【高考生物】2026步步高大一輪復(fù)習(xí)講義第十單元生物技術(shù)與工程第49課時(shí)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、發(fā)酵工程及其應(yīng)用課標(biāo)要求1.利用乳酸菌發(fā)酵制作酸奶或泡菜。2.利用酵母菌、醋酸菌分別制作果酒和果醋。3.闡明發(fā)酵工程利用現(xiàn)代工程技術(shù)及微生物的特定功能，工業(yè)化生產(chǎn)人類所需產(chǎn)品。4.舉例說明發(fā)酵工程在醫(yī)藥、食品及其他農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)上有重要的應(yīng)用價(jià)值?？记榉治?.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)及實(shí)例2024·湖北·T12023·山東·T122022·湖北·T102022·江蘇·T162021·山東·T122.發(fā)酵工程的原理及應(yīng)用2024·河北·T182024·山東·T142023·山東·T202022·湖北·T132022·山東·T20考點(diǎn)一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1．發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)2．嘗試制作傳統(tǒng)發(fā)酵食品(1)泡菜的制作[教材隱性知識]源于選擇性必修3P8“練習(xí)與應(yīng)用拓展應(yīng)用2”泡菜咸而不酸的最可能的原因是__________________，加入陳泡菜水的目的是____________________________。(2)果酒和果醋的制作①原理和條件項(xiàng)目制作果酒制作果醋發(fā)酵菌種酵母菌醋酸菌代謝類型異養(yǎng)________型異養(yǎng)_______型發(fā)酵過程有氧條件下，酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖：C6H12O6＋6H2O＋6O2eq\o(→,\s\up7(酶))6CO2＋12H2O＋能量；無氧條件下，酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精：C6H12O6eq\o(→,\s\up7(酶))2C2H5OH＋2CO2＋能量O2、糖源充足時(shí)：________________；O2充足、缺少_______時(shí)：__________對氧的需求前期_______，后期_______一直需氧產(chǎn)物檢測聞氣味、品嘗、酸性條件下的重鉻酸鉀(橙色→灰綠色)酸堿指示劑(pH試紙)、聞氣味、品嘗②果酒和果醋的制作步驟及目的[教材隱性知識]源于選擇性必修3P8“練習(xí)與應(yīng)用·拓展應(yīng)用3”：果酒和果醋改進(jìn)裝置及其分析裝置的使用：使用該裝置制作果酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制作果醋時(shí)，應(yīng)將充氣口連接充氣泵，輸入空氣。(1)泡菜制作過程中，酵母菌將葡萄糖分解成乳酸(2021·湖北，3A)()(2)葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入無菌空氣制作葡萄醋(2022·江蘇，16C)()(3)果酒發(fā)酵時(shí)，每日放氣需迅速，避免空氣回流入發(fā)酵容器(2021·江蘇，14A)()(4)果酒發(fā)酵時(shí)，用斐林試劑檢測葡萄汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日增多(2021·江蘇，14B)()(5)果醋發(fā)酵時(shí)，用重鉻酸鉀測定醋酸含量變化時(shí)，溶液灰綠色逐日加深(2021·江蘇，14D)()制作果酒、果醋的操作要點(diǎn)分析黃酒是世界上最古老的酒類之一，源于我國，且唯我國有之，與啤酒、葡萄酒并稱世界三大古酒。古遺六法中描述道：“黍米必齊，曲蘗必時(shí)，水泉必香，陶器必良，湛熾必潔，火劑必得。”曲蘗主要指酒曲，湛熾是指浸泡和蒸煮，回答下列問題：(1)“陶器必良”和“火劑必得”的目的是什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________(2)黃酒發(fā)酵過程中，不需要對黍米和陶器裝置進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，卻可以防止其他雜菌對發(fā)酵產(chǎn)生影響，為什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________(3)黃酒的酒精度數(shù)一般為15度左右，酒精度數(shù)無法繼續(xù)提高可能的原因是什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________(4)“陳儲”是指將榨出的黃酒放入儲酒罐內(nèi)存放待用，如果“陳儲”時(shí)密封不嚴(yán)，酒會變酸，為什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________考向一泡菜的制作1．(2024·江蘇，14)關(guān)于“利用乳酸菌發(fā)酵制作酸奶或泡菜”的實(shí)驗(yàn)，下列敘述正確的是()A．制作泡菜的菜料不宜完全淹沒在煮沸后冷卻的鹽水中B．制作酸奶的牛奶須經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后再接種乳酸菌C．發(fā)酵裝置需加滿菜料或牛奶并封裝，以抑制乳酸菌的無氧呼吸D．控制好發(fā)酵時(shí)間，以避免過量乳酸影響酸奶或泡菜的口味和品質(zhì)2．(2023·山東，12)以下是以泡菜壇為容器制作泡菜時(shí)的4個處理：①沸鹽水冷卻后再倒入壇中；②鹽水需要浸沒全部菜料；③蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水；④檢測泡菜中亞硝酸鹽的含量。下列說法正確的是()A．①主要是為了防止菜料表面的醋酸桿菌被殺死B．②的主要目的是用鹽水殺死菜料表面的雜菌C．③是為了使氣體只能從泡菜壇排出而不能進(jìn)入D．④可檢測到完整發(fā)酵過程中亞硝酸鹽含量逐漸降低考向二果酒、果醋的制作3．(2022·湖北，10)關(guān)于白酒、啤酒和果酒的生產(chǎn)，下列敘述錯誤的是()A．在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣B．白酒、啤酒和果酒釀制的過程也是微生物生長繁殖的過程C．葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇所需的酶既存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，也存在于線粒體D．生產(chǎn)白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但發(fā)酵過程中起主要作用的都是酵母菌4．(2024·南寧一模)《齊民要術(shù)》記載了一種稱為“動酒酢(‘酢’同‘醋’)法”的釀醋工藝：“大率酒一斗，用水三斗，合甕盛，置日中曝之。七日后當(dāng)臭，衣(指菌膜)生，勿得怪也，但停置，勿移動，撓攪之。數(shù)十日，醋成?！毕铝袛⑹鲥e誤的是()A．該方法依據(jù)的原理是醋酸菌在氧氣充足、糖源缺乏時(shí)將酒精轉(zhuǎn)化為乙酸B．加水的目的是對酒進(jìn)行稀釋，避免滲透壓過高殺死醋酸菌C．“衣”位于變酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的D．“撓攪”有利于酒精與醋酸菌充分接觸，還可以增加溶液中的溶解氧考點(diǎn)二發(fā)酵工程及其應(yīng)用1．發(fā)酵工程的概念發(fā)酵工程是指利用____________的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)模化生產(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品。2．發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)選育菌種eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①從中篩選,②通過,獲得))↓擴(kuò)大培養(yǎng)：增加菌種數(shù)量↓配制培養(yǎng)基：在菌種確定后選擇原料，反復(fù)試驗(yàn)確定培養(yǎng)基配方↓滅菌：____________________都必須嚴(yán)格滅菌↓________：無菌操作↓發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①了解發(fā)酵進(jìn)程：隨時(shí)檢測培養(yǎng)液中的等,②及時(shí)添加必需的營養(yǎng)組分,③嚴(yán)格控制等發(fā)酵條件))↓分離、提純產(chǎn)物eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身：在發(fā)酵結(jié)束之后，,采用_________等方法將菌體分離和干燥,②發(fā)酵產(chǎn)品是代謝物：根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當(dāng)?shù)?____________措施來獲得產(chǎn)品))↓獲得產(chǎn)品3．啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)流程(1)啤酒發(fā)酵的工業(yè)化生產(chǎn)流程及操作目的[提醒]啤酒發(fā)酵的發(fā)酵過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成。(2)“精釀”啤酒與“工業(yè)”啤酒的區(qū)別4．發(fā)酵工程的特點(diǎn)5．發(fā)酵工程的應(yīng)用(1)在食品工業(yè)上的應(yīng)用①生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品。②生產(chǎn)各種各樣的__________________。③生產(chǎn)____________。(2)在醫(yī)藥工業(yè)上的應(yīng)用①獲得具有________________生產(chǎn)能力的微生物。②直接對__________進(jìn)行改造，再通過發(fā)酵技術(shù)大量生產(chǎn)所需要的產(chǎn)品。③利用基因工程，將病原體的____________________________基因轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)奈⑸锛?xì)胞，獲得的表達(dá)產(chǎn)物可以作為疫苗使用。(3)在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用：生產(chǎn)微生物______________________。(4)在其他方面的應(yīng)用①利用纖維廢料發(fā)酵生產(chǎn)________________等能源物質(zhì)。②極端微生物的應(yīng)用：嗜熱菌、嗜鹽菌可以用來生產(chǎn)______________，嗜低溫菌有助于提高_(dá)_____________的產(chǎn)量。[教材隱性知識]源于選擇性必修3P27“異想天開”：單細(xì)胞蛋白是以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過發(fā)酵獲得的大量的微生物________。其不僅含有豐富的____________，還含有糖類、________和維生素等物質(zhì)。分析啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)流程啤酒是以大麥為主要原料經(jīng)酵母菌發(fā)酵制成的，閱讀教材“啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)流程”，思考回答下列問題：(1)制麥時(shí)用赤霉素溶液浸泡大麥種子的目的是什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(2)與傳統(tǒng)的手工發(fā)酵相比，在啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)流程中，下列哪些工程手段使啤酒的產(chǎn)量和質(zhì)量明顯提高_(dá)_______________(選填編號)。①接種單一高質(zhì)量純種酵母菌②嚴(yán)格的消毒措施③培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)協(xié)調(diào)④嚴(yán)格的發(fā)酵條件控制考向三發(fā)酵工程及其應(yīng)用5．(2025·桂林模擬)青島有一種酸啤酒，該啤酒釀造方法簡單易操作，釀造的酸啤酒香氣豐富、酸度均衡，最終啤酒的整體風(fēng)味與口感俱佳。具體流程如圖，下列相關(guān)敘述正確的是()A．麥芽汁能為酵母和乳酸菌的發(fā)酵提供碳源、氮源、水和無機(jī)鹽B．蒸煮可以使淀粉分解，形成糖漿，并對糖漿進(jìn)行滅菌C．發(fā)酵過程中要適時(shí)往外排氣，發(fā)酵后期在低溫、通氣環(huán)境下進(jìn)行D．過濾消毒可殺死啤酒中的所有微生物，延長啤酒的保存期6．