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54 西藏自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I II 1 1 1 1 2 2 2 3 3 3 4 5 6 7本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的1GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)采用Oligo（dT）或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲PEDV：豬流行性腹瀉病毒（PorcineEpidPBS：磷酸鹽緩沖液（Phosphat2RT-PCR：逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ReverseTranscriptionPolycDNA：互補(bǔ)脫氧核糖核酸（Compleme除非另有說(shuō)明，在檢測(cè)中使用的試劑均為分析純，所有試劑均用無(wú)Rf)2×AceQUniversalU+ProbeMaster3將無(wú)菌采樣拭子經(jīng)無(wú)菌PBS潤(rùn)濕后，深入肛門(mén)采集糞便樣品或腸道內(nèi)容物，采取量應(yīng)≥0.5g，于無(wú)取0.5g～2g糞便樣品或腸道內(nèi)容物，加500μL無(wú)菌PBS，混勻后置于-80℃冰4c)若被檢樣品檢測(cè)結(jié)果Ct值＞35，且出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線的樣品，判定為可疑，應(yīng)重復(fù)試驗(yàn)。重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果中Ct值≤35，且出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線，判定為陽(yáng)性，否則判定為陰5焦碳酸二乙酯（DEPC）50μL，加滅菌ddH2O至100mL，室溫放置6h～8A.2PBS（1L，0.01mol/L，P用天平準(zhǔn)確稱(chēng)量8gNaCl，0.2gKCl，1.44gN用HCl調(diào)節(jié)溶液pH至7.4

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