學(xué)顯微鏡原理,D為質(zhì)譜儀原理。【題干3】超薄切片染色常用哪種染色劑增強(qiáng)組織對(duì)比度?【選項(xiàng)】A.蘇木精-伊紅B.醋酸雙氧鈾C(jī).硫黃素OD.檸檬酸鉛【參考答案】D【詳細(xì)解析】檸檬酸鉛用于負(fù)染色,與重金屬結(jié)合形成沉淀增強(qiáng)反差,選項(xiàng)A為光學(xué)染色,B為染色輔助試劑,C用于熒光顯微鏡?!绢}干4】電子顯微鏡的電子束加速電壓通常為多少千伏?【選項(xiàng)】A.10-30kVB.50-100kVC.200-300kVD.500-1000kV【參考答案】C【詳細(xì)解析】常規(guī)電鏡加速電壓為200-300kV,過(guò)高電壓會(huì)導(dǎo)致樣品損傷,選項(xiàng)D為掃描電鏡參數(shù),A和B為光學(xué)顯微鏡范圍?!绢}干5】超薄切片制作中,切片刀的常用類(lèi)型是?【選項(xiàng)】A.超聲波刀B.玻璃刀C.铇?shù)摰禗.砂輪刀【參考答案】C【詳細(xì)解析】铇?shù)摰毒哂懈哂捕群湍透g性,適合制作超薄切片,選項(xiàng)A為樣品處理設(shè)備,B和D用于常規(guī)組織切片。【題干6】電子顯微鏡的物鏡數(shù)值孔徑(NA)范圍通常為?【選項(xiàng)】A.0.1-0.3B.0.4-0.7C.0.8-1.2D.1.5-2.0【參考答案】A【詳細(xì)解析】電鏡物鏡NA為0.1-0.3,數(shù)值越大分辨率越高但景深越淺,選項(xiàng)B為光學(xué)顯微鏡物鏡參數(shù),C和D為掃描電鏡參數(shù)?!绢}干7】樣品制備中,臨界點(diǎn)干燥法主要用于哪種材料?【選項(xiàng)】A.液體樣品B.半固體組織C.濕潤(rùn)組織D.纖維材料【參考答案】C【詳細(xì)解析】臨界點(diǎn)干燥法可去除濕潤(rùn)組織中的水分并防止皺縮,選項(xiàng)A用冷凍干燥,B用石蠟包埋,D用樹(shù)脂包埋。【題干8】電子顯微鏡的成像系統(tǒng)包括哪些部分?【選項(xiàng)】A.光學(xué)系統(tǒng)+電磁透鏡B.光學(xué)系統(tǒng)+X射線探測(cè)器C.電磁透鏡+光電倍增管D.電磁透鏡+CCD傳感器【參考答案】A【詳細(xì)解析】電鏡成像系統(tǒng)由電磁透鏡組成,選項(xiàng)B為X射線衍射儀,C為質(zhì)譜儀,D為掃描電鏡探測(cè)器?!绢}干9】超薄切片染色后,哪種步驟可去除多余染色劑?【選項(xiàng)】A.蒸餾水漂洗B.丙酮脫水C.甲醇固定D.氯仿溶解【參考答案】A【詳細(xì)解析】染色后需用蒸餾水漂洗去除未結(jié)合染料,選項(xiàng)B用于脫水,C為固定步驟,D為溶解有機(jī)物。【題干10】電子顯微鏡的電子束在樣品表面產(chǎn)生的形變效應(yīng)稱(chēng)為?【選項(xiàng)】A.靜電效應(yīng)B.熱效應(yīng)C.磁效應(yīng)D.輻射效應(yīng)【參考答案】C【詳細(xì)解析】電子束與樣品相互作用產(chǎn)生局部磁場(chǎng)變化,選項(xiàng)A為靜電顯微鏡原理,B為掃描隧道顯微鏡,D為粒子加速器現(xiàn)象?!绢}干11】超薄切片制作中,切片機(jī)的工作角度通常為?【選項(xiàng)】A.0°-5°B.5°-15°C.15°-30°D.30°-45°【參考答案】B【詳細(xì)解析】切片機(jī)以5°-15°角度切割可減少切片碎裂,選項(xiàng)A角度過(guò)小易斷裂,C和D角度過(guò)大影響成像?!绢}干12】電子顯微鏡的放大倍數(shù)與物鏡的哪種參數(shù)直接相關(guān)?【選項(xiàng)】A.