(2024·山東，14)在發(fā)酵過程中，多個黑曲霉菌體常聚集成團(tuán)形成菌球體，菌球體大小僅由菌體數(shù)量決定。黑曲霉利用糖類發(fā)酵產(chǎn)生檸檬酸時(shí)需要充足的氧。菌體內(nèi)銨離子濃度升高時(shí)，可解除檸檬酸對其合成途徑的反饋抑制。下列說法錯誤的是()A．相同菌體密度下，菌球體越大檸檬酸產(chǎn)生速率越慢B．發(fā)酵中期添加一定量的硫酸銨可提高檸檬酸產(chǎn)量C．發(fā)酵過程中pH下降可抑制大部分細(xì)菌的生長D．發(fā)酵結(jié)束后，將過濾所得的固體物質(zhì)進(jìn)行干燥即可獲得檸檬酸產(chǎn)品一、過教材1．下列關(guān)于泡菜制作的敘述，錯誤的是()A．泡菜的制作過程主要是由乳酸菌參與發(fā)酵，該菌屬于厭氧菌B．用水密封發(fā)酵壇的主要目的是保持無氧條件C．鹽水的制作過程要煮沸冷卻，煮沸是為了除去水中的氧氣和雜菌，冷卻是因?yàn)楦邷貢⑺廊樗峋鶧．腌制泡菜時(shí)如果加入一些陳泡菜汁，可以縮短腌制時(shí)間E．泡菜制作的過程中，乳酸菌在產(chǎn)生乳酸的同時(shí)還會產(chǎn)生亞硝酸鹽F．發(fā)酵期間乳酸不斷積累，當(dāng)它的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%～20%時(shí)，泡菜口味最佳G．泡菜制作過程中，亞硝酸鹽的含量先增加后降低2．下列關(guān)于果酒和果醋制作的敘述，正確的是()A．制作葡萄酒前，需反復(fù)沖洗葡萄以避免雜菌污染B．將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶要留有大約1/3的空間C．為保證無氧環(huán)境，果酒制作過程中不能擰松瓶蓋D．在O2和糖源充足時(shí)，醋酸菌能將乙醇先轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛轉(zhuǎn)化為醋酸E．制作果酒和果醋的溫度基本相同F(xiàn)．果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒則情況相反G．泡菜壇內(nèi)的白色菌膜和變酸的果酒表面的菌膜所含的主要菌種相同3．如圖為果酒與果醋發(fā)酵的簡易裝置甲及興趣小組設(shè)計(jì)的改進(jìn)裝置乙示意圖，下列說法正確的是()A．裝置甲在釀酒過程中被雜菌污染的機(jī)會比裝置乙小B．裝置乙的d處彎曲可防止發(fā)酵液被空氣中的雜菌污染C．果酒發(fā)酵時(shí)氣閥a需要先打開后關(guān)閉D．果酒發(fā)酵過程中氣閥a和氣閥b應(yīng)同時(shí)處于打開或關(guān)閉狀態(tài)E．利用果酒進(jìn)行果醋發(fā)酵時(shí)，應(yīng)適當(dāng)提高溫度并打開氣閥a4．下列關(guān)于發(fā)酵工程及其應(yīng)用的敘述，正確的是()A．分離、提純獲得微生物細(xì)胞本身或其代謝產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)B．發(fā)酵工程中所用菌種大多是單一菌種，一旦有雜菌污染，可能導(dǎo)致產(chǎn)量大大下降C．在菌種確定之后，要選擇原料制備培養(yǎng)基，培養(yǎng)基不需要滅菌D．發(fā)酵過程中需要隨時(shí)取樣檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)目、產(chǎn)物濃度等E．谷氨酸發(fā)酵過程中，在酸性條件下會積累谷氨酸F．啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)中，酒精的產(chǎn)生和積累主要在后發(fā)酵階段完成G．用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料，可通過發(fā)酵工程從微生物細(xì)胞中提取H．若發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞，可采用過濾、沉淀的方法將菌體分離I．微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的化學(xué)防治手段二、過高考1．(2022·湖南，21節(jié)選)某黃酒釀制工藝流程如圖所示，圖中加入的菌種a是______________，工藝b是________(填“消毒”或“滅菌”)，采用工藝b的目的是_______________________________________________________________________________________________。2．(2023·新課標(biāo)，35節(jié)選)若實(shí)驗(yàn)獲得一種具有良好固氮能力的根瘤菌，可通過發(fā)酵工程獲得大量根瘤菌，用于生產(chǎn)根瘤菌肥。根瘤菌肥是一種微生物肥料，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用微生物肥料的作用是______________________________________________________________________________________________________________________________(至少答出2點(diǎn))。答案精析考點(diǎn)一整合1．微生物代謝天然存在前一次發(fā)酵半固體發(fā)酵毛霉氨基酸2．(1)C6H12O6eq\o(→,\s\up7(酶))2C3H6O3(乳酸)＋能量煮沸八成滿沒過全部菜料教材隱性知識食鹽濃度過高導(dǎo)致泡菜未能正常發(fā)酵相當(dāng)于接種純度較高的乳酸菌(2)①兼性厭氧需氧C6H12O6＋2O2eq\o(→,\s\up7(酶))2CH3COOH＋2CO2＋2H2O＋能量糖源C2H5OH＋O2eq\o(→,\s\up7(酶))CH3COOH＋H2O＋能量需氧不需氧②70%1/318～30擰松30～35教材隱性知識關(guān)閉CO2空氣中微生物的污染判斷正誤(1)×[泡菜制作過程中，主要是乳酸菌將葡萄糖分解形成乳酸。](2)×[葡萄果皮上雖然有醋酸菌，但酒精發(fā)酵處于無氧環(huán)境，且酒精的濃度逐漸升高，原有的醋酸菌很難存活，制作好葡萄酒后直接通入無菌空氣，因缺少醋酸菌種源，不能制作出葡萄醋。](3)√(4)×[果酒發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液中的葡萄糖不斷被消耗，因此用斐林試劑檢測葡萄汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日減少。](5)×[重鉻酸鉀用于檢測酒精，不能用于測定醋酸含量變化。]提升(1)控制發(fā)酵過程的氧氣和溫度等條件。