ICS65.150CCSB514405Technicalstandardforseedlingsbreedingin2025-02-24發(fā)布IDB4405/T314—2025前言 2規(guī)范性引用文件 3術語和定義 4育苗條件 5親貝挑選 6性腺強化促熟 7人工催產(chǎn) 8人工授精 9受精卵孵化 10選幼 11幼蟲培育 12采苗 13附著后管理 15優(yōu)質種苗的標準 DB4405/T314—2025本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由汕頭市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。本文件起草單位：汕頭大學。本文件主要起草人：鄭懷平、張洪寬。DB4405/T314—20251華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”苗種培育技術規(guī)范本文件規(guī)定了華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”(NobleScallop“Nan’aoGoldenScallop”)苗種培育的術語和定義、培育條件、親貝挑選、性腺強化促熟、人工催產(chǎn)、人工授精、受精卵孵化、選幼、幼蟲培育、采苗、附著后管理、出池、優(yōu)質種苗標準等內容。本文件適用于汕頭轄區(qū)的華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”苗種規(guī)?；嘤^程。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB11607-1989漁業(yè)水質標準NY5052-2001無公害食品海水養(yǎng)殖用水水質3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”(NobleScallop“Nan’aoGoldenScallop”)貝殼、閉殼肌、外套膜均為金黃色的華貴櫛孔扇貝。3.2眼點幼蟲eye-spotlarvaeD形幼蟲培養(yǎng)到8d~10d時，在內臟團附近會出現(xiàn)一個黑色的眼點，此時的幼蟲被稱為眼點幼蟲，也被稱為早期殼頂幼蟲，隨著幼蟲的發(fā)育，該眼點變圓變大。3.3變態(tài)metamorphosis幼蟲面盤消失、長出次生殼變?yōu)橹韶惖纳飳W過程。3.4規(guī)格合格率certifiedsizerate達到規(guī)格的苗種數(shù)量占苗種總數(shù)的百分比。3.5傷殘死亡率woundedanddeathrate殼殘缺和死亡苗種數(shù)量占苗種總數(shù)的百分比。DB4405/T314—202523.6出池苗規(guī)格sizeofspatmovedhatchingroom殼長≥500μm的稚貝。3.7商品苗規(guī)格sizeofcommercialspat殼長≥5.0mm的稚貝。4育苗條件4.1設備和材料水泵設施、海水沉淀池、砂濾池、凈化海水蓄水池、催產(chǎn)池、孵化池、育苗池、餌料保種室、餌料培育池、控溫設施、充氣設施、顯微鏡、附著基等。4.2水質苗種培育過程中所用水為潔凈砂濾海水，水源符合GB11607-1989的規(guī)定，培育用水符合NY5052-2001的規(guī)定。5親貝挑選華貴櫛孔扇貝“南澳金貝”的左右兩枚貝殼、閉殼肌、外套膜均為金黃色。貝殼大，近圓形，殼長略小于殼高。左殼較凸，右殼較平。兩耳不相等，前耳大，后耳小。殼表具放射肋23條，肋上具有翹起的小鱗片。足絲孔具細齒。鉸合線直。親貝殼長≥60.0mm，健康，性腺發(fā)育良好，卵巢為金黃色、精巢為白色或微黃色。雌、雄比例為3:1~4:1。6性腺強化促熟在室內采用三角褐指藻+亞心形扁藻+蛋黃+酵母粉混合投喂親貝，投喂1次/3h，投喂量為三角褐指藻5×105個細胞/ml水體和亞心形扁藻2×104個細胞/ml水體，10g雞蛋黃/m3水體和5g酵母粉/m3水體，水溫23℃~25℃,鹽度28~32，連續(xù)微充氣，每天全換水1次，暗光或弱光培養(yǎng)。