焦距B.孔徑光闌C.球差系數(shù)D.分辨率【參考答案】C【詳細(xì)解析】物鏡球差系數(shù)影響放大倍數(shù)和分辨率,選項(xiàng)A為光學(xué)顯微鏡參數(shù),B和D為系統(tǒng)整體性能指標(biāo)?!绢}干13】樣品制備中,包埋劑的選擇依據(jù)是?【選項(xiàng)】A.硬度適中B.熔點(diǎn)低于樣品C.色彩對(duì)比度D.導(dǎo)電性【參考答案】A【詳細(xì)解析】包埋劑需硬度適中以支撐切片,選項(xiàng)B為樹(shù)脂包埋特性,C為染色需求,D為電鏡樣品處理。【題干14】電子顯微鏡的電子束波長(zhǎng)與加速電壓的關(guān)系符合?【選項(xiàng)】A.波長(zhǎng)與電壓成正比B.波長(zhǎng)與電壓成反比C.波長(zhǎng)與電壓無(wú)關(guān)D.波長(zhǎng)與電壓平方成反比【參考答案】B【詳細(xì)解析】波長(zhǎng)λ=12.3/√V(V為電壓kV),電壓越高波長(zhǎng)越短,選項(xiàng)A和D公式錯(cuò)誤,C為光學(xué)顯微鏡原理?!绢}干15】超薄切片的厚度檢測(cè)常用哪種技術(shù)?【選項(xiàng)】A.熒光顯微鏡B.掃描電鏡C.原子力顯微鏡D.金剛石刀測(cè)量【參考答案】B【詳細(xì)解析】掃描電鏡可測(cè)量切片厚度(0.5-5nm),選項(xiàng)A為光學(xué)成像,C為表面形貌分析,D為物理測(cè)量方法?!绢}干16】電子顯微鏡的樣品臺(tái)傾斜角度調(diào)節(jié)主要用于?【選項(xiàng)】A.聚焦調(diào)節(jié)B.景深調(diào)節(jié)C.樣品定位D.減少球差【參考答案】D【詳細(xì)解析】?jī)A斜樣品臺(tái)可減少球差影響,選項(xiàng)A為物鏡焦平面調(diào)節(jié),B為物鏡數(shù)值孔徑影響,C為機(jī)械定位?!绢}干17】超薄切片染色后,哪種溶劑可去除多余染料?【選項(xiàng)】A.乙醚B.丙酮C.甲醇D.乙醇【參考答案】A【詳細(xì)解析】乙醚可溶解有機(jī)染料且不影響切片結(jié)構(gòu),選項(xiàng)B為脫水溶劑,C和D為固定劑。【題干18】電子顯微鏡的電磁透鏡材料通常為?【選項(xiàng)】A.碳化硅B.铇合金C.氧化鋁D.石英玻璃【參考答案】B【詳細(xì)解析】铇合金具有高導(dǎo)磁性和耐高溫性,適合制造電磁透鏡,選項(xiàng)A為半導(dǎo)體材料,C和D為光學(xué)元件材料。【題干19】樣品制備中,石蠟包埋法的主要缺點(diǎn)是?【選項(xiàng)】A.耗時(shí)較長(zhǎng)B.易造成組織皺縮C.染色困難D.成本高昂【參考答案】B【詳細(xì)解析】石蠟包埋在高溫處理時(shí)易使組織皺縮,選項(xiàng)A為冷凍干燥缺點(diǎn),C和D為其他方法問(wèn)題。【題干20】電子顯微鏡的電子束在樣品表面產(chǎn)生的二次電子能量范圍是?【選項(xiàng)】A.1-10eVB.10-100eVC.100-1000eVD.1000-10,000eV【參考答案】A【詳細(xì)解析】二次電子能量為1-10eV,背散射電子為100-1000eV,選項(xiàng)B和C為其他信號(hào)類(lèi)型,D為X射線能量范圍。2025年綜合類(lèi)-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(篇4)【題干1】電子顯微鏡的分辨率主要取決于以下哪種因素?【選項(xiàng)】A.真空度B.電子束波長(zhǎng)C.樣品厚度D.