(2)在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制(且發(fā)酵產(chǎn)生的酒精對其他雜菌也有毒害作用)。(3)酒精濃度升高導(dǎo)致酵母菌活性下降。(4)醋酸菌在有氧條件下會將酒精轉(zhuǎn)化為醋酸。評價(jià)1．D[為制造無氧環(huán)境制作泡菜的菜料要完全淹沒在煮沸后冷卻的鹽水中，A錯誤；制作酸奶的牛奶不需要經(jīng)過高壓蒸汽滅菌，否則會破壞牛奶的營養(yǎng)成分，B錯誤；發(fā)酵裝置中泡菜裝至八成滿，制作酸奶時(shí)倒入的奶液量不要超過奶瓶容積的2/3，制作酸奶或泡菜時(shí)需要促進(jìn)乳酸菌的無氧呼吸，C錯誤；制作酸奶或泡菜時(shí)，控制好發(fā)酵時(shí)間，以避免過量乳酸影響酸奶或泡菜的口味和品質(zhì)，D正確。]2．C[沸鹽水冷卻后再倒入壇中，鹽水煮沸是為了殺滅雜菌，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響，A錯誤；鹽水需要浸沒全部菜料，制造無氧環(huán)境，有利于乳酸菌的無氧呼吸，B錯誤；蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，是為了隔絕空氣、防止雜菌污染等，C正確；腌制泡菜過程中亞硝酸鹽的含量先增多后減少，D錯誤。]3．C[在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣，讓酵母菌大量繁殖，再進(jìn)行酒精發(fā)酵，A正確；白酒、啤酒和果酒釀制的過程也是微生物生長繁殖的過程，如發(fā)酵初期酵母菌大量繁殖，B正確；葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇的過程發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，所需的酶存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，不存在于線粒體，C錯誤；生產(chǎn)白酒一般使用高粱，啤酒一般使用麥芽，果酒則使用對應(yīng)的水果，但在發(fā)酵過程中都主要依賴酵母菌產(chǎn)生酒精，D正確。]4．C[醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，“衣”位于變酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的，C錯誤。]考點(diǎn)二整合1．微生物2．自然界誘變育種或基因工程育種培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備接種微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度溫度、pH和溶解氧過濾、沉淀提取、分離和純化3．(1)淀粉酶淀粉分解，形成糖漿酒精和二氧化碳(2)長短低高4．溫和豐富低廉專一污染小容易處理5．(1)②食品添加劑③酶制劑(2)①某種藥物②菌種③某個或某幾個抗原(3)肥料、農(nóng)藥和飼料(4)①酒精、乙烯②洗滌劑熱敏性產(chǎn)品教材隱性知識菌體蛋白質(zhì)脂質(zhì)提升(1)使大麥種子無須發(fā)芽就能產(chǎn)生α-淀粉酶(2)①②③④評價(jià)5．A[麥芽汁中含有豐富的糖類，還含有一些蛋白質(zhì)、無機(jī)鹽，可以為酵母和乳酸菌的發(fā)酵提供碳源、氮源、水和無機(jī)鹽，A正確；蒸煮不是使淀粉分解，形成糖漿，B錯誤；發(fā)酵過程中由于酵母菌無氧呼吸會產(chǎn)生CO2，所以要適時(shí)往外排氣，主發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液還要在低溫、密閉的環(huán)境中儲存一段時(shí)間進(jìn)行后發(fā)酵，C錯誤；過濾消毒只能殺死啤酒中大部分的微生物，D錯誤。]6．D[黑曲霉利用糖類發(fā)酵產(chǎn)生檸檬酸時(shí)需要充足的氧，相同菌體密度下，菌球體越大越不利于菌體與氧氣接觸，則檸檬酸產(chǎn)生速率越慢，A正確；菌體內(nèi)銨離子濃度升高時(shí)，可解除檸檬酸對其合成途徑的反饋抑制，發(fā)酵中期添加一定量的硫酸銨，提高了銨離子濃度，菌體內(nèi)可提高檸檬酸產(chǎn)量，B正確；發(fā)酵過程中pH下降導(dǎo)致細(xì)菌生命活動所必需的酶失活，可抑制大部分細(xì)菌的生長，C正確。]查落實(shí)固基礎(chǔ)一、1．EF[泡菜制作的過程中，硝酸鹽還原菌將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，E錯誤；泡菜的口味品質(zhì)最佳是在乳酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.4%～0.8%時(shí)，F(xiàn)錯誤。]2．B[制作葡萄酒前，不能反復(fù)沖洗葡萄以避免將酵母菌過多地沖掉，A錯誤；果酒制作過程中需要定期擰松發(fā)酵瓶蓋，釋放產(chǎn)生的二氧化碳，C錯誤；乙醇是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的，當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，D錯誤；果酒制作的溫度為18～30℃，果醋制作的溫度為30～35℃，不是在同一溫度下進(jìn)行的，E錯誤；果酒制作過程中，酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳與酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，隨著二氧化碳濃度的增加，溶液的pH逐漸降低，因此果酒、果醋制作過程中溶液的pH都是逐漸降低，F(xiàn)錯誤；泡菜壇內(nèi)的白色菌膜主要是酵母菌，變酸的果酒表面的菌膜所含的主要菌種是醋酸菌，G錯誤。]3．BCE[裝置甲在釀酒過程中需要拔瓶塞排氣，而裝置乙不需要通過拔瓶塞排氣，因此裝置甲被雜菌污染的機(jī)會比裝置乙大，A錯誤；無氧發(fā)酵階段氣閥a一直關(guān)閉，氣閥b應(yīng)定期打開，D錯誤。]4．BDH[發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，A錯誤；培養(yǎng)基需要嚴(yán)格滅菌，C錯誤；谷氨酸發(fā)酵過程中，在中性或弱堿性條件下會積累谷氨酸，E錯誤；啤酒發(fā)酵過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個階段，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解、酒精的產(chǎn)生和積累都是在主發(fā)酵階段完成，F(xiàn)錯誤；單細(xì)胞蛋白即微生物菌體，不需要從微生物細(xì)胞中提取，G錯誤；微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的生物防治手段，I錯誤。]