培養(yǎng)5d~7d，性腺更加飽滿、成熟。7人工催產(chǎn)向每個個體的精巢或卵巢中注射0.02mM的5-羥色胺0.1ml，雌、雄分開放入加有1/3的砂濾海水產(chǎn)卵池中待產(chǎn)。所有雄性親貝可放入一個產(chǎn)卵池中，雌性親貝則按每平方米10個放入不同的產(chǎn)卵池中。水溫25℃~26℃,鹽度28~32，連續(xù)微充氣。約10min后，親貝就開始排精或排卵。排放20min后，即可移走親貝。8人工授精DB4405/T314—20253從含有精液的產(chǎn)卵池中舀取適量的精液加入含有卵子的產(chǎn)卵池中進行人工授精，邊加精液邊攪拌。水溫25℃~26℃,鹽度28~32。5min后，移取少量水體顯微鏡下檢查，4個~5個精子/卵子周圍即可。如發(fā)現(xiàn)精子不夠，可繼續(xù)添加少量精液，繼續(xù)開展人工授精；如精子過多，可添加新鮮的砂濾海水進行稀釋。9受精卵孵化當卵子完全受精20min后，用新鮮的砂濾海水注滿產(chǎn)卵池，開始受精卵孵化。鏡檢計數(shù)受精卵密度，保持在40個~50個/ml水體，如過多，則需要分入其他的孵化池中進行孵化。水溫25℃~28℃,鹽度28~32，連續(xù)微充氣，暗光或弱光孵化。24h后，受精卵可孵化為D形幼蟲。受精卵孵化為D形幼蟲后，停止充氣，暗光或弱光對D形幼蟲進行選幼。30min后，用300目篩絹網(wǎng)收集孵化池水體中上層的D形幼蟲，放入清潔的育苗池中添加新鮮的砂濾海水進行幼蟲培育。11幼蟲培育11.1育苗池深度1.8m~2m。11.2氣石位置和數(shù)量氣石距水面1/2~1/3處；氣石數(shù)量為1個/m2。11.3室內光線暗光或弱光，光照強度<100lux。11.4水溫和鹽度水溫25℃~28℃,鹽度28~32。11.5幼蟲密度D形幼蟲為3個~4個/ml水體，眼點幼蟲為1個~2個/ml水體。11.6幼蟲餌料及投喂量前3d為金藻（球等鞭金藻或湛江叉鞭金藻），從第1d的1次/d逐漸增加到第3d的3次/d，投餌量從第1d的1×103個藻細胞/ml水體逐漸增加到5×103個藻細胞/ml水體；第4d~第7d投喂金藻和扁藻，投餌次數(shù)為3次/d，投餌量從8×103個細胞/ml水體逐漸增加到1×104個細胞/ml水體；第7d后投喂金藻、扁藻和硅藻（小新月菱形藻或威氏海鏈藻或牟氏角毛藻），投餌次數(shù)為4次/d，投餌量為1.2×104個細胞~1.5×104個細胞/ml水體。第8d~第9d幼蟲出現(xiàn)眼點即達到眼點幼蟲。11.7換水、倒池和充氣幼蟲培育期間不換水、不倒池，連續(xù)微充氣，并嚴禁使用抗生素。DB4405/T314—20254每日早晚兩次抽樣鏡檢觀察幼蟲的攝食和發(fā)育情況，測量和記錄幼蟲生長和存活1次/2d。12采苗12.1采苗時間當眼點幼蟲達到30%以上，應立即倒池并投放附著基進行采苗。12.2附著基種類聚乙烯網(wǎng)片或棕繩；聚乙烯簾片可反復使用、棕繩只能使用1次。12.3附著基處理棕繩需要經(jīng)過捶打、0.05%NaOH浸泡、煮沸、再浸泡等處理后才能使用，使用前要剪短為1.5m~2m長的短繩并繞成捆；新的聚乙烯網(wǎng)片需用0.05%NaOH浸泡、捶打、搓洗干凈，舊的聚乙烯網(wǎng)片無需NaOH溶液浸泡，洗刷干凈后即可使用。附著基投放期均在潔凈的淡水中浸泡1天。12.4附著基投放數(shù)量根據(jù)眼點幼蟲的數(shù)量投放附著基，一般按10個/m2的數(shù)量進行投放。12.5附著基投放位置棕繩可以垂直懸掛于育苗池中，聚乙烯網(wǎng)片則需要用聚乙烯細繩拴著一塊墜石投放于育苗池中，附著基底部距水面1/3~1/2。13附著后管理13.1加大換水量投放附著基后適當加大換水量，每天換水1次，減少充氣量，每天檢查幼蟲附著變態(tài)情況。13.2增加投餌量餌料以硅藻為主，投餌量為3×104個細胞/ml水體逐漸增加到10×104個細胞/ml水體。投放附著基約1周后，95%的幼蟲可變態(tài)為