光學(xué)鏡片材質(zhì)【參考答案】B【詳細(xì)解析】電子顯微鏡的分辨率與電子束波長(zhǎng)成反比,根據(jù)德拜-瓦納公式(Δx≈0.61λ/NA),波長(zhǎng)越短分辨率越高。真空度影響電子束散射,樣品厚度過(guò)大會(huì)導(dǎo)致信息重疊,光學(xué)鏡片材質(zhì)與光學(xué)顯微鏡類(lèi)似,并非核心因素?!绢}干2】超薄切片厚度范圍通常為多少微米?【選項(xiàng)】A.0.5-1.0B.1.0-2.0C.2.0-3.0D.3.0-4.0【參考答案】A【詳細(xì)解析】超薄切片厚度需控制在0.5-1.0微米以適應(yīng)電子束穿透,過(guò)厚會(huì)導(dǎo)致樣品散射或信息丟失,過(guò)薄則易斷裂。此范圍與電子顯微鏡的景深和樣品支持膜兼容性直接相關(guān)?!绢}干3】制作超薄切片時(shí),切片刀的刀口角度通常為多少度?【選項(xiàng)】A.15°B.30°C.45°D.60°【參考答案】C【詳細(xì)解析】45°刀口角度可平衡切片的韌性和脆性,既保證切片連續(xù)性又減少斷裂概率。15°過(guò)銳易崩刀,30°和60°導(dǎo)致切片邊緣不規(guī)則或厚度不均?!绢}干4】電子顯微鏡的成像原理屬于哪種類(lèi)型?【選項(xiàng)】A.光學(xué)成像B.放射性成像C.電子衍射成像D.X線成像【參考答案】C【詳細(xì)解析】電子顯微鏡通過(guò)電子束與樣品相互作用產(chǎn)生衍射、散射等信號(hào),經(jīng)物鏡和投影鏡轉(zhuǎn)換形成圖像。此過(guò)程區(qū)別于光學(xué)顯微鏡的光學(xué)折射原理,也不涉及放射性或X線輻射。【題干5】超薄切片染色常用哪種染色劑?【選項(xiàng)】A.HE染色B.Giemsa染色C.鐵蘇木精染色D.煌綠染色【參考答案】C【詳細(xì)解析】鐵蘇木精(Hematoxylin-Eosin)是超薄切片的標(biāo)準(zhǔn)染色劑,其堿性染料結(jié)合酸性組織成分,通過(guò)分化步驟增強(qiáng)細(xì)胞對(duì)比度。HE染色多用于石蠟切片,Giemsa用于細(xì)胞遺傳學(xué)?!绢}干6】電子顯微鏡的加速電壓范圍一般為多少伏特?【選項(xiàng)】A.50-100B.100-200C.200-300D.300-400【參考答案】C【詳細(xì)解析】常規(guī)透射電鏡加速電壓200-300kV,平衡分辨率與穿透力。50-100kV僅適用于輕元素樣品,300-400kV會(huì)顯著增加樣品損傷。電壓過(guò)低導(dǎo)致分辨率不足,過(guò)高則電離輻射危害加劇?!绢}干7】超薄切片的固定劑常用哪種有機(jī)溶劑?【選項(xiàng)】A.甲醛B.戊二醛C.戊醇D.丙酮【參考答案】B【詳細(xì)解析】戊二醛(Glutaraldehyde)是超薄切片固定劑,其交聯(lián)作用能穩(wěn)定細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。甲醛易聚合且穿透性差,戊醇和丙酮主要用于脫水而非固定?!绢}干8】電子顯微鏡的物鏡光闌主要用于調(diào)節(jié)?【選項(xiàng)】A.樣品亮度B.電子束直徑C.焦點(diǎn)位置D.顯像對(duì)比度【參考答案】B【詳細(xì)解析】物鏡光闌控制進(jìn)入物鏡的電子束直徑,影響景深和分辨率。調(diào)節(jié)亮度需調(diào)整燈絲電流或樣品傾斜角,焦點(diǎn)位置由物鏡和樣品距離決定,對(duì)比度與樣品本身和組織處理相關(guān)。【題干9】超薄切片的包埋材料常用哪種樹(shù)脂?【選項(xiàng)】A.環(huán)氧樹(shù)脂B.聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)C.聚丙烯酸酯D.聚碳酸酯【參考答案】B【詳細(xì)解析】PMMA是超薄切片的標(biāo)準(zhǔn)包埋材料,其低收縮率(<1%)和優(yōu)異機(jī)械性能確保切片在電鏡中穩(wěn)定。環(huán)氧樹(shù)脂收縮率較高易導(dǎo)致切片變形,聚丙烯酸酯脆性大,聚碳酸酯易吸濕。【題干10】電子顯微鏡的投影鏡光闌主要作用是?【選項(xiàng)】A.調(diào)節(jié)樣品亮度B.控制成像放大倍數(shù)C.調(diào)整景深D.降低背景噪聲【參考答案】B【詳細(xì)解析】投影鏡光闌通過(guò)調(diào)節(jié)光闌開(kāi)口面積改變放大倍數(shù),開(kāi)口越小放大倍數(shù)越高,但分辨率下降。亮度調(diào)節(jié)由物鏡光闌和樣品光闌共同控制,景深與物鏡光闌相關(guān),背景噪聲與樣品制備質(zhì)量相關(guān)?!绢}干11】超薄切片的切片厚度測(cè)量常用哪種儀器?【選項(xiàng)】A.光學(xué)顯微鏡B.掃描電鏡(SEM)C.測(cè)微計(jì)D.數(shù)字圖像分析系統(tǒng)【參考答案】D【詳細(xì)解析】數(shù)字圖像分析系統(tǒng)通過(guò)切片圖像像素計(jì)算厚度,精度達(dá)0.1nm。光學(xué)顯微鏡受衍射極限限制(分辨率約0.2μm),SEM測(cè)量需二次制樣且誤差較大,測(cè)微計(jì)僅適用于實(shí)體標(biāo)本?!绢}干12】電子顯微鏡的暗場(chǎng)成像主要用于觀察?【選項(xiàng)】A.輕元素分布B.重元素分布C.細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)D.細(xì)胞核染色質(zhì)【參考答案】A【詳細(xì)解析】暗場(chǎng)成像使樣品整體變暗,僅重元素區(qū)域(如金屬顆粒)明亮。適用于觀察細(xì)胞器(如線粒體、核糖體)的輕元素分布,而重元素分布(如重金屬沉積)更適合明場(chǎng)或選區(qū)衍射成像?!绢}干13】超薄切片的染色步驟中,分化處理的主要目的是?【選項(xiàng)】A.增加切片透明度B.增強(qiáng)細(xì)胞核對(duì)比度C.去除多余染色劑D.穩(wěn)定細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)【參考答案】C【詳細(xì)解析】分化處理通過(guò)鹽酸乙醇溶液(1%HCl-70%乙醇)溶解胞質(zhì)染色劑,保留細(xì)胞核或特定結(jié)構(gòu)。分化不足導(dǎo)致背景過(guò)深,過(guò)度分化則細(xì)胞核輪廓模糊。切片透明度由脫水步驟決定。【題干14】電子顯微鏡的樣品架旋轉(zhuǎn)角度調(diào)節(jié)范圍通常是?【選項(xiàng)】A.0°-30°B.0°-60°C.0°-90°D.0°-180°【參考答案】B【詳細(xì)解析】樣品架旋轉(zhuǎn)角度調(diào)節(jié)范圍0°-60°,用于調(diào)整樣品與電子束入射角。超過(guò)60°可能導(dǎo)致樣品邊緣信息丟失或電鏡鏡筒結(jié)構(gòu)干涉。90°旋轉(zhuǎn)需更換樣品臺(tái)或特殊附件?!绢}干15】超薄切片的切片刀材料通常為?【選項(xiàng)】A.硬質(zhì)合金鋼B.氧化鋯陶瓷C.碳化硅D.氟化碳【參考答案】B【詳細(xì)解析】氧化鋯陶瓷具有高硬度(莫氏硬度8.5)、耐腐蝕性和低熱膨脹系數(shù),適合連續(xù)切片。