二、1．酵母菌消毒殺死黃酒中的大多數(shù)微生物，并延長其保存期2．促進(jìn)植株生長，增加作物產(chǎn)量；能夠減少化肥的使用，改良土壤，減少污染，保護(hù)生態(tài)環(huán)境第50課時(shí)微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用課標(biāo)要求1.通過配制培養(yǎng)基、滅菌、接種和培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)操作獲得純化的酵母菌菌落。2.分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，并進(jìn)行計(jì)數(shù)?？记榉治?.微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)2024·湖南·T62024·山東·T152022·湖北·T42021·天津·T12.微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)2024·黑吉遼·T192024·江西·T172024·全國甲·T372023·山東·T152023·廣東·T102023·遼寧·T92022·遼寧·T152022·海南·T122022·江蘇·T32022·河北·T232021·山東·T14考點(diǎn)一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1．培養(yǎng)基的配制(1)培養(yǎng)基的概念、用途和類型①概念：人們按照微生物對______________________的不同需求，配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。②用途：用以____________________________微生物或積累其代謝物。③培養(yǎng)基的種類(按物理性質(zhì)分)培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基特點(diǎn)作用____培養(yǎng)基加凝固劑，如____微生物的分離與鑒定，活菌計(jì)數(shù)，保藏菌種半固體培養(yǎng)基容器放倒不致流出，劇烈震動則破散觀察微生物的運(yùn)動、分類鑒定____培養(yǎng)基不加凝固劑常用于工業(yè)生產(chǎn)、微生物的擴(kuò)大培養(yǎng)(2)培養(yǎng)基的配方①主要營養(yǎng)物質(zhì)：水、________、氮源、____________。②其他條件：pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣。如表：微生物乳酸桿菌霉菌細(xì)菌厭氧微生物特殊需求添加____一般pH調(diào)至____一般pH調(diào)至____________2.無菌技術(shù)(1)目的：獲得________的微生物培養(yǎng)物。(2)關(guān)鍵：防止________污染。(3)常用方法：滅菌和消毒。(4)注意事項(xiàng)①實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。②為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在超凈工作臺上并在______________附近進(jìn)行。[提醒]選擇無菌技術(shù)的原則：一要考慮無菌技術(shù)的效果，滅菌的效果比消毒要好；二要考慮操作對象的承受能力，活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌。3．微生物的純培養(yǎng)概念辨析4．純培養(yǎng)的過程(以酵母菌為例)(1)不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)(2023·山東，15A)()(2)可用濕熱滅菌法對實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌(2022·湖北，4D)()(3)接種后未長出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄(2023·山東，15C)()分析微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作如圖所示，據(jù)圖回答下列問題：(1)圖示①～⑧中不正確的操作及其原因分別是什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________(2)在第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(3)在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________平板劃線法操作中幾次灼燒接種環(huán)的目的考向一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1．(經(jīng)典高考題)為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是()A．倒平板后需間歇晃動，以保證表面平整B．圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C．該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的D．菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色2．(2024·深圳聯(lián)考)某同學(xué)將5個手指尖在貼有“洗手前”標(biāo)簽的固體培養(yǎng)基上輕輕按一下，然后用肥皂將該手洗干凈，再將這5個手指尖在貼有“洗手后”標(biāo)簽的同種培養(yǎng)基上輕輕按一下。將這兩個培養(yǎng)皿放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，發(fā)現(xiàn)貼有“洗手后”標(biāo)簽的培養(yǎng)皿中菌落較少。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A．這個實(shí)驗(yàn)中需要進(jìn)行滅菌處理的材料用具有培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基等B．“將手指尖在培養(yǎng)基上輕輕按一下”相當(dāng)于微生物培養(yǎng)中的接種C．從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，洗手后的操作不會污染培養(yǎng)基D．