ICSCCS67.080.20B3143湖南省地方標(biāo)準(zhǔn)DB43/T28842023鉛鋅重金屬污染耐性闊葉木本植物篩選技術(shù)規(guī)程codeofpracticeforthescreeningoftolerantbroad-leaveswoodyplantsunderheavymetalleadandzincpollutions2023-12-20發(fā)布2024-03-20實(shí)施湖南省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布DB43/T288420235土壤和苗木27質(zhì)量控制49耐性分析5DB43/T28842023前言本文件按照GB/T1.12020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由湖南省林業(yè)局提出。本文件由湖南省林業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本文件起草單位:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)、國(guó)家林業(yè)和草原局中南調(diào)查規(guī)劃院、郴州市林業(yè)綜合服務(wù)中心。本文件主要起草人:朱凡、黃鑫浩、楚春暉、許洪揚(yáng)、于志民、蔣曉輝、孔琳雅。DB43/T28842023鉛鋅重金屬污染耐性闊葉木本植物篩選技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了鉛鋅重金屬污染耐性闊葉木本植物篩選的試劑和設(shè)備、土壤和苗木、篩選流程、質(zhì)量控制、篩選值計(jì)算方法、耐性分析、檔案管理等要求。本文件適用于鉛鋅重金屬污染耐性闊葉木本植物的篩選。下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T17138土壤質(zhì)量銅、鋅的測(cè)定火焰原子吸收分光光度法GB/T17141土壤質(zhì)量鉛、鎘的測(cè)定石墨爐原子吸收分光光度法3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1鉛鋅污染脅迫Ieadandzincpollutionstress因過(guò)量重金屬鉛鋅污染引起植物的生理性傷害。3.2耐性闊葉木本植物tolerantbroadleaveswoodyplants在過(guò)量重金屬鉛鋅污染土壤中維持生長(zhǎng)發(fā)育的闊葉木本植物。4試劑和設(shè)備4.1水和試劑4.1.1水所用水達(dá)到GB/T6682規(guī)定的三級(jí)水要求。4.1.2氯化鉛分析純。4.1.3氯化鋅分析純。4.1.4鹽酸DB43/T28842023密度p=1.19g/ml,優(yōu)級(jí)純。4.1.5高濃度鉛鋅混合溶液準(zhǔn)確稱取12.0805g氯化鉛(見4.1.2)和10.4253g氯化鋅(見4.1.3)于1.0L的燒杯中,加水500mL,再加入10mL鹽酸(見4.1.4),微熱溶解。冷卻后轉(zhuǎn)移至1.0L容量瓶中,用水定容至標(biāo)線,搖勻。溶液中鉛質(zhì)量濃度為9.0g/L、鋅質(zhì)量濃度為5.0g/L置于0℃~4℃的冰箱中密閉保存,有效期為56d。4.1.6中濃度鉛鋅混合溶液準(zhǔn)確稱取8.0537g氯化鉛(見4.1.2)和5.2127g氯化鋅(見4.1.3)于1.0L的燒杯中,加水500mL,再加入10mL鹽酸(見4.1.4),微熱溶解。冷卻后轉(zhuǎn)移至1.0L容量瓶中,用水定容至標(biāo)線,搖勻。溶液中鉛質(zhì)量濃度為6.0g/L、鋅質(zhì)量濃度為2.5g/L置于0℃~4℃的冰箱中密閉保存,有效期為56d4.1.7低濃度鉛鋅混合溶液準(zhǔn)確稱取4.0268g氯化鉛(見4.1.2)和4.1701g氯化鋅(見4.1.3)于1.0L的燒杯中,加水500mL,再加入10mL鹽酸(見4.1.4),微熱溶解。冷卻后轉(zhuǎn)移至1.0L容量瓶中,用水定容至標(biāo)線,搖勻。溶液中鉛質(zhì)量濃度為3.0g/L、鋅質(zhì)量濃度為2.0g/L。置于0℃~4℃的冰箱中密閉保存,有效期為56d4.2儀器設(shè)備4.2.1光合儀便攜式紅外二氧化碳?xì)怏w分析儀。配備02000mol/m2·s連續(xù)變化的LED紅藍(lán)光源,二氧化碳量程03000mo1/mol,水測(cè)量范圍075mmo1/mol,光合有效輻射量程03000mol/m2.S。4.2.2葉綠素?zé)晒鈨x便攜式葉綠素?zé)晒鉁y(cè)定儀。紅色作用光波長(zhǎng)625nm655nm,藍(lán)色作用光波長(zhǎng)470nm475nm,光合有效輻射量程07000mol/m·S。4.2.3葉綠素相對(duì)含量測(cè)定儀便攜式葉綠素相對(duì)含量(SPAD1.0SPAD單位。