硬質(zhì)合金鋼易磨損且熱傳導(dǎo)快,碳化硅脆性大,氟化碳非金屬材質(zhì)無(wú)法達(dá)到切片鋒利度要求?!绢}干16】電子顯微鏡的電子束與物鏡光闌的夾角關(guān)系為?【選項(xiàng)】A.0°B.30°C.45°D.90°【參考答案】B【詳細(xì)解析】電子束與物鏡光闌的夾角為30°,此角度優(yōu)化了電子束聚焦和樣品信息收集效率。0°會(huì)導(dǎo)致電子束完全偏移,45°和90°均不符合透鏡光學(xué)設(shè)計(jì)原理?!绢}干17】超薄切片的染色時(shí)間通常為?【選項(xiàng)】A.1-2分鐘B.5-10分鐘C.15-30分鐘D.30-60分鐘【參考答案】B【詳細(xì)解析】染色時(shí)間5-10分鐘可保證染色劑充分滲透,避免過(guò)深或不足。1-2分鐘僅表面染色,15-30分鐘導(dǎo)致背景過(guò)深且切片易脆,60分鐘以上非必要且增加損傷風(fēng)險(xiǎn)。【題干18】電子顯微鏡的樣品支持膜厚度一般為?【選項(xiàng)】A.100nmB.200nmC.500nmD.1μm【參考答案】A【詳細(xì)解析】支持膜厚度100nm可承受電子束轟擊而不破裂,同時(shí)允許超薄切片(80-100nm)自然吸附。200nm以上增加樣品散射,500nm和1μm會(huì)導(dǎo)致切片邊緣模糊?!绢}干19】超薄切片的切片方向?qū)Τ上裼泻斡绊懀俊具x項(xiàng)】A.無(wú)影響B(tài).僅影響細(xì)胞核形態(tài)C.決定細(xì)胞器顯示方向D.影響整體組織結(jié)構(gòu)層次【參考答案】C【詳細(xì)解析】切片方向決定細(xì)胞器(如線粒體、高爾基體)的縱向或橫向顯示。平行于細(xì)胞器長(zhǎng)軸可觀察其立體結(jié)構(gòu),垂直方向則顯示截面。對(duì)細(xì)胞核形態(tài)影響較小,但整體組織層次需多角度切片?!绢}干20】電子顯微鏡的真空系統(tǒng)壓力范圍通常為?【選項(xiàng)】A.10?3-10??PaB.10??-10??PaC.10??-10??PaD.10??-10??Pa【參考答案】A【詳細(xì)解析】常規(guī)電鏡真空度為10?3-10??Pa(10?3-10??Torr),此范圍平衡了電子束散射和樣品吸附風(fēng)險(xiǎn)。10??-10??Pa(10??-10??Torr)需特殊高真空泵,10??-10??Pa(10??-10??Torr)已超出常規(guī)設(shè)備能力,10??-10??Pa(10??-10??Torr)僅用于特殊研究。2025年綜合類(lèi)-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-電子顯微鏡技術(shù)及超薄切片歷年真題摘選帶答案(篇5)【題干1】電子顯微鏡的成像原理基于什么物理現(xiàn)象?【選項(xiàng)】A.光的折射;B.光的干涉;C.物質(zhì)的波粒二象性;D.熱輻射【參考答案】C【詳細(xì)解析】電子顯微鏡利用電子束的波動(dòng)性(物質(zhì)波)產(chǎn)生衍射和干涉現(xiàn)象形成圖像,選項(xiàng)C正確。其他選項(xiàng):A為光學(xué)顯微鏡原理,B是干涉儀基礎(chǔ),D與成像無(wú)關(guān)?!绢}干2】超薄切片的厚度通??刂圃谑裁捶秶??【選項(xiàng)】A.0.1-1μm;B.0.5-2μm;C.1-5μm;D.5-10μm【參考答案】A【詳細(xì)解析】超薄切片厚度需小于電子束波長(zhǎng)(約0.02-0.03μm),實(shí)際操作中0.1-1μm可避免切片過(guò)厚導(dǎo)致圖像模糊,選項(xiàng)A正確。