培養(yǎng)基中的氮元素是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的考點(diǎn)二微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)1．區(qū)分選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途舉例選擇培養(yǎng)基允許__________________，同時(shí)___________________________從眾多微生物中分離所需的微生物以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基分離得到尿素分解菌鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，進(jìn)而產(chǎn)生特定的顏色或其他變化鑒別不同種類的微生物用伊紅—亞甲藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌[提醒]常見選擇培養(yǎng)基舉例：(1)缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中N2的微生物。(2)含青霉素的培養(yǎng)基可淘汰細(xì)菌，篩選出真菌。(3)無有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)微生物。2．微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測定(1)稀釋涂布平板法步驟①系列稀釋操作：該操作常用在將細(xì)胞接種到培養(yǎng)基之前，通過液體稀釋的方法分散細(xì)胞，隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞得以分散。操作步驟：②涂布平板操作步驟(2)微生物的數(shù)量測定方法①顯微鏡直接計(jì)數(shù)法[提醒]顯微鏡直接計(jì)數(shù)法本身不能區(qū)分細(xì)菌的死活，但是通過一定的輔助處理，可以實(shí)現(xiàn)活菌計(jì)數(shù)，如在計(jì)數(shù)前用臺盼藍(lán)染液進(jìn)行染色，可以通過統(tǒng)計(jì)無色細(xì)胞的個數(shù)來對活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。②活菌計(jì)數(shù)法3．土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)操作(1)實(shí)驗(yàn)原理(2)實(shí)驗(yàn)流程(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評價(jià)[教材隱性知識]選擇性必修3P19“探究·實(shí)踐”：本活動初步篩選了能分解尿素的細(xì)菌，請進(jìn)一步借助于生物化學(xué)的方法來鑒定所分離的菌種：分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的________性增強(qiáng)，在培養(yǎng)基中加入______指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑________，可確定該細(xì)菌能夠分解尿素。(1)平板涂布時(shí)涂布器使用前必須進(jìn)行消毒(2023·山東，15B)()(2)利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物(2023·山東，15D)()(3)稀釋涂布平板法和平板劃線法均能得到單菌落，都可用于細(xì)菌計(jì)數(shù)(2021·浙江6月選考，17C)()(4)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板既可用于酵母菌的數(shù)量測定，也可用于細(xì)菌的數(shù)量測定(2023·江蘇，7D)()理解微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)的原理某興趣小組從富含纖維素的土壤中取樣，加入選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，之后接種于鑒別培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，篩選出能夠高效分解纖維素的微生物。請回答下列相關(guān)問題：1．從富含纖維素的土壤中取樣的原因是什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________2．分離出分解纖維素的微生物，應(yīng)該配制以____________為唯一碳源的培養(yǎng)基，目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。3.已知剛果紅與纖維素能形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，復(fù)合物無法形成，平板上會出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈(如圖)，幾號真菌降解纖維素的能力最強(qiáng)，理由是什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________4．三位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細(xì)菌數(shù)量，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的稀釋液中各取0.1mL涂平板，得到以下統(tǒng)計(jì)結(jié)果：甲同學(xué)涂布了兩個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是236和260，取平均值248；乙同學(xué)涂布了三個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是209、240和250，取平均值233；丙同學(xué)涂布了三個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是21、212和256，取平均值163；在三位同學(xué)的統(tǒng)計(jì)中，______同學(xué)的統(tǒng)計(jì)是正確的，據(jù)此計(jì)算，每克土壤樣品中含細(xì)菌________個?？枷蚨繕?biāo)微生物的篩選與鑒定3.(2023·廣東，10)研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線(如圖)和選擇培養(yǎng)基篩選原理來判斷，下列最可能篩選到目標(biāo)菌的條件組合是()A．