5土壤和苗木5.1土壤土壤、河沙按體積比配制,混拌均勻,分裝于花盆中,每個(gè)花盆裝土5.土壤、河沙按體積比配制,混拌均勻,分裝于花盆中,每個(gè)花盆裝土5.0kg。樹苗移栽前1d2d,用600倍~800倍的多菌靈溶液淋透土壤。2DB43/T288420235.2樹苗選用2年生裸根苗,苗高、地徑保持一致,相差不應(yīng)超過(guò)5%。樹苗宜選擇根系發(fā)達(dá)、生長(zhǎng)迅速、抗逆性強(qiáng)的本土植物。5.3基肥每盆施N、P、K含量分別為15%、15%、15%的復(fù)合肥0.15kg。5.4移栽移栽前將樹苗的根部放入盛有0.05%的高錳酸鉀溶液的盆中,消毒20min30min。每盆栽苗1株,澆透定根水。5.5水分根據(jù)土壤墑情、苗木生長(zhǎng)發(fā)育狀況等進(jìn)行澆水。5.6除草及時(shí)拔除雜草。6篩選流程6.1脅迫處理6.1.1高濃度鉛鋅污染脅迫移栽90d后,用高濃度鉛鋅混合溶液(見4.1.5)500mL分2次間隔1d進(jìn)行澆灌,每次250ml處理6盆。澆灌時(shí)以植株為中心,均勻澆灌到植株周圍的土壤中,避免將溶液直接接觸到植物基部和干。6.1.2中濃度鉛鋅污染脅迫用中濃度鉛鋅混合溶液(見4.1.6)按照6.1.1操作。6.1.3低濃度鉛鋅污染脅迫用低濃度鉛鋅混合溶液(見4.1.7)按照6.1.1操作。6.2葉片光合能力測(cè)定方法6.2.1測(cè)定時(shí)間和樣品數(shù)量脅迫處理后15d96.2.2pn)測(cè)定8:00~11:00;的面積;34），），6.3土壤采樣與測(cè)定將不同花盆中的土混合。用木勺分別采集每個(gè)花盆土樣，每個(gè)樣品的重量不少于1.0kg，裝入規(guī)格為8篩選值計(jì)算方法根據(jù)土壤鉛或鋅含量、葉片Pn或Fv/Fm值建立二元一次擬合方程。從土壤鉛含量—葉片Pn值二元一次方程和土壤鋅含量—葉片Pn值二元一次方程中分別計(jì)算出Pn的最大值，取平均值，記作光合速率的最大值maxPn。從土壤鉛含量—葉片F(xiàn)v/Fm值二元一次方程和土壤鋅含量—葉片F(xiàn)v/Fm值F=+·························································(1)4DB43/T288420236.2.3360umol/mol,空氣流速0.5L/min,相對(duì)濕度50%;1次pn在1次pn以內(nèi),光合儀的"穩(wěn)定參數(shù)(stable)"測(cè)量值。a)選擇天氣晴朗的上午8:00~11:00或下午2:30~5:00;子探頭嵌入暗適應(yīng)夾并拉開遮光片;次Fv/Fm6.2.4葉綠素相對(duì)含量(SPAD)測(cè)定葉綠素相對(duì)含量(SPAD)的測(cè)定方法如下:選擇天氣晴朗的上午8:00~11:00或下午2:30~5:00;測(cè)定時(shí)夾住葉片(避開葉片主脈及葉緣),每片葉子測(cè)3次,取平均值作為1次SPAD值。6.3土壤采樣與測(cè)定6.3.1土壤采樣將不同花盆中的土混合。用木勺分別采集每個(gè)花盆土樣,每個(gè)樣品的重量不少于1.0kg,裝入規(guī)格為7cmX10cm的聚乙烯塑料袋密封編號(hào)存放。土樣風(fēng)干后通過(guò)0.149mm尼龍篩,裝入密封袋中備用。6.3.2土壤中鉛、鋅含量測(cè)定鉛測(cè)定按照GB/T17141規(guī)定執(zhí)行,鋅測(cè)定按照GB/T17138規(guī)定執(zhí)行。7質(zhì)量控制根據(jù)土壤鉛或鋅含量、葉片P,或Fv/Fm值建立二元一次擬合方程。從土壤鉛含量葉片P,值二元一次方程和土壤鋅含量葉片pi,值二元一次方程中分別計(jì)算出P,的從土壤鉛含量葉片F(xiàn)v/Fm值二元一次方程和土壤鋅含量葉片F(xiàn)v/Fm出Fv/Fm的最大值,取平均值,記作最大光化學(xué)效率的最大值maxFv/Fm。F+=maxFv/Fm-FV/FmmaxFv/Fm+mqxpn-pnmaxpn5F——篩選值），6鉛鋅重金屬污染耐性闊葉木本植物篩選技術(shù)過(guò)程記錄表鉛鋅重金屬污染耐性闊葉木本植物篩選技術(shù)過(guò)程記錄篩選過(guò)程記錄PnFv/FmSPAD5DB43/T28842023式中F篩選值maxFv/Fm最大光化學(xué)效率的最大值;Fv/Fm最大光化學(xué)效率(見6.2.3);maxpn光合速率的最大值,單位為微摩爾每平方米秒(mo1/m·Spn光合速率(見6.2.2),單位為微摩爾每平方米秒(mol/m·S)。9耐性分析根據(jù)篩選值F和SPAD值,進(jìn)行耐性分析。F值大于等于0.57且SPAD值小于等于32.2,判定該木本植物對(duì)鉛鋅耐性弱;F值小于等于0.4且SPAD值大于等于35.0,判定該木本植物對(duì)鉛鋅耐性強(qiáng)。10檔案管理應(yīng)建立完整的技術(shù)檔案,包括鉛鋅污染脅迫處理過(guò)程、苗木生長(zhǎng)狀況、