其他選項(xiàng)均不符合要求。【題干3】樣品固定劑中哪種成分主要抑制酶活性?【選項(xiàng)】A.戊二醛;B.丙酮;C.四氫硼鈉;D.福爾馬林【參考答案】A【詳細(xì)解析】戊二醛通過(guò)交聯(lián)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)抑制酶活性,丙酮為脫水劑,四氫硼鈉用于糖類(lèi)固定,福爾馬林為氧化劑。選項(xiàng)A正確?!绢}干4】電子顯微鏡的制樣過(guò)程中,哪種步驟用于減少切片褶皺?【選項(xiàng)】A.蒸餾水漂洗;B.超聲清洗;C.真空干燥;D.福爾馬林固定【參考答案】C【詳細(xì)解析】真空干燥可加速水分蒸發(fā)并減少切片因收縮導(dǎo)致的褶皺,超聲清洗(B)用于去除雜質(zhì),蒸餾水漂洗(A)和福爾馬林固定(D)不直接解決褶皺問(wèn)題?!绢}干5】超薄切片染色常用哪種復(fù)紅替代物?【選項(xiàng)】A.蘇木精;B.甲苯胺藍(lán);C.煌綠;D.龍膽紫【參考答案】D【詳細(xì)解析】龍膽紫(堿性復(fù)紅)用于超薄切片染色,增強(qiáng)電子反差;蘇木精(A)用于光學(xué)切片,甲苯胺藍(lán)(B)為堿性染色劑,煌綠(C)用于特殊染色?!绢}干6】電子顯微鏡的加速電壓過(guò)高會(huì)導(dǎo)致什么問(wèn)題?【選項(xiàng)】A.圖像模糊;B.樣品碳化;C.信號(hào)干擾;D.亮度不足【參考答案】B【詳細(xì)解析】加速電壓>100kV時(shí),電子束能量過(guò)高易使樣品表面碳化,影響成像質(zhì)量。圖像模糊(A)多因電壓過(guò)低或樣品制備不佳,信號(hào)干擾(C)與電磁環(huán)境相關(guān)?!绢}干7】哪種染色方法用于區(qū)分細(xì)胞器超微結(jié)構(gòu)?【選項(xiàng)】A.草酸銨染色;B.鐵蘇木精染色;C.錫蘭藍(lán)染色;D.姬姆薩染色【參考答案】B【詳細(xì)解析】鐵蘇木精染色可增強(qiáng)細(xì)胞器(如線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng))的電子密度,與草酸銨(A)的糖類(lèi)染色、錫蘭藍(lán)(C)的結(jié)締組織染色、姬姆薩(D)的血液染色功能不同?!绢}干8】超薄切片制作中,切片機(jī)刀片的常用材料是?【選項(xiàng)】A.氧化鋁;B.碳化硅;C.氟化鈣;D.硅膠【參考答案】B【詳細(xì)解析】碳化硅(SiC)具有高硬度和耐腐蝕性,是切片機(jī)刀片的理想材料;氧化鋁(A)用于光學(xué)切片刀,氟化鈣(C)用于離子減薄,硅膠(D)非金屬刀具材料?!绢}干9】電子顯微鏡的樣品導(dǎo)電性不足時(shí),通常如何處理?【選項(xiàng)】A.噴鍍金粉;B.涂抹導(dǎo)電膠;C.嵌入環(huán)氧樹(shù)脂;D.置于導(dǎo)電臺(tái)【參考答案】A【詳細(xì)解析】噴鍍金粉(A)可改善樣品導(dǎo)電性,避免電子束散射;涂抹導(dǎo)電膠(B)僅適用于小面積樣品,環(huán)氧樹(shù)脂(C)用于光學(xué)切片固定,導(dǎo)電臺(tái)(D)為輔助設(shè)備?!绢}干10】超薄切片的切片厚度測(cè)量工具是?【選項(xiàng)】A.光學(xué)顯微鏡;B.電子顯微鏡;C.激光共聚焦顯微鏡;D.超聲測(cè)厚儀【參考答案】B【詳細(xì)解析】電子顯微鏡自帶圖像分析軟件可直接測(cè)量切片厚度(如0.5-1μm范

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