a(chǎn)點(diǎn)時(shí)取樣、尿素氮源培養(yǎng)基B．b點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基C．b點(diǎn)時(shí)取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基D．c點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基4．(2022·江蘇，3)下列是某同學(xué)分離高產(chǎn)脲酶菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，不合理的是()A．選擇農(nóng)田或公園土壤作為樣品分離目的菌株B．在選擇培養(yǎng)基中需添加尿素作為唯一氮源C．適當(dāng)稀釋樣品是為了在平板上形成單菌落D．可分解酚紅指示劑使其褪色的菌株是產(chǎn)脲酶菌考向三微生物的分離與計(jì)數(shù)5．(2024·武漢調(diào)研)研究者從溫泉中篩選出能高效產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱細(xì)菌的過程如圖1所示。將得到的嗜熱細(xì)菌懸液轉(zhuǎn)接到特定固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，結(jié)果如圖2所示。下列說法錯誤的是()A．過程①②一般都取1mL菌液轉(zhuǎn)移B．試管甲、乙都通過無菌水稀釋C．圖2中周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種D．過程①②屬于稀釋涂布平板法，能對分離得到的微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)兩種純化方法的比較項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法分離結(jié)果關(guān)鍵操作接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線①一系列的梯度稀釋；②涂布平板操作接種用具接種環(huán)涂布器優(yōu)點(diǎn)可以觀察菌落特征，對混合菌進(jìn)行分離可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征缺點(diǎn)不能計(jì)數(shù)操作復(fù)雜，需要涂布多個平板共同點(diǎn)都要用到固體培養(yǎng)基；都需進(jìn)行無菌操作；都會在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，都可用于觀察菌落特征6.(經(jīng)典高考題)產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株，科研人員開展了相關(guān)研究。請回答下列問題：(1)常規(guī)微生物實(shí)驗(yàn)中，下列物品及其滅菌方法錯誤的是________(填編號)。編號①②③④物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧(2)稱取1.0g某土壤樣品，轉(zhuǎn)入99mL無菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)__________后，獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液。分別取0.1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長出了46個酵母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌________個。(3)為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對分離所得的菌株，采用射線輻照進(jìn)行__________育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以__________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，按照菌落直徑大小進(jìn)行初篩，選擇直徑______的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。(4)在處理含油廢水的同時(shí)，可獲得單細(xì)胞蛋白，實(shí)現(xiàn)污染物資源化。為評價(jià)A、B兩菌株的相關(guān)性能，進(jìn)行了培養(yǎng)研究，結(jié)果如圖。據(jù)圖分析，應(yīng)選擇菌株________進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。一、過教材1．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)基的成分與配制過程的相關(guān)說法，正確的是()A．培養(yǎng)基中添加的牛肉膏可為微生物提供碳源、氮源和維生素等B．與液體培養(yǎng)基相比，固體培養(yǎng)基含有瓊脂成分C．培養(yǎng)硝化細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基中需要加氮源，不需要加入碳源D．為防止雜菌污染，滅菌后的培養(yǎng)基應(yīng)立即倒入培養(yǎng)皿中并蓋上皿蓋，待冷卻后倒置E．在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱酸性F．配制培養(yǎng)基過程中應(yīng)先調(diào)pH再進(jìn)行高壓蒸汽滅菌2．獲得純凈微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。下列關(guān)于無菌操作的敘述，錯誤的是()A．牛奶可使用巴氏消毒法，其優(yōu)點(diǎn)是能夠殺死全部微生物，保留牛奶風(fēng)味B．在接種箱或超凈工作臺的使用過程中，可用紫外線照射30min來進(jìn)行消毒C．灼燒滅菌的對象可以是金屬用具和玻璃器皿，在酒精燈火焰充分燃燒層進(jìn)行D．高壓蒸汽滅菌時(shí)的滅菌條件通常是100kPa121℃，15～30minE．若培養(yǎng)皿蓋和培養(yǎng)皿底之間濺有培養(yǎng)基，則不宜用此培養(yǎng)皿培養(yǎng)大腸桿菌F．倒平板時(shí)應(yīng)該把培養(yǎng)皿蓋完全打開，以免培養(yǎng)基濺到培養(yǎng)皿蓋上G．倒平板后，對空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，可檢測培養(yǎng)基是否被污染H．接種前后接種環(huán)都必須灼燒滅菌I．倒平板和接種操作都需要在酒精燈的火焰附近進(jìn)行3．下列有關(guān)微生物分離、純化、計(jì)數(shù)及培養(yǎng)的敘述，錯誤的是()A．平板劃線法接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基，第3次劃線應(yīng)從第2次劃線的末端開始B．平板劃線法接種時(shí)，若在平板上劃線4個區(qū)，則需灼燒接種環(huán)5次C．用涂布器蘸取少量菌液滴加在培養(yǎng)基表面，涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻D．在篩選產(chǎn)纖維素酶的微生物時(shí)，含纖維素和剛果紅的固體培養(yǎng)基既是選擇培養(yǎng)基也是鑒別培養(yǎng)基E．接種后需立即倒置培養(yǎng)以避免皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染F．對培養(yǎng)皿進(jìn)行編號或?qū)N進(jìn)行標(biāo)注時(shí)，應(yīng)使用記號筆在皿底標(biāo)記G．菌落的大小、顏色、隆起程度等特征都可作為菌種鑒定的依據(jù)H．同一稀釋度下應(yīng)至少對3個平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求平均值I．利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和J．用平板劃線法和稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)時(shí)，所得數(shù)據(jù)往往比實(shí)際數(shù)據(jù)偏小二、過高考1．(2021·廣東，21節(jié)選)基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強(qiáng)等特性，研究人員設(shè)計(jì)了一種不需要滅菌的發(fā)酵系統(tǒng)，其培養(yǎng)基鹽濃度設(shè)為60g/L，pH為10，菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60d以上。該系統(tǒng)不需要滅菌的原因是_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。2．(2023·全國乙，37節(jié)選)在粉碎的秸稈中接種菌T，培養(yǎng)一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)菌T能夠?qū)⒔斩捴械睦w維素大量分解，其原因是________________________。3．(2022·河北，23節(jié)選)枯草芽孢桿菌為好氧微生物，液體培養(yǎng)時(shí)應(yīng)采用____________(填“靜置”或“搖床震蕩”)培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中抽樣檢測活菌數(shù)量時(shí)，應(yīng)采用__________________(填“稀釋涂布平板法”或“顯微鏡直接計(jì)數(shù)法”)，其原因是___________________________________________________________________________________________________________。4．(2022·全國乙，37節(jié)選)用菌株C可產(chǎn)生S，若以制糖廢液作為碳源，為進(jìn)一步確定生產(chǎn)S的最適碳源濃度，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請簡要寫出實(shí)驗(yàn)思路：________________________________________________________________________________________。答案精析考點(diǎn)一整合1．(1)①營養(yǎng)物質(zhì)②培養(yǎng)、分離、鑒定、保存③固體瓊脂液體(2)①碳源無機(jī)鹽②維生素酸性中性或弱堿性無氧2．(1)純凈(2)雜菌(4)②酒精燈火焰4．濕熱滅菌法接種環(huán)連續(xù)劃線稀釋分散單菌落判斷正誤(1)×[不含氮源的平板可用于固氮菌的培養(yǎng)。](2)√(3)×[使用后的培養(yǎng)基即使未長出菌落也要在丟棄前進(jìn)行滅菌處理，不能直接丟棄，以免污染環(huán)境。]提升(1)②拔出棉塞后完全握住棉塞會造成雜菌污染，應(yīng)握住棉塞上部；⑥劃線時(shí)不能將培養(yǎng)皿完全打開，應(yīng)在火焰附近將培養(yǎng)皿打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋；⑦劃線時(shí)第5次的劃線不能與第1次的劃線相連；⑧平板應(yīng)倒置培養(yǎng)。(2)劃線后，線條末端菌種的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使菌種的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個微生物繁殖而來的菌落。(3)需要；劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者。評價(jià)1．B[溫度降低后，培養(yǎng)基易凝固，因此倒平板后要及時(shí)輕輕晃動，以保持均一性，A錯誤；由題圖可知，隨著劃線次數(shù)增多，細(xì)菌密度逐漸減小，Ⅲ區(qū)開始出現(xiàn)單菌落，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落，B正確；菌落是由單個微生物細(xì)胞或多個同種細(xì)胞繁殖到一定程度后形成的，能得到單菌落即可以達(dá)到菌種純化的目的，C錯誤；剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，菌落周圍的纖維素被降解后紅色消失，出現(xiàn)透明圈，D錯誤。]2．C[從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，貼有“洗手后”標(biāo)簽的培養(yǎng)皿中菌落較少，并不能說明洗手后的操作不會污染培養(yǎng)基，C錯誤。]考點(diǎn)二整合1．特定種類的微生物生長抑制或阻止其他種類微生物生長2．(1)②酒精冷卻(2)②活菌30～300平均值少當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個菌落3．(1)脲酶尿素(2)30～300稀釋涂布平板3